Авидность к вирусу эпштейна-барр в инвитро

Обновлено: 19.04.2024

Клинические состояния, обусловленные Эпштейн-Барр вирусной инфекцией, не имеют четких проявлений. Наиболее известное заболевание, связанное с вирусом Эпштейна-Барр (ВЭБ), - инфекционный мононуклеоз. На данный момент известно, что ВЭБ заражены 90% взрослых людей, причём многие не знают об этом, так как при хорошем иммунитете вирус себя не проявляет или проявляется как простудное заболевание. Лишь в 20% случаев появляется ангина, увеличение лимфоузлов и высокая температура, ещё реже увеличение селезёнки и печени – все эти признаки типичны для мононуклеоза. ВЭБ сохраняется в организме на всю жизнь и при иммунодефицитных состояниях проявляется как хронически активная или часто рецидивирующая инфекция. Длительная невысокая (субфебрильная) температура с выраженной слабостью, постоянно увеличенные лимфатические узлы, частые ОРВИ, атипичные пневмонии, увеличении печени и селезенки, неврологические проявления и снижение ряда показателей общего анализа крови – эти симптомы характерны для ряда заболеваний, но требуют исключения вируса Эпштейна-Барр.

Для диагностики используют метод ПЦР, определяющий ДНК вируса, и определение антител к ВЭБ. Но не всегда этого достаточно. Для определения давности инфекции определяют авидность – свойство, присущее только антителам класса IgG. Авидность отражает степень прочности связи антигена (вируса) и антитела. Чем дольше вырабатываются антитела в организме, тем связь прочнее, т.е авидность позволяет понять давность инфекции и отличить острую первичную инфекцию от обострения давнего процесса.

В каких случаях необходимо определение авидности IgG к вирусу Эпштейна-Барр

При выявлении антител класса IgG к вирусу Эпштейна- Барр у беременных и планирующих беременность
Для определения давности заболевания

Как оценить результаты теста?

менее 40% - низкоавидные антитела. Свидетельствуют об острой или недавней инфекции, вызванной вирусом Эпштейна-Барр (первый контакт с вирусом менее 4 месяцев назад)
60% и более - высокоавидные антитела. Говорят о давней инфекции, вызванной вирусом Эпштейна-Барр (контакт с вирусом произошел более 6 месяцев назад).
40-60% - неопределённый результат, антитела еще не достигли уровня высокой авидности. Скорее всего контакт с вирусом произошел менее 6 месяцев назад. Рекомендуется повторить исследование через 2-4 недели.

Сроки выполнения теста.

Как подготовиться к исследованию?

Специальная подготовка не требуется. Взятие крови можно провести утром натощак или в течение дня через 3 часа после необильного приёма пищи.

Можно сдавать кровь в течение дня, не ранее, чем через 3 часа после приема пищи или утром натощак. Чистую воду можно пить в обычном режиме.

В 1964 году канадскими учёными М. Epstein и Y. Вагг был обнаружен неизвестный ранее вирусный агент, названный позднее в честь первооткрывателей вирусом Эпштейна-Барр (ВЭБ). Этот ДНК-со-держащий вирус, относящийся к подсемейству Gammaherpesvirinae рода Gymphocryptovirus и является вирусом герпеса человека 4 типа.

Установлено, что ВЭБ имеет глобальное распространение и обнаруживается у населения всего земного шара. Вирус поражает эпителиальные клетки слизистых оболочек (дыхательных путей, пищеварительного тракта, половых органов), а также клетки иммунной системы, в том числе В-лимфоциты, в которых происходит репликация вирусных частиц.

В настоящее время доказано, что ВЭБ является этиологическим агентом таких заболеваний, как инфекционный мононуклеоз, назофарингеальная карцинома (НФК), лимфома Беркитта, Т-клеточная лимфома, болезнь Ходжкина.

Основной путь передачи ВЭБ — воздушно-капельный, фактор передачи - контаминированная вирусом слюна. Возможно заражение через содержащие вирус пищевые продукты, а также бытовым путём через руки и предметы обихода. Возможны трансмиссивный путь передачи ВЭБ, при гемотрансфузиях с донорской кровью, а также половой.

У людей без выраженных дефектов иммунной системы инфекция ВЭБ протекает субклинически и сопровождается положительными серологическими реакциями. Однако, при массированном поступлении вируса в организм или недостаточности иммунитета может наблюдаться вирусемия. Вирус проникает в лимфоузлы и органы, богатые ретикуло-эндотелиальными клетками, развивается лимфоаденопатия, заметно увеличиваются печень и селезёнка. Симптомы интоксикации и лихорадка обусловлены воздействием токсинов, а воспаление верхних дыхательных путей, полости рта и глотки - непосредственным воздействием вируса.

Наиболее распространенным заболеванием, вызываемым ВЭБ, является инфекционный мононуклеоз (ИМ). До 60% заболевших ИМ — это лица в возрасте 2-20 лет. У детей первых 4-х лет жизни инфицирование ВЭБ чаще всего не сопровождается клиническими проявлениями и происходит бессимптомно, либо проявляется как респираторная вирусная инфекция. Если же первая встреча с ВЭБ приходится на более старший возраст, то в 45% случаев возникают клинические проявления типичного ИМ.

Однако гематологические изменения, напоминающие картину ИМ, могут наблюдаться при цитомегаловирусной инофекции, токсоплазмозе, острых респираторных вирусных заболеваниях, ветряной оспе, кори, инфекционных гепатитах и других заболеваниях. Поэтому для постановки дифференциального диагноза необходимо проведение дополнительных специфических лабораторных исследований.

Определение ВЭБ методом ПЦР является наиболее оптимальным методом ранней диагностики инфекции в острый период инфекционного мононуклеоза при отсутствии в крови специфических антител (см. исследования № 351СЛН , № 351РОТ , № 351НОС , № 351СВ , № 351КР , № 351МОЧ , № 351СМЖ ). Выбор биологического материала зависит от клинических проявлений инфекции.

Наиболее специфичными и чувствительными серологическими маркерами ВЭБ-инфекции являются IgG и IgM к капсидному антигену VCA (см. исследования № 275 и № 186 ), IgG к раннему антигену ЕА (см. исследование № 255 ) и IgG к ядерному антигену EBNA IgG (см. исследование 187 ).

На ранней стадии первичной инфекции IgG к VCA характеризуются низким индексом авидности (ИА). Авидность антител характеризует прочность связывания специфических антител с антигенами возбудителя. В течение нескольких недель происходит созревание антител и возрастание ИА. На стадии пост-инфекции в сыворотках крови пациентов выявляются уже высокоавидные IgG к VCA. Высокая авидность специфических IgG-антител позволяет исключить недавнее первичное инфицирование. Определение ИА следует определять при обнаружении специфических IgG к VCA.

Определение IgG к антигенам EBNА и EA, определение IgG и IgM к VCA и определение индекса авидности IgG к VCA дает необходимую и достаточную информацию для постановки диагноза и установления стадии инфекции.

Специальная подготовка не требуется. Рекомендуется взятие крови не ранее чем через 4 часа после последнего приема пищи. С общими рекомендациями для подготовки к исследованиям можно ознакомиться здесь >> .

Лабораторное подтверждение диагноза при клинических подозрениях на острый инфекционный мононуклеоз.
Оценка стадии текущей инфекции.
Диагностика лимфопролиферативных и онкологических заболеваний, связываемых с вирусом Эпштейна-Барр.

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.

Вирус Эпштейна-Барр относится к семейству герпесвирусов, подсемейство g-герпесвирусов - вирус герпеса человека IV типа. Вирусная частица состоит из нуклеоида, капсида и оболочки.

Нуклеоид содержит двухцепочечную ДНК, он окружен капсидом, состоящим из белковых субъединиц. Нуклеоид и капсид (нуклеокапсид) окружены липидсодержащей внешней оболочкой, образующейся из ядерной или наружной мембраны клетки-хозяина, в которую ещё до начала сборки вирусной частицы встраиваются некоторые вирусные белки.

При инфицировании вирус проникает в эпителий ротоглотки и слюнных желёз человека и вызывает активную инфекцию с лизисом клеток и высвобождением вирусных частиц, в результате чего вирус обнаруживается в слюне. Кроме того, он может проникать в В-лимфоциты и эпителий носоглотки и вызывать латентную инфекцию. Вирус Эпштейна-Барр можно обнаружить в оральных секретах здоровых, но латентно инфицированных людей. Вирус тропен к В-лимфоцитам, Т-лимфоциты он не поражает. Проникнув в лимфоциты, вирус Эпштейна-Барр может вызывать их трансформацию, в результате которой образуются способные к неограниченной пролиферации клоны атипичных лимфоцитов, содержащие кольцевую вирусную ДНК в виде плазмиды. Рецептором вируса на эпителиальных клетках и В-лимфоцитах служит молекула CD21, которая служит также рецептором фрагмента комплемента C3d. Вирус запускает как гуморальный, так и клеточный ответ. Среди образующихся антител есть специфические к антигенам вируса и неспецифические, гетерофильные. Последние появляются в результате поликлональной активации В-лимфоцитов (это может быть причиной интерференции при проведении ряда серологических исследований у людей с активной инфекцией вирусом Эпштейна-Барр). Главную роль в элиминации данной инфекции играет клеточный иммунитет. При острой инфекции первичная репродукция вируса в В-лимфоцитах сменяется выраженной пролиферацией Т-лимфоцитов с соотношением CD4/CD8 меньше 1.

Острая инфекция вирусом Эпштейна-Барр известна под названиями инфекционный мононуклеоз, болезнь Филатова, моноцитарная ангина, идиопатическая железистая лихорадка, болезнь Афейффера, острый доброкачественный лимфобластоз.

Вирус Эпштейна-Барр - главная причина мононуклеоподобного синдрома (хотя острая первичная инфекция, вызванная этим вирусом, и инфекционный мононуклеоз не являются синонимами). Для острой инфекции характерно повышение температуры, боли в горле и увеличение заднешейных лимфоузлов (реже – переднешейных и локтевых, встречается генерализованное увеличение лимфоузлов). В 50% случаев выявляется увеличение селезенки, в 10 - 30% случаев – увеличение печени. Другими проявлениями инфекции могут быть сыпь и периорбитальный отек. Изредка наблюдаются осложнения, в том числе, неврологические, изменения со стороны системы крови в виде гемолитической или апластической анемии, нейтропении, тромбоцитопении. После перенесённого заболевания иногда подолгу сохраняется фарингит, увеличение лимфоузлов, утомляемость и неспособность концентрации внимания.

Заболевание малоконтагиозно. Инкубационный период (период активного размножения и распространения вируса по всей лимфоидной ткани) может длиться от 30 до 50 суток. Инфицирование данным вирусом в любом возрасте, а у детей особенно, в большинстве случаев может протекать бессимптомно или как респираторная инфекция. Доля серопозитивных лиц (имеющих специфические антитела к антигенам вируса) уже среди подростков в разных странах составляет от 50 до 90%, среди взрослых людей серологические признаки инфекции обнаруживаются почти в 100% случаев. Вирус выделяется со слюной, передается через поцелуи и другие контакты слизистой со слюной или загрязнёнными ею предметами. Трансплацентарная передача вируса происходит редко. Иммунитет при инфекционном мононуклеозе стойкий.

Хотя канцерогенность вируса окончательно не доказана, есть основания полагать, что он может играть роль в развитии ряда злокачественных новообразований – лимфомы Беркитта, рака носоглотки, лимфогранулематоза и ряда посттрансплантационных лимфопролиферативных синдромов. На фоне нарушения клеточного иммунитета (СПИД, иммуносупрессия при трансплантации и пр.) вирус Эпштейна - Барр может вызывать инфекционный мононуклеоз с летальным исходом или лимфопролиферативные синдромы с развитием В-клеточных лимфом.

Лабораторная диагностика инфекционного мононуклеоза

Диагностика инфекционного мононуклеоза основывается на клинической картине, характерных изменениях в клиническом анализе крови (в ИНВИТРО тесты №5 – клинический анализ крови, №119 – лейкоцитарная формула) и результатах серологических тестов (в ИНВИТРО - №186 – анти-VCA IgM, №187 – анти-EBNA IgG, №255 – анти-EA IgG). Ко второй неделе заболевания развивается относительный и абсолютный лимфоцитоз с присутствием 10 - 20% атипичных мононуклеаров. Гематологические изменения, напоминающие картину инфекционного мононуклеоза, могут наблюдаться и при цитомегаловирусной инфекции, токсоплазмозе, острых респираторных вирусных заболеваниях, ветряной оспе, кори, инфекционных гепатитах и других заболеваниях. Поэтому для постановки дифференциального диагноза целесообразно проведение серологических тестов. Антитела к антигенам вируса появляются достаточно быстро, и исследование в остром периоде заболевания даже однократное взятие сыворотки на разные виды антител может дать достаточно точное представление о наличии иммунитета или восприимчивости пациента к инфекции вирусом Эпштейна-Барр, текущей инфекции или реактивации.

Серологические тесты.

При литическом жизненном цикле вируса сначала появляются каскадом различные регуляторные белки ранней фазы (ранние антигены, early antigens, EA), к которым относятся используемые в различных тест-системах ЕА-D (p54), EA-R (p85), EA p138. Позже образуются структурные белки вируса - вирусные капсидные антигены (virus capsid antigens, VCA), мембранные белки (membrane antigens, MA). При латентной инфекции образуются только некоторые белки, в число которых входит Эпштейна-Барр ядерный (нуклеарный) антиген (Epstein-Barr nuclear antigens, EBNA, NA). Специфическая серологическая диагностика инфекции основана на использовании комбинации тестов, выявляющих наличие IgG и IgM антител к различным белкам-антигенам вируса, что позволяет дифференцировать инфекцию и уточнить стадию патологического процесса. В серологической диагностике острого мононуклеоза используется также тест на гетерофильные антитела.

ВАЖНО!

Лабораторное подтверждение диагноза при клинических подозрениях на острый инфекционный мононуклеоз.
Оценка стадии текущей инфекции.
Диагностика лимфопролиферативных и онкологических заболеваний, связываемых с вирусом Эпштейна-Барр.

Лабораторное подтверждение диагноза при клинических подозрениях на острый инфекционный мононуклеоз.
Оценка стадии текущей инфекции.
Диагностика лимфопролиферативных и онкологических заболеваний, связываемых с вирусом Эпштейна-Барр.

Читайте также: