Тест-системы на вич вектор-бест
Обновлено: 12.05.2024
ВИЧ-инфекция – медленно текущая ретровирусная инфекция, характеризующаяся пандемическим распространением, развитием синдрома приобретенного иммунодефицита и летальным исходом. Поэтому своевременная и точная лабораторная диагностика этого заболевания имеет важное значение. Она основана прежде всего на идентификации вируса иммунодефицита человека (ВИЧ) и выявлении специфических противовирусных антител. (3, 6, 8, 9)
При массовом скрининге доноров крови и групп риска с целью выявления специфических противовирусных антител используется метод иммуноферментного анализа (ИФА). Метод основан на иммобилизации вирусных антигенов на твердой фазе, сорбции на них антител и выявлении комплексов антиген-антитело с помощью конъюгата антивидового иммуноглобулина с ферментом (8). Преимущества данного метода: можно анализировать большие партии образцов при массовом обследовании населения, возможность автоматизации, использование оборудования, доступного для большинства лабораторий.
Основными показателями качества иммуноферментной тест-системы являются чувствительность и специфичность. Чувствительность – доля больных, для которых получен положительный результат в данной тест-системе, от общего количества обследованных больных. Специфичность – доля здоровых, для которых получен отрицательный результат в данной тест-системе, от общего количества обследованных здоровых (2, 10). Понятия “чувствительность” и “специфичность” тесно связаны с понятиями “ложноотрицательный” и “ложноположительный” результат. Таким образом, более чувствительной является та система, которая дает меньше ложноотрицательных результатов, а более специфичной – та, которая дает меньше ложноположительных результатов (4, 10, 11) .
Причинами ложноположительных результатов могут быть наличие у пациентов аутоиммунных, онкологических и инфекционных заболеваний. Сыворотки беременных женщин и пожилых людей при постановке ИФА также могут давать серопозитивные результаты (1, 2, 5, 7). Ложноотрицательные результаты возможны в случаях раннего инфицирования, когда уровень антител очень низкий, или в терминальной стадии болезни, характеризующейся глубоким поражением иммунной системы (3).
Целью данной работы является сравнительная оценка чувствительности и специфичности 8 иммуноферментных тест-систем для обнаружения антител к ВИЧ, используемых при скрининге.
В работе были использованы следующие диагностикумы: “ЭКОлаб-Вироностика IV” (“ЭКОлаб”), “ЭКОлаб-ЖЕНЕЛАВИЯ-Микст” (“ЭКОлаб”), “КомбиБест-анти-ВИЧ-1+2” (ЗАО “Вектор-Бест”), “ВИЧ-1, ВИЧ-2-ИФА-Авиценна” (СПб “Авиценна”), “СКРИН-ВИЧ” (ЗАО ПКБ им. И.И.Мечникова), “ПЕПТОСКРИН-2” (ООО “АмерКарД”), “ЭКОлаб-ТЕСТ-ВИЧ-1,2” (ЭКОлаб”), “Амеркард Анти-ВИЧ-1/2К” (ООО АмерКард”). Характеристика тест-систем представлена в таблице 1. Постановку ИФА и учет результатов проводили согласно инструкциям по применению тест-систем. Все образцы были протестированы в реакции иммунного блоттинга с использованием систем “БЛОТ-ВИЧ” (ЗАО “Биосервис”) и “ВЕСТЕРН БЛОТ ВИЧ-1” (“Organon”).
Табл.1 Характеристика ИФА-тест-систем для выявления антител к ВИЧ.
| тест-система | антиген | параметры тест-системы | субстрат | ||
| ВИЧ 1 | ВИЧ 2 | тип ИФА | |||
| Вироностика | рекомбинантный, вирусный лизат, пептиды | р 24gp 160 | env-антиген ВИЧ-2 | сэндВИЧ | ТМБ |
| Женелавия | пептиды, рекомбинантный | gp 41 gp 160 | gp 36 | непрямой | ОФД |
| Комби-бест | рекомбинантный | __ | __ | сэндВИЧ | ТМБ |
| АВИЦЕННА | синтетические пептиды | р 24 gp 120 gp 41 | gp 36 | непрямой | ТМБ |
| СКРИН-ВИЧ | рекомбинантный | р 24 р 17 gp 41 gp 120 | gp 110 gp 38 | непрямой | ОФД |
| ПЕПТОСКРИН-2 | пептиды | gp 41 gp 120 | gp 32 | непрямой | ОФД |
| ЭКОлаб-ТЕСТ ВИЧ 1,2 | рекомбинантный | р 24 р 17 gp 41 gp 120 | gp 38 | непрямой | ОФД |
| АМЕРКАРД | рекомбинантный | gp 41 р 55 | gp 32 | непрямой | ОФД |
Материалом для исследования служили 168 образцов сыворотки крови, включающие в себя сыворотки от ВИЧ - инфицированных (n=48), сыворотки от больных вирусными гепатитами В и С (n=35), а также сыворотки от пациентов, в крови которых не обнаружены антитела к ВИЧ (n=85) . Контрольная группа составила 20 здоровых доноров.
Учет результатов ИФА проводили на оборудовании фирмы Sanofi (Франция) – на ридере PR 2100 измеряли оптическую плотность (ОП) исследуемых образцов сыворотки крови. Уровень “среза” (ОП критическое) для каждой тест-системы рассчитывался согласно инструкциям. За “серую зону” принимали значения ОП в интервале + 10% от уровня “среза”. Образцы считали положительными, если значения их ОП были выше “серой зоны”. Образцы считали сомнительными, если значения их ОП находились в пределах “серой зоны”. Образцы считали отрицательными, если значения их ОП были ниже “серой зоны”.
Показатели специфичности в нашем исследовании варьировали от теста к тесту. Так, для здоровых доноров крови этот показатель составил 100%. При исследовании сывороток, полученных от больных вирусными гепатитами В и С специфичность изменялась от 3% (“Скрин-ВИЧ”) до 97% (“КомбиБест-анти-ВИЧ-1,2”) (таблица 2). Данный факт может быть объяснен, с одной стороны, недостаточной специфичностью оцениваемых диагностикумов, а с другой – наличием перекрестных реакций неспецифических факторов в сыворотках с компонентами тест-систем.
Табл. 2 Процент специфичности тест-систем для диагностики ВИЧ-инфекции.
| Диагностикум | доноры | ВИЧ-негативные в иммуноблоте | больные гепатитом В и С |
| “Вироностика” | 100 % | 75 % | 88 % |
| “Женелавия” | 100 % | 84,3 % | 88 % |
| “Комби-Бест” | 100 % | 90 % | 97 % |
| “Авиценна” | 89,5 % | 52,5 % | 60 % |
| “Скрин-ВИЧ” | 100 % | 17,5 % | 3 % |
| “Пептоскрин-2” | 93,8 % | 62,5 % | 74 % |
| “ЭКОлаб-тест ВИЧ 1,2” | 89,5 % | 28,3 % | 26 % |
| “АмерКард” | 87,3 % | 55,8 % | 74 % |
При оценке ложноположительных результатов нами были получены следующие данные (табл.3)
Табл.3 Процент ложноположительных результатов в ИФА-системах.
| Тест-Система | ВИЧ-негативные в иммуноблоте | больные гепатитом В и С | ||
| серая зона, % | ложнополо-жительные результаты, % | серая зона, % | ложнополо-жительные результаты, % | |
| “Вироностика” | 10 | 16,7 | 2,8 | 8,6 |
| “Женелавия” | 8,3 | 11,7 | 2,8 | 8,6 |
| “Комби-Бест” | 4,2 | 5,8 | 2,8 | * |
| “Авиценна” | 5,0 | 24,2 | 8,6 | 34,3 |
| “Скрин-ВИЧ” | 4,2 | 45,8 | 2,8 | 97,1 |
| “Пептоскрин-2” | 8,3 | 24,2 | 14,3 | 14,3 |
| “ЭКОлаб-тест ВИЧ 1,2” | 9,2 | 32,5 | 17,1 | 60,0 |
| “АмерКард” | 7,5 | 36,7 | 20,0 | 5,7 |
* таких результатов нет
Таким образом, наибольшей специфичностью обладают тест-системы “Комби-Бест”, “Женелавия” и “Вироностика”. Остальные тест-системы дают высокий процент ложноположительных результатов, которые не подтверждаются в иммуноблоте.
Процент выявления антител к ВИЧ в серопозитивных образцах практически во всех ИФА-системах составил 100%. В тест-системах “ЭКОлаб-Женелавия-Микст” и “Авиценна” чувствительность была 97,9%. Наименьшая чувствительность из исследуемых диагностикумов была в тест-системе “Пептоскрин-2” – 89,6%. Эти результаты могут свидетельствовать о недостаточной чувствительности перечисленных тест-систем и о высокой вероятности получения ложнонегативных результатов.
Результаты проведенного исследования позволяют сделать выводы о том, что для массового тестирования на ВИЧ-инфекцию наиболее подходят такие высоко специфичные и чувствительные тест-системы, как “Комби-Бест-анти-ВИЧ-1,2”, “ЭКОлаб-Вироностика IV” и “ЭКОлаб-Женелавия-Микст”. Остальные диагностикумы могут давать высокий процент как ложноположительных, так и ложноотрицательных результатов.
В заключении необходимо отметить, что при тестировании сыворотки крови на ВИЧ-инфекцию следует принимать во внимание неодинаковую чувствительность и специфичность различных тест-систем и использовать несколько диагностикумов с различным принципом постановки реакции, особенно для сывороток крови с низким уровнем антител к ВИЧ и для тестирования донорской крови.
На нашем YouTube-канале опубликована серия видео по ИФА-диагностике респираторных инфекций. Подробнее
Новый набор для дифференциального выявления IgG к S- и N-белкам SARS-CoV-2. Подробнее
ВИЧ-1 р24-антиген-ИФА-БЕСТ
Набор реагентов для иммуноферментного выявления и подтверждения наличия антигена р24 ВИЧ-1.
ВЛК анти-ВИЧ-1
Набор для внутрилабораторного контроля качества ИФА "Сыворотка, содержащая антитела к ВИЧ-1".
ВИЧ (-) стандартная панель сывороток
Набор образцов сывороток крови, не содержащих антитела к вирусам иммунодефицита человека 1, 2 типов и антиген р24 ВИЧ-1.
ВИЧ-1 АТ(+) стандартная панель сывороток
Набор образцов сывороток крови, содержащих антитела к вирусу иммунодефицита человека 1 типа.
ВИЧ-2 АТ(+) стандартная панель сывороток
Набор образцов сывороток крови, содержащих антитела к вирусу иммунодефицита человека 2 типа.
ВИЧ-1 р24-антиген (+) стандартная панель сывороток
Набор образцов сывороток крови, содержащих антиген р24 ВИЧ-1 в различных концентрациях.
КомбиБест ВИЧ-1,2 АГ/АТ-авто (комплект 2/Чароит)
Набор реагентов для иммуноферментного выявления антител к ВИЧ-1,2 и антигена р24 ВИЧ-1 для автоматических анализаторов.
КомбиБест ВИЧ-1,2 АГ/АТ-авто (комплект 1)
Набор реагентов для иммуноферментного выявления антител к ВИЧ-1,2 и антигена р24 ВИЧ-1 для автоматических анализаторов.
Срок годности: 12 месяцев
КомбиБест ВИЧ-1,2 АГ/АТ (комплект 1)
Набор реагентов для иммуноферментного выявления антител к ВИЧ-1,2 и антигена р24 ВИЧ-1.
Срок годности: 12 месяцев
КомбиБест ВИЧ-1,2 АГ/АТ (комплект 2)
Набор реагентов для иммуноферментного выявления антител к ВИЧ-1,2 и антигена р24 ВИЧ-1.
Срок годности: 12 месяцев
КомбиБест анти-ВИЧ-1+2 (комплект 3/авто)
Набор реагентов для иммуноферментного выявления антител к вирусам иммунодефицита человека 1 и 2 типов. Выявляет антитела к ВИЧ-1,2 всех классов.
Срок годности: 18 месяцев
КомбиБест анти-ВИЧ-1+2 (комплект 1)
Набор реагентов для иммуноферментного выявления антител к вирусам иммунодефицита человека 1 и 2 типов. Выявляет антитела к ВИЧ-1,2 всех классов.
Срок годности: 18 месяцев
КомбиБест анти-ВИЧ-1+2 (комплект 2)
Набор реагентов для иммуноферментного выявления антител к вирусам иммунодефицита человека 1 и 2 типов. Выявляет антитела к ВИЧ-1,2 всех классов.
Срок годности: 18 месяцев
КомбиБест анти-ВИЧ-1+2 (комплект 1/стрип)
Набор реагентов для иммуноферментного выявления антител к вирусам иммунодефицита человека 1 и 2 типов. Выявляет антитела к ВИЧ-1,2 всех классов.
Срок годности: 18 месяцев
УниБест ВИЧ-1,2 АТ (комплект 3/авто)
Набор реагентов для иммуноферментного выявления суммарных антител к ВИЧ-1,2. Двухстадийный вариант.
Срок годности: 18 месяцев
УниБест ВИЧ-1,2 АТ (комплект 1)
Набор реагентов для иммуноферментного выявления суммарных антител к ВИЧ-1,2. Двухстадийный вариант.
Срок годности: 18 месяцев
УниБест ВИЧ-1,2 АТ (комплект 1/стрип)
Набор реагентов для иммуноферментного выявления суммарных антител к ВИЧ-1,2. Двухстадийный вариант.
Срок годности: 18 месяцев
УниБест ВИЧ-1,2 АТ (комплект 2)
Набор реагентов для иммуноферментного выявления суммарных антител к ВИЧ-1,2. Двухстадийный вариант.
Срок годности: 18 месяцев
ЛИА-Блот ВИЧ-1,2 БЕСТ
Набор реагентов для подтверждения наличия антител к антигенам вируса иммунодефицита человека 1 и 2 типов методом иммунного блоттинга.
Целью работы являлось сравнение пяти наиболее широко используемых на территории Российской Федерации тест-систем ИФА для обнаружения антител к вирусу иммунодефицита человека.
Ключевые слова
Об авторах
Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени Пастера; Северо-Западный государственный медицинский университет имени И.И.Мечникова
Россия
Список литературы
4. Hemelaar J. Implications of HIV diversity for the HIV-1 pandemic. J. Infect., 2013 May, Vol. 66, No. 5, pp. 391–400. URL: DOI: 10.1016/j.jinf.2012.10.026.
5. Gaudy C., Moreau A., Brunet S., Descamps J.M., Deleplanque P., Brand D., Barin F. Subtype B human immunodeficiency virus (HIV) type 1 mutant that escapes detection in a fourth generation immunoassay for HIV infection. J. Clin. Microbiol., 2004, Vol. 42, pp. 2847–2849. 6. Ly T.D., Plantier J.C., Leballais L., Gonzalo S., Lemée V., Laperche S. The variable sensitivity of HIV Ag/Ab combination assays in the detection of p24 Ag according to genotype could compromise the diagnosis of early HIV infection. J. Clin. Virol., 2012, Vol. 55, pp. 121–127. URL: DOI: 10.1016/j.jcv.2012.06.012.
6. Qiu X., Sokoll L., Yip P., Elliott D.J., Dua R., Mohr P., Wang X.Y., Spencer M., Swanson P., Dawson G.J., Hackett J. Jr. Comparative evaluation of three FDA-approved HIV Ag/Ab combination tests using a genetically diverse HIV panel and diagnostic specimens.J. Clin. Virol., 2017 Jul., Vol. 92, pp. 62–68. URL: DOI: 10.1016/j.jcv.2017.05.005.
7. Баранова Е.Н., Шарипова И.Н., Денисова Н.М., Сусекина М.Е., Пузырев В.Ф., Саркисян К.А., Воробьева М.С., Бурков А.Н., Уланова Т.И. Возможности современных тест-систем при подтверждении ранней ВИЧ-инфекции // Вопросы вирусологии. 2009. Т. 54, № 5. С. 37–40. [Baranova E.N., Sharipova I.N., Denisova N.M. Susekina M.E., Puzyrev V.F., Sarkisyan K.A., Vorobyeva M.S., Burkov A.N., Ulanova T.I. The possibilities of modern test systems for the early confirmation of HIV infection. Questions of Virology, 2009, Vol. 54, No. 5, pp. 37–40 (In Russ.)].
8. Иванова Н.И., Пекшева О.Ю. Опыт выявления маркеров ВИЧ-инфекции с использованием нового ИФА-диагностикума ДС-ИФА-ВИЧ-АТ/АГ-СПЕКТР в лабораториях центров по профилактике и борьбе со СПИДом Приволжского Федерального округа // Клиническая лабораторная диагностика. 2009. № 3. С. 46–48. [Ivanova N.I., Peksheva O.Yu. Experience identifying markers of HIV with the new ELISA antigen of DS-ELISA-HIV-at/AG-SPECTRUM in the laboratories of the centers for the prevention and control of AIDS of the Volga Federal district. Clinical Laboratory Diagnostics, 2009, No. 3, pp. 46–48 (In Russ.)].
9. Распопина И.В., Панкова Л.В., Кожевникова И.В. Опыт выявления маркёров ВИЧ-инфекции с использованием нового ИФА-диагностикума Инвитролоджик ВИЧ 1,2-АГ/АТ // Вестник Челябинской областной клинической больницы. 2013. № 1 (20). С. 84. [Raspopina I.V., Pankova L.V., Kozhevnikov I.V. Experience of identifying markers of HIV with the new ELISA antigen of Envitrologic HIV-1,2-AG/AT. Bulletin of the Chelyabinsk Regional Clinical Hospital, 2013, No. 1 (20), pp. 84 (In Russ.)].
10. Шарипова И.Н., Ходак Н.М., Пузырев В.Ф., Бурков А.Н., Уланова Т.И. Сравнительное исследование специфичности тест-систем для диагностики ВИЧ-инфекции на категории образцов сывороток крови беременных женщин // Клиническая лабораторная диагностика. 2015. Т. 60, № 3. С. 38–41. [Sharipova I.N., Khodak N.M. Puzyrev V.F., Burkov A.N., Ulanova T.I. Comparative study of the specificity of test systems for the diagnosis of HIV infection in the category of blood serum samples of pregnant women. Clinical Laboratory Diagnostics, 2015, Vol. 60, No. 3, pp. 38–41 (In Russ.)].
11. Лисицина З.Н., Дмитриевская К.А., Коробан Н.В., Кондрашова Т.В. Иммунные тесты и диагностика острой стадии ВИЧ-инфекции // ВИЧ-инфекция и иммуносупрессии. 2017. Т. 9, № 2. С. 36–41. [Lisitsina Z.N., Dmitrievskaya K.A., Koroban N.V., Kondrashova T.V. Immune tests and diagnosis of the acute stage of HIV infection. HIV Infection and Immunosuppressive Disorders, 2017, Vol. 9, No. 2, pp. 36–41 (In Russ.)].
12. HIV assays: laboratory performance and other operational characteristics: rapid diagnostic tests (combined detection of HIV-1/2 antibodies and discriminatory detection of HIV-1 and HIV-2 antibodies): report 18. Geneva: World Health Organization, 2015.
13. Chaves P., Wesolowski L., Patel P., Delaney K., Owen S.M. Evaluation of the performance of the Abbott ARCHITECT HIV Ag/Ab Combo Assay. J. Clin. Virol., 2011 Dec., Vol. 52, Suppl. 1, pp. S51–S55. URL: DOI: 10.1016/j.jcv.2011.09.010.
14. Mitchell E.O., Stewart G., Bajzik O., Ferret M., Bentsen C., Shriver M.K. Performance comparison of the 4-th generation Bio-Rad Laboratories GS HIV Combo Ag/Ab EIA on the EVOLIS™ automated system versus Abbott ARCHITECT HIV Ag/Ab Combo, Ortho Anti-HIV 1+2 EIA on Vitros ECi and Siemens HIV-1/O/2 enhanced on Advia Centaur.J. Clin. Virol., 2013 Dec., Vol. 58, Suppl. 1, pp. e79–e84. URL: DOI: 10.1016/j.jcv.2013.08.009. 16. Product Package Insert. ARCHITECT HIV Ag/Ab Combo Reagent Kit. USA: Abbott Laboratories.
17. Лаповок И.А., Лопатухин А.Э., Киреев Д.Е. и др. Молекулярно-эпидемиологический анализ вариантов ВИЧ-1, циркулировавших в России в 1987–2015 гг. // Терапевтический архив. 2017. Т. 89, № 11. С. 44–49. [Lapovok I.A., Lopatukhin A.E., Kireev D.A. et al. Molecular epidemiological analysis of HIV-1 circulating in Russia in the years 1987–2015. Therapeutic Archive, 2017, Vol. 89, No. 11, pp. 44–49 (In Russ.)].
ВИЧ-инфекция – медленно текущая ретровирусная инфекция, характеризующаяся пандемическим распространением, развитием синдрома приобретенного иммунодефицита и летальным исходом. Поэтому своевременная и точная лабораторная диагностика этого заболевания имеет важное значение. Она основана прежде всего на идентификации вируса иммунодефицита человека (ВИЧ) и выявлении специфических противовирусных антител. (3, 6, 8, 9)
При массовом скрининге доноров крови и групп риска с целью выявления специфических противовирусных антител используется метод иммуноферментного анализа (ИФА). Метод основан на иммобилизации вирусных антигенов на твердой фазе, сорбции на них антител и выявлении комплексов антиген-антитело с помощью конъюгата антивидового иммуноглобулина с ферментом (8). Преимущества данного метода: можно анализировать большие партии образцов при массовом обследовании населения, возможность автоматизации, использование оборудования, доступного для большинства лабораторий.
Основными показателями качества иммуноферментной тест-системы являются чувствительность и специфичность. Чувствительность – доля больных, для которых получен положительный результат в данной тест-системе, от общего количества обследованных больных. Специфичность – доля здоровых, для которых получен отрицательный результат в данной тест-системе, от общего количества обследованных здоровых (2, 10). Понятия “чувствительность” и “специфичность” тесно связаны с понятиями “ложноотрицательный” и “ложноположительный” результат. Таким образом, более чувствительной является та система, которая дает меньше ложноотрицательных результатов, а более специфичной – та, которая дает меньше ложноположительных результатов (4, 10, 11) .
Причинами ложноположительных результатов могут быть наличие у пациентов аутоиммунных, онкологических и инфекционных заболеваний. Сыворотки беременных женщин и пожилых людей при постановке ИФА также могут давать серопозитивные результаты (1, 2, 5, 7). Ложноотрицательные результаты возможны в случаях раннего инфицирования, когда уровень антител очень низкий, или в терминальной стадии болезни, характеризующейся глубоким поражением иммунной системы (3).
Целью данной работы является сравнительная оценка чувствительности и специфичности 8 иммуноферментных тест-систем для обнаружения антител к ВИЧ, используемых при скрининге.
В работе были использованы следующие диагностикумы: “ЭКОлаб-Вироностика IV” (“ЭКОлаб”), “ЭКОлаб-ЖЕНЕЛАВИЯ-Микст” (“ЭКОлаб”), “КомбиБест-анти-ВИЧ-1+2” (ЗАО “Вектор-Бест”), “ВИЧ-1, ВИЧ-2-ИФА-Авиценна” (СПб “Авиценна”), “СКРИН-ВИЧ” (ЗАО ПКБ им. И.И.Мечникова), “ПЕПТОСКРИН-2” (ООО “АмерКарД”), “ЭКОлаб-ТЕСТ-ВИЧ-1,2” (ЭКОлаб”), “Амеркард Анти-ВИЧ-1/2К” (ООО АмерКард”). Характеристика тест-систем представлена в таблице 1. Постановку ИФА и учет результатов проводили согласно инструкциям по применению тест-систем. Все образцы были протестированы в реакции иммунного блоттинга с использованием систем “БЛОТ-ВИЧ” (ЗАО “Биосервис”) и “ВЕСТЕРН БЛОТ ВИЧ-1” (“Organon”).
Табл.1 Характеристика ИФА-тест-систем для выявления антител к ВИЧ.
| тест-система | антиген | параметры тест-системы | субстрат | ||
| ВИЧ 1 | ВИЧ 2 | тип ИФА | |||
| Вироностика | рекомбинантный, вирусный лизат, пептиды | р 24gp 160 | env-антиген ВИЧ-2 | сэндВИЧ | ТМБ |
| Женелавия | пептиды, рекомбинантный | gp 41 gp 160 | gp 36 | непрямой | ОФД |
| Комби-бест | рекомбинантный | __ | __ | сэндВИЧ | ТМБ |
| АВИЦЕННА | синтетические пептиды | р 24 gp 120 gp 41 | gp 36 | непрямой | ТМБ |
| СКРИН-ВИЧ | рекомбинантный | р 24 р 17 gp 41 gp 120 | gp 110 gp 38 | непрямой | ОФД |
| ПЕПТОСКРИН-2 | пептиды | gp 41 gp 120 | gp 32 | непрямой | ОФД |
| ЭКОлаб-ТЕСТ ВИЧ 1,2 | рекомбинантный | р 24 р 17 gp 41 gp 120 | gp 38 | непрямой | ОФД |
| АМЕРКАРД | рекомбинантный | gp 41 р 55 | gp 32 | непрямой | ОФД |
Материалом для исследования служили 168 образцов сыворотки крови, включающие в себя сыворотки от ВИЧ - инфицированных (n=48), сыворотки от больных вирусными гепатитами В и С (n=35), а также сыворотки от пациентов, в крови которых не обнаружены антитела к ВИЧ (n=85) . Контрольная группа составила 20 здоровых доноров.
Учет результатов ИФА проводили на оборудовании фирмы Sanofi (Франция) – на ридере PR 2100 измеряли оптическую плотность (ОП) исследуемых образцов сыворотки крови. Уровень “среза” (ОП критическое) для каждой тест-системы рассчитывался согласно инструкциям. За “серую зону” принимали значения ОП в интервале + 10% от уровня “среза”. Образцы считали положительными, если значения их ОП были выше “серой зоны”. Образцы считали сомнительными, если значения их ОП находились в пределах “серой зоны”. Образцы считали отрицательными, если значения их ОП были ниже “серой зоны”.
Показатели специфичности в нашем исследовании варьировали от теста к тесту. Так, для здоровых доноров крови этот показатель составил 100%. При исследовании сывороток, полученных от больных вирусными гепатитами В и С специфичность изменялась от 3% (“Скрин-ВИЧ”) до 97% (“КомбиБест-анти-ВИЧ-1,2”) (таблица 2). Данный факт может быть объяснен, с одной стороны, недостаточной специфичностью оцениваемых диагностикумов, а с другой – наличием перекрестных реакций неспецифических факторов в сыворотках с компонентами тест-систем.
Табл. 2 Процент специфичности тест-систем для диагностики ВИЧ-инфекции.
| Диагностикум | доноры | ВИЧ-негативные в иммуноблоте | больные гепатитом В и С |
| “Вироностика” | 100 % | 75 % | 88 % |
| “Женелавия” | 100 % | 84,3 % | 88 % |
| “Комби-Бест” | 100 % | 90 % | 97 % |
| “Авиценна” | 89,5 % | 52,5 % | 60 % |
| “Скрин-ВИЧ” | 100 % | 17,5 % | 3 % |
| “Пептоскрин-2” | 93,8 % | 62,5 % | 74 % |
| “ЭКОлаб-тест ВИЧ 1,2” | 89,5 % | 28,3 % | 26 % |
| “АмерКард” | 87,3 % | 55,8 % | 74 % |
При оценке ложноположительных результатов нами были получены следующие данные (табл.3)
Табл.3 Процент ложноположительных результатов в ИФА-системах.
| Тест-Система | ВИЧ-негативные в иммуноблоте | больные гепатитом В и С | ||
| серая зона, % | ложнополо-жительные результаты, % | серая зона, % | ложнополо-жительные результаты, % | |
| “Вироностика” | 10 | 16,7 | 2,8 | 8,6 |
| “Женелавия” | 8,3 | 11,7 | 2,8 | 8,6 |
| “Комби-Бест” | 4,2 | 5,8 | 2,8 | * |
| “Авиценна” | 5,0 | 24,2 | 8,6 | 34,3 |
| “Скрин-ВИЧ” | 4,2 | 45,8 | 2,8 | 97,1 |
| “Пептоскрин-2” | 8,3 | 24,2 | 14,3 | 14,3 |
| “ЭКОлаб-тест ВИЧ 1,2” | 9,2 | 32,5 | 17,1 | 60,0 |
| “АмерКард” | 7,5 | 36,7 | 20,0 | 5,7 |
* таких результатов нет
Таким образом, наибольшей специфичностью обладают тест-системы “Комби-Бест”, “Женелавия” и “Вироностика”. Остальные тест-системы дают высокий процент ложноположительных результатов, которые не подтверждаются в иммуноблоте.
Процент выявления антител к ВИЧ в серопозитивных образцах практически во всех ИФА-системах составил 100%. В тест-системах “ЭКОлаб-Женелавия-Микст” и “Авиценна” чувствительность была 97,9%. Наименьшая чувствительность из исследуемых диагностикумов была в тест-системе “Пептоскрин-2” – 89,6%. Эти результаты могут свидетельствовать о недостаточной чувствительности перечисленных тест-систем и о высокой вероятности получения ложнонегативных результатов.
Результаты проведенного исследования позволяют сделать выводы о том, что для массового тестирования на ВИЧ-инфекцию наиболее подходят такие высоко специфичные и чувствительные тест-системы, как “Комби-Бест-анти-ВИЧ-1,2”, “ЭКОлаб-Вироностика IV” и “ЭКОлаб-Женелавия-Микст”. Остальные диагностикумы могут давать высокий процент как ложноположительных, так и ложноотрицательных результатов.
В заключении необходимо отметить, что при тестировании сыворотки крови на ВИЧ-инфекцию следует принимать во внимание неодинаковую чувствительность и специфичность различных тест-систем и использовать несколько диагностикумов с различным принципом постановки реакции, особенно для сывороток крови с низким уровнем антител к ВИЧ и для тестирования донорской крови.
На нашем YouTube-канале опубликована серия видео по ИФА-диагностике респираторных инфекций. Подробнее
Новый набор для дифференциального выявления IgG к S- и N-белкам SARS-CoV-2. Подробнее
ВИЧ-1 р24-антиген-ИФА-БЕСТ
Набор реагентов для иммуноферментного выявления и подтверждения наличия антигена р24 ВИЧ-1.
ВЛК анти-ВИЧ-1
Набор для внутрилабораторного контроля качества ИФА "Сыворотка, содержащая антитела к ВИЧ-1".
ВИЧ (-) стандартная панель сывороток
Набор образцов сывороток крови, не содержащих антитела к вирусам иммунодефицита человека 1, 2 типов и антиген р24 ВИЧ-1.
ВИЧ-1 АТ(+) стандартная панель сывороток
Набор образцов сывороток крови, содержащих антитела к вирусу иммунодефицита человека 1 типа.
ВИЧ-2 АТ(+) стандартная панель сывороток
Набор образцов сывороток крови, содержащих антитела к вирусу иммунодефицита человека 2 типа.
ВИЧ-1 р24-антиген (+) стандартная панель сывороток
Набор образцов сывороток крови, содержащих антиген р24 ВИЧ-1 в различных концентрациях.
КомбиБест ВИЧ-1,2 АГ/АТ-авто (комплект 2/Чароит)
Набор реагентов для иммуноферментного выявления антител к ВИЧ-1,2 и антигена р24 ВИЧ-1 для автоматических анализаторов.
КомбиБест ВИЧ-1,2 АГ/АТ-авто (комплект 1)
Набор реагентов для иммуноферментного выявления антител к ВИЧ-1,2 и антигена р24 ВИЧ-1 для автоматических анализаторов.
Срок годности: 12 месяцев
КомбиБест ВИЧ-1,2 АГ/АТ (комплект 1)
Набор реагентов для иммуноферментного выявления антител к ВИЧ-1,2 и антигена р24 ВИЧ-1.
Срок годности: 12 месяцев
КомбиБест ВИЧ-1,2 АГ/АТ (комплект 2)
Набор реагентов для иммуноферментного выявления антител к ВИЧ-1,2 и антигена р24 ВИЧ-1.
Срок годности: 12 месяцев
КомбиБест анти-ВИЧ-1+2 (комплект 3/авто)
Набор реагентов для иммуноферментного выявления антител к вирусам иммунодефицита человека 1 и 2 типов. Выявляет антитела к ВИЧ-1,2 всех классов.
Срок годности: 18 месяцев
КомбиБест анти-ВИЧ-1+2 (комплект 1)
Набор реагентов для иммуноферментного выявления антител к вирусам иммунодефицита человека 1 и 2 типов. Выявляет антитела к ВИЧ-1,2 всех классов.
Срок годности: 18 месяцев
КомбиБест анти-ВИЧ-1+2 (комплект 2)
Набор реагентов для иммуноферментного выявления антител к вирусам иммунодефицита человека 1 и 2 типов. Выявляет антитела к ВИЧ-1,2 всех классов.
Срок годности: 18 месяцев
КомбиБест анти-ВИЧ-1+2 (комплект 1/стрип)
Набор реагентов для иммуноферментного выявления антител к вирусам иммунодефицита человека 1 и 2 типов. Выявляет антитела к ВИЧ-1,2 всех классов.
Срок годности: 18 месяцев
УниБест ВИЧ-1,2 АТ (комплект 3/авто)
Набор реагентов для иммуноферментного выявления суммарных антител к ВИЧ-1,2. Двухстадийный вариант.
Срок годности: 18 месяцев
УниБест ВИЧ-1,2 АТ (комплект 1)
Набор реагентов для иммуноферментного выявления суммарных антител к ВИЧ-1,2. Двухстадийный вариант.
Срок годности: 18 месяцев
УниБест ВИЧ-1,2 АТ (комплект 1/стрип)
Набор реагентов для иммуноферментного выявления суммарных антител к ВИЧ-1,2. Двухстадийный вариант.
Срок годности: 18 месяцев
УниБест ВИЧ-1,2 АТ (комплект 2)
Набор реагентов для иммуноферментного выявления суммарных антител к ВИЧ-1,2. Двухстадийный вариант.
Срок годности: 18 месяцев
ЛИА-Блот ВИЧ-1,2 БЕСТ
Набор реагентов для подтверждения наличия антител к антигенам вируса иммунодефицита человека 1 и 2 типов методом иммунного блоттинга.
Читайте также: