Тест пкт для определения сепсиса
Обновлено: 05.05.2024
История теста. ПКТ — прогормон кальцитонина (КТ). Повышение концентрации ПКТ при инфекционном процессе было открыто случайно. Это позволило использовать ПКТ в качестве маркёра бактериальных инфекций. В конце 80-х годов установлено так же повышение ПКТ при опухолях щитовидной железы и, особенно, легких, возникающее вслед за повышением КТ. В 1992 году КТ и ПКТ систематически определялись у лихорадящих больных; изначально высокие уровни ПКТ в сравнении с КТ при тяжёлых септицимиях определили высокую ценность маркёра.
Систематические исследования ПКТ у детей, проведенные авторами обзора, показали, что он имеет высокие значения только при бактериальных инфекциях, при этом КТ не повышается, и что изначально высокие значения ПКТ снижаются при рациональном лечении антибиотиками. Уровни ПКТ оставались постоянно низкими у пациентов с вирусной инфекцией и лиц, страдающих воспалительными заболеваниями. Некоторые исследования в 1980 г. нашли повышение КТ (иммунореактивного) у больных с тяжёлой инфекцией, но это возможно было обусловлено ПКТ, а не КТ, поскольку методики исследований того времени не обладали достаточной специфичностью.
Гипокальциемия при септическом шоке является составной частью генерализованного воспалительного ответа и может служить маркёром инфекции только при наличии высоких значений ПКТ.
Проведённые исследования по ПКТ вполне доказательны и подлинны для выявленных закономерностей в клинике, но им не хватает экспериментальных подтверждений. Продолжение изучения ПКТ позволит решить две проблемы. Первый феномен, чисто описательный – повышение ПКТ при бактериальных инфекциях или после введения их токсинов — должен быть дополнен раскрытием механизмов этих повышений в составе цитокиновых каскадов и генерализованного воспалительного ответа. Вторая проблема — поиск подходящей биологической модели.
Несмотря на отсутствие таких знаний, ПКТ был быстро установлен в качестве главного маркёра бактериальной инфекции. Концентрация циркулирующего в крови ПКТ чрезвычайно низкая. У здоровых и доноров она определяется на уровне 0,01 нг/мл. При вирусных инфекциях и в составе воспалительного ответа уровень ПКТ повышается слабо, редко достигая 1 нг/мл. В противовес этому, при тяжёлых бактериальных инфекциях он может достигать 20 и даже 200 нг/мл. Очень высокие уровни ПКТ являются надёжным признаком бактериальной инфекции, её тяжести и серьёзности прогноза, что особенно важно при экстренных состояниях.
Тест имеет преимущества перед другими маркёрами по чувствительности, специфичности и простоте техники лабораторного его определения. ПКТ имеет малую зависимость от температуры, устойчив к замораживанию и оттаиванию, требует несложной лабораторной техники.
МОЛЕКУЛА. ПКТ — белок состоящий из 116 аминокислот с молекулярной массой-12 793, содержится в нейроэндокринных клетках: C-клетки щитовидной железы, ткани лёгких и печени. ПКТ подвергается последующему расщеплению на три молекулы: кальцитонин (32 аминокислоты), катакальцин (21 аминокислота), и N-концы 57 аминокислот. При инфекциях ПКТ секретируется в кровоток, не повышая уровень КТ. Стало известно, что циркулирующий в крови ПКТ соответствует по существу 3 аминокислотам из 116, короткие концы молекул переходят от 2-х аминокислот на крайние N-концы, пролина и аланина, постепенно превращаясь под действием дипептилпептидазы 1Y с остатками пептидных концов в Н2Н-х-Pro.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ. МЕТОД. Во всех исследованиях применялся маркер, изготовленный коммерческой фирмой B·R·A·H·M·S Diagnostica CmbH. Berlin. Germany.
Чувствительность-01 нг/мл, диапазон количественных результатов от 0,1 до 500 нг/мл, что вполне обеспечивает нужды клиники. Высокочувствительный к ПКТ тест позволяет получать результаты через 2 часа после забора 20 микролитра плазмы. Минимальный уровень ПКТ выявляемый этим методом в плазме-0,05 нг/мл. У здоровых детей и взрослых уровень ПКТ определяемый методом Brams не превышает 0,1 нг/мл.
Другой, — полуколичественный метод определения ПКТ (PCT-Q тест), имеет чувствительность 0,5 нг/мл и определяет концентрацию ПКТ в крови (плазма или сыворотка) в диапазоне до 10 нг/мл, а с фиолетовым светофильтром возможно быстрое определение концентрации свыше 10 нг/мл.
ФУНКЦИЯ. Изучение функции ПКТ сопровождающего сепсис только начинается. Нет оснований считать ПКТ, индуцированный цитокинами, участником функции остеолиза. По данным Becker`а это бы вело к утяжелению течения бактериальной инфекции. Так введение антипрокальцитониновых антител двум группам хомяков, инфицированных Esherichia coli, лечёным и не лечёным и остававшимися живыми в течение 72-х часов, показало, что антитела специфичные к ПКТ являются протектором инфекции и вызывают значительный лечебный эффект. Однако малое число наблюдений в опыте представляют результаты малодоказательными. Гипокальциемия при сепсисе встречается в составе ответных реакций организма в части случаев, но это не связано с ПКТ.
ПРОКАЛЬЦИТОНИН И ВОСПАЛЕНИЕ. На атаку любого агента организм отвечает общей приспособительной реакцией в интересах целостного организма. Реакции могут формироваться сразу или в течение какого-то времени. Развёртывание во времени действия агента и формирования ответных реакций определяют характер течения заболевания. Установлено, что уровень ПКТ слабо реагирует на волчанку, болезни соединительной ткани, ревматизм и лихорадки при заболеваниях органов пищеварения, васкулитах, артритах, саркоидозе, болезни Крона. Рост концентрации ПКТ начинается только в случае наслоения суперинфекции.
Т.о. ПКТ – тест может быть использован для дифференциации бактериальной суперинфекции и воспалительного ответа лихорадкой (flare-ups). Такими диагностическими возможностями не обладают тумор некротизирующий фактор и интерлейкин-6.
ТРАНСПЛАНТАЦИИ. Показана высокая достоверность ПКТ маркёра для дифференциации реакции отторжения и суперинфекции (Hammer et all).
ШОК И ТРАВМА. Дифференциация непосредственной воспалительной реакции чрезвычайно важна для оценки прогноза при угрожающих жизни состояниях.
При кардиогенном и септическом шоке ПКТ более чувствителен чем ЦР Белок, Тумор НФ, ИЛ-6 для выявления инфекционной природы процесса. Несмотря на то, что в начальной стадии шока концентрации ЦРБ и цитокинов всегда высоки, только повышение уровня ПКТ указывает на развитие тяжёлого сепсиса, при нормальном соотношении NO2:NO3.
Отдельные повреждённые ткани могут вызывать повторные кратковременные подъёмы уровня ПКТ, например, в случаях отложенного открытия коллатералей после кардиохирургических операций и при политравмах. При этом динамика уровней ПКТ выглядит так: первые 2-3 дня после вмешательства от 2 до 5 нг/мл с последующим снижением до нормы, а на 5-7 день — повышение обычно на 2 нг/мл с последующей нормализацией, если не возникнет суперинфекция.
У всех новорождённых отмечается повышенный ПКТ, нормализующийся к 5 дню возраста, если не наступает суперинфекция. То же отмечается при тяжёлой гипоксии в родах и, если не развивается тяжёлая дыхательная недостаточность, ПКТ нормализуется.
ПРОКАЛЬЦИТОНИН И ВИРУСНАЯ ИНФЕКЦИЯ. В случае вирусных менингитов у взрослых и детей в плазме содержится менее 1нг/мл ПКТ. В длительном клиническом наблюдении в отделении неотложной помощи для детей находилось 240 детей, госпитализированных с лихорадкой, у всех идентифицирован вирус, как единственная причина заболевания, только 5% детей имели ПКТ более 1нг/мл и 0,8% детей — более 2 нг/мл. В этих исследованиях ПКТ оказался более чувствительным и специфичным для различения вирусной природы инфекции, чем ЦР-белок,интерлейкин-6 или интерферон-альфа. В случаях, когда вирусные инфекции дают тяжёлую клиническую картину, идентифицируемую как бактериальный шок, ПКТ способствует корректной диагностике.
Далее в обзоре показано большое диагностическое значение ЦРБ и интерферона-альфа для диагностики вирусных инфекций.
ПКТ И ТЯЖЁЛЫЕ БАКТЕРИАЛЬНЫЕ ИНФЕКЦИИ. МЕНИНГИТЫ. Определение ПКТ в сыворотке — наиболее чувствительный маркёр для дифференциации вирусных и бактериальных менингитов у взрослых и детей. Приводится сравнение диагностических возможностей различных диагностических тестов. В отношении ПКТ показано: изучение уровня ПКТ в ходе лечения менингита может служить тестом эффективности лечения. ПКТ не продуцируется в спинно-мозговой жидкости и уровни ПКТ в ней остаются низкими и при бактериальном менингите. В плевральной и асцитической жидкости уровень ПКТ может превышать уровни, полученные из плазмы. В двух случаях инфицированной амниотической жидкости уровни ПКТ оказались очень низкими, при этом уровни интерлейкина-6 — высокими.
СЕПТИЦЕМИЯ И БАКТЕРИЕМИЯ. При септицемии уровень ПКТ повышен, обычно выше 2нг/мл. В педиатрических исследованиях сообщается о 2-х случаях из 46 при бактериальных менингитах, в которых получены низкие уровни ПКТ, но это были случаи, лечёные антибиотиками, с прекрасным клиническим результатом. Возможно, что транзиторные бактериемии у детей могут не сопровождаться значительным повышением ПКТ. Высокие уровни ПКТ при бактериемии всегда предсказывают тяжёлые течение и прогноз. Бактериемии у детей, не лечёных антибиотиками, сопровождаются ПКТ выше 2нг/мл. На основании изучения взрослых, госпитализироанных по экстренным показаниям, Bossink et all, считает, что концентрация ПКТ в 1,6 нг/мл является пороговой для разделения лихорадок бактериальной природы и прочих. Для больных с нейтропениями этот порог ниже: между 0,5 и 1 нг/мл. Генерализация инфекции при кандидозах и аспиргилёзах сопровождается повышением уровней ПКТ.
Исследование ПКТ у больных детей, госпитализированных с наличием бактериемии, установили чувствительность теста — 94% при специфичности 99% и концентрации более 2 нг/мл. Уровни ПКТ выше 5 нг/мл у лиц с иммунодефицитом, в т.ч. СПИДом, указывают на генерализацию инфекции и бактериемию. Исследования показали целесообразность повторных исследований ПКТ с интервалом в 12-24 часа для оценки динамики инфекционного процесса в тяжёлых клинических случаях. Отдельные исследования показали очень высокие значения ПКТ при тяжёлых тропических инфекциях, при этом из 19 больных, имевших уровень ПКТ более 100 нг в мл, умерло 16, а из 16 больных с уровнем ПКТ ниже 100нг в мл умерло двое.
В большом числе исследований содержится вывод: снижение уровней ПКТ в ходе лечения антибиотиками является надёжным прогностическим признаком. Шрёдер у послеоперационных больных нашёл, что неснижающаяся платообразная кривая концентрации ПКТ является плохим прогностическим признаком. МАЛЯРИЯ. Концентрация ПКТ при малярии повышена, но механизмы повышения здесь другие, чем при бактериальной инфекции. Концентрация ПКТ может достигать 20 (g/l. Среди госпитализированных детей с тяжёлой малярией, ПКТ является лучшим маркёром тяжести начальной фазы, а в последующем — эффективности проводимого лечения. Приводятся результаты исследований ПКТ при малярии в Габоне: все больные с концентрацией более 100(g/l умерли от церебральных осложнений малярии.
ПОСТНАТАЛЬНЫЙ ПЕРИОД. ПКТ в крови новорождённых появляется через 12 часов после родов и продолжает возрастать до 24-36 часов возраста до уровня 10нг/мл, затем к 5-м суткам снижается до 1нг/мл. Механизм феномена не известен, выдвинута гипотеза, что это ответ на микробное заселение пищеварительного тракта. У новорожденных с лёгочными дистрессами, не сопровождающимися выраженной дыхательной недостаточностью, уровень ПКТ не повышен.
ПАЦИЕНТЫ НА ИНТЕНСИВНОМ ЛЕЧЕНИИ. Быстрые изменения уровней ПКТ вслед за изменениями инвазии инфекции делают тест необходимым в условиях интенсивного лечения для быстрой дифференциации бактериальных и прочих воспалительных реакций, а так же для оценки эффективности лечения.
ПОСТХИРУРГИЧЕСКИЕ ЛИХОРАДКИ. Много исследований сфокусировано на динамике ПКТ, в сравнении с другими маркёрами, при послеоперационной лихорадочной реакции. Разнородность пациентов, систематическое применение антибиотиков и трудности распознавания инфекционных осложнений требуют изучения причин повышения ПКТ. Мейснер показал, что умеренное повышение уровня ПКТ, отмечаемое у каждого третьего пациента с асептической реакцией, обусловлены повреждением коллатералей и у каждого второго — после кардиохирургических и торакальных вмешательств. Однако, ПКТ маркёр является лучшим для диагностики инфекционных осложнений после больших хирургических вмешательств. Различные исследования доказывают, что диагностические возможности ПКТ-теста повышаются при его динамическом изучении, в том числе через 12-24 часа при тяжёлых клинических случаях. По данным Шрёдера, ПКТ является надёжным прогностическим тестом, его снижение обязательно снижается при выздоровлении.
ШОК И РЕСПИРАТОРНЫЙ ДИСТРЕСС. Многие исследования показали, что ПКТ — качественный маркёр септического шока и исключения шока другой природы. Высокие уровни ПКТ, полученные при пневмококковой пневмонии у детей, обычно указывают при этом на бактериемию, а низкие его уровни отмечаются при вирусных пневмониях, если они не сопровождается тяжёлой гипоксией. Чувствительность ПКТ при бактериальных инфекциях у лиц, находящихся на интенсивном лечении, одинакова с ЦР-белком или немного выше, но при этом более специфична. Концентрация ПКТ у этих больных скрыта продукцией цитокинов, но прогностический уровень теста при этом выше. У пациентов с неопределёнными состояниями мониторинг ПКТ поможет сформировать более адекватную терапию и предупредить прогрессирование инфекции. Отсутствие снижения ПКТ при этом является индикатором плохого прогноза. ОСТРЫЙ ПАНКРЕАТИТ. ПКТ служит в этой патологии дифференциальным тестом. Он повышается только при инфекционном или вторично инфицированном панкреатите, оставаясь не повышенным при проч. формах. Подчёркивается важность использования теста в ближайшем послеоперационном периоде после вмешательств на поджелудочной железе.
БАКТЕРИАЛЬНЫЕ ИНФЕКЦИИ РАЗЛИЧНЫХ ЛОКАЛИЗАЦИЙ. Рассмотрены несовершенства метода исследования гемокультуры у детей. При всех ограниченных воспалениях уровень ПКТ не повышается выше порога, но может повышаться при респираторных инфекциях, внутреннем кровотечении. Авторами обзора показано, что при очаговых воспалениях уровни ПКТ низкие, ниже чем при генерализованных формах, и составляют в среднем 0,5-2 нг/мл. Однако уровни ПКТ могут повышаться, если инфекция начинает распространяться на соседние ткани, а так же при замкнутых воспалительных очагах, например артритах. При урологических инфекциях получены корреляции тестов с выраженностью сморщивания почки. Повышение ПКТ до 2 нг/мл отмечено у детей с пневмококковой бактериемией и в 80% случаев, где пневмококковая инфекция предполагалась, а так же у больных со средним отитом и инфекциях нижних дыхательных путей.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ. ПКТ — хороший биологический маркёр, дополняющий клинические и биологические исследования в патологических ситуациях. Различные маркёры инфекции применяются дифференцированно, в различных сочетаниях в разных странах. Многочисленные изучения маркёров показали невозможность основываться на результатах только одного из них и важность учёта особенностей каждого маркёра. В Европе исследования ПКТ для оценки инфекционного процесса применяются очень широко, значительно меньше они применяются в педиатрии, меньше чем скорость седиментации эритроцитов. Джай и Вайт сообщили, что в лабораторию Американского университетского педиатрического госпиталя в 1995 году поступило 2740 заказов на проведение исследований скорости седиментации эритроцитов и только 440 заказов на исследование ПКТ, причём большинство из ревматологии.
ПКТ-тест — многообещающий маркёр вследствие своей высокой чувствительности и специфичности. Исследование белков острой фазы воспаления, в т.ч. С-реактивного белка, не пригодны для дифференциации инфекционного процесса и воспалительного ответа. ПКТ-тест чувстителен и высокоспецифичен для этой цели, в отличие от всех известных маркёров. К достоинствам теста относится его пригодность для экстренных клинических ситуаций, при проведении интенсивной терапии и в качестве прогностического маркёра при прогрессировании инфекционного процесса. Тест отличается точностью измерения и специфичностью в диапазоне низких значений (от 1 до 5 нг/мл), например, при очаговых воспалениях без бактериемии. Несмотря на то, что точная функция ПКТ в воспалительной реакции и цитокиновых цепях остаётся неизвестной, его использование в клинике оценивается чрезвычайно высоко. Отмечается стабильность этого белка, его устойчивость к комнатной температуре, и к замораживанию, постоянство присутствия в плазме в течение 24 часов, простота его определения. Стоимость определения ПКТ может быть значительно снижена при автоматизации методики. Отмечается быстрота выполнения теста, что важно в условиях экстренной помощи. В течение последнего времени тест все шире входит в клиническую практику, имея очевидные преимущества перед ныне широко применяемыми тестами. Несмотря на незнание сегодня многих патофизиологических механизмов, тест явится прекрасным маркёром инфекции в будущем.
Когда нужно сдать анализ крови на сепсис?
Врач может заподозрить, что у пациента развивается сепсис, и назначить анализы, если:
- У больного возникли соответствующие симптомы.
- Лабораторные исследования, которые были проведены ранее, дают повод заподозрить это состояние.
Иногда симптомы сепсиса бывают выражены слабо, их легко спутать с признаками других заболеваний. У пациента повышается температура тела до 38° C, учащаются сердечные сокращения и дыхание, он сильно потеет, при этом имеются симптомы инфекции, из-за которой развилась системная воспалительная реакция в организме. Возникают признаки нарушений работы различных органов.
В тяжелых случаях возникает спутанность сознания, больной становится вялым, снижается артериальное давление, ноги, руки и губы холодные, синюшные, на коже появляются пятна, как при менингите.
Для того чтобы вовремя распознать сепсис и назначить необходимые анализы, традиционно врачи используют критерии шкалы quick SOFA (qSOFA). Если есть все три критерия, скорее всего, это сепсис:
Более точно установить диагноз помогают критерии по шкале SOFA, в них учитываются данные лабораторных анализов:
| Показатели | Баллы | ||||
| 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | |
| Индекс оксигенации (измеряется в отделении интенсивной терапии) | Более 400 мм рт. ст. | 300–399 мм рт. ст. | 200–299 мм рт. ст. | 100–199 мм рт. ст. | Менее 100 мм рт. ст. |
| Уровень тромбоцитов | Более 150×109/л | Менее 150×109/л | Менее 100×109/л | Менее 50×109/л | Менее 20×109/л |
| Уровень билирубина в крови (функция печени) | Менее 20 мкмоль/л | 20–30 мкмоль/л | 33–101 мкмоль/л | 102–204 мкмоль/л | Более 204 мкмоль/л |
| Снижение артериального давления | Нет | Менее 70 мм рт. ст. | Удается удерживать лишь с помощью медикаментозных препаратов. | ||
| Оценка по шкале комы Глазго | 15 | 13–14 | 10–12 | 6–9 | Менее 6 |
| Уровень креатинина в крови (функция почек) | Менее 110 мкмоль/л | 110–170 мкмоль/л | 171–299 мкмоль/л | 300–440 мкмоль/л | Более 440 мкмоль/л |
| Количество мочи в сутки | Менее 500 мл в день | Менее 200 мл в день | |||
Процедура проведения анализа крови при сепсисе
Анализ активности эндотоксина (Endotoxin Activity Assay — EAA) — единственный метод количественного определения бактериального токсина, который одобрен Управлением по контролю качества пищевых продуктов и медикаментов США (Food and Drug Administration — FDA).
Что такое эндотоксин? Вещество, по химической природе липополисахарид, встроенное в клеточную мембрану грамотрицательных бактерий. Это мощный медиатор воспаления, и его уровень в крови повышается уже на ранних этапах развития сепсиса.
Для того чтобы определить уровень эндотоксина, у пациента берут кровь и добавляют в нее специфические антитела. Они связываются с бактериальным липополисахаридом, и эти комплексы поглощают нейтрофилы (особая разновидность лейкоцитов). В этих клетках происходят некоторые биохимические реакции, они начинают быстро поглощать и расходовать кислород. В присутствии люминофора возникает свечение, которое можно зарегистрировать с помощью особого инструмента — люминометра. По интенсивности свечения судят об уровне эндотоксина в крови.
Результат измеряется от 0 до 1:
- 0 — отсутствует;
- менее 0,4 — низкий уровень;
- 0,4–0,59 — промежуточный уровень;
- 0,6 и более — высокий уровень;
- 1 — максимальный уровень.
Показатели эритроцитов при сепсисе
Эритроциты — красные кровяные клетки, которые содержат гемоглобин и отвечают за транспорт кислорода, углекислого газа. При тяжелом сепсисе с ними происходят следующие изменения:
Показатели СОЭ при сепсисе
Скорость оседания эритроцитов, сокращенно СОЭ, характеризует скорость оседания эритроцитов под действием силы тяжести в крови, в которой искусственно заблокированы процессы свертывания (образования тромба). У мужчин этот показатель в норме составляет 2–15 мм/час, у женщин — 1–10 мм/час. При сепсисе СОЭ повышается, что является признаком воспалительного процесса в организме.
Показатели лейкоцитов при сепсисе
При сепсисе количество белых кровяных телец в крови увеличивается — возникает лейкоцитоз. Причины вполне объяснимы, ведь в организме развивается воспалительный процесс. В некоторых случаях уменьшается количество нейтрофилов — особого вида лейкоцитов. Это состояние называется нейтропенией, и оно связано с худшим прогнозом.
Показатели тромбоцитов при сепсисе
Снижение количества тромбоцитов в крови — тромбоцитопения — один из симптомов и критериев диагностики сепсиса по шкале SOFA. Риск смерти пациента напрямую зависит от того, насколько сильно у него снижено число тромбоцитов, и как долго сохраняется это состояние. При тромбоцитопении менее 100×109/л риск кровотечения больше не повышается, но уровень смертности продолжает расти.
Как определить заражение крови?
Сепсис характеризуется смертностью от 10 до 40%. На этот показатель влияет вид возбудителя, состояние организма пациента и, что немаловажно, время, в течение которого установлен точный диагноз и начато лечение. Иногда патология протекает в виде септического шока: нарушается кровообращение, обменные процессы в клетках, резко падает артериальное давление, и поддерживать его на цифрах больше 65 мм рт. ст. удается только с помощью лекарств. Среди больных септическим шоком смертность значительно выше.
Кроме того, мы применяем инновационный метод очистки крови от эндотоксина — селективную сорбцию на картриджах для экстракорпоральной гемоперфузии Toramyxin PMX-20R. Эта процедура действует как плазмаферез: кровь больного пропускают через специальный аппарат, в котором задерживается эндотоксин — один из главных виновников системной воспалительной реакции. Фильтр аппарата состоит из волокон, к которым прикреплены молекулы антибиотика полимиксина Б. Он связывается с эндотоксином и образует с ним стабильный комплекс.
Сорбция эндотоксина на картриджах помогает эффективно бороться с тяжелым сепсисом, вызванным грамотрицательными бактериями и смешанной флорой.
B·R·A·H·M·S PCT-Q – это иммунохроматографический тест для полуколичественного определения прокальцитонина (ПКТ) с целью диагностики и контроля терапии при тяжелых бактериальных инфекциях и сепсисе.
Примечание: результаты исследования, проведенного с помощью B·R·A·H·M·S PCT-Q, следует анализировать в контексте всех лабораторных данных и общей клинической картины пациента.
После нанесения пробы пациента (сыворотка или плазма) на тестовую полоску изотопный индикатор (антитела мыши к анти-катакальцину, конъюгированные с коллоидным золотом) связывается с ПКТ пробы, в результате образуется маркированный комплекс антиген-антитело. Этот комплекс перемещается по капиллярам тестовой системы, пока не достигает зоны тестовой полосы. Здесь маркированный комплекс антиген-антитело связывается с фиксированными антителами к антикальцитонину, образуя трёхслойный комплекс.
При концентрации ПКТ ≥ 0,5 мкг/л трёхслойный комплекс проявляется в виде полосы, окрашенной в красный цвет. Насыщенность цвета прямо пропорциональна концентрации ПКТ, которую определяют при помощи контрольной карты и относят к одному из следующих диапазонов: < 0,5 мкг/л, ≥ 0,5 мкг/л, ≥ 2 мкг/л, ≥ 10 мкг/л
Несвязанный индикатор диффундирует в зону контрольной полосы, фиксируется здесь и образует интенсивно окрашенную красную полосу. С помощью этой контрольной полосы проверяют функциональную пригодность тестовой системы.
Важная информация
Внимание! Поскольку сыворотка или плазма пациентов считается потенциально инфекционной, то при обращении с тестом нужно соблюдать общие меры предосторожности и правила работы в лаборатории.
Сотрудники отдела обслуживания клиентов B·R·A·H·M·S, тел.: +49(0)3302/883300, по запросу предоставят инструкцию по безопасному применению реагентов, соответствующую положениям директивы 1907/2006-EC.
Утилизация теста и компонентов набора осуществляется в соответствии предписаниями местного законодательства.
Стабильность и условия хранения
Тест B·R·A·H·M·S PCT-Q следует хранить в запечатанном виде при температуре 2…30°C. Необходимо строго соблюдать срок годности, указанный на обратной стороне упаковки. Во время хранения не допускать воздействия на карты прямых солнечных лучей.
Характеристика анализа
Точность и безошибочность
B·R·A·H·M·S PCT-Q, будучи полуколичественным тест-методом, в отдельных диапазонах концентрации тесно коррелирует с количественным тестом B·R·A·H·M·S PCT LIA. Различия между B·R·A·H·M·S PCT-Q и B·R·A·H·M·S PCT LIA возможны из-за индивидуальных субъективных различий в считывании, особенно если концентрация ПКТ является промежуточной для цветных полос на контрольной карте.
Ориентировочные диапазоны
Примечание:
Отсечка может варьироваться в зависимости от клинической картины. Приведенные ниже эталонные диапазоны являются ориентировочными.
Диагностика бактериальной системной воспалительной реакции и сепсиса
Синдром системного воспалительного ответа (SIRS), сепсис, тяжелый сепсис и септический шок классифицированы согласно критериям объединенной конференции Американского колледжа торакальных врачей / Общества интенсивной медицины.
Внимание!
Уровень ПКТ ниже 0,5 мкг/мл не исключает инфекцию, так как локализованные инфекции (без системных признаков) могут быть связаны с такими низкими уровнями. Также эти значения могут быть низкими, если измерение ПКТ производилось слишком быстро после появления бактериальной симптоматики (обычно < 6 часов). В этом случае следует провести повторное исследование ПКТ через 6-24 ч.
Низкая вероятность прогрессирования в тяжелую системную ин фекцию (тяжелый сепсис).
ПКТ ≥ 0,5, но
Возможна системная инфекция (сепсис), но также известны другие условия, которые могут быть причиной повышенного уровня ПКТ (см. ниже)
Средняя вероятность прогрессирования в тяжелую системную инфекцию (тяжёлый сепсис) 6. Необходимо пристальное наблюдение за пациентом: как за клинической картиной, так и с помощью повторного анализа ПКТ через 6-24 ч.
ПКТ ≥ 2, но
ПКТ ≥ 10 мкг/л
Выраженная системная воспалительная реакция, почти исключительно вследствие тяжелого бактериального сепсиса или септического шока.
Высокая вероятность тяжёлого сепсиса или
септического шока
Эффект насыщения реакции
Не наблюдается эффект насыщения реакции до 4000 мкг/л
Влияющие факторы
Значение гемоглобина > 5 г/дл может оказывать влияние на точность считывания и таким образом на результат теста. Липиды и билирубин не оказывают влияния на результаты теста.
Примечание:
Примечание:
Сыворотка, имеющая высокую концентрацию человеческих иммуноглобулинов на животные белки или иммуноглобулинов, образующих ревматоидный фактор, в некоторых случаях показывала интерференцию, ведущую к ложноположительным результатам.
Примечание: Повышенный уровень ПКТ может быть не всегда связан с инфекцией.
Описаны несколько ситуаций, когда повышенный уровень ПКТ может быть вызван не инфекцией.
Среди прочих, к ним относятся:
• новорожденные < 48 ч жизни (физиологическое повышение);
• первые дни после обширной травмы, большого хирургического вмешательства, серьёзного ожога, терапии с помощью OKT3-антител и других медикаментов, вызывающих высвобождение провоспалительных цитокинов;
• пациенты с инвазивными микозами, острыми приступами молниеносной трехдневной плазмодийной малярии;
• пациенты с длительным или тяжелым кардиогенным шоком, длительными тяжелыми аномалиями кровотока в органах
• пациенты с тяжёлым циррозом печени и острым или хроническим вирусным гепатитом
• пациенты с мелкоклеточным раком легкого, медуллярным С-клеточным раком щитовидной железы
Низкий уровень ПКТ не исключает наличие бактериальной инфекции
Такой уровень может встречаться, напр., на ранней фазе развития инфекции, при локализованных инфекциях и подостром эндокардите. Поэтому, при наличии клинических признаков, указывающих на присутствие инфекции, большое значение имеют последующее наблюдение и повторное измерение прокальцитонина. Метод измерения ПКТ должен соответствовать предполагаемому клиническому использованию.
Нормальные испытуемые
Концентрация ПКТ в сыворотке или плазме у здоровых людей составляет < 0,5 мкг/л и находится, таким образом, ниже границы определения. С помощью высокочувствительного количественного анализа было установлено, что нормальные значения находятся ниже 0,05 мкг/л
Процедура тестирования
Обращение с образцом
Может быть исследована как сыворотка, так и плазма. Однако в ходе проверок для всех пациентов следует использовать одинаковую матрицу. Образцы, не используемые для анализа в течение 24 часов с момента отбора, следует заморозить и хранить при температуре -20°С. Образцы можно замораживать и размораживать три раза
Примечание
Для каждого исследования должен использоваться отдельный тест. Перед проведением исследования все компоненты должны быть нагреты до комнатной температуры.
1. Проведение исследования
Вскрыть защитную упаковку теста непосредственно перед проведением исследования.
Заполнить пипетку без пузырей, по крайней мере, до маркировки, удерживать немного наклонённой при пипетировании.
С помощью прилагаемой пипетки пипетировать 6 капель в лунку B·R·A·H·M·S PCT-Q. Утилизировать остатки сыворотки или плазмы.
Примечание: можно использовать также микропипетку (200 мкл). В этом случае в лунку подают 200 мкл сыворотки или плазмы.
Инкубировать 30 минут при комнатной температуре. Отметить время начала теста в контрольной карте.
2. Считывание и оценка результата
Концентрация ПКТ в образце определяется через 30 минут (макс. 45 минут). Во-первых, требуется проверить действительность теста по наличию хорошо видимой контрольной полосы
A. Полосы отсутствуют или видна только тестовая полоса: тесты, на которых не проявилась контрольная полоса, не действительны, и их нельзя оценивать.
B.Видна только контрольная полоса: тесты, на которых видна только контрольная полоса, действительны, результат отрицательный. Концентрация ПКТ составляет < 0,5 мкг/л.
C. Видны контрольная и тестовая полосы: тесты, на которых видны и контрольная, и тестовая полосы действительны, результат положительный.
Диапазон концентрации ПКТ определяется посредством сравнения интенсивности цвета тестовой полосы с цветными полосами на контрольной карте. Следует использовать контрольные карты, поставляемые вместе с набором.
3. Документирование и архивирование
Документирование результатов теста осуществляется посредством маркировки крестиком концентрации ПКТ на контрольной карте, которой соответствует интенсивность цвета тестовой полосы. В контрольную карту вписывают также номер серии использованного теста.
Для архивирования результатов теста заполненную контрольную карту можно вклеить в историю болезни пациента (освободить клейкую поверхность, удалив с обратной стороны карты защитную бумагу).
Особые указания
1. По сравнению с B·R·A·H·M·S PCT LIA тест B·R·A·H·M·S PCT-Q имеет 90 – 92 % диагностической чувствительности и 92 – 98 % специфичности. Если при положительном результате экспресс-теста требуется точное клиническое определение концентрации ПКТ или измерение концентрации в динамике, рекомендуется проводить последующие определения при помощи количественных исследований.
2. Контроль изменения ПКТ путём сравнения с тестом B·R·A·H·M·S PCT-Q предшествующего дня недопустим, так как уже через несколько часов происходит изменение цвета полос (с красного на фиолетовый). Также, может оказаться, что считанный через 30 минут отрицательный тест через несколько часов приобретет слабое окрашивание. В данном случае верным считается результат, считанный через 30 минут.
Дополнительную информацию можно получить в отделе обслуживания клиентов B·R·A·H·M·S GmbH
Строго соблюдать указания производителя
Неправильное обращение с реагентами может привести к искажению результатов. B·R·A·H·M·S GmbH не несёт ответственности за получение неверных результатов вследствие неправильного хранения, использования или обращения.
Символы
Библиография
2. Harbarth S. et al.: Diagnostic value of procalcitonin, interleukin-6 and interleukin 8 in critically ill patients admitted with suspected sepsis. Am. J. Resp. Crit. Care Med. 2001, 164: 396-402
5. Meisner M. et al.: Procalcitonin – Influence of temperature, storage, anticoagulation and arterial or venous asservation of blood samples on procalcitonin concentrations. Eur J Clin Chem Clin Biochem 1997, 35 (8): 597-601
6. American College of Chest Physicians/Society of Critical Care Medicine: Definitions for sepsis and organ failure and guidelines for the use of innovative therapies in sepsis. Crit Care Med 1992, 20: 864-874
9. Chiesa C, Panero A, Rossi N, Stegagno M, De Giusti M, Osborn JF, Pacifico L. Clin Infect Dis (1998), 26: 664-672: Reliability of Procalcitonin Concentrations for the Diagnosis of Sepsis in Critically III Neonates
Читайте также: