T spot отрицательный при некоторых формах туберкулеза

Обновлено: 26.04.2024

В нашей стране микобактерия туберкулёза присутствует в организме 95% взрослых. Однако заболевание в активной форме возникает менее чем у 1%. Поэтому её наличие не означает болезнь. Пусковым механизмом является снижение иммунитета. Чаще всего туберкулёз диагностируется у людей в возрасте от 18 до 44 лет. До 18 лет ребёнку ежегодно полагается сдавать тест и оценивать реакцию иммунитета. На сегодняшний день существует два основных способа диагностики туберкулёза – это проба Манту (до 7 лет) и диаскинтест (с 7 до 18 лет). Есть ли альтернатива традиционным способам выявления туберкулёзной инфекции в организме?

Что такое Т-SPОТ?

От пробы Манту или диаскинтеста для своих детей многие родители отказываются в силу двух причин: это противопоказания и личные убеждения. Существует некая подмена понятий, когда безопасная во всех отношениях проба Манту воспринимается как прививка, а не как проверка состояния иммунитета.

Показания для проведения T-SPOT

кожные заболевания (например, экзема) и аутоиммунные заболевания;
аллергические реакции;
эпилепсия;
диализ;
трансплантация органов;
судорожный синдром;
любые хронические заболевания в стадии обострения (особенно сахарный диабет, пневмокониозы);
онкологические заболевания во время терапии, подавляющей иммунитет (глюкостероидная или лучевая), а также лечение с замещением функции почек;
при подозрении на внелёгочные формы туберкулёза;
ВИЧ-инфекция.

Также T-SPOT может применяться для диагностики беременных женщин, если у них был контакт с больным туберкулёзом.

Анализ T-SPOT является дополнительным в иммунодиагностике, но может использоваться в качестве замены пробы Манту или диаскинтеста.

Чем отличается T-SPOT от пробы Манту и дианскинтеста?

Самое главное отличие — в процедуре проведения теста. При традиционных способах диагностики заболевания туберкулёза — пробе Манту и диаскинтесте — применяется внутрикожное введение препарата. Для пробы Манту используется очищенный туберкулин, для диаскинтеста — это белки бактерий туберкулёза. При попадании веществ под кожу происходит местная реакция, по которой оценивают наличие в организме микобактерий туберкулёза.

Для диагностики туберкулёзной инфекции с помощью спот теста требуется кровь пациента, которую в дальнейшем отправят на исследование в лабораторию. Это главное отличие теста от пробы Манту и диаскинтеста. Ещё один схожий тест, которые проводят в пробирке — это квантифероновый тест. Главное отличие тестов друг от друга в методике исследований. Так, например, квантифероновой тест определяет гамма-интерферон (он вырабатывается в ответ на внедрение туберкулёзной палочки), а спот тест определяет Т-клетки (они вырабатывают гамма-интерферон на присутствие микобактерии туберкулёза).

Как подготовиться к сдаче крови на анализ Т-SPОТ?

Особой подготовки к сдаче анализа крови для теста не требуется. Анализ нужно сдавать утром натощак (не менее 4 часов после еды). Если вы долгое время принимаете какие-либо препараты, то сообщите об этом врачу. Забор крови производится из вены.

Технология проведения теста

После забора крови пациента её отправляют в лабораторию на исследование. Биоматериал подвергается стимуляцией белками-антигенами, которые можно обнаружить в составе микобактерий туберкулёза. В ответ на эти действия Т-лимфоциты вырабатывают гамма-интерферон. В местах заражённых клеток начинают появляться пятна. Результат — количественное значения выявленных Т-лимфоцитов.

В чём плюсы и минусы Т-SPOT?

— Тест хорош тем, что определяет иммунный ответ организма, - объясняет Ольга Малиновская, руководитель медицинского департамента федеральной сети лабораторий. — У него нет задачи дифференцировать, является инфекция латентной или активной формой туберкулёза. Результат теста говорит о том, имел ли пациент контакт с патогенной микобактерий и как его иммунная система прореагировала на это. В основе теста лежат белки микобактерий туберкулёза, они аналогичны белкам, используемых в диаскинтесте. Главная особенность в том, что тест проводится без вмешательства во внутреннюю среду организма. Методика T-SPOT теста утверждена в 2012 году, а в 2017 году вышли федеральные клинические рекомендации по выявлению туберкулёза у детей, обучающихся в образовательных учреждениях. Согласно этому документу, фтизиатр на основании отрицательного результата T-SPOT теста и осмотра ребёнка, может выдать справку, что ребёнок здоров. Это разрешено.

Анализ крови: трактовка результата

Существует 3 разновидности результата теста:

Положительный — антитела найдены. Человек контактировал с больным туберкулёзом. Также положительный результата может указывать на латентную форму туберкулёза. Необходимо назначить дополнительное обследование: рентген лёгких, компьютерная томография груной клетки, анализ мокроты и т.д.
Отрицательный — инфекции туберкулёза в организме не обнаружено.
Сомнительный — это указывает на то, что иммунный ответ в организме начался, но не развернулся в полную силу. Следовательно, состояние пациента необходимо контролировать и провести повторную диагностику (T-SPOT или диаскинтест) через несколько месяцев. Также тест может дать сомнительный результат в том случае, если у пациента вырабатывается иммунный ответ не на конкретные антигены туберкулёза, а на другие инфекции. Например, у детей это может быть связано с вирусом герпеса. В случае сомнительного результата некоторые лаборатории предлагают бесплатно повторное исследование.

После получения результата T-SPОТ, родителям необходимо показать тест фтизиатру. Врач осмотрит ребёнка и напишет заключение, которое можно показать в детском учреждении, будь то детский сад или школа. Однако результат одного анализа без справки от фтизиатра действительным считаться не будет. Не забывайте, что сотрудники детских учреждений — не врачи и расшифровкой результата диагностики заниматься не вправе.
Решение о конкретном выборе метода диагностики для вашего ребёнка с учётом его особенностей здоровья рекомендуется принимать совместно с фтизиатром.

Плюсы T-SPOT

— исследование без вмешательства в организм. Для диагностики туберкулёза необходим только анализ крови;
— исследование подходит детям с аллергическими реакциями и кожными болезнями;
— ранняя диагностика туберкулёза;
— высокая специфичность (специфичность достигает 97%, это способность теста не давать ложноположительный результат при отсутствии микобактерий);
— не реагирует на введение вакцины БЦЖ. Проба Манту может давать подобную реакцию;
— отсутствие побочных эффектов и противопоказаний для проведения теста;
— исследование подходит для беременных женщин, контактировавших с больными туберкулёзом.

Минусы T-SPOT

— не входит в список процедур по ОМС (можно пройти только на платной основе);
— исследование не позволяет выявить активность или динамику болезни;
— возможность сомнительного результата и, как следствие, потребность в дополнительной сдаче теста.

Универсальный альтернативный вариант иммунологического исследования in vitro диагностики туберкулезного процесса путем количественного определения мононуклеарных клеток периферической крови, продуцирующих ИФН-γ в ответ на присутствие белков CFP-10 и ESAT-6 M. tuberculosis.

Синонимы русские

Иммунологический тест на туберкулез

Синонимы английские

Testing for tuberculosis infection

Метод исследования

Прямая оценка функции T-клеток энзим-связывающий иммуноспотингом (ELISPOT).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.

Общая информация об исследовании

Возбудителем туберкулёза является микобактерия туберкулеза (МБТ, палочка Коха, Mycobacterium tuberculosis) – высокоустойчивый микроорганизм. В настоящее время описано около 150 видов микобактерий, но клинически значимыми признаны М. tuberculosis (более 90 % всех случаев туберкулезной инфекции), М. bovis (5 %) и М. africanum (около 3 % – главным образом среди населения стран тропической Африки).

Источником инфекции являются больные люди и животные. Наиболее распространен воздушно-капельный путь заражения, при котором возбудитель проникает в организм через верхние дыхательные пути, иногда через слизистые оболочки пищеварительного тракта или через поврежденную кожу.

Попадая в окружающую среду, возбудитель способен длительно сохраняться: в высохшей мокроте он выживают до 10 месяцев, на предметах, окружающих больного (белье, книги), – более 3 месяцев, в воде – более года, в почве – до 6 месяцев.

В настоящее время описаны следующие варианты развития ситуации после проникновения МБТ в организм человека: [1]

полная элиминация (удаление) возбудителя из организма;
развитие первичного туберкулеза (при быстром росте и размножении МБТ);
инфицирование, или "латентная туберкулезная инфекция" (ЛТИ), [2] – состояние стойкого иммунного ответа на антигены МБТ при отсутствии клинических проявлений активной формы туберкулеза.

Присутствующий в организме возбудитель способен не только длительно бессимптомно персистировать в организме, но при определенных обстоятельствах (интенсивное размножение МБТ на фоне малоэффективного иммунитета и т.д.) реактивироваться и вызвать развитие заболевания. В настоящее время установлено, что с момента инфицирования МБТ в течение первого года заболевание развивается у 5 % инфицированных людей, в течение всей оставшейся жизни туберкулез развивается еще у 5 %, то есть пожизненный риск заболевания туберкулезом среди инфицированных составляет 10 %.

Вместе с тем наличие различных факторов может способствовать повышению риска развития локального туберкулеза: так, при ВИЧ-инфицировании ежегодный риск заболевания туберкулезом на фоне ЛТИ составляет 10 %, а пожизненный риск – 50 %.

Диагностика туберкулеза является комплексной и включает, согласно регламентирующим документам, [3] аллергические внутрикожные пробы (реакция Манту и "Диаскинтест"), инструментальное обследование (ФЛГ, рентген) и лабораторные – направленные как на выявление и идентификацию возбудителя с определением спектра его чувствительности к препаратам этиотропной терапии, так и на изучение выраженности иммунологической реакции на патоген.

Одним из современных и высокоинформативных методов определения специфической иммунной реакции на МБТ, особенно при отсутствии или минимальных клинико-инструментальных признаках инфекции и сомнительных результатах общепринятых методов лабораторной диагностики туберкулеза, является тест T-SPOT.

Исследование иммунного Т-клеточно-опосредованного ответа: количественное определение в крови эффекторных Т-клеток (CD4 и CD8), вырабатывающих ИФН-ɣ (гамма-интерферон), который продуцируется в ответ на стимуляцию специально подобранными антигенами ESAT-6 и CFP10. Эти белки входят в состав клинически значимых МБТ (М. tuberculosis, М. bovis, М. africanum) и отсутствуют у бактерий, используемых при производстве вакцины БЦЖ и у непатогенных для человека микобактерий.

Особенной подготовки не требуется. Для проведения теста берется анализ крови из вены натощак.

Время проведения теста Т-SPOT.TB составляет 2-3 дня.

Вакцинация БЦЖ не влияет на результат теста. В тесте T-SPOT.TB используются два специфических антигена M. Tuberculosis (ESAT-6 и CFP 10), которые не дают перекрестную реакцию с вакциной БЦЖ, а также с большинством распространенных видов нетуберкулезных микобактерий.

Ограничений по возрасту нет. Тест Т-SPOT.TB при необходимости можно делать детям с рождения.

Тест Т-SPOT можно делать, если в детском коллективе карантин, в то время как кожные тесты необходимо проводить не ранее чем через месяц после снятия карантина.

- Аллергические состояния
- Кожные заболевания
- Эпилепсия
- Обострение хронических соматических заболеваний
- Острые инфекционные заболевания

После контакта с больным туберкулезом тест Т-СПОТ можно провести через 1 месяц после контакта (время необходимо для формирования иммунного ответа). Кожные тесты после контакта с больным туберкулезом становятся положительными только через 2-6 месяцев. И через 4-6 месяцев повторить тест.

Для оформления карты в детские учреждения: Возможно. Тест Т-SPOT.TB не входит в приказ, но входит в Федеральные клинические рекомендации главного детского фтизиатра.

Как и любой иммунологический скрининг на туберкулез у детей необходимо проводить один раз в год. У пациентов групп риска тестирование проводится 2 раза в год.

Нет, данный тест может использоваться для обследования пациентов на туберкулез с любым заболеванием и при любом состоянии иммунной системы.

Нет, данный тест может использоваться для обследования на туберкулез у всех групп пациентов (включая детей любого возраста) при любых заболеваниях и состояниях организма.

Нет, данный тест может использоваться в любое время, независимо от вакцинации и приема препаратов.

Тест TSPOT.TB показывает более высокую чувствительность чем Квантифероновый тест, особенно у детей до 5 лет, пожилых и пациентов групп риска (пациенты на генно-инженерной терапии и ВИЧ-инфицированные) Тест T-SPOT.TB в отличии от Квантиферонового теста имеет Регистрационное удостоверение на территории РФ.

Отрицательные результаты теста T-SPOT.TB позволяют врачу-фтизиатру выдать справку

*Примечание: к рассмотрению не принимаются результаты:
- ИФА крови на туберкулёз,
- ПЦР крови на ДНК МБТ,
- ПЦР мокроты на ДНК МБТ.
Т.к. не являются специфическими, применяются, как уточняющие методы и не рекомендованы к использованию в качестве методов профилактического обследования.

Исследование T-Spot является иммунологическим способом диагностики туберкулеза. Он во многом похож и даже является заменой квантиферонового тест. Этот способ определения носительства туберкулеза очень информативен и позволяет исключить ложноположительные реакции на носительство микобактерии ту

Для диагностики туберкулеза наряду с Диаскинтестом и пробой Манту предлагается использовать иммуноферментные гамма-интерфероновые тесты, одним из которых является T-SPOT.TB. Этот метод диагностики во многом похож на квантифероновый тест, для его проведения так же необходима кровь из вены.

На сегодняшний день квантифироновый тест на территории Российской Федерации для выявления туберкулеза не используют. Вместо него предлагают английский аналог - Интерфероновый тест (Т-СПОТ или T-SPOT.TB).

Т спот (T-SPOT.TB)

Что означает T-SPOT.TB

Данный анализ может применяться для всех людей, находящихся в группе риска по латентной туберкулезной инфекции, а также для лиц с подозрением на туберкулез вне зависимости от их возраста, пола, иммунного статуса и терапии.

высокая специфичность и высокая чувствительность;
отсутствие противопоказаний для исследования;
безопасность и отсутствие побочных реакций;
отсутствие ложноположительных результатов в случае вакцинации БЦЖ;
интерпретация результатов теста менее субъективна, чем интерпретация результатов кожных туберкулиновых проб;
возможно применять для дифференцирования туберкулезной инфекции у детей от поствакцинальной аллергии, а также для оценки уровня специфического иммунитета в процессе лечения.

Кому показан Т-СПОТ

индивидуальная непереносимость туберкулина;
кожные заболевания и аллергические состояния в период обострения;
дети, подростки и взрослые с высоким риском развития аллергической реакции;
инфекционные заболевания в период обострения; ;
эпилепсия.

Анализ Т-СПОТ. Метод проведения исследования

Дети в возрасте до 2 лет - 2 мл;
Дети в возрасте от 2 до 9 лет - 4 мл;
Взрослые и дети в возрасте 10 лет и старше - 8 мл.

Для исследования берется венозная кровь утром натощак (или не менее чем через 2-4 часа после последнего приема пищи).

Обследование проводится при наличии информированного согласия законных представителей несовершеннолетних детей.

Результат Т-СПОТ

отрицательным, если в организме туберкулез отсутствует;
положительным, если организм инфицирован туберкулёзом;
сомнительным (неопределенным), если тест не дает однозначного ответа.

Отрицательные результаты тестов при отсутствии клинических симптомов заболевания позволяют врачу фтизиатру выдать справку об отсутствии у ребенка в настоящий момент активного туберкулеза.

Т-СПОТ - сомнительный результат:
В редких случаях результаты теста не могут быть интерпретированы вследствие не прохождения положительного контроля теста и оцениваются как неопределенные. В этом случае нельзя не подтвердить, не исключить туберкулезную инфекцию.

Т-СПОТ.ТБ (Т-SPOT®.ТВ) следует применять и интерпретировать только совместно с общей клинической картиной. Отрицательный Т-СПОТ не исключает возможности инфицирования М. tuberculosis.

Сравнение тестов для диагностики туберкулеза

Параметр	Проба Манту	Диаскинтест	Квантифероновый тест	Т-СПОТ (T-SPOT.TB)
Производитель	Российская Федерация		Австралия	Великобритания
Метод исследования	Кожный тест (алергопроба)		Исследование венозной крови
Побочные реакции	Возможны	Редко, но возможны	Нет	Нет
Противопоказания	Есть	Есть	Нет	Нет
Специфичность	Низкая	Высокая	Высокая	Высокая
Ложноположительные результаты после вакцинации БЦЖ	Да	Нет	Нет	Нет
Зависимость от сроков проведения профилактических прививок	Да (не ранее чем через 1 месяц)		Нет	Нет
Интерпретация результатов	Субъективна		Объективна

Где можно сделать T-SPOT в Москве

Иммунологический тест in vitro (в пробирке) T-SPOT проводится как альтернативный метод, который не входит в программу государственных гарантий по организации бесплатной медицинской помощи гражданам и проводится на платной основе.

Микобактерия туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis, палочка Коха, туберкулезная палочка) - главный возбудитель туберкулеза.

Данный микроорганизм устойчив к неблагоприятным условиям, например, присутствует в высушенной мокроте, в почве, на загрязненных предметах.

Передается туберкулез легких воздушно-капельным путем. Люди с легочным туберкулезом выделяют в воздух микобактерии во время кашля, чихания или отхаркивания мокроты.

Специалисты не исключают возможность заражения через пищевые продукты или при контакте с предметами, которые заражены возбудителем туберкулеза.

Согласно данным ВОЗ: в 2014 году 9,6 миллионов человек заболели туберкулезом, один миллион среди которых составили дети в возрасте от 0 до 14 лет.

Рекомендуется пройти обследование на вероятность заражения туберкулезом, при наличии следующих симптомов:

Длительном кашле (более 3 недель), сопровождающимся мокротой и кровью.
Боль в области груди.
Температура тела 37-38˚С.
Слабость, сильная потливость по ночам.

Имеют латентную (скрытую) форму туберкулеза или являются инфицированными микобактериями туберкулёза приблизительно около трети всего населения. Больные с латентной формой туберкулёза не заразны, но при этом существует риск перехода носительства в активную форму. Он может составлять 10%.

К группе риска относятся люди с ослабленным иммунитетом, страдающие сахарным диабетом, курильщики и дети.

Поэтому ранее для диагностики латентной туберкулезной инфекции использовались такие тесты, как проба Манту и Диаскинтест, которые имеют ряд ограничений.

Острые и хронические инфекционные заболевания, за исключением подозрений на туберкулез;
Период обострения соматических заболеваний;
Кожные заболевания;
Аллергия;
Эпилепсия.

Основным методом диагностики и лечения латентной туберкулёзной инфекции в 2015 году был утверждён иммунологический способ диагностики туберкулеза - T-SPOT.TB.

В отличии от других тестов данный метод чувствителен (около 98%) и специфичен (около 100%), что исключает возможность ложноположительных реакций.

Как достигается высокая специфичность T-SPOT

T-SPOT.TB - диагностический тест in vitro, в основе которого лежит выявление секреции интерферона-гамма лимфоцитами, стимулированными специфическими антигенами Mycobacterium tuberculosis ESAT-6 и CFP-10.

В результате иммунологического ответа подсчитывается число Т-клеток, которые ответили на эту стимуляцию.

Антигены ESAT-6 и CFP-10 присущи только патогенным штаммам (M.tuberculesis, M.bovis, M.africanum, M.microti, M.canetti) и как правило отсутствуют в образцах вакцины БЦЖ.

Таким образом, вакцинация от туберкулёза не оказывает влияние на результат данной диагностики и только у больных, инфицированных патогенными туберкулезными микобактериями в крови определяются Т-клетки, которые и распознают эти антигены.

Преимущества теста T-SPOT.TB перед кожными пробами

Высокая специфичность и чувствительность.
Полная безопасность теста и отсутствие побочных проявлений.
Исключает ложноположительные результаты, даже при вакцинации БЦЖ.
Тест используется при наличии противопоказаний к проведению кожных проб.
Короткие сроки выполнения.

Когда предпочтительно использовать тест T-SPOT.ТВ

В случае противопоказаний к проведению кожных тестов (аллергические заболевания, заболевания кожи, эпилепсия, период обострения хронических заболеваний).
При вероятности токсико-аллергических реакций на туберкулин.
У пациентов, привитых БЦЖ и показавших ложноположительный ответ на Манту.
У людей, побывавших в странах с высоким риском заболеваемости туберкулезом.
У беременных (при вероятности контакта с больным туберкулезом или наличия клинической картины).
У контактирующих с больным активной формы туберкулеза.
У больных на ФНО-ɣ терапии.
У ВИЧ-инфицированных.
При подозрении на наличие вне легочных форм туберкулеза.

Как подготовится к сдаче анализа на туберкулез

Забор крови производится из вены на локтевом сгибе, натощак.
Образцы биоматериала забирают у пациентов в пробирки Vacutainer с антикоагулянтом Гепарин.
После взятия крови, в первые 2-3 секунды, пробирку необходимо перевернуть 3-4 раза. Но сделать это необходимо аккуратно, без пенообразования.
На пробирку наносится маркировка: ФИО пациента, возраст, дата и время забора материала.

Взрослые и дети (от 10 лет и старше): одна пробирка 6 мл или две пробирки по 4 мл;
Дети (возраст 2-9 лет): одна пробирка 4 мл;
Дети возрастом до 2 лет: одна пробирка 2 мл;
Пациенты с подтвержденным иммунодефицитом: пробирка 10 мл.

Образцы хранятся в вертикальном положении, строго при температуре от 18 до 25 °С не более 8 ч. Материал для проведения исследования не охлаждают и не замораживают.

Как правильно подготовиться к анализу крови по методу Т-SPOT.TB: Специальной подготовки не требуется. Для проведения исследования проводится забор крови из вены натощак.
Сколько времени требуется для получения результатов анализа: для проведения теста Т-SPOT.TB необходимо 2 рабочих дня.
Может ли повлиять вакцинация БЦЖ на результат анализа: вакцинация БЦЖ не оказывает влияния на результат теста. Используемые в тесте Т-SPOT.TB специфические антигены M. Tuberculosis (ESAT-6 и CFP 10) не дают перекрестную реакцию с вакциной БЦЖ.
Есть ли ограничения по возрасту для проведения теста Т-SPOT.TB: возрастных ограничений по тесту нет. Его можно проводить даже детям с рождения.
Существуют ли ограничения в проведении теста Т-SPOT.TB во время карантина в ДОУ: данный тест разрешается проводить даже во время карантина в детском коллективе. Это одно из преимуществ анализа по сравнению с кожными тестами, которые требуется проводить не ранее чем через 30 дней после снятия карантина.
При каких состояниях не проводятся кожные тесты: аллергия, заболевания кожи, обострения хронических заболеваний, острые инфекционные болезни, эпилепсия.
После контакта с больным туберкулезом через какое время можно пройти тест Т-SPOT.TB: тест Т-СПОТ можно провести через 1 месяц после контакта с больным туберкулезом.
Можно ли сделать тест Т-СПОТ вместо кожной пробы Манту, чтобы оформить медкарту в детское учреждение: Не исключено. Тест Т-СПОТ входит в Федеральные клинические рекомендации главного детского фтизиатра.
Как часто нужно проводить исследование методом Т-SPOT.TB: детям анализ можно проводить один раз в год, пациентам из групп риска тестирование проводится 2 раза в год.
После кожного теста Диаскин можно ли проводить тест T-SPOT.TB: Проводить можно, но только спустя 2 месяца, чтобы исключить ложноположительный результат.
Кому запрещается проводить диагностику тестом T-SPOT.TB: Данный тест может использоваться для пациентов с любым заболеванием и при любом состоянии иммунитета.
Кому противопоказана диагностика с помощью теста T-SPOT.TB: Таких категорий пациентов нет.
Как влияет ранее проведенная вакцинация на результат теста T-SPOT.TB: Данный тест может использоваться в любое время, независимо от вакцинации.

Читайте также: