Ложноположительный анализ на вирусную нагрузку
Обновлено: 23.04.2024
Метод определения в пробах материалов, подвергающихся исследованию, любых ДНК и РНК, в случае неэффективности других методов.
Суть этого метода звучит в самом названии.
Поначалу исторический экскурс.
Автор разработки Кэри Мюллис, заработал Нобелевскую премию за работу 1983 года.
Первоначально планировалось научное применение метода, но впоследствии он завоевал свое место и в диагностической медицине.
Этим методом можно определять генетический материал всевозможных инфекций.
Гинекологические и урологические труднодиагностируемые инфекции выявляются этим методом.
Очень часто ПЦР используется для диагностики ВИЧ.
Основы метода, на основании которых работает исследование, основаны на уникальности фрагмента ДНК для каждой инфекции.
В случае с ВИЧ это РНК.
И создает большое количество копий этого фрагмента ДНК (или РНК).
Геометрическая прогрессия определяет число копий в течение цикла ПЦР (около 3-х минут).
По прошествии нескольких часов число фрагментов – несколько миллиардов.
Теперь несложно определить и возбудителя инфекции.
Метод силен своей универсальностью.
Для определения фрагментов ДНК (или РНК) возбудителя любой инфекции всегда используется одно и то же стандартное оборудование.
ПЦР славится и своей специфичностью (практически 100%).
Можно использовать один и тот же исследуемый материал для поиска разных возбудителей заболеваний.
У метода очень высокая чувствительность и оперативность.
Всего в течение дня, можно узнать, есть ли возбудитель в организме и какой.
Инкубационный период не мешает проведению исследования.
Нет еще клиники заболевания и антител в крови, но есть ДНК или РНК конкретного возбудителя в организме подвергающегося исследованию.
К недостаткам метода нужно отнести высокую квалификацию врача, берущего материал для исследования, и лаборанта, проводящего исследование.
Также важна высокая чистота помещения, в котором проводят исследование (практически 100%), чтобы результаты исследований были достоверными.
Для ИППП существуют специальные комплексные исследования, при которых определяют наличие сразу нескольких возбудителей.
А теперь поговорим о перспективах ПЦР для диагностики ВИЧ-инфекции.
Когда делают ПЦР на ВИЧ
От четырех до четырнадцати дней спустя, после инфицирования, можно обнаружить ВИЧ данным методом.
Достоверность результата оценивают, когда минуло четырнадцать дней спустя опасной половой связи.
Наличие отрицательного результата говорит о достоверности проведенного исследования.
Но для того чтобы получить непререкаемый результат исследования проводят еще и ИФА.
ПЦР является высокочувствительным методом, в основе которого лежит амплификация (усиление) небольшого участка провирусной ДНК (или РНК) за счёт праймеров.
Праймеры – это специальные реагенты.
Желательная (не обязательная) процедура взятия венозной крови на исследование на ВИЧ-инфекцию.
Проведение ПЦР для диагностики достаточно дорогостоящий анализ.
Его делают не всегда, а в особых случаях.
И если случилась медицинская авария, в которой есть ВИЧ-инфицированные и возможно заразившиеся.
Спустя четырнадцать дней достоверность на наличие ВИЧ-инфекции порядка 98%.
По истечении пяти дней после предполагаемого заражения - 80%.
Анализ ИФА можно делать только тогда, когда появятся антитела к ВИЧ в крови.
Проходит от одного до трёх месяцев, иногда до года.
Поэтому если есть озабоченность по поводу ВИЧ инфицирования, лучше не тянуть, а сделать этот дорогостоящий, но такой необходимый анализ.
Важно знать диагноз как можно раньше.
ПЦР анализ на ВИЧ
рассказывает подполковник
медицинской службы, врач
Ленкин Сергей Геннадьевич
Содержание данной статьи проверено и подтверждено на соответствие медицинским
стандартам врачем дерматовенерологом, урологом, к.м.н.
Ленкиным Сергеем Геннадьевичем
| Наименование | Срок | Цена |
|---|---|---|
| Прием венеролога | 900.00 руб. | |
| ДНК ВИЧ (кровь) | 5 д. | 3450.00 руб. |
Как делают
Нахождение ВИЧ в пробах крови методом ПЦР выполняется двумя вариантами:
- исследуется провирус ВИЧ-инфекции, точнее его ДНК
- исследуется плазма или сыворотка крови на РНК ВИЧ-инфекции
Периферическая кровь, точнее ее мононуклеарные клетки, исследуются на содержание провируса.
По причине того, что ИФА дает вероятность выше 98% - 99,9%, ПЦР не является 100% подтверждающим анализом на наличие ВИЧ-инфекции.
Большой процент ложноположительных срабатываний зависит и от чистоты лаборатории, где проводят исследования, и от квалификации проводящего исследования.
ПЦР на ВИЧ-инфекцию – единственная диагностика до появления антител к ВИЧ.
То есть до минимум трёх месяцев с начала инфицирования.
Прогресс заболевания ВИЧ-инфекцией характеризуется нарастанием количества вируса в крови.
Проведение ПЦР говорит о стадии заболевания ВИЧ и эффективности антиретровирусной терапии.
Помимо вышеперечисленных условий, есть обязательные исследования крови на ВИЧ-инфекцию для:
- новорожденных от ВИЧ-инфицированной матери
- наблюдения за концентрацией ВИЧ-инфекции
Все остальные условия являются необязательными.
Процедура сдачи ПЦР для диагностики наличия ВИЧ-инфекции в организме проста.
Берется венозная кровь и проводится анализ.
Нужно воздержаться от употребления любых продуктов около десяти часов.
Не употреблять алкоголь, ограничить физическую активность, исключить эмоциональные нагрузки.
Для этого нужна очень чистая лаборатория.
При получении положительного результата его обязательно перепроверяют.
Для этого используют референц-лабораторию.
Там проводят более точный исследовательский способ диагностики.
К сожалению, универсальность не 100%, и зачастую результат анализа ложноположительный.
Его используют вспомогательным методом для установления наличия или отсутствия ВИЧ-инфекции в организме.
Если проводят скрининг на наличие ВИЧ-инфекции или ставят диагноз ВИЧ инфицирования, то используют метод ПЦР.
Методом проводят и количественную оценку нахождения ВИЧ в организме.
Так определяется степень и тяжесть патологических изменений в организме.
Уровень концентрации ВИЧ-инфекции, в организме диагностируемого определяют методом ПЦР.
До лечения исследуется кровь методом ПЦР и после, и можно оценить правильность проводимого курса лечения.
Те ли препараты назначают или нужно другие.
Проводят анализ, и в том случае, если антитела в крови есть, но их наличие не говорит о достоверности наличия ВИЧ-инфекции в организме.
Результаты анализов
Есть много поводов для исследования на наличие ВИЧ-инфекции в организме.
Предстоящая операция, планирование беременности, наличие в анамнезе случайных половых связей и другие похожие причины.
Есть категории работников (например, медицинские работники, учителя и другие) для которых эта процедура необходима, для допуска работы с людьми.
Есть определенная тревожная симптоматика, при которой анализ на ВИЧ-инфекцию проводят:
- при резкой потере веса
- при длительной диарее (около 3-х недель)
- при лихорадке невыясненной этиологии
- при росте лимфоузлов в разных местах
- при лимфо- и лейкопении
- при наличии необъяснимой пневмонии, системном кандидозе, туберкулезе, манифестном токсоплазмозе и других серьезных заболеваниях
Интерпретацией результатов проведенных анализов занимается только лечащий врач.
Какой бы ни был результат - это не повод заниматься лечением самостоятельно.
К тому же результат ввиду несовершенства метода может быть как ложноотрицательным, так и ложноположительным.
Иногда схожие результаты анализов у разных людей свидетельствуют о различной клинике.
Чаще делают количественный ПЦР-анализ на ВИЧ-инфекцию.
Этот анализ дает сведения о количестве вируса и отображается единицей копия/мл.
Расшифровка результатов:
- РНК вируса отсутствует или его очень мало (около 20 копий/мл)
- мизерное количество РНК (чуть больше 20 копий/мл)
- 20 – 10 6 копий/мл
- более чем 10 6 копий/мл
Самый опасный третий и четвертый результат.
Что делать, если результат анализа ПЦР на ВИЧ положительный
Анализы на ВИЧ-инфекцию делают в несколько этапов.
Это занимает период от двух до десяти дней.
Результаты анализов делятся на положительные, отрицательные и сомнительные.
Если результат сомнительный, то немного позже обязательно делают анализ еще раз.
Но даже положительный результат не окончательный.
Пересдача крови на анализ тоже делается.
На достоверность результата влияние оказывает некоторые заболевания и состояния организма.
Проведение анализа может быть конфиденциальным или анонимным.
При конфиденциальном обследовании имя обследуемого человека называется.
При анонимном обследовании анализ делают по идентификационному номеру.
Результат анализа может узнать только подвергшийся обследованию человек.
Даже положительный результат остается тайной.
Это врачебная тайна, и она не может быть нарушена.
Но даже подтвержденный положительный результат еще не приговор.
В современных условиях ВИЧ-инфицированные подвергаются пожизненной антиретровирусной терапии, что позволяет сохранить им жизнь.
Наоборот, чем раньше обнаружено наличие ВИЧ-инфекции в организме, тем плодотворнее будет лечение.
Перспективы метода в диагностике ВИЧ-инфекции
ПЦР относится к молекулярно-биологическим методам исследования.
Помимо диагностики ВИЧ-инфекции и ИППП, метод зарекомендовал себя в генетических разработках, в ветеринарной науке, сельском хозяйстве.
Продукты питания исследуют на содержание ГМО с помощью ПЦР.
Также сфера применения метода судебно-медицинская экспертиза.
Но все же нас интересуют, в первую очередь, перспективы ПЦР для постановки диагноза наличия ВИЧ-инфекции.
С помощью ПЦР выявляются даже единицы ВИЧ присутствия в крови.
Анализ характеризуется очень высокой чувствительностью – от одного до ста единиц ВИЧ.
Выраженная уникальность происходит за счет того, что идет поиск специфичной ДНК (или РНК) присущий конкретному возбудителю заболевания.
Реакция протекания операции копирования фрагментов РНК характеризуется высокой специфичностью метода ПЦР.
Поэтому амплификационная тест-система (ПЦР) выигрывает перед другими тест-системами иммунологического характера (например, ИФА).
Еще важна и скорость ПЦР анализа.
Один рабочий день уходит на проведение ПЦР.
Но есть у метода и негативные качества.
Если ВИЧ-инфекция попадет в исследуемую кровь случайно, из воздуха, при ее отсутствии в организме, реакция копирования вируса все равно будет идти.
Поэтому и нужна такая стерильность в лаборатории, в которой проводиться ПЦР.
Благодаря большому непостоянству генетического материала ВИЧ уменьшаются диагностические показатели чувствительности.
Хотя сам метод очень чувствительный.
Чувствительность метода ПЦР характеризуют 98%. У ИФА этот показатель выше – 99%.
А за данными статистики или вовремя не продиагностируемые заболевшие или, наоборот, неправильно продиагностируемые о наличии в организме ВИЧ-инфекции.
Для лабораторий, в которых ПЦР проводиться, разрабатываются специальные системы внутреннего контроля, с целью повышения качества диагностики.
На основе стандартизированных межлабораторных панелей качества минимализируют ошибки тестирования.
Если все сделано правильно, без ошибок, то с помощью ПЦР можно определить только один фрагмент провируса на десять тысяч – сто тысяч лимфоцитов.
Методом определяют и резистентность к препаратам антиретрорвирусной терапии.
Конечно, метод несовершенный, но у него большие перспективы.
Особенно на ранних стадиях инфицирования, когда в крови еще нет антигенов.
Метод хоть и недешевый, но правильно проведенный, с соблюдением всех условий правильной постановки, очень информативный.
Человечество слишком поздно осознало опасность, которую представляет вирус иммунодефицита человека (ВИЧ).
Вызываемое им заболевание – синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД).
Правда, на начало XXI века медики научились эффективно бороться с этой инфекцией.
Никто не станет отрицать, что ведущую роль в этом направлении сыграло совершенствование лабораторных методов выявления инфекции.
А также исследования показателей крови уже зараженных людей.
Виды анализов
По своим характеристикам, ВИЧ относится к категории гемотрансмиссивных инфекций.
Заражение здорового человека происходит при попадании возбудителя в кровеносное русло.
Там вирус связывается с лимфоцитами и другими мишенями, начинает активную репликацию.
Зараженные клетки не сразу, но истощаются и погибают.
За счет этого и возникает иммунодефицит.
Благодаря компенсаторным способностям человеческого организма, инфекция очень долго (до нескольких лет) протекает бессимптомно.
В этом и заключается главная опасность инфекции.
Единственно, что может оказаться информативным в начальных стадиях болезни, это – анализы крови.
В клинической практике они применяются по разным направлениям:
- первичная диагностика – это исследования, которые прямо указывают на наличие или отсутствие ВИЧ-инфекции в организме обследуемого человека
- иммунограмма – направлена на оценку показателей иммунной системы, таких как количество лимфоцитов CD4, которые являются главной мишенью для вирусов
- вирусная нагрузка – помогает оценить степень активности инфекции и эффективность проводимой антиретровирусной терапии
- общий анализ крови (ОАК), который проводится инфицированным людям для общей оценки поражения организма вирусом
- биохимические исследования позволяют оценить функцию основных жизненно важных органов – печени, почек, кроветворной системы и так далее
Сложность в том, что показатели последних двух пунктов меняются в основном на продвинутых стадиях заболевания.
Но если человек вовремя прошел диагностику и узнал о своем статусе, он теперь может держать заболевание под полным контролем.
Достаточно лишь стать на учет в специализированном центре и вовремя сдавать необходимые анализы.
Типичный алгоритм обследования пациента предлагаем рассмотреть в виде следующей таблицы:
Кровь на ВИЧ
Экспресс-метод и ИФА при ситуации, рискованной по заражению или при характерных симптомах (лихорадка, увеличение лимфоузлов, частые простуды, диарея, похудание и так далее)
Повторный анализ
Положительный ответ первого исследования.
Клинический анализ крови
Установление диагноза ВИЧ-инфекции, в дальнейшем – по показаниям
Биохимический анализ крови
Установление диагноза ВИЧ-инфекции, в дальнейшем – по показаниям
Кровь на CD-4 клетки
Установление диагноза ВИЧ-инфекции, сначала двукратно с периодом в 7 дней, в дальнейшем каждые 6-12 месяцев, при ухудшении здоровья – немедленно
Вирусная нагрузка
Установление диагноза ВИЧ-инфекции, перед началом АРТ и дальше – через 3 месяца до получения негативных результатов, в дальнейшем каждые 6 месяцев
Как и любая патология, ВИЧ-инфекция имеет индивидуальные черты у каждого инфицированного человека.
Поэтому предложенная таблица – лишь ориентир.
Точные сроки и перечень необходимых анализов назначаются врачом, который ведет пациента.
Также меняются сроки проведения мониторинговых обследований после того, как пациент начинает прием препаратов антиретровирусной терапии (АРТ).
Показатели общего анализа крови при ВИЧ
На ранних стадиях инфекции, показатели общего анализа крови меняются мало или вообще остаются в переделах нормы.
Внимательный врач может связать некоторые граничные колебания лейкоцитов (формулы белой крови) с эпизодами повторных рецидивных простуд и респираторных инфекций.
В более продвинутых стадиях заболевания, когда компенсаторные возможности организма слабеют, в ОАК возникают такие изменения:
- Анемия. Снижение количества эритроцитов ниже возрастной и половой нормы связывают с повреждением ВИЧ клеток костного мозга и общим истощением организма. Степень анемии коррелирует с активностью ВИЧ-инфекции: малокровие нарастает при прогрессировании заболевания и наоборот, отступает на фоне АРТ-терапии.
- Лейко- и лимфопения являются типичными явлениями для ВИЧ. В общем анализе крови можно обнаружить стойкое снижение количества лейкоцитов (ниже 4*10 в 9 степени) и лимфоцитов (ниже 13%), показатели этих клеток помогают врачам составить предварительный прогноз и разработать меры по защите человека от других инфекций (например – назначить профлечение бисептолом).
- Тромбоцитопения. Падение уровня тромбоцитов ниже нормы (180*10 в 9 степени) весьма характерно для ВИЧ-инфекции, в течение 10 лет, такое явление возникает у 45% инфицированных людей. Вызывают тромбоцитопению два механизма: аутоиммунное повреждение тромбоцитопению и снижение количества их предшественников (мегакариоцитов).
Для пациента очень важно соблюдать сроки, когда врач рекомендует сдавать ОАК.
Это поможет вовремя заметить опасные осложнения ВИЧ-инфекции и предотвратить их.
Кроме того, нельзя забывать о риске развития побочных реакций в ответ на прем препаратов АРТ-терапии.
Показатель СОЭ
Очень важными данными ОАК, является скорость оседания эритроцитов или, сокращенно – СОЭ.
Норма – 4-10 мм в час.
Когда СОЭ ускоряется, это свидетельствует о нарушении белкового баланса крови.
К сожалению, показатель абсолютно неспецифичен: СОЭ возрастает при любой инфекции, травмах, онкологии.
Для пациентов характерно такое сочетание, когда скорость оседания эритроцитов повышена до 30-40-50 мм в час.
А человек чувствует себя более-менее нормально.
Такая картина связана со снижением количества белых кровяных телец.
В частности, тех лимфоцитов, какие синтезируют белки-иммуноглобулины.
Уменьшение количества этих иммунных белков влечет за собой относительное повышение белков-альбуминов, что и отражается в росте СОЭ.
Показатели биохимии крови
Биохимический анализ крови для пациентов очень важен.
С его помощью можно оценить функцию почек и, что более важно – печени.
ВИЧ очень часто соседствует с вирусными гепатитами.
Поэтому показатели трансаминаз помогают вовремя сориентироваться и дообследовать пациента.
Кроме того, контроль за функцией печени и почек позволяет вовремя заметить негативные реакции организма на АРТ-препараты.
Биохимия – важнейший комплекс анализов.
Однако из-за многогранности показателей интерпретировать их должен только специалист.
В этой статье мы просто не сможем осветить все детали таких исследований у пациентов.
ВИЧ-инфекция относится к тяжелым неизлечимым патологиям иммунодефицита человека.
С момента постановки диагноза производится постоянный контроль состояния больного.
Определяется тяжесть течения с помощью лабораторных анализов.
Данные показатели играют решающую роль в назначении антиретровирусной терапии.
Вирусная нагрузка при ВИЧ – это диагностика, позволяющая определить степень тяжести течения патологического процесса.
Показатели определяются с помощью оценки количества частиц вируса, присутствующего в определенном объеме биоматериала инфицированного.
При ВИЧ-инфекции подсчитывается количество копий РНК возбудителя в 1 мл плазмы крови пациента.
Совместно с данным анализом выполняется исследование крови на иммунный статус.
Это позволяет определить состояние иммунной системы (количество CD4).
Характеристика теста на наличие РНК вируса ВИЧ
Показатели вирусной нагрузки (ВН) – это основа мониторинга состояния пациента.
Тест проводится перед началом лечения.
Затем периодически на протяжении всего курса терапии для отслеживания динамики заболевания.
Высокоактивное антиретровирусное лечение – это единственное мероприятие, которое препятствует развитию СПИДа и повышает качество жизни пациента, а также ее продолжительность.
При отсутствии эффекта в результате проводимой медикаментозной терапии и определении высокой ВН лечащий врач корректирует лечебную тактику, при необходимости заменяет препараты.
Вирусная нагрузка определяется преимущественно методом ПЦР, но также используются другие методики исследования.
Количество вируса измеряется числом копий РНК вируса на 1 мл плазмы.
В норме вирусная нагрузка при иммунодефицитном состоянии составляет менее 12 тыс. копий ВИЧ.
Показатели значительно превышающие данные цифры говорят о тяжелом течение болезни и о необходимости коррекции проводимого лечения.
Если высокие показатели наблюдаются без проводимого лечения, врач назначает и расписывает схему терапии в срочном порядке.
Определение состояния иммунной системы при ВИЧ
Вирусная нагрузка выполняется совместно с тестом определения СD4, который при ВИЧ-инфекции является основным показателем количества иммунных клеток в организме.
СD-лимфоциты – это белые клетки крови, которые отвечают за реакцию иммунитета при проникновении в организм инфекционных возбудителей.
В здоровом организме на 1 мл крови определяется более 1000 СD-лимфоцитов.
При инфицировании вирусом иммунного дефицита здоровые клетки, отвечающие за состояние иммунитета, погибают ежедневно в больших объемах.
После чего организм заменяет их на новые.
Со временем вирус иммунодефицита угнетает иммунную систему настолько, что организм не справляется с своевременным возобновлением CD4-лимфоцитов.
Их уровень снижается, иногда до критических показателей.
Снижении количества иммунных клеток до уровня менее 250 – 300 клеток является основным критерием к назначению антиретровирусной терапии.
В противном случае у человека развивается СПИД.
Его опасность заключается в быстром возникновении множественных оппортунистических заболеваний, повышенной вероятности присоединения неинфекционных патологий и раковых процессов.
В результате человек за короткий период времени погибает.
Как правило, процесс снижения иммунных клеток длится не один год (чаще 7-9 лет).
Однако при правильном контролировании состояния больного можно избежать развитие СПИД – конечной стадии течения ВИЧ-инфекции.
Показатели СD4 могут варьироваться в крови, в зависимости от многочисленных факторов.
Это стрессовых ситуаций, менструального цикла у женщин, времени года и суток, присоединении простудных заболеваний.
Поэтому получить максимально точные результаты можно соблюдая некоторые правила.
Диагностика проводится в одно и то же время суток.
Как правило, в утренние часы.
Не выполняется тест при наличии ОРВИ или любых других, даже незначительных простудных состояниях.
Если показатели вирусной нагрузки и СD-лимфоцитов при ВИЧ находятся в пределах нормы, диагностика проводится 1 раз в 3-6 месяцев.
При низком уровне иммунных клеток и повышенном количестве РНК бактериального агента в плазме крови проводится противовирусная терапия.
В данном случае диагностика выполняется намного чаще.
Когда назначается тест на вирусную нагрузку при ВИЧ
Вирусная нагрузка при ВИЧ-инфекции необходима с следующих случаях:
- Подозрение на инфицировании ВИЧ (к примеру, после случайного незащищенного сексуального контакта, переливание донорской крови, рождение ребенка от зараженной матери). Вирусная нагрузка является одним из наиболее ранних диагностических методов, определяющих наличие РНК вируса в крови. Большинство лабораторных исследований проводится не ранее, чем через месяц после предполагаемого инфицирования – это время за которое в крови начинают формироваться антитела к инфекции. Вирусная нагрузка определяется спустя две недели.
- Взятие больного на диспансерное наблюдение.
- У пациентов ВИЧ-инфицированных, перед назначением противовирусной терапии. Забор анализов выполняется 1 раз в 3, 6 месяцев или 1 раз в год, все зависит от получаемых результатов.
- Спустя 4 недели после начала приема антиретровирусных препаратов, для контроля состояния мониторинг проводится 1 раз в 3 месяца.
Какие способы используют для определения вирусной нагрузки при ВИЧ
Для точного вычисления показателей вирусной нагрузки выполняется лабораторное исследование крови.
Иногда РНК возбудителя определяется в других биологических жидкостях, к примеру, в эякуляте или слюне.
Методы вирусной нагрузки:
- ПЦР – диагностика (высокочувствительная методика, используемая в частных клиниках, позволяет распознать болезнь на самых ранних стадиях; наличие вирусного агента определяется уже при наличии 40 копий в 1 мл плазмы крови);
- способ разветвленной ДНК (чаще используется в государственных лабораториях, является наиболее простым, но менее чувствительным по сравнению с ПЦР-диагностикой; определение показателей вирусной нагрузки возможно при больших объемах РНК вируса в плазме);
- метод изотермической амплификации нуклеиновых кислот (NASBA) – высокочувствительное исследование, широко распространено в Европейских странах, на территории РФ практически не используется.
Как правило, на протяжении лечения применяется один и тот же метод диагностики.
Это позволяет сравнивать результаты и быть уверенными в их точности.
Расшифровка результатов теста на вирусную нагрузку при ВИЧ: норма и отклонение
При подозрении на ВИЧ–инфекцию выполнение вирусной нагрузки покажет нулевую реакцию.
Это значит полное отсутствие РНК вирусного агента в организме, другими словами человек является полностью здоровым.
Иногда определение вирусной нагрузки наблюдается не только при ВИЧ, но и на фоне патологических процессов, связанных с болезнями мочевыделительной системы.
В частности, терминальная стадия почечной дисфункции, а также серьезные расстройства эндокринной системы.
Данные патологии провоцируют образование специфических иммуноглобулинов в ответ на инфекции, которые определяются в ходе лабораторной диагностики.
Вирусная нагрузка, выполняемая у женщин в период беременности, может показать наличие антител к ВИЧ-инфекции.
Но в большинстве случаев данные показатели являются ложными и связаны со стрессовым состоянием, в котором пребывает организм при вынашивании плода.
Также с гормональными перестройками.
В данном случае вирусная нагрузка покажет низкие показатели.
Так как несмотря происходящие изменения в организме в период вынашивания плода, при отсутствии инфицирования показатели не могут быть слишком высокими.
Неопределенная вирусная нагрузка при ВИЧ возможна в следующих ситуациях – если лабораторное исследование проводилось до сероконверсии.
То есть периода, когда в плазме крови начинают формироваться первые иммуноглобулины (антитела), определяемые при проведении анализов на ВИЧ-диагностику.
В таких случаях вирусная нагрузка не определяется до первых проявлений болезни.
Нормой при ВИЧ-инфекции считается наличие менее 10 000 – 15 000 клеток вируса на 1 мл крови.
Также следует отметить, данные показатели расшифровки при проведении противовирусного лечения говорят о положительной динамике и высокой эффективности медикаментозной терапии.
Неопределяемая вирусная нагрузка при ВИЧ, после приема противовирусной терапии, не означает полное излечение.
В данном случае отсутствие показателей вирусной нагрузки говорит о неправильно проведенной диагностике.
Либо о значительном снижении РНК вируса в организме больного, до уровня, который достаточно сложно определить.
Вирусная нагрузка 200 000 при ВИЧ считается сильно завышенной.
Такое состояние пациента требует незамедлительного проведения медикаментозного лечения.
Если показатели, превышающую норму при ВИЧ-инфекции, не были своевременно обнаружены, это может привести к развитию СПИД.
И даже к скорому летальному исходу, в результате присоединения других заболеваний.
Вирусная нагрузка свыше 500000 при ВИЧ является показателем развития синдрома приобретенного иммунного дефицита (СПИДа).
Если в результате проведения противовирусной терапии у больного вирусная нагрузка повышается до 700 000 при ВИЧ, это говорит о неэффективности лечения и требуется замена на другие препараты.
Но в большинстве случаев высокие показатели являются основным критерием общего состояния.
Говорят о наличии в организме других, хронических или острых процессов, которые в любой момент могут привести к смерти пациента.
Вирусная нагрузка, определяемая от 20 000 и до 100 000, является опасным состоянием, которое требует постоянного контроля.
При высоких показателях исследования проводимая антиретровирусная терапия позволяет улучшить состояние больного и снизить уровень РНК вируса к норме.
Тест на вирусный контроль и наличие иммунных клеток проводится не реже 1 раза в месяц, иногда чаще.
При этом о необходимости корректирования медикаментозного лечения решает лечащий врач.
Неопределяемая вирусная нагрузка при ВИЧ
Неопределяемые результаты анализа на вирусную нагрузку при ВИЧ чаще говорят о значительном снижении РНК вирусного агента в плазме крови.
До столь мизерного уровня, что даже высокочувствительные методы не в состоянии определить наличие вирусного агента.
Неопределяемая вирусная нагрузка не означает полное излечение от ВИЧ-инфекции и ее исчезновение из всех биологических материалов больного.
Чаще такая реакция наблюдается у пациентов спустя полгода после начала приема антиретровирусных препаратов.
В данном случае снижается вероятность инфицирования своего полового партнера.
Так как в сперме и слюне также снижается количество частиц вируса.
Но пренебрегать правилами безопасности не стоит.
Неопределяемая вирусная нагрузка у беременной женщины является большим преимуществом, так как снижается вероятность заражения плода.
Придерживаясь врачебных рекомендаций относительно образа жизни, режима питания и отдыха, больному удастся поддерживать вирусную нагрузку на неопределяемом или нормальном уровне.
Использование антиретровирусных препаратов поддерживает иммунную систему и предотвращает размножение вирусных агентов.
Адекватная схема терапии позволяет поддерживать нормальное состояние больного.
Предотвращает прогрессирование вирусной инфекции с последующим развитием СПИДа.
Высокая вирусная нагрузка при ВИЧ: используемые препараты
Антиретровирусная терапия – это единственный способ борьбы с прогрессированием вирусной инфекции в организме человека.
Высокая вирусная нагрузка при ВИЧ является основным показателем к назначению необходимых препаратов, среди которых:
- I. НИОТ, НтИОТ, ННИОТ (медикаменты препятствуют дальнейшее размножение РНК вируса внутри клетки).
- II. Ингибиторы протеазы (предотвращает формирование новых копий вируса).
- III. Ингибиторы интегразы (блокируют фермент вирусного агента, предотвращают поражение иммунных клеток).
- VI. Ингибиторы проникновения ВИЧ инфекции в клетку-мишень.
Вирус иммунодефицита серьезное и опасное заболевание, требующее всестороннего контроля состояния пациента.
Доза и курс лечения назначается квалифицированным врачом.
Самолечение в данном случае недопустимо.
Если вам необходимо определить вирусную нагрузку при ВИЧ, обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.
Ложноположительным результатом является положительный результат анализа на ВИЧ у человека, не инфицированного вирусом иммунодефицита. Получение такого результата анализа может привести к серьезным последствиям для пациента и ошибочным рекомендациям со стороны врача. Именно поэтому процесс диагностики ВИЧ-инфекции и постановка непосредственно диагноза подчинены очень строгому алгоритму, который не допускает ошибок.
Исследовать кровь на ВИЧ можно исключительно с помощью тестов, сертифицированных для применения в конкретной стране.
Двумя важными характеристиками всех тестов являются специфичность и чувствительность. Чувствительность теста отражает долю положительных результатов, которые определяет тест у пациентов, инфицированных ВИЧ. Специфичность же, наоборот, отражает долю отрицательных результатов теста у здоровых людей. Как правило, тесты на ВИЧ-инфекцию обладают высокой специфичностью – это значит, что может присутствовать очень малое количество ложноположительных результатов, и подавляющее большинство неинфицированных пациентов все же имеет отрицательный результата анализа. К примеру, если провести тестирование 1000 неинфицированных людей и будет получено 4 положительных результата, это говорит о специфичности теста 99,6% (996 достоверно негативных результата на 1000 протестированных человек).
Причиной ложноположительного результата могут быть технические проблемы, связанные с самим тестом или с биологическим материалом.
Технические проблемы включают в себя перепутывание образцов, неправильную маркировку, неправильное обращение и интерпретацию визуально считываемого результата экспресс-тестов.
К биологическим причинам можно отнести участие в исследовании вакцины против ВИЧ и такие медицинские состояния, как:
• инфекция, вызванная вирусом Эпштейна-Барр (ВЭБ);
• беременность;
• получение иммуноглобулина;
• гипербилирубинемия;
• аутоимунные заболевания;
• недавняя вакцинация.
В основе механизма формирования реактивного результата теста при данных состояниях, как правило, лежит неверное распознавание тестами антител, которые не связаны с ВИЧ и появились в нашем организме в ответ на внедрение других антигенов, а распознаются как антитела к вирусу иммунодефицита.
Надлежащей практикой, рекомендованной ВОЗ, является проведение повторного тестирования всех людей с первоначально положительным результатом для исключения каких-либо потенциальных ошибок в тестировании или отчетности.
Когда при скрининге получен положительный результат анализа на ВИЧ (такой результат называют реактивным), необходимо проведение дополнительного обследования для того, чтобы установить, является ли положительный результат истинным или ложным.
Если положительный результат получен при выполнении экспресс-теста, то требуется соблюдение рекомендованного ВОЗ алгоритма исследования–последовательное использование нескольких тест-систем разных производителей.
Если при последовательном проведении разных экспресс-тестов первоначальный результат положительный, а последующий нет, необходимо лабораторное до обследование для исключения ранней инфекции. Прогностическая ценность проведения дополнительно 2-3 тестов подряд стремится к 100%.
После того, как диагноз ВИЧ-инфекции был установлен, и начато лечение, тестирование на антитела повторять не стоит.
При проведении скрининговых исследований следует учитывать, что распространенность ВИЧ-инфекции в отдельных регионах так же может влиять на количество ложноположительных результатов.
Распространенность ВИЧ отображает долю людей, живущих с ВИЧ-инфекцией (ЛЖВ) на конкретной территории, и влияет на количество ложноположительных результатов в зависимости от достоверно положительных.
При высокой распространенности (2%), если протестировать 10000 человек, то 200 образцов будет получено от ЛЖВ (истинно-положительные) и 9800 от неинфицированных людей. Учитывая специфичность теста 99,8%, около 20 образцов будет ложноположительными. В этом случае из 220 положительных результатов 91% людей фактически инфицированы ВИЧ. Количество достоверно положительных результатов значительно превышает количество ложных.
При низкой распространенности (0,1%) только 10 образцов из 10000 будут истинно-положительными, в то время как 9990 образцов будут от неинфицированных людей. Учитывая специфичность теста (99,8%) – 20 образцов будет ложнопозитивными. В этом случае из 30 положительных результатов только 33% людей будут инфицированы и количество ложноположительных результатов превысит количество истинных. При проведении скрининговых программ в популяциях с низкой распространенностью ВИЧ-инфекции следует ожидать, что количество ложнопозитивных результатов будет преобладать над истинно положительными.
Не стоит забывать о методах профилактики инфицирования ВИЧ после получения отрицательного результата. К ним относятся:
- использование презерватива во время сексуальных контактов (избегать использования лубрикантов на масляной основе);
- регулярное тестирование на ВИЧ;
- при употреблении инъекционных наркотиков использовать стерильные шприцы/иглы и отказ от совместного использования их с другими потребителями;
- прием препаратов доконтактной профилактики (ДКП) в группах высокого риска и препаратов постконтактной профилактики (ПКП) после аварийной ситуации (начать прием ПКП необходимо как можно раньше, насколько это возможно, и не позднее 72часов после контакта);
- мужское обрезание (ВОЗ указывает на снижение риска получения ВИЧ при гетеросексуальных контактах до 60%);
- обследование беременных и начало АРТ при получении положительного результата.
Автор: врач Университетской клиники H-Clinic Коновалова Анастасия Александровна
Медицинский редактор: руководитель Университетской клиники, к.м.н., врач-инфекционист Коннов Данила Сергеевич
Иммуноблот на ВИЧ позволяет обнаружить антитела к вирусным белкам, помещенным на специальную нитроцеллюлозную мембрану. Это высокоточное исследование, устанавливающее наличие фракций, в которых основные белки располагаются в виде небольших полос.
Оболочка вируса ВИЧ-1 содержит гликопротеины с молекулярной массой от 41 кд до 160 кд (килодальтона). Большое значение для проведения иммунного блоттинга имеет гликопротеин ВИЧ-2 с молекулярным весом от 32 кд до 140 кд. Белки сердцевины ВИЧ-1 и ферменты вируса представлены протеинами р17, р24, р55.
Возбудитель ВИЧ-2 состоит из белков, обозначаемых как р16, р25, р56. Они образуют его внутреннюю оболочку. В состав генома входят 6 регуляторных и 3 структурных гена. Нередко при делении клеток возникают генетические неточности и появляется несколько подтипов возбудителя.
Положительные пробы
Для исключения ошибок при лабораторной диагностике ВИЧ-инфекции пациенту назначают дополнительное исследование. Его результаты интегрируются как положительные, если обнаружены антитела к 2 или 3 белкам ВИЧ-1 или ВИЧ-2.
Иммуноблот подтверждает все хорошие результаты ИФА. В этом случае обнаруживают антитела к gp120/160, gp41 или р24, которые являются структурными единицами трех основных генов СПИДа — gag, pol, and env. У некоторых пациентов, имеющих отрицательные результаты ИФА и ПЦР, иммуноблот показывает несколько положительных полосок. Врач назначает дополнительное исследование р24 для постановки правильного диагноза и исключения ранней фазы ВИЧ-инфекции.
Если полученные результаты подвергаются сомнению, больному предлагают повторять сдачу анализа в течение последующих 3 месяцев. Почти все случаи заболевания ВИЧ подтверждают с помощью системы для проведения иммуноблота — прибора Sanofi. В большинстве случаев обнаруживают антигены ВИЧ, белки р25, gp110/120 и gp160, указывающие на инфицирование вирусом. Ложноположительная проба регистрируется у пациентов, страдающих заболеваниями соединительной ткани, имеющих повышенный уровень билирубина, при взаимодействии с различными вирусными антигенами.
Негативный результат
Для исследования берут образцы сыворотки крови ВИЧ-инфицированных пациентов. Их хранят в замороженном виде при температуре -20°С. Анализ проводят с помощью тест-систем:
- Антиген;
- Рекомбинат-ВИЧ;
- Пептоскрин.
Нередко больного интересует вопрос, может ли быть отрицательный результат иммуноблота на ВИЧ у пациента, имеющего инфицированного сексуального партнера. После проведенного исследования нередко получают сомнительный результат или фиксируются антитела к белкам gp120 и gp160, что указывает на полное отсутствие отрицательных данных. Иногда сомнительный ответ регистрируют у пациентов с бессимптомно протекающей инфекцией.
Неинтерпретируемые результаты
Анализ, проведенный с помощью различных тестов на антитела к ВИЧ-инфекции, иногда не соответствует отрицательным данным и не отвечает критериям серопозитивности. Врачу трудно установить причину появления сомнительного результата.
Некоторые больные не входят в группу риска по инфицированию ВИЧ. Врач может ошибаться в интерпретации результатов исследования в том случае, если инфицирование вызвано другим серотипом.
Сыворотку крови пациента необходимо исследовать в динамике. Если в течение 6 месяцев не наблюдают клинических проявлений СПИДа и отсутствуют факторы риска, у больного регистрируют отсутствие инфекции.
Сомнительные результаты анализа получают у пациентов, имеющих низкий риск инфицирования. В некоторых случаях появление неясных данных вызывают содержащиеся в сыворотке крови иммунные комплексы и аутоантитела.
У некоторых больных возникновение сомнительных результатов вызвано развитием патологических процессов:
- инфекционных заболеваний;
- раковой опухоли;
- аллергической реакции.
У больного появляются изменения в клиническом анализе крови, наблюдают рост С-реактивного белка или повышение СОЭ. У людей, страдающих инфекционными заболеваниями, часто выявляют сомнительную реакцию иммуноблота на ВИЧ.
Пациенты с неопределенными результатами не могут являться донорами крови и биологических материалов.
Линейный метод
Принцип иммуноблоттинга включает:
- Использование нативного вирусного вещества ВИЧ-формат или антигенов в формате Western -Blot.
- Соединение белков ВИЧ с отдельными антителами, выявленными в сыворотке крови.
- Процесс инкубации, происходящий с добавлением меченных антител к человеческим Ig.
- Расшифровку окрашенных полос.
Анализ позволяет врачу своевременно провести интерпретацию результатов исследования. Положительный блот расшифровывают как 2ENV+/- GAG+/POL, неопределенный — 1 ENV+/- GAG+/POL. Отрицательный результат предусматривает отсутствие полос.
Для выполнения анализа применяют рекомбинантный и лизатный иммуноблот. Исследование является специфичным и составляет 99,5%.
Может ли результат анализа быть расшифрован как ложный, интересуются больные. Полученные данные могут быть сформированы в результате стимуляции защитных сил организма (беременности, гемодиализа). При подозрении на острый ретровирусный синдром и контакт с больным ВИЧ-инфекцией пациенту рекомендуют сдать сыворотку на реакцию ПЦР. Повторное серологическое исследование подтверждается путем измерения вирусной нагрузки в представленном образе биологического материала.
Диагностика ВИЧ у новорожденных
Анализ на СПИД у ребенка раннего возраста проводят в том случае, если установлен контакт с ВИЧ-инфицированной матерью. Серологические реакции могут быть положительными в течение 1,5 лет. Антитела в сыворотке крови новорожденного обнаруживают с помощью реакций ИФА, РИФ и иммунного блоттинга.
В течение 9 месяцев жизни ребенка положительный результат появляется в связи с наличием в сыворотке крови антител матери. Антиген р24 имеет специфичность около 65%. В некоторых случаях не удается обнаружить антитела у больного ребенка, если у него диагностировано врожденное низкое содержание глобулинов в крови. Установленный отрицательный результат иммуноблота не является гарантией отсутствия инфекции.
Тестирование проводят в несколько этапов:
- на 1-2 сутки после рождения;
- в 1-2 месяца;
- в полугодовалом возрасте.
Дальнейшее изучение антител проводят до тех пор, пока не будут получены 2 отрицательных результата иммуноблота. Установление диагноза СПИД у ребенка, рожденного от ВИЧ-инфицированной женщины, возможно на основании 2 положительных результатов реакции ПЦР. Передача новорожденному возбудителя ВИЧ-инфекции исключена, если женщина не кормит ребенка грудью.
Исследование при беременности
Будущей матери назначают иммунный и линейный блоттинг, если получен положительный результат на ВИЧ методом ИФА. Если блот подтвержден, пациентка больна СПИДом. В этом случае начиная с 14 недели беременности назначают терапию, предупреждающую инфицирование ребенка.
Может ли ошибиться специалист при выполнении исследования сыворотки крови во время беременности, спрашивают пациентки у лечащего врача. Он обязан выдать на руки беременной женщине копии анализов ПЦР, ИФА для устранения сомнений в их достоверности.
При постановке иммуноблота иногда возникают проблемы, но если ИФА, блот и ПЦР — положительные, диагноз ВИЧ-инфекции подтверждается окончательно. Вероятность получения ложноположительного анализа при беременности велика. В случае если ИФА (+), а иммуноблот (-), женщине предлагают пересдать сыворотку крови.
Читайте также: