Лаборатория биохимии вирусных рнк

Обновлено: 18.04.2024

Согласно эпидемиологическим данным Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), на 2017 год в мире насчитывается около 150 миллионов человек, которые были инфицированы вирусом гепатита С. Гепатит С — это опасное вирусное заболевание печени. Этот вирус может приводить к развитию как острой, так и хронической формы гепатита, которая варьируется по тяжести – от легкой болезни, продолжающейся несколько недель, до серьезной пожизненной болезни. При своевременной диагностике и правильно подобранном лечении данная патология полностью излечима, особенно, если не медлить со сдачей анализов на выявления гепатита С в крови. Иначе последствия могут быть трагическими — гепатит С часто приводит к развитию необратимых изменений, потенциально угрожающих для жизни.

Благодаря наличию в своих стенах современного медицинского оборудования, Юсуповская больница занимается диагностикой всех видов вирусных гепатитов. В клиники терапии каждому пациенту окажут не только квалифицированную помощь от специалистов высшей категории с многолетним стажем работы, но и понимание, поддержку в его нелегкой борьбе с ужасным заболеванием.

Гепатит С: что нужно знать пациенту

общая слабость;
кожный зуд;
расстройства пищеварения: тошнота, рвота, диарея;
повышение температуры тела до 38°С;
головные боли, миалгия, артралгия.

На втором (желтушном) периоде, когда поражена печень, в кровь выбрасывает большое количество билирубина — желтого пигмента. Именно благодаря иктеричному окрашиванию кожных покровов пациента становится очевидно, что у него присутствуют явные проблемы с печенью, и назначается комплекс лабораторных исследований крови, мочи и кала.

Однако многие случаи заражения протекают бессимптомно, без характерной клинической картины. После инкубационного периода, который длиться от пары недель до пары месяцев, пациент может и не подозревать, что он является носителем вируса не только в продромальной (преджелтушной) стадии, но и в желтушной — по причине отсутствия ее как таковой. Например, в 2/3 всех случаев гепатит С проходит в атипичной (безжелтушной, или субклинической) форме.

Анализ гепатит С: особенности и подготовка

Всегда кровь на биохимический анализ сдается строго натощак, непосредственно в утренние часы, до полудня. Это обусловлено суточными ритмами в организме человека, которые влияют на содержание гормонов в крови. Количественный анализ на гепатит С (антигены и антитела) сдается в любое время суток, но тоже, обязательно, натощак: важно не принимать пищу в течение 4–6 часов до забора крови. В обоих случаях используется венозная кровь, которая как биоматериал более качественна, чем капиллярная либо артериальная.

Накануне сдачи любых анализов крови рекомендуется избегать чрезмерных физических и психоэмоциональных нагрузок, приема алкоголя и тяжелой пищи. Питьевой режим должен быть обычным.

Количественные и качественные анализы на гепатит С

Этот вид гепатита имеет шесть разновидностей, поэтому анализы необходимо проводить в комплексе. К группе риска относятся люди, принимающие внутривенные наркотики (кокаин, героин), ведущие беспорядочную половую жизнь, медработники (особенно хирурги и анестезиологи), а также пациенты, которым показаны гемодиализ или переливания крови.

В профилактических целях либо при подозрении вирусное поражение печени сдаются следующий качественный и количественный анализ на гепатит С:

При количественном анализе плазмы крови на гепатит С:

При количественном анализе сыворотки крови на гепатит С:

Расшифровка анализа крови на гепатит С

Расшифровка анализа крови на гепатит С и верификация диагноза, с учетом клинической и эпидемиологической картины, под силу только специалисту.

При отрицательном результате в крови, по итогам всех проведенных тестов, не находят никаких маркеров вирусного гепатита. Тогда можно говорить об отсутствии заболевания. Однако в некоторых случаях врачи рекомендуют сделать анализы повторно через две недели.

При положительном результате анализа на гепатит проводится повторный уточняющий анализ через две-три недели. Возможен вариант, когда пациент только что переболел острой формой вирусного гепатита и маркёры в крови пока еще сохраняются.

Анализ на гепатит С: цена, Москва

Стоимость анализа на гепатит С в частных клиниках Москвы варьируется в диапазоне от 500-2000 рублей. Качественный анализ на гепатит С стоит в среднем 700 рублей. Количественный анализ на гепатит С методом ПЦР обойдется жителям Москвы примерно в 2500 рублей.

Юсуповская больница специализируется на диагностике и проведении анализов на выявление всех типов вирусных гепатитов. В стационаре клиники работает собственная современная лаборатория, сотрудники которой постоянно усовершенствуются в своей профессии и проходят специальные курсы по повышению квалификации. В больнице разрабатывают новые медикаментозные методики лечения различных видов вирусных гепатитом, в том числе и гепатит С. Ответственность перед каждым пациентом и высокий уровень профессионализма сотрудников – это визитная карточка Юсуповской больницы. Для записи на прием, звоните по телефону.

Лаборатория молекулярной биологии вирусов была создана в 1979 г. по инициативе профессора Николай Петровича Мазуренко. В неё вошли молекулярные биологи, являвшиеся в то время сотрудниками лаборатории вирусного канцерогенеза, возглавляемой Н.П. Мазуренко. Руководителем со дня основания был избран доктор биологических наук Киселёв Федор Львович, впоследствии профессор, член корреспондент РАМН, а затем РАН, который возглавлял лабораторию до дня своей смерти в 2016 г. В настоящее время руководство лабораторией перешло к бывшей сотруднице лаборатории, ученице Федора Львовича Киселёва, кандидату биологических наук Светлане Владимировне Винокуровой.

Под руководством Фёдора Львовича Киселёва в лаборатории велись работы в области молекулярной онковирусологии: работы по исследованию вирусных и клеточных онкогенов, новых опухолеродных вирусов человека и животных, в частности вирусов папиллом человека. Федор Львович одним из первых инициировал изучение структуры и функции клеточных и вирусных онкогенов с целью выявления молекулярных опухолевых маркеров, изучение генетической нестабильности и клональности опухолей, большое внимание уделял изучению нарушений эпигенетических механизмов регуляции экспрессии клеточных и вирусных генов в опухолях, он по праву считается одним из основоположников молекулярной онкологии в нашей стране. Эти работы осуществлялись в сотрудничестве со многими отделениями нашего Центра.

Лаборатория постоянно сотрудничала с другими научными учреждениями страны (с институтами Эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи, Микробиологии им. А. Кирхинштейна, Онкологии им. Н.Н. Петрова, Экспериментальной патологии и терапии, Молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта) и мира (с учеными Чехословакии, Франции, Германии, Швеции).

Федор Львович создал свою собственную научную школу, под его руководством защищено более 30 кандидатских и докторских диссертаций, многие молодые ученые из нашей страны и из-за рубежа проходили стажировку в его лаборатории. Из лаборатории вышли шесть учёных, возглавлявших в разное время научные подразделения института Канцерогенеза. Сегодня ученики Фёдора Львовича Киселёва работают в ведущих научных институтах разных стран.

В настоящее время основным направлением исследования лаборатории молекулярной биологии вирусов является изучение механизмов эпигенетической регуляции клеточных и вирусных генов в опухолях шейки матки и яичников. В лаборатории используются современные методы исследования всех уровней эпигенетической регуляции генома: ДНК метилирования, модификации гистонов и анализа некодирующих РНК.

Исследования ведутся по 2-м основным направлениям:

Эпигенетические и генетические модификации генома при злокачественных гинекологических опухолях

Инфекция вирусами папиллом человека: эпигенетические механизмы регуляции продуктивной и трансформирующей вирусной инфекции.

Метод ПЦР — позволяет идентифицировать в биологическом материале искомый участок генетического материала и обнаружить единичные молекулы ДНК вируса, не выявляемые другими методами. Принцип метода основан на многократном увеличении числа копий, специфичного для данного возбудителя участка ДНК.

С помощью ПЦР-анализа можно диагностировать инфекцию в остром периоде и выявлять случаи носительства.

Вирус гепатита С
Исследование позволяет выявить присутствие РНК вируса гепатита С (субтипы 1a, 1b, 2a, 2b, 2c, 2i, 3) и идентифицировать генотипы 1a, 1b, 2, 3 (субтипы a/b).

Вирус гепатита С (ВГС) поражает клетки печени, а также некоторые клетки крови (нейтрофилы, моноциты, В-лимфоциты).

Вирус гепатита С подразделяют на 6 генотипов, каждый из которых, в свою очередь подразделяется на субтипы. Генотипы 1, 2 и 3 являются самыми распространенными в мире. В Российской Федерации чаще распространен генотип 1b, чем 1a, далее с убывающей частотой — 3, 1a, 2.

Генотипирование вируса гепатита С
Генотип вируса гепатита С является наиболее важным фактором, от которого зависит эффективность и тактика противовирусного лечения хронического гепатита С. Знание генотипа вируса используется для планирования продолжительности курса лечения, что особенно важно, учитывая широкий спектр побочных действий применяемых препаратов интерферона и плохую переносимость терапии многими пациентами. Генотипирование вируса гепатита C должно выполняться всем пациентам до начала противовирусной терапии, в целях планирования ее продолжительности, прогнозирования эффективности, в отдельных случаях — для расчета дозы противовирусных препаратов.

Основной путь передачи вируса гепатита С — кровь (препараты для переливания элементов крови и плазмы, донорские органы, нестерильные шприцы, иглы, инструменты), реже — заражение половым путём.

Острый вирусный гепатит
Острый вирусный гепатит, как правило, протекает бессимптомно и в большинстве случаев остаётся невыявленным. У 60–85 % инфицированных развивается хроническая инфекция, которая увеличивает риск развития цирроза, печёночной недостаточности и гепатоцеллюлярной карциномы.

Лечение при различных генотипах вируса гепатита С
Генотип 1 хуже поддаётся лечению, чем генотипы 2 и 3. Кроме того, биопсию печени важнее провести именно при генотипе 1. Повышенные дозы препаратов интерферона рекомендованы для пациентов с 1-м и 4-м генотипами. Курс терапии у таких пациентов должен быть продлён до 48 недель даже при отсутствии вируса в крови более 24 недель. В случае успешности лечения, которая подтверждается снижением вирусной нагрузки крови (< 50 МЕ/мл за 4 недели), вероятен более короткий срок терапии. Если количество вирусных копий не снизилось на 2 порядка за 12 недель, значит, лечение неэффективно и его необходимо пересмотреть.

Генотипы 2 и 3 хорошо поддаются терапии в 80% случаев.

Показания

При обнаружении РНК вируса гепатита С и планировании противовирусной терапии.

Подготовка
Кровь необходимо сдавать утром с 08.00–12.00, спустя 2–4 часа после последнего приёма пищи. Накануне сдачи исследования нужно исключить физические и психоэмоциональные нагрузки.

Вирус иммунодефицита человека, РНК HIV, ПЦР real-time качественный — исследование, которое проводится с целью определения РНК ВИЧ типа 1 в плазме крови, методом ПЦР (полимеразной цепной реакции) в реальном времени (real-time или РТ-ПЦР). Исследование проводят для прогноза и мониторинга эффективности терапии.

Данный метод ныне является самым быстрым и достоверным методом диагностики инфекционных заболеваний.

При первичном инфицировании ВИЧ, метод ПЦР позволяет выявить РНК ВИЧ в крови уже спустя 10–14 суток после инфицирования.

ВИЧ (вирус иммунодефицита человека) — вирус семейства ретровирусов (вирус с медленной репликацией), который поражает клетки иммунной системы человека (CD4, Т-хелперы) и вызывает синдром приобретенного иммунодефицита.

ВИЧ является возбудителем синдрома приобретенного иммунодефицита (СПИД).

Пути передачи ВИЧ-инфекции — половой, при переливании крови, от заражённой матери к новорождённому. В период 3–6 недель после инфицирования, обычно развивается недлительный острый синдром, для которого характерны гриппоподобные симптомы и высокие уровни виремии в периферической крови. В большинстве случаев, после этого развивается ВИЧ-специфичный иммунный ответ и снижение виремии в плазме, обычно в течение 4–6 недель после появления симптомов. После сероконверсии (появления специфических антител) наступает клинически стабильная бессимптомная фаза, способная длиться годами. Для бессимптомного периода характерен невысокий уровень персистирующей виремии в плазме и постепенное снижение уровней CD4+T-лимфоцитов, которое приводит впоследствии к развитию тяжёлого иммунодефицита, множественным оппортунистическим инфекциям, онкогенезу и гибели. У лиц с установленной ВИЧ-1 инфекцией, количественное измерение уровня РНК ВИЧ-1 в крови используют в целях прогноза и контроля антиретровирусной терапии.

Показания
Обнаружение ВИЧ методом полимеразной цепной реакции — ПЦР (качественно) проводится с целью:

разрешения сомнительных результатов иммуноблоттингового исследования;
для ранней диагностики инфицирования ВИЧ;
контроля эффективности противовирусного лечения;
определения стадии заболевания СПИДом (переход инфицированности в заболевание).

Общие правила при подготовке к исследованию:

по возможности, рекомендуется сдавать кровь утром, в период с 8 до 11 часов, натощак (не менее 8 часов и не более 14 часов голода, питье — вода, в обычном режиме), накануне избегать пищевых перегрузок;
если вы принимаете какие-то лекарственные препараты, следует проконсультироваться с врачом по поводу целесообразности проведения исследования на фоне приёма препаратов или возможности отмены приёма препарата перед исследованием, длительность отмены определяется периодом выведения препарата из крови;
алкоголь — исключить приём алкоголя накануне исследования;
курение — не курить минимально в течение 1 часа до исследования;
исключить физические и эмоциональные стрессы накануне исследования;
после прихода в медицинский офис рекомендуется отдохнуть (лучше — посидеть) 10–20 минут перед взятием проб крови;
нежелательно сдавать кровь для лабораторного исследования вскоре после физиотерапевтических процедур, инструментального обследования и других медицинских процедур. После некоторых медицинских процедур (например, биопсия предстательной железы перед исследованием ПСА) следует отложить лабораторное обследование на несколько дней;
при контроле лабораторных показателей в динамике, рекомендуется проводить повторные исследования в одинаковых условиях: в одной лаборатории, сдавать кровь в одинаковое время суток и пр.

Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие РНК ВИЧ в крови.

Положительный результат — выявление РНК ВИЧ — свидетельствует об инфицировании пациента.

С момента создания лаборатории в основе нашей идеологии был принцип доказательной медицины. Это предполагает оснащение лаборатории самым современным оборудованием, наличие высококвалифицированных специалистов, выполнение сложных диагностических методик. Этого принципа мы придерживаемся на протяжении всей нашей деятельности и в настоящее время лаборатория клинической биохимии, иммунологии и молекулярной биологии – это современная лаборатория, располагающая передовыми технологиями, высококвалифицированными кадрами, высокотехнологичным оборудованием. Приоритетным для нас является:
- проведение лабораторных исследований в соответствии с международными стандартами качества и практическим использованием достижений современных инновационных технологий в лабораторной диагностике;
- индивидуальный подход к каждому пациенту, который обратился за медицинской помощью в наш Центр.

ЛКБИиМБ с 2007 года входит в состав участников российской системы внешнего контроля качества лабораторных исследований — ФСВОК, а так же проходит ежемесячную аттестацию в международных системах внешней оценки качества лабораторных исследований EQAS (США) и RIQAS (Великобритания). С 2016 года лаборатория участвует в международной программе межлабораторного сравнения UNITI. Комплексный подход к вопросам качества обеспечивает надежность и точность получаемых результатов лабораторных исследований.

Ежемесячно в ЛКБИиМБ выполняется порядка 300 тысяч исследований, более половины из которых составляют исследования биоматериала, доставляемого из медицинских учреждений Ростовской области в рамках заключенных договоров (бесплатно для пациентов!)
В настоящее время в лаборатории клинической биохимии, иммунологии и молекулярной биологии выполняется около 350 видов многоуровневых и сложных исследований по всем направлениям лабораторной диагностики. Многие из исследований являются уникальными для нашего региона:

• Исследование иммунного статуса (определение показателей клеточного и гуморального иммунитета методом проточной цитофлуориметрии).
• С целью диагностики онкогематологических заболеваний (острых лейкозов, миелодиспластического синдрома, лимфопрлиферативных заболеваний, множественной миеломы) изучается морфологическая характеристика, а также проводится иммунофенотипирование клеток периферической крови и костного мозга современным высокочувствительным методом проточной цитофлюориметрии. Этот метод позволяет не только диагностировать редкие варианты острых лейкозов, но и прогнозировать их течение, осуществлять мониторинг минимальной резидуальной болезни, т.е. выявлять наличие минимального количества опухолевых клеток в стадии ремиссии при острых лимфобластных лейкозах, лимфопролиферативных заболеваниях и множественной миеломе, что необходимо для определения риска развития рецидива и контроля эффективности терапии.

• Методы электрофореза и электроиммунофиксации используются для диагностики парапротеинемических гемобластозов.
• Оценка состояния сердечно-сосудистой системы, в том числе выявление ранних нарушений, приводящих к сосудистым катастрофам.
• Определение белков острой фазы воспаления.
• Исследование системы свертывания крови с целью выявления рисков кровотечений и тромбообразования, в том числе, выполнение глобального теста "Тромбодинамика" для оценки эффективности антикоагулянтной терапии для профилактики тромботических осложнений.
• Гормональные исследования: исследование функционального состояния щитовидной железы, репродуктивной системы, поджелудочной железы, гипофизарно-надпочечниковой системы, системы ренин-ангиотензин-альдостерон, симпатоадреналовой системы, а также исследование соматотропной функции гипофиза.
• Исследование регуляции метаболизма костной ткани.
• Определение широкого спектра онкомаркеров.
• Диагностика аутоиммунных заболеваний.
• Диагностика анемий.
• Широкий спектр биохимических исследований для выявления патологии печени, мочевыводящей системы, поджелудочной железы.
• Инфекционная серология: определение антител к вирусным и бактериальным антигенам, в т.ч. при диагностике вирусных гепатитов, TORCH-инфекций, новой коронавирусной инфекции SARS-CoV-2.
• Иммунитет при паразитарных инфекциях.
• Аллергодиагностика (в.т. тест активации базофилов для лекарственных и респираторных аллергенов).
• Лекарственный мониторинг.
• Определение электролитного состава и газов крови.

Молекулярно-биологические исследования проводят с применением метода ПЦР(полимеразная цепная реакция). Этот метод рассчитан на выявление нуклеиновых кислот (генетического материала) возбудителя. проведение полимеразной цепной реакции "в реальном времени" (Real Time PCR) является наиболее качественным и быстрым методом исследования. Метод ПЦР универсален - одна порция биологического материала позволяет провести исследования на наличие возбудителей целого ряда заболеваний. Одним из существенных преимуществ метода ПЦР является высокая чувствительность - от 95% до 100%.

Этот метод используется для:
• Выявления РНК коронавируса SARS-CoV-2 методом ОТ-ПЦР в режиме реального времени.
• Определения РНК вирусов гриппа А и гриппа В.
• Определения ОРВИ-скрин 10 РНК/ДНК вирусов: респираторно синцитиального вируса, метапневмовируса, вируса парагриппа 1, 2, 3, 4, коронавирусов, риновирусов, аденовирусов групп В, С и Е, бокавируса.

Лаборатория клинической биохимии, иммунологии и молекулярной биологии сотрудничает с мировыми лидерами в производстве диагностического оборудования, среди которых Beckman Coulter, Siemens, Becton Dickinson, Instrumentation Laboratory, Thermo Fisher Scientific, HAMILTON.
Лаборатория ежедневно обрабатывает более 7 тысяч проб. Более 5-и тысяч из них - это ПЦР исследования на COVID-19. Порядка 2-х тысяч проб (кровь) направляется на автоматизированную трековую систему PowerExpress. Сортировка и аликвотирование образцов осуществляется на автоматизированной системе обработки образцов AUTOMATE 2500/2550.Как и другие лаборатории, ЛКБИиМБ использует лабораторную информационную систему, которая, благодаря применению уникальной системы штрих-кодирования, дает возможность автоматизировать и контролировать процессы регистрации пациентов, исследования биоматериала, а также получения и выдачи результатов.

Заведующая лабораторией клинической биохимии, иммунологии и молекулярной биологии – Луговская Галина Ивановна — врач клинической лабораторной диагностики высшей категории, Отличник Здравоохранения.

Читайте также: