Голодная слюна и папилломы

Обновлено: 18.04.2024

Доброкачественные новообразования, которые называют бородавками или папилломами чаще всего локализуются непосредственно на поверхности эпидермиса, поражая кожу лица, рук и стоп.

Реже данный дефект может формироваться на слизистых оболочках, образуя сосочковые, дольчатые структуры, которые в медицине получили название кондиломы или эпителиальная гиперплазия. Такие образования могут представлять существенную угрозу здоровью человека и требуют обязательного обращения к специалисту. Не являются исключением и папилломы во рту, а также в области губ. Рассмотрим причины, симптомы и методики лечения такого неприятного эпидермального дефекта.

Причины образования папиллом во рту и возможные места их локализации

Появление всех видов папиллом связано с заражением пациента вирусом папилломы человека (ВПЧ). Распространенность этого вида вирусного агента очень высока и достигает в некоторых странах 90% населения. При этом не всегда носительство ВПЧ сопровождается формированием кожных новообразований. Вирус способен длительное время оставаться в латентном состоянии, не проявляясь вовсе. Образованию папиллом способствуют такие факторы как снижение иммунитета, наличие вредных привычек, неполноценное питание и гормональный дисбаланс.

Науке известны более 100 типов вируса папилломы человека. От вида ВПЧ напрямую зависит локализация новообразования. Папилломы во рту, покрывающие поверхность слизистой оболочки, вызывает ВПЧ 13 и 32 типа, поражая при этом различные участки ротовой полости:

Папилломы на языке. Язык чаще всего подвергается эпителиальной гиперплазии, что проявляется обычно формированием мелкой зернистости или единичных бугорков слизистой оболочки языка. В первом случае, множественные мелкие наросты ощущаются как неприятная шероховатость поверхности, в то время как второй вид новообразования, являясь достаточно крупным, часто травмируется и причиняет своему обладателю не только дискомфорт, но и болевые ощущения.

Папилломы на языке обычно появляются в области кончика или боковых частей органа. Нередким явлением можно считать также папиллому под языком. Корень органа реже всего страдает от подобных наростов. Цветовые характеристики папилломы варьируют от светло-розовых до ярко-красных.

Папиллома в горле. Папилломы в горле могут длительное время оставаться не диагностированными, так как они обычно не вызывают выраженных болевых ощущений у пациента. Обладатели таких новообразований слизистой оболочки отмечают несущественный дискомфорт и першение в горле, которому не придают значения.

В случае увеличения папилломы в размере, она может препятствовать нормальному приему пищи и даже менять голос своего обладателя, делая его более приглушенным. Сам нарост обычно выглядит как мягкий белесый или разовый бугорок, имеющий шероховатую поверхность. Особенно часто встречаются папилломы на миндалине.

Папиллома гортани. Одна из самых неприятных разновидностей локализации новообразований. Дело в том, что формирование папиллом гортани препятствует процессу дыхания, что может привести к острой гипоксии. Особенно такое явление характерно для маленьких детей, которые не могут четко сформулировать жалобы на затруднения дыхания.

Папиллома на губе. Подобный эпидермальный нарост обычно доставляет больше неприятностей с точки зрения эстетики, чем физиологии. Однако чрезмерное разрастание новообразования повышает риск его травматизации во время еды или активной мимики.

Папиллома на десне. Обычно отличается отсутствием симптомов, и каких-либо болевых ощущений. Если папиллома на десне образовалась на незаметном для самого пациента месте. Она может быть выявлена только при посещении стоматолога.

Чем опасны папилломы во рту?

Главная опасность папиллом на слизистых оболочках заключается в возможности их злокачественной трансформации, что сопровождается онкологическим процессом. Нельзя утверждать, что такая вероятность очень высока, но большинство медиков сходятся во мнении, что при чрезмерном разрастании эпилелия, атипичный рост клеток может приобрести неконтролируемый характер.

Кроме того, папилломы во рту обычно сопровождаются постоянным дискомфортом, что связано с расположением большого количества нервных окончаний и чувствительных центров на слизистой рта. Лечение папилломы в горле необходимо в силу вероятности ее разрастания с последующими проблемами речевой активности.

Также, лечение папиллом во рту оправдано с той точки зрения, что именно данная локализация сопровождается самым высоким риском травмирования новообразования. Это может произойти во время приема пищи, разговора или мимической активности. В этом случае открывается сильнейшее кровотечение, которое очень сложно остановить. Кроме того, постоянная влажная среда с обилием микроорганизмов, препятствует быстрому заживлению раневой поверхности и, напротив, способствует инфицированию раны.

Лечение папиллом во рту

Абсолютно все специалисты подтверждают необходимость удаления папиллом, локализованных в области ротовой полости. Большинство из них рекомендуют воспользоваться с этой целью наименее травматичной и самой безопасной методикой, разработанной на сегодняшний день – лазерной деструкцией.

Удаление папиллом лазером можно производить вне зависимости от локализации дефекта, что особенно важно для глубоких гортанных наростов. При этом процедура совершенно безболезненна для пациента и позволяет специалисту четко регулировать глубину воздействия. Лазерный луч обладает асептическими свойствами и усиливает регенеративные способности слизистой оболочки. Благодаря минимальной, ограниченной зоне воздействия, достигается высокая избирательность и направленность манипуляции.

Однажды ко мне на приём пришла взволнованная молодая девушка. Показав папиллому на шее (размерами 3х3мм), она спросила: "ЭТО выросло за месяц. Доктор, у меня РАК. "
Заказ погребальных венков пришлось отменить, после чего я рассказал ей то, что знал об этих образованиях.

Опасность для здоровья: не представляют.

Что это такое?

Папилломы представляют собой разрастания поверхностного слоя кожи, похожие на сосочки.

Записывайтесь на вебинар "Канцерогены в косметике: правда, ложь и. маркетинг"

Как выглядят?

Характерная особенность - наличие у папилломы "ножки". Это означает, что верхняя часть шире, чем основание. Они имеют мягкую консистенцию, безболезненны и легко смещаются. Чаще всего их можно заметить на коже лица, шеи, подмышечных областей, промежности и под молочными железами.

Почему появляются?

Как и бородавки, папилломы не опасны. Их появление связывают с вирусом папилломы человека (ВПЧ), который передаётся при контакте с носителем. Также возможна передача ВПЧ с поражённого участка кожи на здоровый у одного человека. Увеличивают восприимчивость к вирусным частицам высокая влажность и микротрещины кожи. В связи с этим всегда следует использовать индивидуальные предметы гигиены при посещении бассейнов, саун и душевых.

Важно: большое количество папиллом может говорить о проблемах с иммунитетом. Для женщин в таких случаях необходимо взятие мазка на ВПЧ, так как некоторые его виды могут вызывать рак шейки матки

Как лучше лечить?

Большое количество папиллом, безусловно, доставляет неудобство и выглядит не эстетично. Однако это не повод использовать для удаления нитку, плоскогубцы или паяльную лампу дедовские методы.

Для единичных небольших (1х1 мм) образований подходит сок чистотела - испытанное народное средство. Когда папиллом много или они крупные этот способ не подходит, так как может растянуться на месяцы и привести к выраженному воспалению.

Значительно более удобно и эффективно удаление методом радиоволновой хирургии. Операция не требует специальной подготовки, практически безболезненна, после неё можно управлять автомобилем.

Однажды мне довелось удалить сразу около 70 папиллом у одного пациента. Сложно передать всю радость избавившегося от них человека, которого они мучили несколько лет.

Гистологическое исследование при удалении

Результаты лечения

На фото ниже приведены результаты удаления папиллом шеи методом радиоволновой хирургии

Редко возникают снова. Повторное появление папиллом возможно при высокой активности вируса в организме. В этой ситуации может потребоваться дополнительное лечение иммуномодуляторами или консультация иммунолога.

Другие статьи:

Полезная статья? Сделайте репост в Вашей социальной сети!

Оставьте комментарий или задайте вопрос

Здравствуйте.
Почему небольшие папилломы на теле есть (3 шт.), а анализ на ВПЧ онкогенных типов отрицательный. Везде пишут, что если есть папилломы, значит есть и вирус.

Пост специально для Вас.

Вам стоит более критично подходить к чтению информации в интернете. Источники, у которых не указан автор НЕ заслуживают доверия. Совсем. На них не нужно тратить время.

Записывайтесь на вебинар "Канцерогены в косметике: правда, ложь и. маркетинг"

Принято считать, что около 93% населения земного шара являются носителями вируса папилломы человека. Однако лишь у небольшой части людей заболевание проявляется появлением папиллом. Сегодня мы поговорим о том, как можно лечить папилломы и что можно сделать если они появились вновь после удаления.

Как на самом деле они выглядят?

Очень часто пациенты, которые приходят ко мне на приём, просят удалить им папиллому или несколько и указывают на пигментный невус, фибропапиллому или бородавку. Один раз в качестве папилломы для удаления мне предложили клеща (не шучу):

Считаю необходимым чётко обозначить, что такое папиллома и чем она отличается от остальных кожных новообразований. Чаще всего это небольшое, размерами 1-3 мм кожное образование на тонкой ножке. Основных отличий папилломы от остальных образований кожи три. Первое - ножка всегда тоньше, чем верхняя часть. Второе - консистенция папилломы всегда мягче окружающей кожи. Третье - размер папилломы, как правило, небольшой - не более 5 мм. На фотографии ниже - типичная папиллома.

Как избавиться от папиллом?

Существует всего два основных метода лечения папиллом

Наиболее простым и эффективным методом лечения является удаление папиллом различными методами (лазер, радиоволновая хирургия, электрокоагуляция и т.п.). В большинстве случае однократного полного удаления папиллом со всего тела бывает достаточно. Более подробно о том, как папилломы удаляются методом радиоволновой хирургии в нашей клинике, я расскажу чуть ниже.
Очень популярным методом в последнее время стало удаление папиллом в домашних условиях. Чаще всего, это происходит с помощью двух видов препаратов - растворы кислот с названием вроде "Супер чистотел" и смесь диметилового эфира и пропана (популярный препарат "Криофарма"). Ничего не могу сказать об эффективности этих двух способов, т.к. никогда не удалял папилломы таким образом.

ВАЖНО. Пожалуйста, не ставьте себе диагноз "папиллома" самостоятельно на основании изучения интернета. Перед применением указанных выше препаратов всегда стоит показаться онкологу и убедиться, что то, что Вы собираетесь удалить в домашних условиях - действительно папиллома. Если диагноз поставлен не верно и на пигментный невус будет нанесена любая из этих жидкостей - последствия могут быть крайне печальными .

Если папилломы появились вновь после удаления?

К сожалению, ни один из перечисленных выше методов не даёт 100% гарантии исчезновения папиллом. В очень редких случаях, даже при удалении у квалифицированного доктора они могут появиться снова. Если это произошло в течение короткого срока (полгода или несколько месяцев) нужно проверить состояние иммунитета - проконсультироваться с иммунологом. Как правило в таких ситуациях назначаются иммуномодуляторы, которые помогут организму бороться с вирусом папилломы человека.

Как проходит удаление папиллом?

В нашей клинике удаление папиллом производится методом радиоволновой хирургии.
Просто посмотрите это короткое видео и многие вопросы отпадут сами собой.

Папиллома фиксируется специальным пинцетом, после чего инструментом в виде петли отсекается от кожи у основания. В момент соприкосновения с кожей на конце инструмента концентрируется радиоволна высокой частоты, которая испаряет клетки папилломы и одновременно "склеивает" кровеносные сосуды. Как правило обезболивание при такой процедуре не требуется - болезненные ощущения сравнимы с эпиляцией пинцетом. В редких случаях производится обезболивание кремом ЭМЛА.

Коротко о главном:

Если Вы решили избавиться от папиллом - есть 2 способа:
Первый - удалить папилломы в клинике, желательно у онколога. Плюсы этого метода очевидны - максимальная эффективность и безопасность.
Второй способ - удаление в домашних условиях с помощью препаратов, которые можно купить в аптеках. Преимуществом этого метода является невысокая стоимость, однако для безопасного удаления я рекомендую предварительно проконсультироваться с врачом-онкологом.
Если лечение папиллом ни одним из указанных способов не эффективно - стоит проверить иммунитет. Для этого лучше проконсультироваться у иммунолога.

Решили расстаться с Вашими папилломами? Это можно сделать по адресам в Санкт-Петербурге (Асафьева 7/1)

Другие статьи:

Полезная статья? Сделайте репост в Вашей социальной сети!

Оставьте комментарий или задайте вопрос

Записывайтесь на вебинар "Канцерогены в косметике: правда, ложь и. маркетинг"

Папилломы: причины появления, опасность и способы лечения

Папиллома образуется при разрастании верхнего слоя кожи – эпидермиса. Она выглядит как вырост кожи размером от 1 до 5-7 миллиметров, реже до 2 сантиметров. Форма варьирует от точечного или немного свисающего выроста кожи до горошины.

Цвет папилломы чаще светло-бежевый, в тон кожи. Но известны и белая, и тёмно-коричневая папилломы. Локализуются папилломы на коже лица, шеи, живота и спины, в подмышечных впадинах, на слизистой оболочке полости рта, гортани, трахеи.

Разрастание папиллом на ограниченном участке кожи называют папилломатоз, он выглядит как белые бляшки в форме цветной капусты, располагается преимущественно на слизистой оболочке полости рта у пожилых людей.

Почему появляются папилломы

Заражение вирусом папилломы человека происходит при бытовом или половом контакте с носителями вируса. Заболевают не все контактирующие. После полового контакта вероятность заражения составляет около 70% процентов, при бытовом – меньше.

Для женщин заражение штаммом ВПЧ высоко онкогенного риска опасно развитием рака шейки матки. Если данный штамм вируса обнаружен, рекомендуют регулярно посещать гинеколога для контрольных осмотров. Если заражения нет, можно сделать прививку от рака шейки матки. Вакцину вводят девочкам с 9 лет и взрослым женщинам трижды.

Папилломы усиленно растут при снижении иммунитета – после длительных болезней, на фоне постоянного переутомления и недосыпания, при приёме лекарств, снижающих защитные силы. Изменение гормонального фона при беременности и естественное снижение иммунитета у беременной женщины, часто приводит к усиленному росту папиллом в этот период.

Для папиллом характерен медленный темп роста, однако при беременности они не только стремительно увеличиваются в размерах, но и появляются новые элементы.

В чем опасность папиллом?

Папилломы причиняют психологический дискомфорт, это косметический дефект, который изменяет внешность в худшую сторону.
Длительно существующая на теле папиллома может перерождаться в злокачественную опухоль, если ВПЧ относится к онкогенному штамму.
Появление папиллом в местах трения одежды приводит к их надрыву и кровотечениям или воспалению окружающих тканей.
Разрастание папиллом в гортани проявляется осиплостью голоса, затруднением дыхания.

Как вылечить папиллому

Папилломы, которые часто травмируются одеждой, кровоточат или воспаляются, нужно удалять обязательно!

Появление папилломы или её усиленный рост – это сигнал о необходимости обратиться к врачу для получения консультации и принятия решения о методе лечения.

Удаление папиллом на коже проводится хирургами в хирургическом стационаре следующими методами:

аппаратом Сургитрон (радионож, радиоволновое удаление),
скальпелем, .

Если на коже у пациента не папиллома, а невус, его удаляет врач-онколог.

Папилломы на женских половых органах называются кондиломы, их удаляют гинекологи.

Как охотники готовятся к охоте — изучают следы, устанавливают кормушки, размещают загонщиков, ставят стрелков на линию огня, выпускают собак — так же и иммунологи, чтобы избавить организм от вируса, поэтапно готовят и направляют процесс активации иммунной системы. Первое действие — определить мишень.

Мишень — белок вируса

Вирус папилломы, попав в клетки кожи, проявляет себя как двуликий Янус. Его геном может находиться в двух формах: или встроиться в хромосому клетки, или существовать в виде свободной молекулы — ДНК-эписомы. Если он встроился в клеточную хромосому, то при наличии предрасполагающих факторов происходит реализация программы его генома и вирус начинает размножаться. Пораженный участок превращается в папиллому, или бородавку. Причем порой это случается не на руке или ноге, а на слизистой оболочке в самых интимных местах человеческого тела. И если вирус принадлежит к особому подтипу, то лет через десять пораженные клетки, возможно, трансформируются в раковую опухоль.

Для своей успешной жизни вирус должен заставить клетку синтезировать несколько полезных ему белков. В частности, вирусу папилломы нужен белок L1, который идет на строительство оболочки новых вирусных частиц, а также белки Е6 и Е7 — они делают зараженную клетку бессмертной, это онкогенные белки.

Бороться с вирусом можно несколькими принципиально разными способами. Первый — запретить ему связываться с клетками-мишенями, второй — не дать ему в них размножаться, третий — уничтожать больные клетки вместе с вирусом. Поскольку в случае с вирусом папилломы больные клетки не содержат его в традиционном понимании — ведь после попадания в клетку от него остается одна ДНК, которая и задает синтез тех самых опасных белков, — запретить размножение нельзя. Поэтому в руках медиков остаются первый и третий способы, то есть профилактическая вакцина и терапевтическая. Недавно появился еще один — применение коротких, так называемых молчащих РНК, которые принуждают замолкнуть вирусные гены. Но движение по этому пути еще в самом начале.

Ситуация осложняется тем, что у каждого вида млекопитающих имеются свои вирусы папилломы, которые не живут в тканях других видов, а в культуре клеток вирус человека размножается чрезвычайно неохотно. В результате поиск вакцины приходится вести на мышах, а потом надеяться, что эти результаты удастся воспроизвести при испытаниях с участием добровольцев.

Большим успехом в борьбе с вирусом папилломы оказалось открытие в 1991 году интересного феномена, сделанное Чжоу Цзянем и Яном Фрэйзером, работавшими в брисбенском госпитале им. принцессы Александры, Австралия (Яна Фрэйзера в ноябре 2008 года наградили за эту работу итало-швейцарской премией фонда Бальцана в размере 1 млн швейцарских франков. — Примеч. ред.). Они обнаружили, что белки L1 самопроизвольно собираются в вирусоподобные частицы (ВПЧ) даже если внутри них нет никакого генетического материала. Такие белки очень просто и в больших количествах можно синтезировать с помощью дрожжей, встроив в них нужный ген. Из дрожжей они выходят уже в виде готовых частиц, причем их иммунногенные свойства такие же, как и у настоящего вируса. Если ВПЧ ввести в организм, то в нем начнут вырабатываться защитные антитела. Во многих экспериментах такая защита доказала свою надежность, и спустя одиннадцать лет после открытия большой эксперимент с участием 1533 добровольцев показал, что подобная вакцина от вируса папилломы человека подтипа 16 (HPV16), во-первых, вполне безопасна, а во-вторых, обеспечивает полную защиту организма. Этот результат важен еще потому, что именно на подтипы 16 вместе с 18, 31 и 45 приходится 80% всех случаев опухолевого перерождения пораженной вирусом ткани, прежде всего рака шейки матки. За оставшиеся 20% ответственны еще 13 разновидностей этого вируса. За шесть лет, прошедшие с начала эксперимента с участием добровольцев, действие вакцины не ослабло — ни одного случая заражения вирусом среди них зафиксировано не было.

Пептидные пули

Однако это все — профилактические вакцины, причем пока неизвестно, сколь быстро иммунная система забудет о той информации, которую она получила в момент прививки. Поэтому огромный интерес вызывает терапевтическая вакцина, которая уничтожает уже зараженные клетки.

Для ее создания иммунологи надеются использовать столь яркий след вируса, как те самые два белка, Е6 и Е7. Они обязательно должны быть на поверхности заболевших клеток, и, стало быть, задача состоит в том, чтобы научить клетки-киллеры находить эти следы.

Многие лаборатории в мире соревнуются на этом поприще, ведь цена победы очень велика. Для возбуждения иммунного ответа применяют и сами Е-белки, и их пептидные фрагменты (Т-эпитопы), и химерные конструкции из Е- и L-белков. (Напомним, что вещества, которые возбуждают иммунный ответ, называются антигенами.) Для усиления ответа в вакцину добавляют цитокины, белки теплового шока и другие стимулирующие элементы.

Непременный компонент вакцины — вектор, который обеспечивают доставку антигенов — Е-белков или их пептидных фрагментов — в специальные клетки иммунной системы (макрофаги, дендритные клетки), после чего те начинают вырабатывать особые белки цитокины и давать инструкции клеткам-киллерам, что им, собственно, надо уничтожать. Векторами для антигенов папилломавируса в разных опытах служили вирус осповакцины, аденовирус, альфавирус, бактерии. Надо отметить, что дендритные клетки — самые активные партнеры для возбуждения сильного иммунного ответа, поэтому желательно, чтобы антигены попадали именно в них.

Вот почему большое внимание уделяют химерным конструкциям на основе белков теплового шока, то есть содержащим и Е-белок, и белок-усилитель иммунного ответа. Белок теплового шока имеет сродство к дендритным клеткам. Именно таким методом в модельных экспериментах удалось уже при однократной иммунизации зафиксировать уменьшение размера опухоли. Сейчас несколько кандидатов в терапевтические вакцины находятся на различных проверочных стадиях, но в отличие от профилактических вакцин пока ни одна из них не дала приемлемой эффективности. Возникает мысль, что успеха можно достичь, совершенствуя все части вакцины: пептидные фрагменты, которые наиболее правильно повторяют Т-эпитопы Е-белка, вектор для направленной доставки вакцины в дендритную клетку, стимулятор иммунного ответа, а также носитель вакцины, на котором все это держится.

Параллельно в ГОСНИИГенетики был налажен синтез в дрожжах белков L1 трех типов (с одним из них была проблема), который собирался в правильные вирусоподобные частицы и правильно реагировал с антипептидными антителами и референс-моноклональными антителами.

Ответы на разные пептиды сильно отличались, и эти эксперименты позволили выявить наиболее эффективные фрагменты как белка L1, так и Е7. Окончательная проверка показала, что если в качестве носителя-адъюванта к этим пептидам использовать гемоцианин улитки или специальный иммуностимулятор ПМ, то реакция иммунной системы будет наиболее сильной. Самое главное, что при этом вырабатывается сильный иммунный ответ к L1, а также активируются популяции специфических клеток-киллеров, так называемые цитотоксические Т-клетки CD8 + . Именно они должны уничтожать зараженные клетки. Фактически, полученные данные дают основание считать, что нам удалось создать отдельные компоненты прототипа комбинированной вакцины, профилактической и терапевтической. Пока это еще не вакцина, препарат надо испытывать на приемлемой биологической модели, например на мышах с перевиваемой опухолью, вызываемой онкогенным белком Е7. Причем полученные вакцинные препараты скорее ориентированы на профилактику, поскольку уже доказано, что белок L1 генерирует сильный защитный ответ даже в отсутствие адъюванта.

Пептиды — слабые иммуногены, в этом мы убедились, сделав конъюгат одного пептида из белка Е7 со стандартным адъювантом Фрейнда. Активировать Т-клетки таким путем непросто, и, вероятно, нужно менять тактику. Прежде всего для этого требуется обеспечить целевую доставку пептидных антигенов из Е-белка в дендритные клетки, чтобы достичь специфической и сильной активации киллерных CD8 + лимфоцитов.

И тогда мы решили применить новый подход: использовать как усилитель доставки фуллерены, высокая клеточно-проникающая способность которых хорошо известна, и добавить вектор, который бы направлял их в дендритные клетки. Для этого пришлось заняться работой, не имеющей прямого отношения к созданию вакцины: определить иммуногенность фуллерена и их производных с аминокислотами и пептидами, а также их способность проникать внутрь клеток. И здесь мы получили очень интересные результаты.

Фуллерен и жизнь

Проблема токсичности фуллеренов и прочих наночастиц давно уже стала весьма актуальной. Сразу же за открытием фуллеренов среди ученых распространилась идея, что эти молекулы могут пригодиться в качестве средства для транспортировки лекарственных препаратов. Сейчас синтезированы сотни соединений фуллеренов, многие из них проявляют биологическую активность, однако до создания коммерческих препаратов дело не дошло. Возможно, потому, что у них нет особых преимуществ по сравнению с нефуллереновыми аналогами, а возможно — из-за недостаточно глубокого понимания механизмов метаболизма фуллеренов и их взаимодействия с живыми клетками.

Однако из-за развития нанотехнологий практически неизбежно возникают условия для загрязнения окружающей среды этими весьма стойкими соединениями, масштаб производства которых возрастает. Пора решать вопрос об опасности или безопасности фуллеренов в том числе и об иммунологической безопасности. Прежде всего речь идет о способности фуллеренов вызывать иммунный ответ, например аллергию.

Безразличный фуллерен

В своих опытах мы использовали кристаллический фуллерен, называемый фуллеритом, наносуспензию гидратированого фуллерена Андриевского, а также соединения фуллерена со всевозможными аминокислотами, пептидами и белками. При этом аминокислоты присоединялись непосредственно к шарику фуллерена. Способ получения таких производных разработали еще в 1994 году в ИНЭОС РАН им. А. Н. Несмеянова. Там же в содружестве с Институтом проблем химической физики РАН был создан еще один функциональный фуллерен, который очень быстро пришивается к пептидам и белкам, содержащим аминокислоту цистеин. Для чего нужно было получать столь сложные соединения?

Дело в том, что еще 12 лет назад мы уже пытались вызвать у мышей специфический иммунный ответ на чистые фуллерены и их аминокислотные производные и нисколько не преуспели в этом деле. Однако в 1998 году появились сведения, что одной американской группе удалось-таки добиться иммунного ответа на фуллерен в присутствии сильного иммуностимулятора. В своих опытах мы как раз и хотели проверить этот результат, а в качестве иммуностимуляторов взяли известные аллергены вроде яичного и сывороточного альбумина. Однако результат оказался тем же: никакого специфического ответа на собственно фуллерен замечено не было. Зато мы обнаружили хорошо выраженную реакцию на аминокислоты, пришитые к фуллерену. (На чистые аминокислоты ответ вообще не развивается, организм к ним толерантен.)

Отсутствие иммунной реакции на фуллерен можно объяснить следующим образом. Теоретически в водной среде молекулы гидрофобного фуллерена не могут существовать в одиночном состоянии, а собираются в кластеры из десятков, а то и сотен молекул. Попав в живой организм, эти кластеры должны взаимодействовать с гидрофобными компонентами среды и электронодонорными молекулами — белками, жирами или аминами. В результате углеродная сфера может быть полностью закрыта этими молекулами, и тогда она не способна связываться с рецептором В-лимфоцита, который дает сигнал на развитие иммунного ответа. Впрочем, само по себе наличие у В-клеток специфического рецептора на фуллерен вызывает серьезные сомнения. Фуллерены как искусственные молекулы получены совсем недавно, в 1991 году, и в процессе эволюции организмы с ним не могли контактировать, следовательно, вряд ли существуют клеточные клоны, распознающие такие молекулы. Как показали работы по созданию углеродных эндопротезов еще в 1979 году, антитела к другим формам углерода — графиту и алмазу получить невозможно. Хотя известен такой фермент, как протеаза ВИЧ, чей активный центр имеет гидрофобную полость: фуллерен (с гидрофильной подвеской) хорошо ее заполняет и тем самым блокирует активность вируса. Но рецепторы на В-лимфоците для улавливания чужеземцев располагаются снаружи, то есть обращены в водную среду, имеют гидрофильную природу и вряд ли будут захватывать фуллерен.

Как нож в масло

Если фуллерен не вызывает иммунного ответа, то может ли он как-то повредить клетку? Ответ на этот вопрос дает серия опытов, проведенная нами с эритроцитами, тромбоцитами человека и симбиосомами — продуктами симбиоза бобовых растений с азотфиксирующими бактериями рода Rhizobium. О том, что фуллерен проник внутрь симбиосомы можно судить по заряду ее мембраны. В присутствии АТФ и ионов магния она способны генерировать на внутренней стороне своей мембраны положительный заряд. Фуллерены с пришитыми аминокислотами пролином или аминокапоновой кислотой — отрицательно заряжены. Попав внутрь симбиосомы, они нейтрализуют заряд на мембране, что можно зафиксировать спектральными методами, используя специальные зонды. Как оказалось, процесс этот весьма быстрый: при добавлении раствора с производными фуллерена, мембрана клетки моментально теряла накопленный ею потенциал.

Фуллерен с другой кислотой, аргинином, наоборот, приобретает положительный заряд, и поэтому его влияние на симбиосому заметить не удалось. Зато оно проявилось на эритроцитах, мембрану которых заряжали отрицательно с помощью валиномицина (из клетки при этом выходит K + ): при добавлении C₆₀-Arg происходила быстрая разрядка потенциала.

Изменение потенциала мембраны оказалось не единственным эффектом. Есть такой флуоресцентный краситель — акридин оранжевый. Он меняет свое свечение при изменении кислотности среды. С его помощью удалось дополнительно подтвердить, что аминокислотные производные фуллеренов в самом деле легко проникают внутрь клеток и меняют кислотность среды.

Мы подтвердили также, что фуллерены легко проникают в разные типы клеток. Например, в тромбоцитах много кальция, поэтому изучать транспорт фуллерена можно с помощью другого красителя, хлортетрациклина, свечение которого зависит от концентрации ионов кальция: если фуллерен с ним взаимодействует, то гасит это свечение. Так оно и вышло: при добавлении к тромбоцитам, нагруженным хлортетрациклином, фуллеренов, в том числе и фуллерена Андриевского, наблюдалось тушение флуоресценции. Правда, оказалось, что фуллерен Андриевского входит в клетку в сто раз медленнее, чем с аминокислотными производными.

Итак, установлено, что фуллерен благодаря своей гидрофобности достаточно свободно проходит сквозь липидную мембрану клетки. Отсюда появляется идея, которая уже у многих на слуху: фуллерен с закрепленным пептидом может протащить его внутрь клетки. А это значит: он может служить отличным средством доставки пептидов в дендритные клетки иммунной системы.

Чтобы проверить этот предположение, мы, во-первых, присоединили к фуллерену найденные на предыдущем этапе пептиды белка Е7, вызывающие наибольший иммунный ответ. Во-вторых, синтезировали носитель для вакцины на основе сополимера винилпирролидона и малеинового ангидрида, к которому были присоединены цепочки жирных кислот. К этим гидрофобным хвостам за счет ван-дер-ваальсовых связей и цеплялись молекулы фуллеренов с пептидами. Результат оказался очень неплохим уже в первом эксперименте. Препарат действительно вел себя, как и положено терапевтической вакцине, генерировал специфические Т-клетки и антитела. Но пока что нам не удалось детально проследить механизм его действия. К сожалению, из-за прекращения финансирования эту работу пришлось прервать. Хотя мы и не теряем надежды на продолжение, но время упущено, а зарубежные исследователи не стоят на месте.

Читайте также: