Стандартная панель сывороток содержащих антитела к вич 1 типа
Обновлено: 23.04.2024
Общая информация об исследовании
ВИЧ (вирус иммунодефицита человека) – вирус семейства ретровирусов, который поражает клетки иммунной системы человека (CD4, Т-хелперы). Вызывает СПИД.
ВИЧ-1 – наиболее распространенный тип вируса, чаще всего встречающийся в России, США, Европе, Японии и Австралии (как правило, субтип В).
ВИЧ-2 – редкий тип, распространен в Западной Африке.
Для диагностики вируса иммунодефицита человека используется комбинированная тест-система четвертого поколения, способная определять ВИЧ-инфекцию уже через 2 недели после попадания вируса в кровь, тогда как тест-системы первого поколения делают это только через 6-12 недель с момента инфицирования.
Преимуществом этого комбинированного ВИЧ-анализа является выявление, благодаря использованию антител к ВИЧ-1 p24 в качестве реагентов, специфического антигена p24 (белка вирусного капсида), который может быть обнаружен данным тестом уже через 1-4 недели с момента инфицирования, т. е. еще до сероконверсии, что значительно сокращает "период окна".
Кроме того, такой анализ на ВИЧ выявляет в крови антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 (с использованием реакции антиген-антитело), которые вырабатываются в достаточном количестве для определения тест-системой через 2-8 недель с момента заражения.
После сероконверсии антитела начинают связываться с антигеном p24, в результате чего тест на антитела к ВИЧ будет положительным, а тест на p24 – отрицательным. Однако спустя некоторое время в крови будут определяться и антитела, и антиген одновременно. На терминальной стадии СПИД-тест на антитела к ВИЧ может давать отрицательный результат, так как нарушается механизм выработки антител.
- Инкубационный период, или "период серонегативного окна", – время с момента заражения до выработки в крови защитных антител к вирусу, когда тесты на антитела к ВИЧ отрицательны, но человек уже может передавать вирус другим людям. Продолжительность данного периода – от 2 недель до 6 месяцев.
- Период острой ВИЧ инфекции наступает в среднем через 2-4 недели с момента инфицирования и длится примерно 2-3 недели. На данном этапе у некоторых людей могут развиться неспецифические симптомы, схожие с симптомами гриппа, что связано с активной репликацией вируса.
- Латентная стадия протекает бессимптомно, но в течение нее происходит постепенное снижение иммунитета и увеличение количества вируса в крови.
- СПИД (синдром приобретенного иммунодефицита) является конечной стадией развития ВИЧ-инфекции, которая характеризуется сильным угнетением иммунной системы, а также сопутствующими заболеваниями, энцефалопатией или онкологическими заболеваниями.
Несмотря на то что ВИЧ-инфекция неизлечима, сегодня существует высокоактивная антиретровирусная терапия (АРВТ), которая может значительно продлить жизнь ВИЧ-инфицированного и улучшить ее качество.
Данный тест имеет особенно высокую диагностическую ценность, если инфицирование ВИЧ произошло незадолго до момента тестирования (за 2-4 недели).
Для чего используется исследование?
Анализ используется для ранней диагностики ВИЧ, что позволяет предотвратить дальнейшую передачу вируса другим людям, а также своевременно начать антиретровирусную терапию и лечение заболеваний, способствующих прогрессированию ВИЧ-инфекции.
На нашем YouTube-канале опубликована серия видео по ИФА-диагностике респираторных инфекций. Подробнее
Новый набор для дифференциального выявления IgG к S- и N-белкам SARS-CoV-2. Подробнее
ВИЧ (-) стандартная панель сывороток
Набор образцов сывороток крови, не содержащих антитела к вирусам иммунодефицита человека 1, 2 типов и антиген р24 ВИЧ-1.
ВИЧ-1 АТ(+) стандартная панель сывороток
Набор образцов сывороток крови, содержащих антитела к вирусу иммунодефицита человека 1 типа.
ВИЧ-2 АТ(+) стандартная панель сывороток
Набор образцов сывороток крови, содержащих антитела к вирусу иммунодефицита человека 2 типа.
ВИЧ-1 р24-антиген (+) стандартная панель сывороток
Набор образцов сывороток крови, содержащих антиген р24 ВИЧ-1 в различных концентрациях.
HBsAg-стандартная панель сывороток
Набор образцов сывороток крови, содержащих разные субтипы и мутантные формы HBsAg вируса гепатита В.
Анти-ВГС контрольная панель сывороток
Набор образцов сывороток крови, содержащих и не содержащих антитела к вирусу гепатита С.
Анти-ВГС стандартная панель сывороток
Набор образцов сывороток крови, содержащих и не содержащих антитела к вирусу гепатита С.
Антипаллидум-контрольная панель сывороток
Набор образцов сывороток, содержащих и не содержащих антитела к Treponema pallidum.
МИНИпол (вариант 1)
Минимальный положительный контрольный образец 1, лиофилизированная сыворотка, содержащая антитела
к Treponema pallidum, для контроля чувствительности анализа в лаборатории при использовании наборов реагентов
для иммуноферментного выявления IgG и суммарных антител к Treponema pallidum
МИНИпол (вариант 2)
Минимальный положительный контрольный образец 2, лиофилизированная сыворотка, содержащая HBsAg и антитела к ВГС , для контроля чувствительности анализа в лаборатории при использовании наборов реагентов для иммуноферментного выявления HBsAg (с пределом выявления 0,05 МЕ/мл) и антител к ВГС.
МИНИпол (вариант 3)
Минимальный положительный контрольный образец 3, лиофилизированная сыворотка, содержащая HBsAg, антитела к ВГС и ВИЧ-1, для контроля чувствительности анализа в лаборатории при использовании наборов реагентов для иммуноферментного выявления HBsAg (с пределом выявления 0,05 МЕ/мл), антител к ВГС и антител к ВИЧ-1.
МИНИпол (вариант 4)
Минимальный положительный контрольный образец 4.
Лиофилизированная сыворотка, содержащая HBsAg, антитела к ВГС, ВИЧ-1, и Treponema pallidum, для контроля чувствительности анализа в лаборатории при использовании наборов реагентов для иммуноферментного выявления HBsAg (c пределом выявления 0,05 МЕ/мл); антител к ВГС; антител к ВИЧ-1; суммарных антител к T. pallidum.
Отрицательная донорская сыворотка, не содержащая серологические маркёры гепатитов В, С, ВИЧ-инфекции, сифилиса. Набор для внутрилабораторного контроля качества иммуноферментного анализа.
Распространение ВИЧ инфекции приобрело характер глобальной катастрофы. Около 33,3 млн. человек в мире инфицировано ВИЧ, среди них 15,9 млн. женщин и 2,5 млн. детей до 15 лет [1]. Своевременное выявление ВИЧ, внедрение новых, усовершенствование существующих методов диагностики остается основным направлением по предотвращению распространения ВИЧ.
При скрининговых обследованиях населения на ВИЧ используют иммуноферментный анализ (ИФА). В тест-системах III и IV поколений рекомбинантные полипептиды используются в составе иммуносорбента (твёрдой фазы) и конъюгата, что позволило выявлять суммарные антитела (АТ) разных классов (IgG, IgM, IgA) и сократило серологическое окно. Тест-системы IV поколения (комбинированные) позволяют выявлять не только специфические АТ, но и антиген р24 ВИЧ-1 (АГ) посредством введения в систему моноклональных антител (МКАТ) к белку р24 ВИЧ-1 [5], что повышает чувствительность тест-системы и позволяет выявлять ВИЧ на ранних сроках, когда АТ к нему отсутствуют.
Тестирования коммерческих ВИЧ-сероконверсионных панелей сывороток производства Boston Biomedica Inc и ZeptoMetrix Corp. (США) различными тест-системами показывает, что чувствительность комбинированных ИФА-тестов приближается к показателю ПЦР анализа.
Широкое использование комбинированных тестов в службе крови делает актуальной задачу их дальнейшего совершенствования. Разработчики и производители постоянно исследуют новые подходы дальнейшего улучшения параметров чувствительности и специфичности комбинированных тестов.
Тест-система DIA-HIV Ag/Ab для одновременного определения АТ к ВИЧ ½ и АГ р24 ВИЧ-1 содержит полноразмерные рекомбинантные белки ВИЧ ½ и укороченные синтетические АГ, а также мощную систему биотин-стрептавидинового усиления с применением полимерной пероксидазы в составе конъюгата. Тест-система разработана российскими и украинскими учёными, выпускается в промышленных объёмах с 2011 года. Тест-система имеет регистрационное удостоверение Федеральной службы по надзору в сфере здравоохранения ФСЗ 2012/1336 от 30 ноября 2012 года.
Для установления достоверности полученных данных использованы показатели среднего арифметического результатов трёх повторов анализа исследуемых образцов в ИФА, стандартной ошибки и среднеквадратичного отклонения.
Тест-система DIA-HIV Ag/Ab, предназначена для скрининговых и подтверждающих исследований сывороток и плазмы крови человека на наличие АГ р24 ВИЧ-1 и суммарных АТ (IgG, IgM, IgA) к ВИЧ-1, ВИЧ-2.
| Стандарт ABI | Стандарт NIBSC | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| Концентрация, пкг/мл | ОП | ОП/ГЗ | Концентрация, МЕ | ОП | ОП/ГЗ |
| 40 | 0,804±0,024 | 5,5±0,16 | 8 | 0,531±0,016 | 3,6±0,11 |
| 20 | 0,621±0,018 | 4,2±0,12 | 4 | 0,384±0,011 | 2,6±0,08 |
| 10 | 0,519±0,015 | 3,5±0,1 | 2 | 0,253±0,007 | 1,72±0,05 |
| 5 | 0,263±0,008 | 1,8±0,05 | 1 | 0,148±0,004 | 1,1±0,03 |
| 2,5 | 0,185±0,005 | 1,25±0,04 | 0,5 | 0,083±0,002 | 0,56±0,01 |
Примечание: ОП – оптическая плотность, ОП/ГЗ – соотношение оптической плотности к граничному значению, МЕ – международные единицы.
Аналитическая чувствительность тест-системы по выявлению стандарта р24 ВИЧ-1 ABІ составила 2,5 пкг/мл.
Аналитическая чувствительность тест-системы по выявлению АГ р24 ВИЧ-1 составляет 20 пкг/мл.
| № образца панели | АТ к субтипам и группам ВИЧ | Результаты | |
|---|---|---|---|
| ОП | ОП/ГЗ | ||
| 1 | Анти-ВИЧ-1 субтип А группа М | 3,387±0,10 | 23,0±0,69 |
| 2 | Анти-ВИЧ-1 субтип В группа М | 3,565±0,11 | 24,2±0,72 |
| 3 | Анти-ВИЧ-1 субтип С группа М | 3,319±0,10 | 22,5±0,67 |
| 4 | Анти-ВИЧ-1 субтип Е группа М | 3,233±0,09 | 21,9±0,66 |
| 5 | Анти-ВИЧ-1 группа 0 | 1,098±0,03 | 7,5±0,22 |
| 6 | Анти-ВИЧ-2 | 3,195±0,09 | 21,7±0,65 |
| 7 | Отрицательный контроль | 0,063±0,002 | 0,42±0,012 |
Тест-система выявляет АТ к субтитам А, В, С и Е ВИЧ-1 группы М, АТ к ВИЧ-1 группы О и АТ к ВИЧ-2, причём показатели соотношения ОП/ГЗ достаточно высокие.
| № образца панели | Результаты | № образца панели | Результаты | ||
|---|---|---|---|---|---|
| ОП | ОП/ГЗ | ОП | ОП/ГЗ | ||
| 1 | 3.196±0,096 | 20.2±0,606 | 9 | 3.14±0,094 | 20.1±0,603 |
| 2 | 3.374±0,101 | 21.3±0,639 | 10 | 3.372±0,101 | 21.3±0,639 |
| 3 | 3.476±0,104 | 22.0±0,66 | 11 | 3.418±0,102 | 21.9±0,657 |
| 4 | 3.231±0,096 | 20.8±0,624 | 12 | 3.136±0,094 | 20.0±0,600 |
| 5 | 3.375±0,101 | 21.3±0,639 | 13 | 3.326±0,099 | 21.3±0,639 |
| 6 | 3.399±0,102 | 21.4±0,642 | 14 | 3.344±0,100 | 21.4±0,642 |
| 7 | 3.296±0,099 | 21.2±0,636 | 15 | 3.342±0,100 | 21.4±0,642 |
| 8 | 3.659±0,109 | 23.1±0,693 | 16 | 3.416±0,102 | 21.9±0,657 |
| № образца панели | Тест-системы, ОП/ГЗ | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| День забора крови | Abbott HIV1/2 | Organon Teknika HIV | Abbott HIV Ag | DIA-HIV-Ag/Ab | |
| PRB 950-1 | 0 | 0,2 | 0,3 | 0,5 | 0,4±0,012 |
| PRB 950-2 | 18 | 0,2 | 0,3 | 0,7 | 1,2±0,036 |
| PRB 950-3 | 21 | 0,2 | 0,3 | 3,3 | 5,9±0,177 |
| PRB 950-4 | 28 | 15,5 | 0,4 | 4,1 | 6,4±0,192 |
| № образца панели | Тест-системы, ОП/ГЗ | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| День забора крови | Abbott HIV1/2 | Organon Teknika HIV | Abbott HIV Ag | DIA-HIV-Ag/Ab | |
| PRB-959-1 | 0 | 0,3 | 0,4 | 0,3 | 0,5±0,015 |
| PRB-959-2 | 7 | >16,7 | 0,8 | 12,5 | 25,1±0,753 |
| PRB-959-3 | 9 | >16,7 | 0,8 | 8,1 | 24,9±0,747 |
| PRB-959-4 | 14 | >16,7 | 5,9 | >12,5 | 8,3±0,249 |
| PRB-959-5 | 19 | >16,7 | 5,6 | >12,5 | 5,4±0,162 |
| PRB-959-6 | 21 | >16,7 | 5,9 | >12,5 | 6,1±0,183 |
| PRB-959-7 | 26 | >16,7 | 5,4 | >12,5 | 6,7±0,201 |
| № образца панели | Тест-системы, ОП/ГЗ | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| Abbott Monoclonal HIV Ag | Dupont HIV Ag | Organon Teknik HIV Ag | IVCOMBI.CE 4 th Generation | DIA-HIV-Ag/Ab | |
| PRА203-01 | 4,3 | 5,7 | 16,8 | 2,3 | 2,3±0,069 |
| PRА203-02 | 12,2 | 6,2 | 16,4 | 4,1 | 20,5±0,615 |
| PRА203-03 | 6,0 | 8,7 | 9,3 | 1,4 | 4,2±0,126 |
| PRА203-04 | 3,0 | 3,1 | 4,1 | 1,9 | 3,5±0,106 |
| PRА203-05 | 4,9 | 1,2 | 8,2 | - | 27,9±0,837 |
| PRА203-06 | 1,3 | 1,3 | 1,5 | 1,0 | 25,8±0,774 |
| PRА203-07 | 5,7 | 2,8 | 12,1 | 2,9 | 25,9±0,777 |
| PRА203-08 | 1,5 | 1,0 | 2,0 | 3,0 | 27,5±0,825 |
| PRА203-09 | 0,5 | 0,2 | 0,2 | 0,4 | 0,8±0,024 |
| PRА203-10 | 12,2 | 9,6 | 25,3 | 3,6 | 15,3±0,459 |
| PRА203-11 | 3,1 | 3,9 | 5,8 | 2,4 | 2,8±0,086 |
| PRА203-12 | 3,5 | 2,9 | 6,6 | 1,6 | 24,9±0,747 |
| PRА203-13 | 2,1 | 1,1 | 2,4 | 1,2 | 9,3±0,279 |
| PRА203-14 | 0,9 | 0,7 | 2,5 | 0,4 | 2,5±0,075 |
| PRА203-15 | 2,5 | 2,8 | 5,9 | 3,3 | 2,8±0,084 |
| PRА203-16 | 1,8 | 1,4 | 3,7 | 1,1 | 28,5±0,855 |
| PRА203-17 | 6,3 | 4,0 | 6,1 | 2,5 | 17.5±0,525 |
| PRА203-18 | 2,4 | 0,8 | 2,3 | 1,7 | 24.8±0,744 |
| PRА203-19 | 0,5 | 0,2 | 0,3 | 0,4 | 0.3±0,009 |
| PRА203-20 | 17,0 | 9,1 | 26,4 | 4,6 | 10.7±0,321 |
| № образца панели | Тест-системы, ОП/ГЗ | ||
|---|---|---|---|
| №1 | №2 | DIA-HIV-Ag/Ab | |
| 1 | 7,3 | 11,1 | 25,1±0,753 |
| 2 | 17,6 | 11,2 | 22,0±0,66 |
| 3 | 17,3 | 11,2 | 24,7±0,741 |
| 4 | 17,4 | 11,1 | 23,9±0,717 |
| 5 | 4,8 | 11,6 | 22,8±0,684 |
| 6 | 6,1 | 10,0 | 22,5±0,675 |
| 7 | 7,7 | 10,6 | 22,8±0,684 |
| 8 | 13,4 | 11,4 | 22,2±0,666 |
| 9 | 16,8 | 11,6 | 23,4±0,702 |
| 10 | 17,6 | 11,2 | 22,9±0,687 |
| 11 | 16,3 | 11,2 | 23,3±0,699 |
| 12 | 17,1 | 11,2 | 25,6±0,768 |
| 13 | 17,1 | 11,5 | 23,2±0,696 |
| 14 | 18,7 | 10,2 | 23,8±0,714 |
| 15 | 5,7 | 10,9 | 23,4±0,702 |
| 16 | 9,2 | 11,4 | 24,6±0,738 |
| 17 | 11,3 | 10,4 | 23,7±0,711 |
| 18 | 16,1 | 10,6 | 22,9±0,687 |
| 19 | 17,0 | 0,5 | 22,1± |
| 20 | 15,6 | 0,4 | 21,2± |
| № сыворотки | Тест-системы, ОП/ГЗ | ||
|---|---|---|---|
| №1 | №2 | DIA-HIV-Ag/Ab | |
| 1 | 1,4±0,042 | 4,3±0,126 | 4,3±0,129 |
| 2 | 0,4±0,012 | 1,9±0,042 | 3,3±0,099 |
| 3 | 0,69±0,021 | 1,4±0,042 | 1,6±0,048 |
| 4 | 0,77±0,023 | 9,4±0,282 | 1,4±0,042 |
| 5 | 17,6±0,528 | 11,5±0,345 | 3,1±0,093 |
| 6 | 14,9±0,447 | 10,0±0,30 | 5,0±0,150 |
| 7 | 5,9±0,177 | 5,4±0,162 | 4,4±0,132 |
| 8 | 3,96±0,119 | 3,6±0,108 | 3,7±0,111 |
| 9 | 9,69±0,291 | 4,2±0,126 | 7,4±0,222 |
По результатам анализа донорских сывороток и образцов стандартных панелей специфичность тест-системы составила 100%.
Чувствительность тест-системы при исследовании образцов стандартных панелей и неразведенных сывороток от ВИЧ-инфицированных пациентов составила 100%. Тест-система выявляет АТ к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 в низких титрах и с более высокими сигналами, чем коммерческие аналоги ведущих мировых производителей.
Разработанная тест-система способна диагностировать ВИЧ-инфекцию на более ранних этапах заболевания, чем её коммерческие аналоги.
Разработанная тест-система обладает высокой специфичностью: при испытаниях в условиях предприятия - 100% (2519 образцов), в клинических лабораториях - 99,8% (134486 исследований).
Следует отметить высокую стабильность и точность тест-системы: показатель межсерийных различий коэффициента позитивности для 12 выпущенных промышленных серий тест-системы составил 5,87% (CV).
Диагностика ВИЧ-инфекции, обычно, базируется на выявлении антител к ВИЧ. Классические серологические тесты для выявления антител к ВИЧ делятся на тест-системы для скрининга антител (первичная диагностика) и тест-системы для подтверждения, т.е. идентификации ВИЧ – позитивных образцов сывороток крови человека.
Проведение обследования единичных тестов на ВИЧ необходимо в регионах с низким показателем распространения ВИЧ-инфекции. При этом требуется использовать высокоспецифичные, одноразовые тесты для индивидуального обследования единичных сывороток крови человека.
Это особенно важно в тех регионах, где отсутствуют условия функционирования диагностической лаборатории – отсутствует специальное оборудование, электричество, нет персонала, обученного постановке иммуноферментного анализа или иммунного блоттинга. Кроме того, могут отсутствовать условия для забора на анализ и обработки крови из локтевой вены для получения образцов сывороток или плазмы крови.
Для проведения оперативных мероприятий по дальнейшему предотвращению распространения ВИЧ-инфекции, анализ должен быть проведен максимально быстро. В последние годы для этого разработаны и приобретают всё большее значение простые/быстрые тесты исследования, когда время анализа одного образца – до 15 минут или максимально – до 40 минут.
Технология производства одноразовых, простых/быстрых тестов (П/Б) настолько усовершенствована в последние годы, как свидетельствуют многочисленные испытания, проведенные в различных странах мира, что по качеству и результатам П/Б – тесты вполне могут быть приравнены к классическим тест-системам. ВОЗ рекомендует лабораториям, для которых приобретение тест-систем для иммунного блоттинга является сложным из-за высокой стоимости этих наборов, использовать комбинации ИФА – тест-систем и П\Б-тестов. Поэтому понятно, насколько важно качество П/Б-тестов, особенно при использовании их для первичного анализа – ложноотрицательный результат такого анализа и отсутствие возможности проведения анализа классическим методом ИФА может иметь неблагоприятные последствия. Такая же ситуация может сложиться и при применении П/Б-тестов при ургентных ситуациях – родовспоможении, травмах и т.д.
П/Б-тесты должны быть устроены таким образом, чтобы максимально минимизировать риск заражения для оператора, производящего как забор пробы на анализ, так и непосредственно анализ. П\Б-тесты должны сохранять свои свойства при хранении и транспортировании при различных температурных условиях окружающей среды, т.е. при температуре от 2 o C до 30 o C, а иногда до 45 o C.
Индивидуальный одноразовый П/Б-тест должен содержать все необходимые реагенты, готовые к употреблению, включать обязательно внутренний контроль и быть предельно простым в применении, чтобы максимально сократить возможность технических ошибок.
Начиная с 1988 года, когда появились первые разработки П/Б-тестов, ВОЗ была предложена Программа объективного изучения операционных характеристик этих тестов: чувствительность, специфичность, температура инкубации при проведении анализа, срок годности, температура хранения и транспортирования, простота постановки теста, использование для анализа не только образцов сыворотки или плазмы крови, но и цельной крови человека.
Для производства П/Б-тестов применяются различные технологии – метод иммунохроматографии, метод иммунофильтрации, метод латекс-агглютинации, модифицированный метод ИФА – иммуно-дот.
Анализ проведенных исследований в институте Тропической медицины (Бельгия) показывает, что большая часть применяемых в настоящее время быстрых тестов пригодна для исследования как сыворотки и плазмы, так и цельной крови человека. По чувствительности и специфичности эти тесты не уступают классическому ИФА, и при этом имеют преимущества по простоте и быстроте проводимого исследования индивидуальных проб сывороток.
Три из пяти представленных тестов являются тестами, в основе которых лежит принцип иммунохроматографии.
На мембране иммобилизованы рекомбинантные и пептидные антигены ВИЧ-1 и ВИЧ-2. Каждый из 3-х тестов имеет свои принципиальные особенности технологии и проведения анализа, однако, главная цель – быстро (15-30 мин) провести анализ пробы сыворотки (плазмы) крови человека без применения специального оборудования и особых лабораторных условий.
Тест представляет собой набор реагентов для качественного и дифференцированного выявления антител к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 в сыворотке (плазме) крови человека.
Все реагенты, необходимые для постановки теста, в готовом виде размещены в ячейках проявочной ванны (6 рядов по 12 ячеек).
В ячейки проявочной ванны опускаются зубцы пластикового гребня. На поверхности каждого зубца этого гребня нанесены в разных точках пептидные антигены ВИЧ-1, рекомбинантный антиген ВИЧ-2 и внутренний контроль реакции – антитела к человеческому IgG.
В ячейках разных рядов проявочной ванны, в которые опускаются зубцы пластикового гребня, находятся необходимые для проведения ИФА-реакции реагенты: разбавитель образца сыворотки, конъюгат, промывочный раствор (в 3 рядах) и раствор хромогенного субстрата.
Препарат представляет собой оригинальную разработку, которая позволяет проводить иммуноферментный анализ без применения специального оборудования и с минимальным участием оператора.
Оператор должен только через определенные промежутки времени извлекать зубцы гребня из ячеек одного ряда и помещать их в ячейки следующего ряда. С помощью одного гребня могут быть исследованы одновременно 10 сывороток и 2 контроля (К+ и К-). Постановка анализа на 1 гребне занимает не более 40 мин.
По окончании анализа и выявлении в исследованной сыворотке антител к ВИЧ-1 и/или к ВИЧ-2 на зубцах гребня в определенных местах должны проявиться 2 или 3 пятна, при отрицательном результате – одно пятно.
Во всех анализах были получены результаты, соответствующие исходным характеристикам сывороток, входящих в данную панель (табл. 20)
| №пп | ВИЧ-экспресс | Иммунокомб Биспот ВИЧ1,2 | Multispot HIV1/HIV2 | Genie II | Determine HIV1/2 | ||
| С.23 | С.24 | С.25 | С.010216010220 | MS 350 | С.010121 | 70218U100 | |
| 1 | - | - | - | - | - | - | - |
| 2 | - | - | - | - | - | - | - |
| 3 | - | - | - | - | - | - | - |
| 4 | - | - | - | +сл. | - | - | - |
| 5 | + | + | + | + | + | + | + |
| 6 | + | + | + | + | + | + | + |
| 7 | + | + | + | + | + | + | + |
| 8 | + | + | + | + | + | + | + |
| 9 | + | + | + | + | + | + | + |
| 10 | + | + | + | + | + | + | + |
| 11 | + | + | + | + | + | + | + |
| 12 | + | + | + | + | + | + | + |
| 13 | + | + | + | + | + | + | + |
| 14 | + | + | + | + | + | + | + |
| 15 | + | + | + | + | + | + | + |
| 16 | + | + | + | + | + | + | + |
| 17 | + | + | + | + | + | + | + |
| 18 | + | + | + | + | + | + | + |
| 19 | + | + | + | + | + | + | + |
| 20 | + | + | + | + | + | + | + |
| 21 | + | + | + | + | + | + | + |
| 22 | + | + | + | + | + | + | + |
| 23 | + | + | + | + | + | + | + |
| 24 | + | + | + | + | + | + | + |
Быстрый подтверждающий тест – иммуноблот ИммуноКомб ВИЧ 1+2 КомбФирм по результатам этих же Госиспытаний рекомендован для постановки окончательного диагноза и подтверждений наличия антител к ВИЧ (приказ 292 от 30.07.2001).
В 2003 году согласно Указанию Зам. Министра здравоохранения РФ – Г.Г.Онищенко были проведены Государственные испытания препаратов, предназначенных для серодиагностики ВИЧ-инфекции.
Для изучения были предоставлены следующие П/Б-тесты:
Для изучения пяти П/Б-тестов, представленных на Госиспытания 2003 г. были использованы следующие материалы:
Результаты испытания П/Б-тестов представлены в табл.21
Таблица 21. Изучение 5 простых/быстрых тестов (П/Б тесты)на стандартных панелях ГИСК им.Л.А.Тарасевича.
| П/Б тесты | Serodia HIV 1/2 | Determine HIV1/2 | Иммунокомб II ВИЧ1+2 Биспот | Genie II HIV1/HIV2 | Retrocheck HIV WB | |
| Стандартные панели | ВИЧ 1+ ОСО 422821202П 16 сывороток | 16/16 | 16/16 | 16/16 | 15/16 | - |
| ВИЧ 2+ ОСО 422821602П 8 сывороток | 8/8 | 8/8 | 8/8 | 8/8 | - | |
| ВИЧ - ОСО 422821402П 20 сывороток | 0/20 | 0/20 | 0/20 | 0/20 | 0/20 | |
| Референс-сыворотка ВИЧ-2 1 сыворотка | 1/1 | 1/1 | 1/1 | 1/1 | - | |
| Референс-панель ОСО 422832704 24 сыворотки | - | - | - | 0/4 20/20 | ||
Пять вышеуказанных П/Б-тестов были изучены на клиническом материале, специально отобранном для этих исследований и аттестованном предварительно методом ИФА и в иммуноблоте.
В панели клинического материала были представлены:
Характеристика сывороток и результаты испытаний пяти П/Б-тестов представлены в таблицах 22,23,24.
Таблица 22. Изучение 5 простых/быстрых тестов (П/Б тестов) на клиническом ВИЧ-позитивном материале.
| П/Б тесты | Serodia HIV 1/2 | Deter-mine HIV1/2 | Иммунокомб II ВИЧ1+2 Биспот | Genie II HIV1/ HIV2 | Retro- check HIV WB | ||||
| Характеристика сывороток в ИФА и ИБ | шифр | ИФА (О.П.) | иммуно-блот*** | ||||||
| анти-тела* | анти-ген** | ||||||||
| 1г | >3,0 | 0,391 | ВИЧ-1 | + | + | + | + | + | |
| 2г | >3,0 | 0,198 | ВИЧ-1 | + | + | + | + | + | |
| 3г | >3,0 | 0,231 | ВИЧ-1 | + | + | + | + | + | |
| 5г | 1,24 | 2,008 | неопред | + | + | + | - | + | |
| 6г | >3,0 | 0,026 | ВИЧ-1 | + | + | + | + | + | |
| 7г | >3,0 | 0,229 | ВИЧ-1 | + | + | + | + | + | |
| 8г | >3,0 | 0,364 | ВИЧ-1 | + | + | + | + | + | |
| 9г | >3,0 | 0,360 | ВИЧ-1 | + | + | + | + | + | |
| 10г | >3,0 | 0,157 | ВИЧ-1 | + | + | + | + | + | |
| 11г | >3,0 | 0,252 | ВИЧ-1 | + | + | + | + | + | |
| 12г | >3,0 | 1,196 | ВИЧ-1 | + | + | + | + | + | |
| 1т | 0,312 | 0,056 | отрицат | - | - | - | - | - | |
| 2т | 1,08 | 0,049 | отрицат | + | - | - | - | - | |
| 3т | 1,02 | 0,183 | отрицат | + | - | - | - | - | |
| 4т | >3,0 | 0,135 | неопред | + | + | + | + | + | |
| 5т | >3,0 | 0,325 | неопред | + | + | + | + | + | |
| 6т | >3,0 | 0,151 | ВИЧ-1 | + | + | + | + | + | |
| 7т | 1,83 | 0,053 | отрицат | - | - | - | - | - | |
| 8т | >3,0 | 0,849 | ВИЧ-1 | + | + | + | + | - | |
| 9т | >3,0 | 0,034 | ВИЧ-1 | + | + | + | + | + | |
| 10т | >3,0 | 0,024 | неопред | + | + | + | + | + | |
| 11т | 2,39 | 0,022 | неопред | + | + | + | + | + | |
| 12т | 1,97 | 0,126 | неопред | + | + | - | - | - | |
| 13т | >3,0 | 0,036 | ВИЧ-1 | + | + | + | - | + | |
| 14т | >3,0 | 0,048 | неопред | + | + | + | + | + | |
| 15т | 0,167 | 0,032 | отрицат | - | - | - | - | - | |
* - тест-система "Genscreen Plus HIV Ag/Ab" производства фирмы "Bio-Rad" (ОП крит. 0,172)
** - тест-система "Genetic Systems HIV-1 Ag" производства фирмы "Bio-Rad" (ОП крит. 0,101)
*** - тест-система "New Lav Blot I" производства фирмы "Bio-Rad"
Таблица 23. Изучение 5 простых/быстрых тестов (П/Б тестов) на сероконверсионной панели BBI № 9017
| П/Б тесты | Serodia HIV 1/2 | Deter-mine HIV1/2 | Иммунокомб II ВИЧ1+2 Биспот | Genie II HIV1 /HIV2 | Retro-check HIV WB | ||||
| Сыворотки панели | шифр | ИФА (О.П.) | иммуно-блот*** | ||||||
| анти-тела* | анти- ген** | ||||||||
| 1 | 0,032 | 0,041 | отрицат | - | - | - | - | - | |
| 2 | 0,022 | 0,046 | отрицат | - | - | - | - | - | |
| 3 | 0,041 | 0,034 | отрицат | - | - | - | - | - | |
| 4 | 0,70 | 0,035 | отрицат | - | - | - | - | - | |
| 5 | 0,113 | 0,033 | отрицат | - | - | - | - | - | |
| 6 | 0,248 | 0,036 | отрицат | - | - | + | - | - | |
| 7 | 0,822 | 0,053 | отрицат | - | - | + | - | - | |
| 8 | 2,142 | 0,110 | отрицат | - | - | + | - | + | |
| 9 | 1,824 | 0,195 | неопред | + | - | + | - | + | |
| 10 | 2,878 | 0,176 | неопред | + | + | + | + | + | |
| 11 | >3,0 | 0,085 | неопред | + | + | + | + | + | |
* - тест-система "Genscreen Plus HIV Ag/Ab" производства фирмы "Bio-Rad" (ОП крит. 0,106)
** - тест-система "Genetic Systems HIV-1 Ag" производства фирмы "Bio-Rad" (ОП крит. 0,108)
*** - тест-система "New Lav Blot I" производства фирмы "Bio-Rad"
При исследовании сывороток беременных (18 образцов), сывороток крови пациентов с диагнозом гепатит В и С (25 образцов), сывороток крови доноров (34 образца) , ни в одном случае не было выявлено ложно-положительных результатов, т.е. специфичность – 100% (табл.24).
Таблица 24. Специфичность простых/быстрых тестов (П/Б тестов) на серонегативных сыворотках
| П/Б тесты | Serodia HIV 1/2 | Determine HIV1/2 | Иммунокомб II ВИЧ1+2 Биспот | Genie II HIV1/HIV2 | Retrocheck HIV WB | |
| сыворотки | доноры | 0/34 | 0/34 | 0/34 | 0/34 | 0/34 |
| беременные | 0/18 | 0/18 | 0/18 | 0/18 | 0/18 | |
| гепатит С | 0/8 | 0/8 | 0/8 | 0/8 | 0/8 | |
| гепатит В+С | 0/5 | 0/5 | 0/5 | 0/5 | 0/5 | |
| гепатит В | 1±/12 | 0/12 | 0/12 | 0/12 | 0/12 | |
Таким образом, результаты испытаний П/Б-тестов показали, что все исследованные препараты обладают выраженной специфичностью, что особенно важно при проведении быстрого тестирования неизвестного сывороточного материала.
Можно сказать, что П/Б-тесты гарантированы, при правильной постановке и хорошем качестве сывороток, от ложно-положительных реакций.
Большинство исследованных П/Б-тестов имеют достаточную чувствительность при выявлении антител к ВИЧ-1 и ВИЧ-2, не уступающую чувствительность тест-систем для классического иммуноферментного анализа.
Это подтверждает предлагаемую ВОЗ стратегию, по которой в определенных случаях простые/ быстрые тесты (П/Б-тесты) могут с успехом заменять классический иммуноферментный анализ. При этом постановка серологического диагноза ВИЧ-инфекции ускоряется и значительно упрощается.
Весь клинический материал аттестован в лаборатории стандартизации и контроля МИБП против арбовирусных инфекций, риккетсиозов и СПИДа ГИСК им. Л.А. Тарасевича.
По-видимому, будущее серодиагностики ВИЧ-инфекции за простыми/ быстрыми тестами при условии их высокого качества, развитых и стандартизованных технологий и выраженной стабильности.
Исследование специфических антител и антигена p24 вируса иммунодефицита человека.
Синонимы русские
Антитела к ВИЧ 1, 2, антитела к вирусу иммунодефицита человека, ВИЧ-1 p24, ВИЧ-1-антиген, p24-антиген.
Синонимы английские
Anti-HIV, HIV antibodies, human immunodeficiency virus antibodies, HIV-1 p24, HIV-1 Ag, p24-antigen.
Метод исследования
Электрохемилюминесцентный иммуноанализ (ECLIA).
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Исследование на наличие ВИЧ-инфекции может проводиться анонимно и конфиденциально. При конфиденциальном обследовании в обязательном порядке необходимо предъявление паспорта.
- Не курить в течение 30 минут до исследования.
Общая информация об исследовании
ВИЧ (вирус иммунодефицита человека) – вирус семейства ретровирусов, который поражает клетки иммунной системы человека (CD4, Т-хелперы). Вызывает СПИД.
ВИЧ-1 – наиболее распространенный тип вируса, чаще всего встречающийся в России, США, Европе, Японии и Австралии (как правило, субтип В).
ВИЧ-2 – редкий тип, распространен в Западной Африке.
Для диагностики вируса иммунодефицита человека используется комбинированная тест-система четвертого поколения, способная определять ВИЧ-инфекцию уже через 2 недели после попадания вируса в кровь, тогда как тест-системы первого поколения делают это только через 6-12 недель с момента инфицирования.
Преимуществом этого комбинированного ВИЧ-анализа является выявление, благодаря использованию антител к ВИЧ-1 p24 в качестве реагентов, специфического антигена p24 (белка вирусного капсида), который может быть обнаружен данным тестом уже через 1-4 недели с момента инфицирования, т. е. еще до сероконверсии, что значительно сокращает "период окна".
Кроме того, такой анализ на ВИЧ выявляет в крови антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 (с использованием реакции антиген-антитело), которые вырабатываются в достаточном количестве для определения тест-системой через 2-8 недель с момента заражения.
После сероконверсии антитела начинают связываться с антигеном p24, в результате чего тест на антитела к ВИЧ будет положительным, а тест на p24 – отрицательным. Однако спустя некоторое время в крови будут определяться и антитела, и антиген одновременно. На терминальной стадии СПИД-тест на антитела к ВИЧ может давать отрицательный результат, так как нарушается механизм выработки антител.
- Инкубационный период, или "период серонегативного окна", – время с момента заражения до выработки в крови защитных антител к вирусу, когда тесты на антитела к ВИЧ отрицательны, но человек уже может передавать вирус другим людям. Продолжительность данного периода – от 2 недель до 6 месяцев.
- Период острой ВИЧ инфекции наступает в среднем через 2-4 недели с момента инфицирования и длится примерно 2-3 недели. На данном этапе у некоторых людей могут развиться неспецифические симптомы, схожие с симптомами гриппа, что связано с активной репликацией вируса.
- Латентная стадия протекает бессимптомно, но в течение нее происходит постепенное снижение иммунитета и увеличение количества вируса в крови.
- СПИД (синдром приобретенного иммунодефицита) является конечной стадией развития ВИЧ-инфекции, которая характеризуется сильным угнетением иммунной системы, а также сопутствующими заболеваниями, энцефалопатией или онкологическими заболеваниями.
Несмотря на то что ВИЧ-инфекция неизлечима, сегодня существует высокоактивная антиретровирусная терапия (АРВТ), которая может значительно продлить жизнь ВИЧ-инфицированного и улучшить ее качество.
Данный тест имеет особенно высокую диагностическую ценность, если инфицирование ВИЧ произошло незадолго до момента тестирования (за 2-4 недели).
Для чего используется исследование?
Анализ используется для ранней диагностики ВИЧ, что позволяет предотвратить дальнейшую передачу вируса другим людям, а также своевременно начать антиретровирусную терапию и лечение заболеваний, способствующих прогрессированию ВИЧ-инфекции.
Читайте также: