Методы определения вирусов картофеля

Обновлено: 28.03.2024

Текст ГОСТ 33539-2015 Карантин растений. Методы выявления и идентификации вируса Т картофеля

Методы выявления и идентификации вируса Т картофеля

Plant quarantine. Methods of detection and identification of Potato virus T

Дата введения 2017-01-01

Предисловие

Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены в ГОСТ 1.0-2015 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2-2015 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены"

Сведения о стандарте

1 РАЗРАБОТАН Федеральным государственным бюджетным учреждением "Всероссийский центр карантина растений" (ФГБУ "ВНИИКР")

2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 29 сентября 2015 г. N 80-П)

За принятие стандарта проголосовали:

Краткое наименование страны по
МК (ИСО 3166) 004-97

Код страны по
МК (ИСО 3166) 004-97

Сокращенное наименование национального органа по стандартизации

Минэкономики Республики Армения

Госстандарт Республики Беларусь

Госстандарт Республики Казахстан

(Поправка. ИУС N 7-2019).

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 23 октября 2015 г. N 1625-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 33539-2015 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 января 2017 г.

5 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

6 ПЕРЕИЗДАНИЕ. Январь 2019 г.

ВНЕСЕНА поправка, опубликованная в ИУС N 7, 2019 год

Поправка внесена изготовителем базы данных

1 Область применения

Настоящий стандарт распространяется на растения картофеля Solanum tuberosum Linnaeus (далее - растения) и устанавливает методы выявления и идентификации (далее - исследование) вируса Т картофеля Potato virus Т (далее - вирус Т картофеля).

Примечание - Общие сведения о вирусе Т картофеля приведены в приложении А.

2 Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие межгосударственные стандарты:

ГОСТ 12.1.004-91 Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования

ГОСТ 12.1.005-88 Система стандартов безопасности труда. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны

ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности

ГОСТ 12.1.019-79 Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты*
__________________
* В Российской Федерации действует ГОСТ Р 12.1.019-2009.

ГОСТ 12.4.009-83 Система стандартов безопасности труда. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание

ГОСТ 12.4.021-75 Система стандартов безопасности труда. Системы вентиляционные. Общие требования

ГОСТ 61-75 Реактивы. Кислота уксусная. Технические условия

ГОСТ OIML R 76-1-2011 Государственная система обеспечения единства измерений. Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания

ГОСТ 83-79 Реактивы. Натрий углекислый. Технические условия

ГОСТ 1942-86 1,2-Дихлорэтан технический. Технические условия

ГОСТ 2156-76 Натрий двууглекислый. Технические условия

ГОСТ 2493-75 Реактивы. Калий фосфорнокислый двузамещенный 3-водный. Технические условия

ГОСТ 4172-76 Реактивы. Натрий фосфорнокислый двузамещенный 12-водный. Технические условия

ГОСТ 4233-77 Реактивы. Натрий хлористый. Технические условия

ГОСТ 4234-77 Реактивы. Калий хлористый. Технические условия

ГОСТ 6259-75 Реактивы. Глицерин. Технические условия

ГОСТ 6552-80 Реактивы. Кислота ортофосфорная. Технические условия

ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия

ГОСТ 9147-80 Посуда и оборудование лабораторные фарфоровые. Технические условия

ГОСТ 11086-76 Гипохлорит натрия. Технические условия

ГОСТ 12026-76 Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия

ГОСТ ИСО/МЭК 17025-2009 Общие требования к компетентности испытательных и калибровочных лабораторий

ГОСТ 20562-2013 Карантин растений. Термины и определения

ГОСТ 21240-89 Скальпели и ножи медицинские. Общие технические требования и методы испытаний

ГОСТ 21507-2013 Защита растений. Термины и определения

ГОСТ 23493-79 Картофель. Термины и определения

ГОСТ 28311-89 Дозаторы медицинские лабораторные. Общие технические требования и методы испытаний

ГОСТ 29267-91 Картофель семенной. Оздоровленный исходный материал. Приемка и методы анализа**
________________
** В Российской Федерации действует ГОСТ Р 55329-2012 "Картофель семенной. Приемка и методы анализа".

Примечание - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодному информационному указателю "Национальные стандарты", который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по выпускам ежемесячного информационного указателя "Национальные стандарты" за текущий год. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

3 Термины, определения и сокращения

3.1 В настоящем стандарте применены термины по ГОСТ 20562, ГОСТ 21507 и ГОСТ 23493, а также следующие термины с соответствующими определениями:

3.1.1 гермоплазма: Коллекция живых растений, семян или вегетативных органов и трансплантатов в культуре in vitro, способных к воспроизводству потомства.

3.1.2 инокулюм (в области карантина растений): Инфицированный материал (живые микроорганизмы), используемый для искусственного заражения.

3.1.3 инокуляция (в области карантина растений): Введение инокулюма в ткани индикаторных растений, а также в питательные среды.

3.1.4 истинные семена: Ботанические семена растений.

3.1.5 линия: Потомство одной меристемы, полученное методом клонального микроразмножения.

3.1.6 макрорастение: Растение, полученное традиционными способами размножения.

3.1.7 меристема [меристематическая ткань]: Ткани растений, состоящие из интенсивно делящихся и сохраняющих физиологическую активность на протяжении всей жизни клеток, обеспечивающих непрерывное нарастание массы растения и предоставляющих материал для образования различных специализированных тканей.

3.1.8 меристемное микрорастение: Миниатюрное растение, полученное из меристематической ткани и культивируемое на искусственной питательной среде.

3.2 В настоящем стандарте применены следующие сокращения:

ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота;

ИФА - иммуноферментный анализ;

кДНК - комплементарная ДНК;

ОРС - открытые рамки считывания;

ОТ - обратная транскрипция;

п. н. - пара нуклеотидов;

ПЦР - полимеразная цепная реакция;

РНК - рибонуклеиновая кислота;

ЭДТА - этилендиаминтетрауксусная кислота.

4 Общие положения

4.1 Для выявления и идентификации вируса Т картофеля применяют отборочные и подтверждающие анализы, схема применения которых представлена на рисунке 1.


Рисунок 1 - Схема выявления и идентификации вируса Т картофеля

4.2 В качестве отборочных анализов используют серологические анализы по 8.3 или молекулярные анализы по 8.4.

4.3 Серологические анализы проводят твердофазным ИФА в модификации DAS-ELISA.

4.4 В случае использования в качестве отборочных анализов серологических методов положительный результат проверяют в подтверждающем молекулярном анализе со специфическими праймерами к вирусу Т картофеля. Образец считают зараженным вирусом Т картофеля при наличии положительных результатов в обоих анализах.

4.5 В случае использования в качестве отборочных анализов молекулярных методов положительный результат проверяют в подтверждающем серологическом анализе. Образец считают зараженным вирусом Т картофеля при наличии положительных результатов в обоих анализах.

4.6 В качестве дополнительного подтверждающего анализа используют биологический тест на индикаторных растениях по 8.5.

4.7 При необходимости установления морфологии вирионов, типичных для представителей семейства Flexiviridae, используют метод электронной микроскопии (см. рисунок А.1, приложение А).

4.8 При первичном обнаружении вируса Т картофеля рекомендуется провести секвенирование гена белка оболочки для сравнения с сиквенсами изолятов вируса Т картофеля в базах данных генетических последовательностей.

4.9 Исходный образец клубней и листьев растений с этикетками, образцы РНК и экстракты сока, полученные из образцов растений, хранят в пробирках при температуре минус 80°С не менее 12 мес; продукты амплификации ПЦР - при температуре минус 20°С не менее 12 мес.

5 Общие требования

5.1 Требования безопасности

При выполнении исследования необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007.

Исследования проводят в перчатках и лабораторных халатах. При работе с раствором бромистого этидия используют резиновые перчатки.

Помещение, в котором проводят исследования, должно быть оборудовано общей приточно-вытяжной вентиляцией по ГОСТ 12.4.021. Содержание вредных веществ в воздухе рабочей зоны не должно превышать норм, установленных ГОСТ 12.1.005.

При работе с электроустановками электробезопасность должна соответствовать требованиям ГОСТ 12.1.019. Помещение лаборатории должно соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. При работе с УФ-излучением необходимо пользоваться защитным экраном и защитными очками.

Утилизацию зараженного растительного материала проводят автоклавированием в течение 20 мин при температуре от 121 до 125°С.

5.2 Требования к лаборатории

Общие требования к лаборатории - по ГОСТ ИСО/МЭК 17025.

Для исключения ложноположительных результатов исследования и некорректной интерпретации полученных результатов ПЦР-лаборатория должна включать следующий набор рабочих зон:

- приема и регистрации образцов;

- первичной обработки образцов;

- детекции продуктов амплификации (отсутствует в случае, если детекцию продуктов ПЦР осуществляют по методике ПЦР в режиме реального времени).

5.3 Требования к персоналу

Персонал, участвующий в исследовании, должен владеть методами ИФА и ПЦР и быть обучен технике обращения с лабораторным оборудованием.

6 Средства измерений, аппаратура, реактивы, посуда и материалы

6.1 Для отбора и хранения проб и образцов по 7.2 используют:

- весы по ГОСТ OIML R 76-1 высокого класса точности с пределом допускаемой абсолютной погрешности однократного взвешивания не более ±0,0001 г;

- камеру морозильную, способную поддерживать температуру до минус 80°С по ГОСТ 26678;

- камеру холодильную диапазоном температур от 2 до 5°С по ГОСТ 26678;

- воду дистиллированную по ГОСТ 6709;

- дихлорэтан по ГОСТ 1942;

- натрия гипохлорит (натрий хлорноватистокислый) по ГОСТ 11086;

- спирт этиловый ректификованный технический по ГОСТ 18300;

- среду питательную Мурасиге-Скуга;

- углерод четыреххлористый по ГОСТ 20288;

- колбы мерные вместимостью 1000 см

8.3.2 Подготовка проб

Исследуемый образец растения, отобранный по 7.2.1, массой 1 г гомогенизируют в пластиковом контейнере с 10 см. Очищенные препараты вируса содержат единственный компонент с коэффициентом седиментации 99 S.

Вирионы (см. рисунок А.1, приложение А) состоят из единственной молекулы однонитевой плюс-смысловой РНК, состоящей из 6539 нуклеотидов, и единственного белка оболочки молекулярной массой 27 кДа. Соотношение РНК и белка в вирионах составляет 95:5.


Рисунок А.1 - Вирионы вируса Т картофеля

Последовательность (сиквенс) нуклеотидов одного из участков генома вируса Т картофеля (3'-терминуса РНК) впервые получен в Японии. Затем получены сиквенс гена РНК-зависимой РНК-полимеразы и сиквенс всего генома вируса Т картофеля.

Геномная РНК вируса Т картофеля содержит poly(A)-tail на 3'-конце, три частично накладывающиеся друг на друга ОРС, а также нетранслируемые участки на 5'- и 3'-концах, состоящие из 74 и 184 нуклеотидов соответственно. Межгенные участки отсутствуют.

ОРС-1 (нуклеотиды 75-4895) кодирует полипротеин молекулярной массой 184,621 кДа. На ОРС-1 имеются участки, кодирующие ферменты РНК-зависимую РНК-полимеразу, метилтрансферазу (нуклеотиды 72-223), папаин-подобную цистеин-протеазу (нуклеотиды 631-712) и хеликазу (нуклеотиды 792-1028).

ОРС-2 (нуклеотиды 4804-5888) кодирует транспортный белок молекулярной массой 40,455 кДа.

ОРС-3 (нуклеотиды 5714-6355) кодирует структурный белок оболочки молекулярной массой 23,622 кДа.

По строению генома вирус Т картофеля существенно отличается от всех вирусов семейства Flexiviridae. По последовательности нуклеотидов вирус Т картофеля наиболее близок к витивирусу А винограда (Grapevine А vitivirus), но отличается от последнего структурой генома (витивирус А винограда содержит пять ОРС). В свою очередь, по строению генома вирус Т картофеля наиболее близок к триховирусам, но геном его меньшей величины и не содержит четвертой ОРС на 3'-конце, наличие которой характерно для большинства триховирусов.

А.3 Поражаемые растения

Вирус Т картофеля поражает растения картофеля и другие растения семейства Solanaceae.

Восприимчивыми к вирусу Т картофеля растениями при искусственной инокуляции являются следующие виды: свекла обыкновенная (Beta vulgaris), катарантус розовый (Catharanthus roseus), марь белая (Chenopodium album), марь гигантская (Chenopodium amaranticolor), марь амброзиевидная (Chenopodium ambrosioides), марь вонючая (Chenopodium foetidum), марь многолистная (Chenopodium foliosum), марь стенная (Chenopodium murale), марь киноа (Chenopodium quinoa), циамопсис четырехкрыльниковый (Cyamopsis tetragonoloba), дурман индийский (Datura metel), дурман обыкновенный (Datura stramonium), дурман фиолетовый (Datura tatula), гомфрена шаровидная (Gomphrena globosa), белена черная (Hyoscyamus niger), томат (Lycopersicon chilense), никандра физалисовидная (Nicandra physalodes), табак Бентхама (Nicotiana benthamiana), табак Кливленда (Nicotiana clevelandii), табак Дебни (Nicotiana debneyi), табак клейкий (Nicotiana glutinosa), табак обыкновенный (Nicotiana tabacum), фасоль обыкновенная (Phaseolus vulgaris), физалис флоридский (Physalis floridana), горох посевной (Pisum sativum), паслен клювовидный (Solanum rostratum), картофель (Solanum tuberosum), шпинат огородный (Spinacia oleracea), звездчатка средняя (Stellaria media), бобы овощные (Vicia faba), вигна китайская (Vigna unguiculata), фасоль стручковая длинная (Vigna unguiculata subsp. sesquipedalis).

Невосприимчивы к вирусу Т картофеля следующие виды растений: амарант хвостатый (Amaranthus caudatus), сельдерей пахучий (Apium graveolens), капуста полевая (Brassica campestris), огурец обыкновенный (Cucumis sativus), гвоздика турецкая (Dianthus barbatus), ячмень обыкновенный (Hordeum vulgare), латук посевной (Lactuca sativa), томат (Lycopersicon esculentum), петуния садовая (Petunia hybrida), шпинат новозеландский (Tetragonia tetragonioides), клевер луговой (Trifolium pretense), пшеница мягкая (Triticum aestivum), кукуруза (Zea mays).

А.4 Способы переноса и распространения

Вирус Т картофеля эффективно переносится с истинными семенами, пыльцой и клубнями картофеля.

Вирус переносится с пыльцой картофеля южноамериканского (Solanum demissum), но не с пыльцой дурмана обыкновенного (Datura stramonium) и никандры физалисовидной (Nicandra physalodes). Вирус Т картофеля был выявлен также в семенах зараженных растений мари киноа (Chenopodium quinoa).

Естественные природные переносчики вируса Т картофеля неизвестны. Вирус не переносится персиковой тлей (Myzus persicae) и большой картофельной тлей (Macrosiphum euphorbiae).

А.5 Географическое распространение

Регион ЕОКЗР: отсутствует.

Европейский союз: отсутствует.

Приложение Б (справочное). Симптомы поражения вирусом Т картофеля

Б.1 Большинство сортов картофеля вирус Т картофеля заражает в бессимптомной форме.

На листьях растений сорта King Edward в результате заражения вирусом Т картофеля развивались симптомы слабого некроза жилок и хлоротической пятнистости, а у растений сорта Cara - некрозы верхушек побегов через 12 дней после инокуляции. На растениях сорта Superior вирус вызывал слабую мозаику и некротический рисунок на листьях, а также угнетение роста побегов. На листьях растений сорта Cara, инокулированных перуанским изолятом вируса Т картофеля, развивались симптомы сильного системного некроза. Но после инокуляции растений этого сорта боливийским изолятом вируса Т картофеля развились лишь симптомы слабой мозаики и посветления жилок листьев.


Рисунок Б.1 - Симптомы поражения растения картофеля вирусом Т


Рисунок Б.2 - Системная крапчатость на листьях индикаторного растения Nicotiana debneyi, вызванная инокуляцией вируса Т картофеля


Рисунок Б.3 - Местные некрозы на инокулированных листьях индикаторного растения Phaseolus vulgaris

Ключевые слова: вирус Т картофеля, методы выявления, методы идентификации, биологический тест, серологический анализ, молекулярный анализ, ИФА, ПЦР, ДНК, РНК, праймер, индикаторные растения

Редакция документа с учетом
изменений и дополнений подготовлена

Технические условия и методы определения качества

Seed potatoes. Specifications and methods of determining the quality

Предисловие

Цели, основные принципы и общие правила проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены"

Сведения о стандарте

1 РАЗРАБОТАН Федеральным государственным бюджетным научным учреждением "Всероссийский научно-исследовательский институт картофельного хозяйства им.А.Г.Лорха" (ФГБНУ ВНИИКХ), Союзом участников рынка картофеля и овощей (Картофельный Союз), Федеральным государственным бюджетным учреждением "Российский сельскохозяйственный центр" (ФГБУ "Россельхозцентр")

2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 25 октября 2016 г. N 92-П)

За принятие проголосовали:

Краткое наименование страны по МК (ИСО 3166) 004-97

Сокращенное наименование национального органа по стандартизации

Минэкономики Республики Армения

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 20 января 2017 г. N 16-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 33996-2016 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 января 2018 г.

5 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

6 ПЕРЕИЗДАНИЕ. Май 2020 г.

Информация о введении в действие (прекращении действия) настоящего стандарта и изменений к нему на территории указанных выше государств публикуется в указателях национальных стандартов, издаваемых в этих государствах, а также в сети Интернет на сайтах соответствующих национальных органов по стандартизации.

В случае пересмотра, изменения или отмены настоящего стандарта соответствующая информация будет опубликована на официальном интернет-сайте Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации в каталоге "Межгосударственные стандарты"

1 Область применения

Настоящий стандарт распространяется на семенной картофель и устанавливает требования к семенному картофелю, включая исходный материал и методы определения его качества.

2 Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие межгосударственные стандарты:

ГОСТ 12.0.004 Система стандартов безопасности труда. Организация обучения безопасности труда. Общие положения

ГОСТ 12.1.005 Система стандартов безопасности труда. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны

ГОСТ 12.3.041 Система стандартов безопасности труда. Применение пестицидов для защиты растений. Требования безопасности

ГОСТ OIML R 76-1 Государственная система обеспечения единства измерений. Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания

ГОСТ 427 Линейки измерительные металлические. Технические условия

ГОСТ 11354 Ящики из древесины и древесных материалов многооборотные для продукции пищевых отраслей промышленности и сельского хозяйства. Технические условия

ГОСТ 13502 Пакеты из бумаги для сыпучей продукции. Технические условия*

* Действует ГОСТ 33772-2016 "Полеты из бумаги и комбинированных материалов. Общие технические условия".

ГОСТ 20290 Семена сельскохозяйственных культур. Определение посевных качеств семян. Термины и определения

ГОСТ 21133 Поддоны ящичные специализированные для картофеля, овощей, фруктов и бахчевых культур. Технические условия

ГОСТ 23493 Картофель. Термины и определения

ГОСТ 30090 Мешки и мешочные ткани. Общие технические условия

3 Термины, определения и сокращения

3.1 В настоящем стандарте применены термины по ГОСТ 20290 и ГОСТ 23493, а также следующие термины с соответствующими определениями:

3.1.1 исходный материал: Картофель, определенного ботанического сорта, свободный от вирусной и другой инфекции, полученный методами биотехнологии и отбора, предназначенный для получения оригинального семенного картофеля и выращенный оригинатором сорта или уполномоченным им лицом (для сортов, охраняемых патентом), или лицами в соответствии с порядком и регламентом производства исходного материала, установленными нормативными документами стран, принявшими стандарт*.

* В Российской Федерации действует Государственный реестр селекционных достижений, допущенных к использованию (сорта растений). - М.: Ежегодное официальное издание ФГУ "Государственная комиссия РФ по испытанию и охране селекционных достижений".

3.1.2 оригинальный семенной картофель: Семенной картофель, полученный от размножения исходного материала, произведенный оригинатором сорта или уполномоченным им лицом (для сортов, охраняемых патентом) и предназначенный для производства элитного семенного картофеля.

3.1.3 элитный семенной картофель: Семенной картофель, полученный от последовательного размножения оригинального семенного картофеля.

3.1.4 репродукционный семенной картофель: Семенной картофель, полученный от последовательного размножения элитного семенного картофеля.

3.2 В настоящем стандарте применяют следующие сокращения:

ИМ - исходный материал (in vitro микрорастения и микроклубни, мини-клубни);

ОС - оригинальный семенной картофель;

ЭС - элитный семенной картофель;

ПП-1 - первое полевое поколение из мини-клубней;

ССЭ - супер-суперэлита, не более чем второе полевое поколение;

СЭ - суперэлита, не более чем третье полевое поколение;

Э - элита, не более чем четвертое полевое поколение;

PC - репродукционный семенной картофель;


- первая и вторая репродукции семенного картофеля после элиты, не более чем шестое полевое поколение;

ХВК - X вирус картофеля;

SBK - S вирус картофеля;

МВК - М вирус картофеля;

YBK - Y вирус картофеля;

ВСЛК - вирус скручивания листьев картофеля.

ИФА - иммуноферментный анализ;

ИХА - иммунохроматографический анализ;

ПЦР - полимеразная цепная реакция.

4 Классификация

Семенной картофель по качеству клубней и качеству посадок в зависимости от ступени размножения (поколения семенного материала) подразделяют на категории:

- категория исходного и оригинального семенного картофеля - включает исходный материал (микрорастения, микроклубни, мини-клубни), первое полевое поколение из мини-клубней и супер-суперэлитный семенной картофель (второе полевое поколение). Категория равнозначна категории предбазисного семенного картофеля (РВ, S) по классификации, принятой в странах ЕС;

- категория элитного семенного картофеля - включает суперэлитный и элитный семенной картофель. Категория равнозначна категории базисного семенного картофеля (SE, Е) по классификации, принятой в странах ЕС;

- категория репродукционного семенного картофеля - включает первую и вторую репродукции после элиты для реализации на семенные цели, а также последующие, после второй, репродукции для использования на собственные нужды их производителей или для использования в соответствии с порядком и регламентом, установленными нормативными документами стран, принявшими стандарт. Категория равнозначна категории сертифицированного семенного картофеля (А1-А2) по классификации, принятой в странах ЕС [1]*.

* Поз. [1]-[6] см. раздел Библиография, здесь и далее по тексту. - Примечание изготовителя базы данных.

5 Технические требования

5.1 Характеристики

5.1.1 Для использования в производственном и торговом обороте допускается семенной картофель сортов, внесенных в Государственные реестры селекционных достижений стран - участниц Евразийского экономического союза (далее - Союз) или в иные нормативные документы стран, принявших стандарт*.

* В Российской Федерации действует Перечень вредителей, возбудителей болезней растений, сорняков, имеющих карантинное значение для Российской Федерации. Утвержден Минсельхозом России 31 марта 2003 г.

5.1.2 Семенной картофель по качеству посадок при апробационном осмотре по внешним признакам и качеству партий клубней должен соответствовать требованиям, установленным для соответствующих категорий в таблице 1, а также в 5.1.3-5.1.8.

Таблица 1 - Нормативные допуски для посадок и партий семенного картофеля по показателям сортовой чистоты и проявлению внешних признаков наиболее опасных болезней на растениях и клубнях*

* В Российской Федерации действует Перечень вредителей, возбудителей болезней растений, сорняков, имеющих карантинное значение для Российской Федерации. Утвержден Минсельхозом России 31 марта 2003 г.

Методы выявления и идентификации вируса Т картофеля

Plant quarantine. Methods of detection and identification of Potato virus T

Дата введения 2017-01-01

Предисловие

Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены в ГОСТ 1.0-2015 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2-2015 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены"

Сведения о стандарте

1 РАЗРАБОТАН Федеральным государственным бюджетным учреждением "Всероссийский центр карантина растений" (ФГБУ "ВНИИКР")

2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 29 сентября 2015 г. N 80-П)

За принятие стандарта проголосовали:

Сокращенное наименование национального органа по стандартизации

Минэкономики Республики Армения

Госстандарт Республики Беларусь

Госстандарт Республики Казахстан

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 23 октября 2015 г. N 1625-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 33539-2015 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 января 2017 г.

5 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

6 ПЕРЕИЗДАНИЕ. Январь 2019 г.

ВНЕСЕНА поправка, опубликованная в ИУС N 7, 2019 год

Поправка внесена изготовителем базы данных

1 Область применения

Настоящий стандарт распространяется на растения картофеля Solanum tuberosum Linnaeus (далее - растения) и устанавливает методы выявления и идентификации (далее - исследование) вируса Т картофеля Potato virus Т (далее - вирус Т картофеля).

Примечание - Общие сведения о вирусе Т картофеля приведены в приложении А.

2 Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие межгосударственные стандарты:

ГОСТ 12.1.004-91 Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования

ГОСТ 12.1.005-88 Система стандартов безопасности труда. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны

ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности

ГОСТ 12.1.019-79 Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты*

* В Российской Федерации действует ГОСТ Р 12.1.019-2009.

ГОСТ 12.4.009-83 Система стандартов безопасности труда. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание

ГОСТ 12.4.021-75 Система стандартов безопасности труда. Системы вентиляционные. Общие требования

ГОСТ 61-75 Реактивы. Кислота уксусная. Технические условия

ГОСТ OIML R 76-1-2011 Государственная система обеспечения единства измерений. Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания

ГОСТ 83-79 Реактивы. Натрий углекислый. Технические условия

ГОСТ 1942-86 1,2-Дихлорэтан технический. Технические условия

ГОСТ 2156-76 Натрий двууглекислый. Технические условия

ГОСТ 2493-75 Реактивы. Калий фосфорнокислый двузамещенный 3-водный. Технические условия

ГОСТ 4172-76 Реактивы. Натрий фосфорнокислый двузамещенный 12-водный. Технические условия

ГОСТ 4233-77 Реактивы. Натрий хлористый. Технические условия

ГОСТ 4234-77 Реактивы. Калий хлористый. Технические условия

ГОСТ 6259-75 Реактивы. Глицерин. Технические условия

ГОСТ 6552-80 Реактивы. Кислота ортофосфорная. Технические условия

ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия

ГОСТ 9147-80 Посуда и оборудование лабораторные фарфоровые. Технические условия

ГОСТ 11086-76 Гипохлорит натрия. Технические условия

ГОСТ 12026-76 Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия

ГОСТ ИСО/МЭК 17025-2009 Общие требования к компетентности испытательных и калибровочных лабораторий

ГОСТ 18300-87 Спирт этиловый ректификованный технический. Технические условия*

ГОСТ 20562-2013 Карантин растений. Термины и определения

ГОСТ 21240-89 Скальпели и ножи медицинские. Общие технические требования и методы испытаний

ГОСТ 21507-2013 Защита растений. Термины и определения

ГОСТ 23493-79 Картофель. Термины и определения

ГОСТ 28311-89 Дозаторы медицинские лабораторные. Общие технические требования и методы испытаний

ГОСТ 29267-91 Картофель семенной. Оздоровленный исходный материал. Приемка и методы анализа**

** В Российской Федерации действует ГОСТ Р 55329-2012 "Картофель семенной. Приемка и методы анализа".

Примечание - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодному информационному указателю "Национальные стандарты", который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по выпускам ежемесячного информационного указателя "Национальные стандарты" за текущий год. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

3 Термины, определения и сокращения

3.1 В настоящем стандарте применены термины по ГОСТ 20562, ГОСТ 21507 и ГОСТ 23493, а также следующие термины с соответствующими определениями:

3.1.1 гермоплазма: Коллекция живых растений, семян или вегетативных органов и трансплантатов в культуре in vitro, способных к воспроизводству потомства.

3.1.2 инокулюм (в области карантина растений): Инфицированный материал (живые микроорганизмы), используемый для искусственного заражения.

3.1.3 инокуляция (в области карантина растений): Введение инокулюма в ткани индикаторных растений, а также в питательные среды.

3.1.4 истинные семена: Ботанические семена растений.

3.1.5 линия: Потомство одной меристемы, полученное методом клонального микроразмножения.

3.1.6 макрорастение: Растение, полученное традиционными способами размножения.

3.1.7 меристема [меристематическая ткань]: Ткани растений, состоящие из интенсивно делящихся и сохраняющих физиологическую активность на протяжении всей жизни клеток, обеспечивающих непрерывное нарастание массы растения и предоставляющих материал для образования различных специализированных тканей.

3.1.8 меристемное микрорастение: Миниатюрное растение, полученное из меристематической ткани и культивируемое на искусственной питательной среде.

ГОСТ Р 55329-2012

НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

Приемка и методы анализа

Seed potatoes. Acceptance rules and methods of analysis

Дата введения 2014-01-01

1 РАЗРАБОТАН Государственным научным учреждением Всероссийским научно-исследовательским институтом картофельного хозяйства им. А.Г.Лорха Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИИКХ Россельхозакадемии) совместно с Федеральным государственным бюджетным учреждением "Российский сельскохозяйственный центр" (ФГБУ "Россельхозцентр")

2 ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 359 "Семена и посадочный материал"

4 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

1 Область применения

Настоящий стандарт распространяется на семенной картофель и устанавливает правила приемки и методы определения его сортовых и посадочных качеств.

2 Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:

ГОСТ Р 53136-2008 Картофель семенной. Технические условия

ГОСТ 12.0.004-90 Система стандартов безопасности труда. Организация обучения безопасности труда. Общие положения

ГОСТ 12.1.005-88 Система стандартов безопасности труда. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны

ГОСТ 12.3.041-86 Система стандартов безопасности труда. Применение пестицидов для защиты растений. Требования безопасности

ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия

ГОСТ 11354-93 Ящики из древесины и древесных материалов многооборотные для продукции пищевых отраслей промышленности и сельского хозяйства. Технические условия

ГОСТ 12026-76 Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия

ГОСТ 21133-87 Поддоны ящичные специализированные для картофеля, овощей, фруктов и бахчевых культур. Технические условия

ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ 30090-93 Мешки и мешочные ткани. Общие технические условия

Примечание - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодному информационному указателю "Национальные стандарты", который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по выпускам ежемесячного информационного указателя "Национальные стандарты" за текущий год. Если заменен ссылочный стандарт, на который дана датированная ссылка, то рекомендуется использовать версию этого стандарта с указанным выше годом утверждения (принятия). Если после утверждения настоящего стандарта в ссылочный стандарт, на который дана датированная ссылка, внесено изменение, затрагивающее положение, на которое дана ссылка, то это положение рекомендуется применять без учета данного изменения. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, рекомендуется применять в части, не затрагивающей эту ссылку.

3 Термины, определения и сокращения

В настоящем стандарте применены термины, определения и сокращения по ГОСТ Р 53136, а также следующие сокращения:

ИФА - иммуноферментный анализ;

ИХА - иммунохроматографический анализ;

ПЦР - полимеразная цепная реакция.

4 Правила приемки

4.1 Сортовая чистота, зараженность вирусными и бактериальными болезнями заявленных категорий/классов семенного картофеля оцениваются на основе полевых обследований и апробации по [1] со следующими изменениями и дополнениями (см. приложение А).

4.2 Клубни семенного картофеля принимают партиями.

Партией считают любое количество клубней семенного картофеля одного сорта, одной категории/класса и однородных по качеству.

На каждую партию семенного картофеля выдают документ, удостоверяющий его сортовые и посадочные качества.

Примечание - Правила установления срока действия документа, удостоверяющего посадочные качества семенного картофеля, срок действия, продления срока действия, выдачи нового документа - по приложению Ж.

4.2.1 Для проверки посадочных качеств упакованного семенного картофеля из разных мест партии проводят выборку упаковочных единиц:

- от партии клубней, упакованных в мешках или ящиках, - в соответствии с таблицей 1:

Таблица 1 - Объем выборки от партии семенного картофеля, упакованного в мешки или ящики, массой 30-40 кг

Стеблевая нематода картофеля

Микроскопический круглый червь стеблевая нематода картофеля (Ditylenchus destructor) поражает подземные органы растений и наносит существенный вред сельскохозяйственным культурам.

Вредитель встречается практически во всех зонах, где выращивается картофель. Помимо картофеля, нематода поражает множество сорных и культурных растений: морковь, свёкла, люцерна, клевер, чеснок, ирис, тюльпан, томаты, ревень, арахис, хмель, мята и т.п. .

Проникая в клубень через столоны, чечевички или повреждения, вызванные проволочником, стеблевая нематода картофеля активно размножается и быстро поражает весь клубень. Заражение происходит во время вегетации в период формирования и развития клубней и продолжается в постуборочный период во время хранения.

Поражение клубней нематодой сопровождается типичными симптомами: кожура высыхает, темнеет и приобретает металлический блеск. Само место поражения немного вдавлено, при прикосновении под кожурой чувствуется пустота. Мякоть под повреждённой кожурой становится трухлявой. При сильном поражении клубней происходит растрескивание кожуры, что приводит к вторичной инфекции клубня грибами, бактериями и свободно живущими нематодами. Нередко стеблевая нематода картофеля проникает во внутренние ткани клубней.

Стеблевая нематода картофеля

Стеблевая нематода картофеля. Диагностика

Уровень заражения семенного картофеля стеблевой нематодой, а также методы отбора проб и определения качества семенного картофеля регламентируются ГОСТ 33996-2016 “Картофель семенной. Технические условия и методы определения качества”:

  • в репродукционном семенном картофеле допускается наличие клубней, поражённых стеблевой нематодой, (в процентах по счету) не более 0.5% (раздел 5.1.9)
  • клубневой анализ проводят на объединённой пробе, собранной из точечных проб, объёмом не менее 250 клубней (раздел 6.4.3)
  • для определения наличия клубней, поражённых стеблевой нематодой, из объединенной пробы из разных мест отбирают 100 клубней (раздел 7.2.8)
  • для определения стеблевой нематоды срезают тонкий слой покровной ткани с пуповинной части клубня и выявляют поврежденные участки под кожицей (раздел 7.2.8)

Традиционная диагностика стеблевой нематоды заключается в визуальном осмотре повреждённых участков клубней и выделении живых нематод инкубированием фрагментов клубней в воде. Последующее микроскопирование позволяет подтвердить наличие вредителя – стеблевая нематода картофеля имеет характерный стилет, посредством которого она повреждает растительные ткани.

В испытательной лаборатории ООО “Независимая диагностическая лаборатория” разработан метод молекулярно-биологической диагностики стеблевой нематоды картофеля, основанный на проведении полимеразной цепной реакции в режиме реального времени с использованием зондов Taqman. Метод позволяет с высокой точностью и достоверностью выявлять заражение клубней картофеля стебелевой нематодой даже при отсутствии видимых признаков поражения.

Испытательная лаборатория ООО “Независимая диагностическая лаборатория” оказывает услуги по диагностике семенного картофеля на наличие стеблевой нематоды с учётом требований соответствующего ГОСТ.

Читайте также: