Как расшифровать количественный показатель гепатита в

Обновлено: 24.04.2024

Исследование для выявления возбудителя гепатита B (HBV), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется наличие генетического материала (ДНК) вируса и его количество (вирусная нагрузка) в образце крови.

ДНК HBV может быть обнаружена в концентрации, находящейся за нижней границей линейного диапазона концентраций. Линейный диапазон концентраций – это диапазон, в котором можно точно посчитать количество копий возбудителя. Для данного анализа линейный диапазон концентраций ДНК HBV, определяемых детектирующим амплификатором, составляет 7,5×10 2 – 1,0×10 8 копий/мл образца.

Синонимы русские

Вирус гепатита В (ВГВ), количественное определение ДНК.

Синонимы английские

Hepatitis B Virus DNA, Quantitative, Real-Time PCR, Blood; HBV Viral Load; Hepatitis B Virus DNA Quant.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Единицы измерения

Копия/мл (копия на миллилитр).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до сдачи крови.

Общая информация об исследовании

Вирусный гепатит В (ВГВ) – инфекционное заболевание печени, вызванное ДНК-содержащим вирусом гепатита В (HBV). Среди всех причин развития острого гепатита и хронической вирусной инфекции вирус гепатита В считается одной из самых распространенных в мире. Действительное количество инфицированных неизвестно, так как у многих людей инфекция протекает без специфических симптомов и за медицинской помощью они не обращаются. Нередко вирус обнаруживают при проведении профилактических лабораторных исследований. По приблизительным подсчетам, в мире около 350 миллионов человек поражено вирусом гепатита В и ежегодно от его последствий умирает 620 тысяч. В России количество носителей HBV превышает 5 миллионов человек.

Источник инфекции – больной ВГВ или бессимптомный вирусоноситель. HBV передается с кровью и другими биологическими жидкостями. Заразиться можно при незащищенном половом контакте, использовании нестерильных шприцев, переливании крови и пересадке донорских органов, ребенка может заразить мать во время или после родов (через трещины в сосках). В группу риска входят: медицинские работники, у которых возможен контакт с кровью пациента, пациенты, получающие гемодиализ, инъекционные наркоманы, люди, ведущие беспорядочную половую жизнь, дети, рожденные от матерей с ВГВ.

Инкубационный период заболевания – от 4 недель до 6 месяцев. Вирусный гепатит В может протекать как в виде легких форм, длящихся несколько недель, так и в виде многолетней хронической инфекции. Основные признаки гепатита: желтушность кожных покровов, лихорадка, тошнота, утомляемость, в лабораторных анализах – нарушения функции печени и специфические антигены вируса гепатита В. Острое заболевание может быстро приводить к летальному исходу, переходить в хроническую инфекцию или заканчиваться полным выздоровлением. Считается, что после перенесенного ВГВ формируется стойкий иммунитет. Хронический вирусный гепатит В связан с развитием цирроза и рака печени.

Есть несколько специфических тестов для выявления существующего или перенесенного вирусного гепатита В. Для подтверждения наличия инфекции и уточнения периода заболевания используют определение антигенов вируса, антител к ним и ДНК вируса.

Полимеразная цепная реакция отличается высокой чувствительностью и специфичностью. Методом ПЦР можно определить ДНК вируса качественно или количественно. Благодаря качественному методу подтверждается присутствие вируса гепатита В в организме и его активное размножение. Количественное определение вирусной нагрузки позволяет оценить интенсивность развития болезни, эффективность проводимой терапии или развитие устойчивости к противовирусным препаратам.

Существует зависимость между концентрацией вируса в крови и исходом острого вирусного гепатита В. При низком уровне виремии вероятность перехода инфекции в хроническую форму близка к нулю, а инфицированный человек неопасен для окружающих. При высокой вирусной нагрузке ( 5 копий/мл) хронизация возникает часто и больной является потенциальным источником инфекции. Доказана связь между количеством ДНК вируса в сыворотке крови, присутствием HBeAg, повышенной АЛТ и развитием цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы (рака печени).

Эффективность противовирусной терапии оценивается по уменьшению количества ДНК вируса в крови. Через 3-6 месяцев после начала лечения вирусная нагрузка при адекватном терапевтическом ответе должна уменьшиться на 1-2 порядка. Отсутствие уменьшения количества вируса или его увеличение на фоне проводимого лечения требует пересмотра и изменения терапии.

Количественное определение ДНК вируса гепатита В совместно с клинической картиной заболевания и биохимическими показателями, маркерами инфекции, а также результатом пункционной биопсии печени позволяет дать прогноз заболевания и оценить необходимость противовирусной терапии.

Для чего используется исследование?

  • Для прогнозирования течения вирусного гепатита В.
  • Для подтверждения хронической формы вирусного гепатита В.
  • Для выявления носителей вирусного гепатита В и мониторинга активности размножения вируса.
  • Для выявления скрытых и мутантных штаммов вируса гепатита В.
  • Для оценки эффективности противовирусной терапии гепатита В и принятия решения о дальнейшей тактике лечения.

Когда назначается исследование?

  • При качественном обнаружении ДНК вируса гепатита В.
  • При остром и хроническом вирусном гепатите В.
  • При микст-гепатитах.
  • До и во время противовирусной терапии.

Что означают результаты?

Линейный диапазон концентраций ДНК вируса гепатита В, определяемых детектирующим амплификатором, составляет 7,5*10^2 – 1,0*10^8 копий/мл (3.6*10^2 – 4,8*10^7 МЕ/мл).

Что может влиять на результат?

Важные замечания

  • Количественное определение ДНК вируса гепатита В является обязательным исследованием до назначения противовирусной терапии. Во время курса лечения анализ необходимо повторить через 3-6 месяцев.
  • Вирусный гепатит В нередко сочетается с вирусным гепатитом D.

Также рекомендуется

Кто назначает исследование?

Литература

  1. Возианова Ж.И. Инфекционные и паразитарные болезни: В 3х т. — К.: Здоровье, 2000 – Т.1.: 601-654.
  2. Chan Henry Lik-Yuen, Wong May Ling, and others. Use of Hepatitis B Virus DNA Quantitation To Predict Hepatitis Be Antigen Reversion in Cases of Chronic Hepatitis B. J Clin Microbiol. 2003 October; 41(10): 4793–4795. PMCID: PMC294957
  3. Harrison’s Principles of Internal Medicine. 16 th ed. NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.
  4. Management of Hepatitis B. An NIH Consensus Development Conference. Program and Abstracts. October 20–22, 2008.

Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.

Определение

Хронический гепатит В – хроническое заболевание печени, продолжающееся более 6 месяцев, в основе которого лежит инфицирование и поражение печени вирусом гепатита В (HBV), проявляющееся воспалительными, некротическими и фибротическими изменениями печеночной ткани различной степени тяжести.

Острый гепатит В – острое инфекционное заболевание, вызываемое вирусом гепатита В (HBV). Характеризуется острым поражением печени и интоксикацией (с желтухой (35%) или без нее (65%)) и протекает с выраженным многообразием клинических проявлений и исходов: от выздоровления (около 90% пациентов) до развития хронического гепатита В, цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы (печеночно-клеточного рака).

Гепатит B относится к заболеваниям, представляющим потенциальную угрозу для жизни, и является одной из основных проблем здравоохранения во всем мире.

Причины появления вирусного гепатита В

Заболевание имеет преимущественно парентеральный механизм передачи, то есть возбудитель попадает непосредственно в кровь: например, во время переливания крови, инвазивных исследований, оперативных вмешательств, гемодиализа и т.д.

В последние годы врачи констатируют увеличение полового пути передачи вируса. У 25% пациентов не удается установить источник заражения.

Пути заражения гепатитом.jpg

В группу риска входят гомосексуалисты, медицинские работники, члены семьи носителя HBV, пациенты с хроническими заболеваниями кожи. При развитии острого гепатита В в первом и втором триместрах беременности вероятность заражения плода небольшая, в третьем триместре инфицирование почти закономерно (вертикальный путь заражения).

Возбудитель заболевания - вирус из семейства гепаднавирусов, содержащий ДНК. Структура вируса:

  • ядерный антиген (НВсАg);
  • антиген инфекционности (НВеАg);
  • поверхностный антиген (HBsAg);
  • поверхностные белки для связывания с рецепторами гепатоцита (preS1-Ag и preS2-Ag);
  • Х-антиген (НВхАg), регуляторный белок, усиливающий синтез вирусных белков.

Есть предположение, что именно он ответственен за канцерогенез и развитие гепатоцеллюлярной карциномы;

  • вирусный гепатит В легкой степени;
  • вирусный гепатит В средней степени тяжести;
  • вирусный гепатит В тяжелый.
  • острый (молниеносный) гепатит;
  • хронический гепатит.

Инкубационный период

Продолжительность периода составляет в среднем от 30 до 180 дней. В течение этого времени пациент может предъявлять жалобы на головную боль, тошноту, хроническую усталость, ухудшение памяти и снижение аппетита. В некоторых случаях наблюдается вечернее незначительное повышение температуры тела.

Для этого периода развития заболевания характерны появление рвоты, изжоги, отрыжки, вздутие живота, боли в суставах и в мышцах, температура тела может повышаться до 38,00С.

Наблюдаются кожный зуд, желтуха, кровоизлияния на коже и кровоточивость десен, потемнение мочи и обесцвечивание кала, увеличивается печень, нарушается сон, пациент испытывает сильные головные боли, снижается артериальное давление, учащается сердцебиение, наблюдаются отеки ног.

При переходе гепатита в хроническую форму симптоматические проявления уменьшаются и наступает период ремиссии. Однако каждое новое обострение вирусного гепатита В протекает тяжелее предыдущего, что связано с разрушением ткани печени, которое постепенно приводит к развитию цирроза и печеночной недостаточности.

Переход гепатита В в цирроз

Для этой стадии характерно расстройство психики, наблюдаются кровотечения в области пищевода, желудка и прямой кишки, развивается асцит (в брюшной полости присутствует свободная жидкость), кожа становится бледной, печень уменьшается и становится плотной.

Диагностика

Лабораторные методы исследования – это первый этап диагностики заболевания.

В общем анализе крови может наблюдаться повышение лейкоцитов (более 9-11*109/л), сдвиг лейкоцитарной формулы влево и увеличение СОЭ (скорости оседания эритроцитов) более 30-40 мм/ч.

Синонимы: Общий анализ крови, ОАК. Full blood count, FBC, Complete blood count (CBC) with differential white blood cell count (CBC with diff), Hemogram. Краткое описание исследования Клинический анализ крови: общий анализ, лейкоформула, СОЭ См. также: Общий анализ – см. тест № 5, Лейкоцит.

Анализы на гепатит Б

Гепатит Б является вирусным заболеванием, которое поражает клетки печени, вызывая в них воспаление. Если не уделять ему должного внимания, то возможно развитие цирроза и рака печени при хронической форме недуга.

Такая опасность вызвана тем, что вирус способен связываться с белками крови, что позволяет ему долго скрываться в организме перед тем, как человек его выявит - можно жить годами с гепатитом Б, не подозревая о его присутствии.

Избежать заражения вирусом помогает вакцинирование, которое стимулирует организм создать антитела к вирусу.

Однако, тем кто его не сделал, рекомендуется регулярно проходит обследование на предмет наличия в крови антигенов гепатита.

Для этого нужно сдать анализы. О том какие существуют исследования, как правильно подготовиться к сдаче крови, а также о стоимости расшифровки результатов мы подробно и расскажем в нашей статье.

Какие анализы сдают на проверку на гепатит Б

Антитела призваны для защиты организма от антигенов вируса

Антитела призваны для защиты организма от антигенов вируса

В первую очередь при проверке на данный недуг проводят качественный, а также количественный анализы на присутствие антигенов и антител в крови.

Для определения ДНК вируса в целях установления его генотипа, проводят генотипирование. Такой метод выявления заболевания считается более точным, но и стоит он дороже.

Расшифровка анализов

По срокам расшифровки можно утверждать, что в современном медицинском центре вы сможете получить результаты уже на следующий день и следовать к врачу для передачи итогов диагностики. Задержка может произойти только в том случае, если присутствует большое количество пациентов тоже проходящих исследование либо же работа лаборатории налажена каким-то другим образом. В любом случае после сдачи крови вам сообщат когда приходить за результатами.

Расшифровка проводится после обследования на наличие маркеров гепатита Б, которыми является наличие или отсутствие антигенов, а также антител к вирусу в крови.

HBsAg

Показывает наличие антигена вируса гепатита Б, может быть как качественным, так и количественным. Гранью является значение 0,5 МЕ/мл. Если результат меньше, то это свидетельствует про отсутствие вируса в крови (только при негативных результатах всех маркеров гепатита B). Возможно также наличие вируса с низкой способностью к репликации.

Результат больше установленного значения говорит про носительство вируса либо наличие острой или хронической формы гепатита.

HBеAg

Данный антиген устанавливается только качественным способом. Отрицательный результат говорит про отсутствие гепатита (если другие маркеры также отрицательные) либо присутствует вирус в “спящем” состоянии, или с низкой репликативной способностью. Также может свидетельствовать про инкубации вируса или начало периода выздоровления.

Положительный результат говорит про острую или хроническую форму заболевания с высокой интенсивностью в размножении вируса.

Anti-HBcor

Эти антитела могут присутствовать либо отсутствовать. Соответственно, результат будет “положительным” либо “негативным”. Если антитела обнаружены, то это однозначно говорит о присутствии вируса в организме.

В случае их отсутствия, можно утверждать о следующем:

  • вируса гепатита Б в организме нет (если другие маркеры также отсутствуют);
  • возможна острая форма заболевания (в неактивной стадии);
  • нельзя исключать наличие хронической формы развития гепатита.

Anti-Hbe

Аналогично прошлым антителам, в результатах анализов будет значиться присутствие либо отсутствие этого вида белковых соединений.

Если диагностика показала положительное значение, то при острой форме гепатита Б это говорит о начале этапа выздоровления. В другом случае результат указывает на наличие хронической формы заболевания. Не исключается и вариант, что человек является носителем вируса, но он “спит”, симптомы и проявления гепатита отсутствуют.

Если исследования показали негативный результат, то возможно человек ранее никогда не болел этим вида гепатита. Не исключается хроническая форма течения заболевания и наличие антигена HBs.

Anti-HBs

После того как вы сдадите анализ, значение может быть:

В первом случае, говорят, что антигены не найдены. Это означает, что вирус либо не поразил тело либо заболевание носит острый характер (такие случаи бывают в виде исключения).

Второй случай может также означать разное. Если перед сдачей анализов проходила вакцинация, то можно утверждать про ее безуспешность. Такой результат может говорить про острую форму заболевания либо описывать ситуацию, при которой вирус спит и находится в неактивном состоянии.

Также во втором случае возможно наличие хронической формы заболевания с высоким инфекционным эффектом. Нельзя исключать и присутствие в крови антигена с низкой способностью к размножению.

Если третий вариант появился после вакцинации, то это говорит про наличие иммунного ответа и успешности процедуры. При острой форме недуга это показывает фазу выздоровления, а при хронической - низкую инфекционность вируса.

Anti-HBс IgМ

Тест на наличие этих антител может либо положительным, сомнительным либо отрицательным. Первый означает, что пациент болен острой формой заболевания (редко хронической).

Если результат “сомнительный”, то тест нужно повторить через 10-14 дней.

Отрицательный итог говорит про отсутствие вируса, его инкубационный период либо наличие хронической формы недуга.

Определение ДНК в крови

Значения выше 40 МЕ/л говорит об инфицировании организма вирусом. Если показатель меньше, то возможны два варианта: гепатит отсутствует либо в образце присутствовало низкое количество молекул вируса, находящееся за порогом точности измерения.

Расшифровку анализов можно сгруппировать в такой таблице

Расшифровку анализов можно сгруппировать в такой таблице

Генотипирование

На сегодншний момент признано наличие как минимум 10 различным генотипов вируса гепатита Б и каждый из них имеет свое географическое распространение. В каждом конкретном случае информацию о генотипе расшифровывает исключительно врач, нет установленных значений.

Интересный факт: эффективность вакцин от гепатита определяют на китайских утках, сурках и сусликах, так как эти животные тоже могут носить в себе гепатит.

В каких случаях нужно сделать анализ?

Сдать указанные выше анализы можно и без присутствия каких-либо симптомов - просто сделать это ради профилактики

Сдать указанные выше анализы можно и без присутствия каких-либо симптомов - просто сделать это ради профилактики

Сдать кровь на анализ может любой желающий, имеющий достаточное количество денег для проведения расшифровки. Обязательно нужно пройти диагностику, если выявлены такие симптомы:

  • хроническая усталость, не хватает сил на повседневные дела, которые раньше делались без труда;
  • блюда, которые раньше были вкусны, больше не вызывают аппетита, чувствуются приступы тошноты и рвоты;
  • кожные покровы или глазной белок вдруг стали отдавать желтым оттенком;
  • присутствуют боли в животе или в правом подреберье;
  • ни с того ни с сего появилась неприятная боль в суставах;
  • повысилась температура, но нет выраженных признаков какого-либо заболевания;
  • произошло потемнение мочи и (или) обесцвечивание кала.

Подготовка к сдаче крови

В данном случае актуальны общие правила для анализов, которые делаются на основании взятой пробы крови:

  • между последним приемом пищи и сдачей крови на анализ должно пройти не менее 8 часов (лучше 12 ч);
  • за 1-2 дня до прохождения обследования нужно отказаться от употребления алкоголя, жирной и жаренной еды;
  • сдавать кровь рекомендуется до 10-11 часов утра;
  • недолжно быть психологических и физических нагрузок накануне посещения медицинского учреждения, а непосредственно перед сдачей крови нужно спокойно посидеть минут 15-20;
  • если пациент принимает лекарственные средства или любые другие препараты, обязательно нужно сообщить доктору перед сдачей анализов;
  • возможны и другие требования в зависимости от лаборатории, в которой больной проходит обследование.

Придерживайтесь этих правил, чтобы результаты были точными и неискаженными

Придерживайтесь этих правил, чтобы результаты были точными и неискаженными

Цены на анализы

Стоимость исследований зависит от оборудования, которое используется в лаборатории, реагентов, популярности и авторитета медицинского учреждения, региона его расположения.

Приведем средние цены для России и Украины:

Вид анализа

Украина, грн.

HBеAg (HBе-антиген вируса гепатита В)

Anti-HBс-total (Антитела классов IgM и IgG к HB-core антигену вируса гепатита B)

Anti-HBс IgМ (Антитела класса IgМ к HB-core-антигену вируса гепатита B)

Anti-HBs (Антитела к HBs-антигену вируса гепатита B)

Anti-HBе (Антитела к HBе-антигену вируса гепатита B)

Вирус гепатита B, определение ДНК (HBV-DNA) кол. в сыворотке крови

Вирус гепатита В, определение ДНК (HBV-DNA) кач. в сыворотке крови

Заключение

Подведем итоги статьи, кратко выделив основные моменты:

  • для диагностики наличия и стадии развития вируса гепатита Б проводят количественные и качественные анализы на присутствие соответствующих антигенов, а также антител.
  • перед сдачей крови необходимо придерживаться правил, которые указаны выше, чтобы результаты были правдивыми и не нужно было приходить на пересдачу;
  • при расшифровке используется сравнения результатов с установленными значениями, а также наличие положительного, сомнительного и негативного результата;
  • поставить правильный диагноз может только специалист, так как набор одних и тех же показателей в разных случаях и стадиях болезни будет иметь разное трактование;
  • дополнительно могут быть назначены анализы для определения степени поражения вирусом гепатита Б печени и организма в целом;
  • стоимость проведения анализов зависит от множества факторов, в том числе реагентов и оборудования, которые доступны лаборатории, авторитета медицинского учреждения и региона его расположения.

Алексей занимается врачебной деятельностью с 1996 года. Проводит терапию всех заболеваний печени, желчного пузыря и желудочно-кишечного тракта в целом. Среди них: гепатит, панкреатит, язва двенадцатиперстной кишки, колит. Другие авторы

-00000nastojka-sofory-japonskoj.jpg

Вирусный гепатит В успешно лечится, если его вовремя обнаружить и правильно определить количество антител и антигенов в крови больного. С помощью иммуноферментного анализа на гепатит можно обнаружить присутствие маркеров вируса, но не могут установить точно стадию процесса.

Для количественной оценки применяют ПЦР диагностику. С помощью теста возможно посчитать количество маркеров, спрогнозировать течение болезни и вероятность излечения при помощи противовирусных препаратов.

Главное преимущество исследования — возможность обнаружить даже минимальные концентрации вируса, идентифицировать возбудителя на видовой стадии.

Диагностика гепатита В

Вирус гепатита В отличается большой контагиозностью и устойчивостью к внешним воздействиям. Он сохраняет активность в следах крови больного до нескольких недель. Поэтому каждый человек подвержен риску заражения даже при условии соблюдения профилактики.

Для диагностики заболевания назначают следующие исследования:

Иммуноферментный анализ крови на наличие антител к ВГВ Это быстрый и информативный тест. Его недостатком является то, что исследование только дает информацию о присутствии антител, но не уточняет их количество.
Биохимический анализ крови При начавшихся изменениях в печени в крови больного будет повышен уровень билирубина, щелочной фосфатазы и снижен уровень печеночных ферментов. Но на начальной стадии показатели будут находиться в пределах нормы.
ПЦР (полимеразная цепная реакция) С ее помощью восстанавливают ДНК вируса, подсчитывают количественные показатели антител, уточняют стадию заболевания. То есть разное количество антител может свидетельствовать об остром этапе или о постпрививочном иммунитете.

Суть ПЦР метода

Американский химик К.Муллис получил Нобелевскую премию, и до сих пор применяется его метод диагностики

Американский химик К.Муллис получил Нобелевскую премию, и до сих пор применяется его метод диагностики

Родоначальником метода ПЦР (полимеразной цепной реакции) считается ученый из Норвегии Х. Клеппе. Он первый стал проводить амплификацию (восстановление) ДНК при помощи короткой цепочки ДНК, то есть синтетического праймера (своеобразной копии).

Однако, ученому не удалось реализовать свою идею. Похожие исследования сделал американский химик К.Муллис, который в 1993 был удостоен Нобелевской премии за свое изобретение. С тех пор ПЦР используют для установления отцовства, диагностики генетических болезней, обнаружения вирусов.

  1. Матричная ДНК с участком, подлежащим копированию.
  2. Праймеры, схожие по строению участку ДНК.
  3. Полимераза, то есть фермент, запускающий реакцию. Она должна быть термостабильной, то есть выдерживать перепады температур.
  4. Раствор с определенными параметрами, обеспечивающий прохождение реакции.

Реакция проводится в несколько этапов:

Денатурация (прогревание) Сначала раствор нагревают, в результате чего цепочки ДНК расходятся.
Стадия отжига Раствор остужают, праймеры связываются с одноцепочечной матрицей.
Этап элонгации Полимераза создает дочернюю цепь ДНК, достраиваются все фрагменты цепочки. Цепочка может расти до пределов, которые задаются количеством реагентов, затем достигает состояния плато.

Для обнаружения гепатита в применяют два типа реакции: количественную и качественную.

Количественный ПЦР

Количественный метод определяет количество генома ВГВ

Количественный метод определяет количество генома ВГВ

Количественный ПЦР предполагает одновременное создание копий фрагментов ДНК и определение количества молекул. Измерение проводится после каждого этапа, то есть в режиме реального времени. Это достигается при помощи флюоресцентных зондов, которые включаются в цепочку молекул и светятся в определенный период исследования.

Данный способ применяют для обнаружения фрагментов ДНК, которые являются маркерами вируса гепатита. С помощью количественного метода удается точно выделить генотип вируса. Другими словами, подсчитывают количество копий генома ВГВ на количество клеток больного.

Количественный анализ дает ответы на следующие вопросы:

  1. С какой интенсивностью прогрессирует болезнь.
  2. Насколько эффективно проводимое лечение.
  3. Развилась ли резистентность к назначенным препаратам.

Также количественное измерение необходимо для диагностики хронической стадии инфекции. Если количество ДНК ниже 100 шт/мл при нормальном уровне трансаминаза, то человек является носителем вируса.

При острой фазе количество антител значительно выше.При антивирусной терапии повышение количества антител свидетельствует о развившейся устойчивости к лекарствам, это является сигналом для корректировки лечения.

Качественный ПЦР

Качественный ПЦР позволяет только установить присутствие возбудителя в крови. Если они отсутствуют, то пациент не заражен, при попадании возбудителя в кровь результат будет положительным.

Однако, с помощью качественной реакции невозможно уточнить геном вируса, этап заболевания. Поэтому для диагностики ВГВ проводят как количественное, так и качественное измерение.

Подготовка к обследованию

Для проведения анализа методом полимеразной реакции необходима венозная кровь. Это необходимо сделать утром на голодный желудок.

Пациенту следует правильно подготовиться к исследованию:

  1. За 10 часов отказаться от пищи, можно пить только чистую воду.
  2. Накануне прекратить прием алкоголя, за 4 часа не курить.
  3. Перед обследованием стоит избегать физических и эмоциональных стрессов.
  4. За 2 суток перестать употреблять лекарства, если это невозможно, то необходимо предупредить лаборанта. Некоторые препараты оказывают влияние на конечный результат.

Интерпретация данных

При количественной реакции оценивают полученные показатели в зависимости от числа копий ДНК

При количественной реакции оценивают полученные показатели в зависимости от числа копий ДНК

Интерпретировать данные качественного измерения несложно. Он дает либо положительный, либо отрицательный ответ.

При количественной реакции оценить полученные показатели можно в зависимости от числа копий ДНК. Единицей измерения является копий/мл.

Расшифровываются данные следующим образом:

  1. Если количество ДНК ВГВ менее 90, то инфекция отсутствует. У пациента развился поствакцинальный иммунитет, либо он излечился от болезни.
  2. При числе копий 2х100 говорят о носительстве вируса.
  3. Количество 2х106 свидетельствует о хронической стадии болезни.
  4. При ДНК более 2х109 пациент болен острой стадией гепатита.

Ошибочные результаты

Преимущества метода диагностики с помощью полимеразных реакцийи заключаются в следующем:

  1. Прямое обнаружение возбудителей. В отличие от него, метод ИФА дает информацию о присутствии антител к вирусу.
  2. Специфичность. То есть копируется именно участок ДНК, который имеется в образце биоматериала.
  3. Повышенная чувствительность. Метод может обнаружить даже единичные фрагменты клеток.
  4. Диагностика болезней в острой и в скрытой стадии. То есть, можно диагностировать болезнь на этапе доклинических проявлений.

У метода есть недостатки, которые приводят к ложным результатам. Самый существенный недостаток — вероятность загрязнения материала. Основным источником загрязнения являются плохо обработанные пробирки, руки лаборанта, реактивы.

В кровь может попасть часть ДНК от предыдущей реакции. Поэтому к лабораториям предъявляются повышенные санитарные требования: раздельные помещения, пластиковые пробирки, обработка лабораторий ультрафиолетом и т. д.

Ложноотрицательные результаты могут быть следствием сниженной чувствительности реакции. Это происходит в следующих ситуациях:

  • пациент принимает лекарственные препараты, например, антикоагулянты;
  • человек перед анализом перенес физическое напряжение (занятия спортом, тяжелая работа);
  • заражение произошло недавно.

Если у пациента есть высокая вероятность инфицирования, а результат исследования отрицательный, ему необходимо повторное обследование.

Заключение

Метод полимеразной цепной реакции является основным и самым информативным для диагностики ВГВ. Он позволяет не просто установить носительство инфекции, но и уточнить этап заболевания, оценить результаты лечения.

Для более точного диагноза применяют качественное и количественное измерение. К недостаткам способа можно отнести вероятность загрязнения, снижение чувствительности и довольно высокую цену.

Для того, чтобы результаты были наиболее достоверными, следует правильно подготовиться к исследованию и проводить его в клинике с соответствующей лицензией и хорошей репутацией.

Смотрите видео о ПЦР:

Светлана Владимировна принимает пациентов с заболеваниями печени и ЖКТ различной степени тяжести. Благодаря ее знаниями в диетологии, на основании диагностики проводит полный комплекс терапии внутрибрюшных органов. Другие авторы

Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.

Напоминаем вам, что самостоятельная интерпретация результатов недопустима, приведенная ниже информация носит исключительно справочный характер

Антитела к вирусу гепатита В: показания к назначению, правила подготовки к сдаче анализа, расшифровка результатов и показатели нормы.

Показания к назначению исследования

Основным показанием к назначению исследования служит гепатит В – инфекционное заболевание, вызываемое ДНК-содержащим вирусом, относящимся к семейству Hepadnaviridae. Вирус гепатита В высококонтагиозен и устойчив к действию факторов окружающей среды.

Источником инфекции являются больные любой формой острого или хронического гепатита, а также вирусоносители. Инкубационный период составляет от 60 до 120 дней.

Непосредственно сам вирус не повреждает клетки печени (гепатоциты). Поражение клеток печени происходит в результате иммунного ответа организма через повреждающее действие Т-лимфоцитов, в меньшей степени за счет образования антител.

Болезнь начинается постепенно и характеризуется наличием у пациента слабости, повышенной утомляемости, редкой головной болью, нарушением сна, снижением аппетита, тошнотой, иногда рвотой, горечью во рту, тяжестью и тупыми болями в правом подреберье. Примерно у 20-30% больных отмечаются боли в крупных суставах, сыпь, реже кожный зуд.

Затем увеличивается печень, появляются темная моча и недостаточно окрашенный кал, желтушность кожных покровов (хотя безжелтушный вариант течения вирусного гепатита В встречается в 20-40 раз чаще желтушного). Период выздоровления может продолжаться до 6 месяцев.

Гепатит В у беременных нередко протекает тяжелее, особенно во второй половине беременности, осложняясь острой печеночной недостаточностью, отслойкой плаценты, гибелью плода и др.

У новорожденных и детей вирусный гепатит, как правило, протекает бессимптомно, без классической желтухи, но в 70-90% случаев переходит в хроническую форму.

Гепатит В у пожилых людей часто имеет тяжелое течение, значительную продолжительность болезни и признаки холестаза (нарушение выработки желчи или ее оттока в двенадцатиперстную кишку с повышением в крови экскретируемых с желчью веществ, появлением кожного зуда, тяжести в правом подреберье, желтушности кожных покровов, потемнение мочи и обесцвечивание кала).

Выделяют острый и хронический гепатит В. Хроническая форма гепатита В диагностируется при обнаружении HBsAg (поверхностного антигена вируса гепатита В) в сыворотке крови в течение 6 и более месяцев.

В структуре вируса выделяют следующие антигенные структуры:

  • поверхностный антиген (HBsAg), входит в состав оболочки вируса, его обнаружение в крови пациента указывает на наличие инфекции;
  • ядерный антиген (HBсAg) – белок внутренней оболочки вируса гепатита В, синтезируется в зараженной клетке, не проникает через клеточную мембрану и поэтому не обнаруживается в сыворотке крови больного человека;
  • HBеAg – входит в состав ядра вируса гепатита В, наличие его в крови указывает на активное размножение вируса;
  • HBхAg –расположен около оболочки вируса, его роль изучается.
  • антитела к HBsAg - анти-HBsAg;
  • антитела к HBсAg обнаруживаются двух видов: анти-HBсAg IgМ и анти-HBсAg IgG;
  • антитела к HBеAg - анти-HBеAg.
  • диагностика вирусного гепатита В (в процессе первичного клинико-лабораторного обследования; перед плановыми хирургическими операциями; беременные женщины в I и III триместрах беременности; реципиенты и доноры крови и ее компонентов, органов и тканей; персонал медицинских организаций; пациенты перед проведением химиотерапии; больные с хроническими заболеваниями, пациенты наркологических и кожно-венерологических диспансеров; персонал учреждений с круглосуточным пребыванием; контактные лица в очагах острого и хронического гепатита В; дети в возрасте до 12 месяцев, рожденные от инфицированных ВГВ матерей; больные с онкологическими заболеваниями, пациенты на гемодиализе, пациенты на лечении иммунодепрессантами и др.);
  • подготовка к вакцинации и оценка иммунитета после вакцинации.

Подготовка к процедуре

  • Рекомендуется сдавать кровь утром с 8 до 11 часов, натощак (не менее 8 часов голода, пить воду можно в обычном режиме).
  • Предварительно проконсультируйтесь с врачом по поводу целесообразности проведения исследования на фоне принимаемых лекарств или возможности отмены приема препарата перед исследованием.
  • Исключить прием алкоголя накануне исследования, не курить в течение 1 часа до исследования.
  • Исключить физические и эмоциональные перегрузки накануне исследования.
  • После прихода в лабораторию отдохнуть 10-20 минут перед взятием крови.
  • Нежелательно сдавать кровь для лабораторного исследования вскоре после физиотерапевтических процедур, инструментального обследования и других медицинских вмешательств.
  • При контроле лабораторных показателей в динамике рекомендуется проводить повторные исследования в одинаковых условиях: в одной лаборатории (тем же методом), сдавать кровь примерно в одинаковое время суток и т. п.

Сроки исполнения

1 рабочий день, исключая день взятия крови.

Что может повлиять на результат

Кроме того, ложноположительный результат может быть у пациентов после переливания крови или компонентов плазмы.

Кровь на анализ берется из вены.

Метод определения: иммуноферментный анализ (ИФА).

Исследуемый материал: сыворотка крови.

Единицы измерения в лаборатории ИНВИТРО: мМЕ/мл.

Анализ крови на антитела к вирусу гепатита В может включать определение следующих показателей:

    Anti-HBs (антитела к HBs-антигену вируса гепатита B);

Серологический маркёр острого процесса. Определяет присутствие антител класса M к HBcoreAg Антитела к HBсore антигену класса М начинают вырабатываться в период первого появления клинических симптомов гепатита В и сохраняются до периода выздоровления. Особенности инфекции. Гепатит B.

Свидетельство перенесённого острого гепатита В, показатель ремиссии. Определяет присутствие антител к HBеAg. Синтез антител к HBeAg в организме начинается после элиминации антигена инфекционности, они свидетельствуют о прекращении репликации (размножения) вируса в организме. К концу 9-й недели .

Определяет присутствие антител к HB-core Ag, независимо от класса M или G. Функции. Антитела к HB-core антигену появляются при остром гепатите В в крови вскоре после появления HBsAg, персистируют после исчезновения HBs-антигена перед появлением анти-HBs-антител и сохраняются длительное время после.

Интерпретация результатов исследования содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т. д.

Нормальные показатели

Для контроля эффективности иммунитета при вакцинации против гепатита В используют количественное определение анти-HBs Ag.

Расшифровка показателей

Антитела к поверхностному антигену вируса гепатита В (Anti-HBs Ag) можно обнаружить в конце острого периода, чаще через 3 месяца от начала инфекции, но иногда и позже (до года). Антитела к поверхностному антигену нейтрализуют вирус, их наличие рассматривают как признак иммунитета.

Anti-HBs Ag выявляются длительное время, могут сохраняться пожизненно и свидетельствуют о наличии инфекции (текущей или перенесенной ранее) или поствакцинальном иммунитете.

При количественном определении анти-HBs Ag:

  • Anti-HBs ниже 10 мМЕ/л - показана вакцинация против гепатита В;
  • Anti-HBs 10-100 мМЕ/л - вакцинацию следует отложить на 1 год;
  • Anti-HBs более 100 мМЕ/л - вакцинация не показана, рекомендовано повторное обследование через 5 лет.

Выявление анти-HBс IgМ свидетельствует об активном размножении вируса, о наличии острой инфекции, особенно при отрицательном результате на HBsAg, в некоторых случаях - о хроническом гепатите В.

Антитела к HBсAg класса IgG появляются в острый период практически одновременно с анти-HBс IgМ, достигают максимальных значений через 5-6 месяцев от момента обнаружения HBsAg и сохраняются на протяжении всей жизни. Анти-HBс IgG - маркер хронической или перенесенной инфекции, вызванной вирусом гепатита В.

Анти-HBе появляются в острый период, сохраняются до 5 лет после перенесенной инфекции и указывают на активное выведение вируса гепатита В из организма и незначительное инфицирование. Их появление считается признаком благоприятного течения болезни, свидетельствуя о снижении скорости размножения вируса.

Отрицательный результат на анти-HBе не исключает наличия острого или хронического гепатита.

График.jpg


Расшифровку результатов лабораторных исследований на антитела к вирусу гепатита В проводят только с учетом выявления других маркеров гепатита. В таблице представлены некоторые критерии лабораторной диагностики нескольких вариантов течения инфекции, вызванной вирусом гепатита В.

Маркер Острый гепатит В Хронический гепатит В Перенесенный гепатит В Носительство гепатита В Иммунитет после вакцинации
HBsAg + + - + -
Anti-HBs Ag - - + - +
анти-HBс Ag IgG + + + + -
анти-HBс Ag IgМ + - - - -
HBеAg +/- +/- - - -
анти-HBеAg -/+ -/+ + - -
ДНК вируса гепатита В + + - +/- -
Активность АЛТ (аланинамино- трансфераза) норма норма норма норма

Дополнительное обследование

При наличии антител к вирусу гепатита В в крови для уточнения диагноза и определения дальнейшей тактики лечения может быть назначено дополнительное обследование:

HBs­антиген вируса гепатита В – основной маркер вируса гепатита В. Синонимы: Анализ крови на австралийский антиген гепатита В; Поверхностный антиген гепатита В. Australia antigen (Au(1)); Australian antigen; Australia-Antigen. Краткое описание исследования HBs¬-антиге.

Читайте также: