Может ли при сифилисе анализ на гепатит быть ложноположительным

Обновлено: 19.04.2024

Что делать если результат анализа на сифилис положительный – первое это не паниковать.

Во-первых, в настоящее время медицина достигла существенных успехов в лечении.

При правильном лечении этого заболевания в любой стадии можно излечиться или заставить болезнь никак себя не проявлять в течении всей жизни.

Во-вторых, один положительный анализ без каких-то симптомов и проявлений сифилиса это еще не болезнь.

В настоящее время примерно у половины больных с положительным анализом на сифилис устанавливается что он не болеет этим заболеванием.

Причины таких результатов – ложно положительные реакции на сифилис от множества причин.

Может быть положительна как одна, так и несколько реакций на сифилис.

Сифилис сегодня является одним из самых опасных и распространенных в России венерических заболеваний. Что бы поставить диагноз женщинам, гинеколог смотрит на симптомы и жалобы пациента.

О том что делать если
анализ на сифилис положительный
рассказывает подполковник
медицинской службы, врач
Ленкин Сергей Геннадьевич

Содержание данной статьи проверено и подтверждено на соответствие медицинским
стандартам врачем дерматовенерологом, урологом, к.м.н.

Ленкиным Сергеем Геннадьевичем

Наименование	Срок	Цена
Прием венеролога	900.00 руб.
Микрореакция на сифилис качественно (RPR)	1 д.	500.00 руб.

Что делать если результат анализа на сифилис положительный

Наиболее частые причины ложно положительных реакций на сифилис:

Беременность и роды
Аллергические заболевания
Аутоиммунные и ревматические заболевания
Острые респираторные заболевания
Отравления

Поэтому при любой положительной реакции на сифилис нужно обратиться к врачу венерологу.

Положительный анализ без каких-то симптомов

Врач венеролог обычно рекомендует комплекс анализов на сифилис, и проводит комплексный осмотр пациента.

В нашем платном КВД имеется самый полный набор анализов на сифилис, который есть в России в одном учреждении:

I. Суммарные антитела
II. Иммуноглобулин М
III. RPR
IV. РИФ 200
V. РИФ абс
VI. КСР
VII. РПГА
VIII. РИБТ

Это самый широкий перечень анализов в одном месте.

Сроки изготовления анализов колеблются от 20 минут до 7 дней.

При установлении диагноза ложно положительной реакции на сифилис

Пациент проходит обследование в нашем платном КВД у:

Иммунолога
Эндокринолога
Инфекциониста
Ревматолога

В случае установления невенерологического диагноза проводится лечение у соответствующего специалиста.

При положительных анализах на сифилис проводится диагностика:

A. Периода сифилиса (первичный, вторичный, третичный)
B. Наличия проявлений сифилиса (скрытый, явный)
C. Давности заболевания (ранний, поздний)

После установления окончательного диагноза назначают лечение.

Реакции на сифилис могут оставаться положительными длительно

При прохождении лечения обязательно назначают последующий контроль изменяющихся сифилитических реакций.

Некоторые реакции на сифилис могут оставаться положительными длительно – месяцы и даже годы.

Здесь на помощь приходит учет постепенного снижения концентрации этих анализов.

Именно поэтому при получении положительных анализов на сифилис, выполняют их в количественных цифровых выражениях.

Положительный результат на сифилис: реакция Вассермана

Реакцию Вассермана применяют с 1906 года.

В это время был открыт этот вид диагностического исследования на сифилис.

Основана эта методика на определении антител к антигену.

В бланке с результатами исследования положительная реакция отмечается плюсом.

4 креста это резко положительный результат.

1 плюс свидетельствует о сомнительной реакции.

В случае ложноположительного ответа специалист может назначить дополнительные методы лабораторных исследований на сифилис.

Если болезнь находится на первой стадии развития, то положительный ответ будет виден только на 6 неделе болезни.

Следует отметить! Впервые дни после заражения результат будет отрицательным, поэтому через время следует повторить исследование.

На второй и третей стадии сифилиса результат будет всегда положительным.

Положительная реакция Вассермана может быть и при развитии других болезней у человека, таких как:

Лейкемия
Проказа
Туберкулез
Лептоспироз
Тиф
Злокачественное новообразование
Скарлатина

В этом случае следует пройти дополнительные исследования.

На практике, в современных лабораториях, реакция Вассермана используется редко.

Хотя, это название часто фигурирует.

Так могут называть и другие скрининговые методики.

RPR анализ на сифилис положительный

Возбудитель сифилиса, бледная трепонема, содержит определенное количество антигенов.

Проникая в организм у человека, к возбудителю начинают вырабатываться антитела.

RPR является антикардиолипиновым скрининг-тестом.

Он помогает обнаружить антитела класса G и M.

При наличии у больного первой стадии сифилиса данный метод в 80 случаях из 100, дает положительный результат.

Спустя одну две недели после заражения и появления шанкра, скрининг-тест позитивный.

После этого периода показатели титров начитают уменьшаться.

Иногда данный метод исследования может показывать ложноположительные результаты.

После положительного результата теста необходимо обратится к венерологу для дальнейшего обследования и лечения.

Чтобы результат был достоверный, следует выполнять ряд обязательных правил:

1. Анализ выполняется на голодный желудок
2. Забор материала для исследования следует проводить утром
3. Отменить прием лекарственных препаратов

Наличие антикардиолипиновых антител говорит о положительном результате.

В результате так же указывается титр.

Если он не высокий, то следует повторить исследования через две недели.

Первичный серопозитивный сифилис – что это?

Такой диагноз устанавливается, именно при положительном серологическом исследовании.

Может говорить о том, что заражение произошло от 1 до 3 месяцев назад.

Вторичный серопозитивный сифилис - этот результат можно получить через три месяца после заражения.

Если сифилис присутствует в организме на протяжении 3-4 лет, в результате будет указан третичный серопозитивный сифилис.

Положительный анализ на сифилис ИФА

Очень важно применять те методы диагностики, которые помогут точно и быстро поставить диагноз.

Своевременно пройденные исследования помогут быстрее вылечить сифилис.

Метод лабораторного исследования ИФА легко справляется с этой задачей, при определении возбудителя.

Этот вид анализа может указать стадию заболевания.

Такой метод лабораторной диагностики достаточно чувствительный.

В 90% случаев является результативным.

При изучении крови больного на сифилис определяют антитела IgG, IgA, IgM к антигенам заболевания.

Каждый класс антител имеет свои характеристики:

1. При обнаружении IgA можно сказать, что заболевание длиться примерно месяц
2. Время от момента заражения может указывать IgM, но иногда он может свидетельствовать про обострение заболеваний находящихся в хронической форме
3. IgG иммуноглобулин, как правило, указывает либо на острую стадию болезни, либо на неэффективное лечение

IgG может остаться положительными после перенесенной инфекции.

Что делать, если иммуноферментный анализ на сифилис дал положительный ответ?

Первым делом следует успокоиться и не паниковать.

Данный метод способен обнаружить только антитела к заболеванию, но не самого возбудителя.

Наличие положительного результата может говорить о следующем:

Человек недавно прошел курс медикаментозного лечения
Болезнь находится на одной из стадий развития

Положительный результат является поводом для проведения дополнительных исследований.

Прямой анализ на сифилис ПЦР метод положительный

На сегодняшний день существует много различных методов диагностики этого заболевания.

Одним из современных методов исследования является полимеразная цепная реакция.

Такой метод может дать достоверные результаты.

Для проведения такого анализа необходимо сделать забор крови у пациента.

Метод ПЦР выполняется с применением современного оборудования.

В отобранном материале больного выделяют ДНК возбудителя сифилиса.

В 100% случае такой анализ позволяет врачу без труда поставить диагноз.

Даже при ранней стадии заболевания и небольшом количестве возбудителя, ПЦР может дать положительный результат.

Тестирование ПЦР основано на определении частичек самого инфекционного агента, а не антител к нему.

Поэтому анализ считается более точным, чем серологические пробы.

Запомните! Положительный результат после проведенного лабораторного исследования методом ПЦР требует своевременного начала лечения.

Положительный результат на сифилис: лечение

Помните! При первой стадии сифилиса лечение проходит быстрее и не вызывает осложнений.

Бледная трепонема воздействует на защитную систему организма, а именно на иммунитет.

Когда трепонема начинает размножаться, проявляются неприятные симптомы.

Курс лечения при положительном сифилисе будет разный для каждой стадии заболевания.

Рассмотрим отдельно каждую.

Основным в лечении первичного сифилиса является антибиотик пенициллиновой группы.

Вводит его, следует ежедневно, внутримышечно.

Также назначаются антигистаминные препараты.

Вторичный сифилис лечится пенициллином.

Если у человека отмечается непереносимость данного препарата, его могут заменить цефтриаксоном.

Эти группы препаратов вводятся в виде инъекций.

На поздних стадиях вводят внутримышечно бензилпенициллин в количестве 2,4 млн. ед.

Делается всего три укола, один в неделю.

Дополнительно в форме таблеток назначается тетрациклин по 500 мг. 4 раза в день.

Продолжительность курса составляет месяц.

Важно! Самостоятельное лечение и несоблюдение назначенной врачом схемы строго запрещено.

Все дозы и курс медикаментозного лечения подбирает лечащей врач, с учетом индивидуальных особенностей организма человека.

Если соблюдаются все указания врача, и лечение было правильно назначено, выздоровление может наступить достаточно быстро.

Положительный тест на сифилис: что делать?

Как только был получен положительный результат на сифилис, следует начать курс лечения.

При обнаружении любого положительного анализа на сифилис обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с 15 летним опытом работы.

Сифилис является классическим венерическим заболеванием.

И по праву считается одной из самых тяжело протекающих и сложно поддающихся лечению половых инфекций.

Заражение сифилисом в подавляющем большинстве случаев происходит при половом контакте с больным человеком.

Это может быть не только традиционный вагинальный секс, но и анальный секс, оральные ласки, поцелуи.

В тех случаях, когда здоровый человек соприкасается с бельем, полотенцами, банными принадлежностями, загрязненными выделениями больного.

Сифилитическая инфекция передается при переливании крови и внутриутробно через плаценту от больной матери плоду.

Инкубационный период инфекции может составлять от 15 до 25 дней.

Возбудителем заболевания являются патогенные бактерии спиралевидной формы – бледные трепонемы, или спирохеты.

Диагностика сифилиса осуществляется в комплексе с учетом клинических признаков и данных лабораторных исследований.

Лабораторная диагностика сифилиса включает в себя микроскопию и бакпосев мазка, иммунологические реакции и при необходимости ПЦР.

В качестве материала для исследования используется отделяемое шанкра (язвы или эрозии, возникающей на коже в месте первичного заражения), кровь.

Основополагающими в диагностике сифилиса являются серологические исследования.

Их информативность базируется на способности организма синтезировать специфические иммуноглобулины – антитела в ответ на проникновение в ткани бледной трепонемы.

Серодиагностика направлена на обнаружение в сыворотке крови антител к возбудителю сифилиса.

Серологические реакции при диагностике сифилиса делятся на неспецифические и специфические.

К первым относятся РМП, реакция Вассермана, ко вторым - РИФ, ИФА, РПГА, иммуноблотинг.

Специфические тесты обнаруживают в крови антитела к трепонеме даже при перенесенной в прошлом сифилитической инфекции.

Ложный сифилис у беременных

Нередки случаи получения ложноположительных результатов серодиагностики сифилиса.

Особенно часто это наблюдается у женщин в период беременности.

Такое состояние называют ложным сифилисом беременных.

Это связано с особенностями иммунных процессов в организме при вынашивании плода.

Какие анализы могут быть ложными на сифилис?

Как правило, это неспецифические серологические реакции (RW).

Применение специфических тестов позволяет исключить диагностические ошибки с большей точностью.

В каких случаях могут возникать ложные результаты на сифилис?

Кроме того, ложные положительные результаты на сифилис могут наблюдаться в следующих случаях:

Аутоиммунные заболевания (системная красная волчанка, тиреоидит)
Инфекционные болезни
Сахарный диабет
Болезни сердца
Прививки
Алкогольная или наркотическая интоксикация
Употребление жирной, тяжелой, соленой или жареной пищи за день до забора крови на анализ
Перенесенный в прошлом сифилис

В случае получения ложноположительного результата необходима повторная сдача анализов.

В некоторых случаях для верификации диагноза делают анализ ПЦР.

Этот метод позволяет окончательно устанавливать отсутствие или наличие в организме бледной трепонемы.

При выявлении возбудителя сифилиса необходимо обязательное лечение всех половых партнеров больного пациента.

Во время лечения исключается прием алкоголя и сексуальные контакты.

Основу медикаментозного лечения инфекции составляет терапия антибиотиками.

Важную роль играют стимуляция иммунитета с помощью иммуномодулирующих средств, защита печени с помощью гепатопротекторов, прием эубиотиков.

Ложноположительные (ЛПР) и ложноотрицательные серологические реакции на сифилис

Ложноположительные серологические реакции на сифилис (ЛПР) – это положительные реакции у людей, которые никогда не болели и в момент обследования не болеют сифилисом. То есть специфической инфекции в организме нет и не было, а серологические реакции дают положительный результат.

Ложноположительными, или неспецифическими результатами называют положительные результаты серологических реакций на сифилис у лиц, не страдающих сифилитической инфекцией, и не болевших сифилисом в прошлом.

Ошибочный анализ на сифилис из-за технических причин

ЛПР могут быть обусловлены техническими погрешностями и ошибками при выполнении исследований, а также качеством реагентов. Несмотря на многочисленные достоинства диагностикумов для РПГА, ИФА и РИФ и их модификаций, применяемых для диагностики сифилиса, в отдельных случаях отмечаются недостоверные результаты анализов. Это может быть связано как с недостаточным уровнем квалификации и профессиональной ответственности персонала (так называемые небиологические или технические ошибки), так и с особенностями тестируемых образцов (биологические ошибки).

Ошибки небиологического характера могут возникать на любом этапе проведения исследований: преданалитическом, аналитическом, и постаналитическом т.е. при заборе, транспортировке, хранении биоматериала, использовании хилезной, проросшей сыворотки, при неоднократном замораживании и оттаивании тестируемых образцов, а также при использование диагностикумов с истекшим сроком годности и т.д. В частности, несоблюдение условий и сроков хранения диагностических наборов является причиной снижения чувствительности реакции и получения ложноотрицательных результатов.

Ложноположительные результаты может вызвать контаминация сывороток пациентов, серонегативных в отношении бледной трепонемы, следами сывороток серопозитивных лиц, что может иметь место при приготовлении сывороток.

Существует множество других технических ошибок, приводящих к получению недостоверных (ложноотрицательных и ложноположительных), сомнительных результатов исследования. В некоторых лабораториях не осуществляется внутри- и внешнелабораторный контроль качества исследований на сифилис, что ведет к получению диагностических ошибок и неуверенности врачей-лаборантов в результатах анализа.

Источником ошибок при постановке неспецифических тестов могут быть неиспользование контрольных сывороток, неравномерная концентрация антигена в опыте из-за недостаточного перемешивания ее перед использованием, контаминация образцов и посуды микроорганизмами, нарушение сроков и условий хранения компонентов реакции, нарушение техники взятия крови.

В современных тест-системах в качестве антигена нашли применение рекомбинантные или синтетические пептиды. Первые получили большее распространение. Но при плохой очистке в смесь антигенов T. pallidum попадают белки Escherichia coli, что приводит к ложной серодиагностике сифилиса у больных эшерихиозом или здоровых, в сыворотке которых обнаружены антитела к кишечной палочке.

В определенной степени к диагностическим ошибкам следует отнести и неправильную трактовку результатов исследования.

Острые и хронические ЛПР

Помимо технических ошибок при выполнении тестов, ЛПР могут быть обусловлены и особенностями организма. Условно ЛПР разделяют на острые (хронические (сохраняются более 6 месяцев).

Острые ЛПР могут наблюдаться при беременности и во время менструации, после вакцинации, после недавно перенесенного инфаркта миокарда, при многих инфекционных заболеваниях. Инфекции, при которых могут отмечаться ЛПР — пневмококковая пневмония, скарлатина, инфекционный эндокардит, туберкулез, лепра, венерическая лимфогранулема, шанкроид (мягкий шанкр), лептоспироз и другие спирохетозы, ВИЧ-инфекция, инфекционный мононуклеоз, малярия, ветряная оспа, вирусные гепатиты, паротит, корь, респираторные заболевания, грипп и дерматозы.

Хронические ЛПР возможны при аутоиммунных заболеваниях, системных болезнях соединительной ткани, онкологических заболеваниях, хронической патологии печени и желчевыводящих путей, при сердечно-сосудистой и эндокринной патологии, при заболеваниях крови, при хронических заболеваниях легких, при инъекционном применении наркотиков и др. При большинстве этих состояний выявляют антикардиолипиновые антитела классов IgG и IgM ("реагины").

Хронические ложноположительные реакции могут являться преклиническими проявлениями тяжелых заболеваний. При злокачественных новообразованиях, диффузных болезнях соединительной ткани титр ЛПР может быть очень высоким.

Среди причин хронических положительных реакций выделяют физиологические состояния (пожилой возраст). С возрастом количество ЛПР увеличивается, у женщин они наблюдаются в 4,5 раза чаще, чем у мужчин. В возрастной группе 80-летних лиц распространенность ЛПР составляет 10%.

Причиной ЛПР могут быть частое использование вводимых внутривенно препаратов, частые переливания и инфузии.

Хронические инфекции (туберкулез, лепра, инфекционный эндокардит, малярия), миелома также могут стать причинами ЛПР.

Заражение другими видами спирохет

Ложноположительные реакции трепонемных и нетрепонемных тестов могут наблюдаться при инфекционных заболеваниях, возбудители которых имеют антигенное сходство с бледной трепонемой. Это возвратный тиф, лептоспироз, клещевой боррелиоз, тропические трепонематозы (фрамбезия, беджель, пинта), а также воспалительные процессы, обусловленные сапрофитными трепонемами полости рта и гениталий.

Возбудители эндемических трепонематозов (фрамбезия, пинта, беджель) — это трепонемы, которые обладают родоспецифическими антигенами, сходными с антигенами T.pallidum. В связи с этим антитела, образующиеся к ним, способны вступать в перекрестные взаимодействия с антигеном возбудителя сифилиса.

Россия не является территорией, эндемичной по данной группе заболеваний. Эти инфекции встречаются главным образом, в странах Африки, Латинской Америки и Южной Азии, и случаи заболеваний редки в практике лечебных учреждений.

Пациента с положительными серологическими реакциями на сифилис, прибывшего из страны с эндемическими трепонематозами, необходимо обследовать на сифилис и назначить противосифилитическое лечение, если оно ранее не проводилось.

Начиная с 1938 года, и особенно во время Второй Мировой войны, в США стали широко проводиться скрининговые серологические исследования для выявления сифилиса. Исследователи сопоставили полученные данные и выяснили, что положительная или сомнительная реакция обнаруживалась у людей не имевших клинических и эпидемиологических признаков сифилитической инфекции или контактов по сифилису. Причем такие результаты возникали гораздо чаще, чем предполагалось ранее. Положительные результаты нетрепонемных тестов с липидными или кардиолипиновыми антигенами (VDRL, в тестах Колмера, реакции Кана) были обнаружены у пациентов с различными заболеваниями, но не имеющих признаков сифилитической инфекции. Биологические ложнополжительные результаты были выявлены у пациентов с аутоиммунными, воспалительными и гематологическими заболеваниями.

Оказалось, что Б-ЛПРВ может встречаться в двух основных вариантах — остром и хроническом. В первом случае у больных, перенесших какую-либо, но не сифилитическую инфекцию, Б-ЛПРВ исчезает в процессе выздоровления, и длительность ее обнаружения не превышает шести месяцев. Во втором случае Б-ЛПРВ может устойчиво сохраняться в течение многих лет в отсутствие очевидного причинного фактора. В начале 50-х годов было установлено, что наиболее часто хроническая Б-ЛПРВ выявляется при аутоиммунных заболеваниях, особенно СКВ, при которой частота ее обнаружения достигает 30—44%

Ложноположительность нетрепонемных (кардиолипиновых) тестов

Липидные антигены T. pallidum cоставляют значительную часть клетки, однако в организме могут присутствовать и имеющие такое же строение липиды – аутоантигены, образующиеся в результате разрушения органов и тканей (в основном липиды митохондриальных мембран).

Сифилитическая инфекция сопровождается образованием иммунных комплексов и аутоиммунным ответом на кардиолипин, фибронектин, коллаген и мышечную креатинкиназу. В нетрепонемных тестах в качестве антигена используют раствор трех высокоочищенных липидов (кардиолипин, стабилизированный лецитином и холестерином) в этиловом спирте. Кардиолипин не является специфичным компонентом для T. pallidum, а также описан как один из фосфолипидов биомембран человека. Поэтому антитела к этому антигену регистрируют в сыворотке практически при любой альтерации клеток человека в результате инфекций и при некоторых физиологических и патологических состояниях.

Так как антиген, используемый в нетрепонемных реакциях, обнаруживается в других тканях, тесты могут давать положительные результаты у лиц без трепонемной инфекции (1—2 % в общей популяции).

Наиболее частой причиной биологических ложноположительных нетрепонемных тестов является антифосфолипидный синдром — аутоиммунный процесс, встречающийся при заболеваниях соединительной ткани (системной красной волчанке, дерматомиозите, склеродермии).

Другими факторами возникновения ложноположительных результатов считаются некоторые хронические бактериальные инфекции (лепра и др.), заболевания вирусной этиологии (инфекционный мононуклеоз), системные болезни соединительной ткани.

Причины также могут заключаться в пожилом возрасте (старше 70 лет), беременности, обширной соматической патологии, нарушениях обмена липидов, иммунодефицитных состояниях различной этиологии, системными хроническими заболеваниями сердца, легких.

Среди других причин следует отметить онкологические заболевания, туберкулез, энтеровирусные инфекции, вирусные гепатиты, болезнь Лайма, пневмонии, алкоголизм, наркоманию, сахарный диабет, вакцинацию, другие инфекции (малярия, ветряная оспа, корь, эндо- и миокардиты), подагру.

При этих состояниях отмечается развитие иммунологических нарушений, приводящих к аномальной продукции антител, способных перекрестно реагировать и с трепонемными антигенами.

Ложноположительность трепонемных тестов

Проблема усугубляется тем, что трепонемные тесты также могут быть ложноположительными. Причинами могут являться аутоиммунные заболевания, коллагенозы, болезнь Лайма, беременность, лепра, герпес, малярия, инфекционный мононуклеоз, опухоли, наркомания. В последние годы для дифференциации ЛПР за рубежом начали активно использовать иммуноблоттинг — один из самых современных методов диагностики сифилиса.

Сохранение антител после успешного лечения

Специфические диагностические реакции длительное время остаются положительными даже после полноценной терапии. После эффективного лечения сифилитической инфекции, у большинства больных титры в нетрепонемных тестах снижаются в 4 раза через 6–12 месяцев после лечения. Однако, при позднем начале терапии, титры даже в нетрепонемных тестах могут сохраняться на прежнем уровне, но никогда не увеличиваться.

Ложноотрицательные результаты анализов

Различные методы диагностики демонстрируют различную чувствительность и специфичность в зависимости от формы и стадии сифилиса. Вероятность ошибочного диагноза возрастает, особенно в случаях латентного, скрытого, сочетанного течения заболевания.

Ложноотрицательные серологические реакции на сифилис могут наблюдаться при вторичном сифилисе вследствие феномена прозоны при тестировании неразведенной сыворотки, а также при обследовании лиц с иммунодефицитным состоянием, например ВИЧ-инфицированных пациентов.

В ИФА такие реакции можно объяснить наличием серонегативной фазы при первичном сифилисе, а при вторичном — иммунной недостаточностью, наличием ВИЧ-инфекции. При получении отрицательного результата серологических исследований на сифилис следует учитывать свойство бледных трепонем проникать и размножаться в различных органах и тканях — поиск возбудителя в лимфе (лимфатических узлах) в ряде случаев приводит к достоверному результату. Целесообразно повторить также анализ образцов, давших положительный результат. Повторное, через 5–7 и более дней, исследование сывороток, как правило, позволяет получить достоверные результаты.

Для диагностики сифилиса применяется множество методов исследования, различающихся по технике проведения и предназначению. Прямые методы направлены на обнаружение возбудителя в исследуемом материале с помощью микроскопии (микроскопия в темном поле и др.) или ПЦР.

Помимо методов прямой детекции бледной трепонемы (T. pallidum), при обследовании на сифилис широкое применение получили непрямые (серологические) методы исследования, выявляющие антитела к возбудителю сифилиса в сыворотке крови и цереброспинальной жидкости. К непрямым методам диагностики сифилиса относятся серологические реакции ИФА, РПГА, КСР, РИФ и РИФ-абс, РИБТ, ПЦР, экспресс-метод, иммуноблот и другие.

Серологические методы диагностики инфекционных заболеваний.

Серологические критерии диагностики основаны на специфических реакциях "антиген-антитело". Реагируют антигены (компоненты клеточных стенок, жгутиков, капсул, ДНК и токсинов) тех микроорганизмов, которые необходимо определить, с антителами, содержащимися в сыворотках. Между антигенами и соответствующими им антителами происходит связывание, что и положено в основу методов серологической диагностики. Серологические реакции применяются для определения неизвестного антигена (источником которого является бактерия, вирус, токсин и др.) с помощью известного антитела или для определения антитела в сыворотке с помощью известного антигена.

Серологические реакции классифицируют в зависимости от состояния антигена и особенностей среды, в которой взаимодействуют антиген и антитело, а также по способу проведения.

Для проведения серологических реакций испольуют множество лабораторных методов, таких, как агглютинация, преципитация, связывание комплемента, иммунофлуоресценция, иммуноферментный и радиоиммунный анализ и другие. Эти реакции позволяют эффективно проводить предварительную идентификацию микроорганизмов.

Сыворотки, которые необходимы для постановки серологических реакций, получают экспериментальным путем, в частности, их производят институты вакцин и сывороток, и предлагают в составе коммерческих диагностических наборов.

Серологические методы являются важным инструментом в диагностике и лечении инфекционных заболеваний человека и животных, поскольку с их помощью можно не только идентифицировать возбудителя заболевания, но и обнаружить в крови больных и переболевших специфические антитела к соответствующим возбудителям. Серологические методы в настоящее время являются самыми эффективными методами диагностики при невозможности или трудностях выделения возбудителя, и сравнительно редко дают ложноположительные и ложноотрицательные результаты.

Использование серологических методов для диагностики сифилиса

В основе серологических лабораторных методов диагностики сифилиса лежит способность организма давать иммунный ответ на появление возбудителя. С помощью серологических реакций в сыворотке (плазме) крови (или цереброспинальной жидкости) выявляют следы иммунного ответа на заражение, а именно антитела к антигенам бледной трепонемы, или же сами антигены.

Для того, чтобы установить специфический характер имеющихся клинических проявлений (т.е. что они являются следствием именно сифилиса) и, в дальнейшем, контролировать динамику патологического процесса, предложено большое количество серологических методов исследований. Эти же методы также широко применяют для скрининга населения.

В соответствии с действующими национальными руководствами и клиническими методическими рекомендациями, во многих странах мира при обследованиях населения с целью выявления больных сифилисом и при установлении клинического диагноза используются передовые серологические методы. Их применяют как при наличии клинических признаков болезни у пациентов, так и в латентные периоды.

Постановка серологических реакций — один из наиболее надежных методов диагностики сифилиса. Стандартизованные серологические реакции с регламентированной методикой постановки называются серологическими тестами на сифилис. Учитывая то, что почти все серологические реакции на сифилис в определенных условиях могут быть ложноположительными или ложноотрицательными, их следует ставить в комплексе и, при необходимости, в динамике.

Серологические реакции, которые используются для определения антител в сыворотке крови больного, отличаются друг от друга чувствительностью, специфичностью, сложностью постановки и стоимостью. Помимо классических методов, для эффективной серодиагностики сифилиса используются иммунологические тесты и технологии, получившие в 21 веке новый импульс к развитию.

Антитела выявляются различными иммунохимическими (серологическими) методами, среди которых осадочные реакции, иммуноферментный, иммунохемилюминесцентный, иммунохроматографический анализы, линейный иммуноблоттинг, исследование с применением проточной флюорометрии, технология иммуночипов и другие.

подтверждения клинического диагноза сифилиса,
постановки диагноза скрытого сифилиса,
контроля за эффективностью лечения, как один из критериев излеченности больных сифилисом,
профилактики сифилиса (скрининговое обследование определенных групп населения с целью выявления патологии).

Важнейшие свойства, необходимые серологическим тестам - чувствительность, специфичность, воспроизводимость

Решающим критерием при выборе метода лабораторной диагностики является его эффективность — чувствительность, специфичность и воспроизводимость.

Чувствительность — это доля положительных результатов у больных. Чувствительность метода определяется процентом положительных результатов исследования проб, заведомо содержащих специфические маркеры возбудителя (нпр., антигены возбудителя или антитела к ним).

Специфичность — доля отрицательных результатов теста у здоровых пациентов. Специфичность метода определяется процентом отрицательных результатов исследования проб, заведомо не содержащих специфические маркеры возбудителя. Таким образом, чем выше чувствительность и специфичность, тем надежнее и достовернее метод исследования.

К важным диагностическим критериям также относится воспроизводимость результатов при повторных исследованиях одних и тех же проб. Следует отметить, что, несмотря на значительные достижения в области высоких технологий, не существует методов, обеспечивающих 100% (абсолютную) чувствительность и специфичность во всех исследуемых биопробах.

В настоящее время в России официально регистрируются тест-системы, наборы, ингредиенты, обладающие при постановке реакции менее 95% чувствительностью и специфичностью. Таким образом, всегда существует возможность получения неадекватного результата.

Классификация тестов по типу применяемого антигена. Трепонемные и нетрепонемные тесты на сифилис

В современной венерологии для диагностических целей используется более десятка вариантов серологических реакций на сифилис, которые можно подразделить по разным критериям на различные категории. Классификацию проводят по методологии проведения исследований, области применения, скорости, дешевизне, требованиям к лабораторной оснащенности и т.д.

По типу используемых антигенов, диагностические тесты традиционно разделяют на две группы— нетрепонемные и трепонемные серологические тесты.

Трепонемные реакции теоретически более специфичны, однако они также дают ложноположительные результаты. Более того, они не позволяют дифференцировать нелеченный и излеченный сифилис. Результаты трепонемных реакций будут положительными в обоих случаях. Нетрепонемные реакции позволяют различать нелеченную или недавно перенесенную и излеченную инфекцию.

При обследовании рекомендуется проводить и трепонемную, и нетрепонемную реакции. Для установки и подтверждения диагноза "сифилис" требуются положительные результаты при проведении тестов обоих типов — трепонемных и нетрепонемных. Поэтому нетрепонемные тесты применяются в комбинации с трепонемными тестами, и проводятся до начала, в процессе и после окончания лечения в определенные временные интервалы.

1. Нетрепонемные тесты

RW — реакция Вассермана с липидными антигенами (реакция связывания комплемента с кардиолипиновым антигеном, РСКк)
реакция Канна (не используется в настоящее время),
цитохолевая реакция Закс-Витебского (не используется в настоящее время),
микрореакция преципитации с плазмой или инактивированной сывороткой (МРП или РМП),
RPR (тест быстрых плазменных реагинов, Rapid Plasma reagin),
TRUST (тест с толуидиновым красным и непрогретой сывороткой, Toluidin Red Unheated Serum Test).

Реактивность в нетрепонемных тестах обычно указывает на повреждение тканей и не всегда специфична в отношении сифилиса. Простота выполнения и низкая стоимость позволяет использовать их как отборочные реакции при установлении предварительного диагноза сифилиса.

2. Трепонемные тесты

В трепонемных тестах используются специфические антигены трепонем. Эти тесты обязательны для подтверждения диагноза (РПГА, РИТ, РИФ и ИФА). Они являются более сложными и дорогостоящими, чем тесты 1-й группы, но и более специфичными и чувствительными. Выявление антител в спинно-мозговой жидкости также производится с помощью трепонемных тестов.

Традиционные трепонемные реакции, подтверждающие диагноз сифилиса, требуют дорогого лабораторного оборудования и опытного персонала, поэтому они редко проводятся вне специализированных лабораторий. Однако сейчас их можно заменить простыми и быстрыми трепонемными реакциями, которые возможно проводить на местах и в которых используется цельная кровь. Проведение этих реакций не требует длительного обучения, специальных условий для хранения реактивов и оборудования.

Сравнительная дешевизна, удобство и практичность трепонемных экспресс- реакций привлекают к ним внимание не только как к методам подтверждения диагноза. Эти реакции могут применяться для скрининга сифилиса в рамках оказания первичной медицинской помощи (их можно проводить на местах, в том же лечебно-профилактическом учреждении) или в районах, где лаборатории не доступны. Однако поскольку антитела к T. pallidum определяются на протяжении ряда лет независимо от того, лечился больной или нет, трепонемные экспресс-реакции нельзя использовать для оценки эффективности лечения и дифференциальной диагностики нелеченного и излеченного сифилиса.

Классификация серологических методов диагностики сифилиса по типу определяемых антител

В современной дерматовенерологии для диагностики используются различные серологические реакции на сифилис. Часть методов, которые были актуальны ещё десять лет назад, перестают применяться из-за сложности или недостаточной специфичности. В зависимости от выявляемых антител, методы серологической диагностики сифилиса подразделяются на три группы:

1) флокуляционные: микрореакция на стекле с липидными антигенами —экспресс-метод диагностики (микрореакции преципитации — МРП), VDRL, CMF (cardiolipin microflocculation test), RPR и др.;

2) реакция связывания комплемента (РСК) с липидными антигенами: реакция Вассермана (РВ), качественная и количественная методика постановки, термостатная и на холоде (реакция Колмера);

3) осадочные реакции, которые в настоящее время не используются: реакция преципитации Кана, цитохолевая реакция Закса — Витебского и др.;

II. Групповые трепонемные реакции — определяются антитела к групповым трепонемным антигенам (входящим в состав микробной клетки как патогенных, так и сапрофитных трепонем):

III. Видоспецифичные протеиновые трепонемные реакции — определяются антитела к специфическим видовым антигенам Treponema pallidum:

Практическое использование серологических реакций на сифилис

За рубежом при массовых обследованиях населения и при необходимости экстренного выявления сифилиса используются нетрепонемные отборочные реакции (VDRL, RPR и др.). Для постановки диагноза требуется подтверждение в трепонемных тестах РИФ-Абс (FTA-ABS), РПГА или TPPA. В настоящее время, рекомендуется использовать ИФА, как замену VDRL в скрининговых тестах. Это связано с тем, что тест ИФА отличается чувствительностью, специфичностью, возможностью автоматизировать исследования, а также с разработкой диагностических тест-наборов. Кроме того, обосновывается реверсивная схема порядка исследования на сифилис, когда первыми используются трепонемные тесты.

С целью контроля за эффективностью терапии и для оценки активности инфекции рекомендуют VDRL в количественном исполнении. В качестве подтвердающего/дополнительного теста используется тест ИФА на противотрепонемные антитела IgM.

В отечественной практике используют комплекс серологических реакций (КСР), включающий реакцию микропреципитации (РМП) с кардиолипиновым антигеном и РСК с кардиолипиновым и трепонемным антигенами. В последнее время рекомендуется в КСР заменять РСК на ИФА или РПГА. Также используются РИФ (и ее модификации — РИФ-Абс и остальные), РИБТ.

Подходы к лабораторной серологической диагностике сифилиса в Российской Федерации

Внедрение в практику унифицированных методов клинических лабораторных исследований в СССР и Российской Федерации позволило ввести более прогрессивные диагностические методы, упорядочить работу клинико-диагностических лабораторий, повысить производительность труда, сократить дублирование лабораторных исследований и стало основой для разработки рациональных форм готовых наборов реактивов.

В 1985 году в СССР, в целях совершенствования диагностики сифилиса, нетрепонемная реакция РСК с неспецифическим (вассермановским) антигеном и осадочные реакции (цитохолевая и Кана) были исключены из диагностического комплекса, как менее чувствительные и не дающие дополнительной информации.

Вместо них, в составе комплекса серологических реакций на сифилис (КСР), было предусмотрено применение реакции связывания комплемента с трепонемным и кардиолипиновым антигенами (РСКт) и микрореакции преципитации с кардиолипиновым антигеном (РМП). Более высокая чувствительность и информативность этого комплекса реакций обеспечивала выявление не только реагинов, но и противотрепонемных антител.

1. РМП с кардиолипиновым антигеном с плазмой крови и инактивированной сывороткой крови. Отборочный тест в случае изолированного применения.

2. РСК с трепонемным и кардиолипидовым антигенами; качественная и количественная методики постановки, термостатная и на холоде;

4. Реакция иммунофлюоресценции (РИФ) в следующих модификациях: РИФ с абсорбцией (РИФ-абс) с сывороткой крови и капиллярной кровью, РИФ-200, РИФ с цельной спинномозговой жидкостью (РИФ-ц); качественные и количественные методики постановки. Диагностика скрытых и поздних форм сифилиса, распознавание ЛПР (ложно-положительных результатов)

5. Комплекс классических серологических реакций (КСР): РСК (реакции Вассермана) с кардиолипиновым и трепонемным антигенами + РМП. Профилактическое обследование населения на сифилис, диагностика всех форм сифилиса, контроль эффективности лечения, обследование лиц, контактных по сифилису.

С целью совершенствования лабораторной диагностики сифилиса, повышения качества работы и предупреждения дальнейшего распространения заболеваемости сифилисом рекомендовано заменить РСК в комплексе серореакций (КСР) при диагностике сифилиса на ИФА и РПГА в качестве отборочных и подтверждающих тестов, т.к. эти тест-системы являются высокочувствительными, специфическими и воспроизводимыми.

1. РМП и зарубежные аналоги (VDRL, RPR и аналогичные микрореакции) в качестве отборочных тестов при обследовании населения на сифилис. Постановка РМП осуществляется с плазмой или инактивированной сывороткой крови.
2. Иммуноферментный анализ (ИФА). Антиген из культуральных или патогенных бледных трепонем. Диагностические реакции, в том числе для ликвородиагностики. В связи с простотой постановки и наличием коммерческих тест-систем могут использоваться как отборочные тесты.
3. Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА). Антиген из культуральных или патогенных бледных трепонем. Отборочные и диагностические реакции.
4. Качественный и количественный варианты РИФ (РИФ-абс, РИФ-ц, РИФ с капиллярной кровью из пальца). Антиген - патогенная бледная трепонема штамма Никольса.
5. Комплекс серологических реакций (КСР) на сифилис, состоящий из реакции связывания комплемента (РСК) с трепонемным и кардиолипиновым антигенами, и РМП. Возможно заменить реакцию связывания комплемента на ИФА или РПГА также в сочетании с РМП. КСР относится к диагностическим тестам.
6. Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ), в которой в качестве антигена используют патогенные бледные трепонемы штамма Никольса. РИБТ относятся к диагностическим подтверждающим тестам.

Таким образом, последовательность обследования пациентов на сифилис в учреждениях здравоохранения рекомендуется планировать следующим образом:

1. При первичном обследовании производится постановка отборочной (скрининговой) реакции микропреципитации (РМП) или ее модификации (RPR, TRUST, VDRL) в количественном и качественном вариантах и в случае положительного результата - любого специфического подтверждающего трепонемного теста (РПГА, ИФА, КСР, РИФ, РИТ);

2. После окончания терапии ставится РМП или ее модификация и по снижению титра судят о динамике инфекционного процесса и эффективности терапии. Подтверждением эффективности проведенной терапии считается снижение титра в 4 и более раз в течение 1 года.

3. По окончании этого срока осуществляется постановка той же специфической реакции, что и при первичном обследовании. Следует учитывать, что специфические трепонемные тесты могут оставаться положительными (не негативировать) в течение ряда лет, а в отдельных случаях остаются положительными на всю жизнь.

Читайте также: