Набор для выявления антител к вирусу ньюкаслской болезни в ртга

Обновлено: 24.04.2024

Для проведения исследования в медицинских офисах Москвы необходимо предъявить СНИЛС и документ удостоверяющий личность.

Синонимы: Выявление IgG к спайковому (S) белку SARS-CoV-2 (качественный анализ) после COVID-19 и для оценки эффективности вакцинации (вакцинным препаратом на основе RBD-домена

Новый коронавирус SARS-CoV-2 относится к РНК-содержащим вирусам семейства Coronaviridae, линии Beta-CoV B. Основным источником инфекции является больной человек, в том числе находящийся в инкубационном периоде заболевания.

Передача инфекции осуществляется воздушно-капельным, воздушно-пылевым и контактным путями. Ведущим путем передачи SARS-CoV-2 является воздушно-капельный, который реализуется при кашле, чихании и разговоре на близком (менее 2 метров) расстоянии. Контактный путь передачи осуществляется во время рукопожатий и при других видах непосредственного контакта с инфицированным человеком, а также через пищевые продукты, поверхности и предметы, контаминированные вирусом.

Диагноз COVID-19 устанавливается на основании клинического обследования, данных эпидемиологического анамнеза, результатов инструментальных и лабораторных исследований.

Наиболее частыми клиническими симптомами данной инфекции являются: повышение температуры тела, кашель (сухой или с небольшим количеством мокроты), одышка, утомляемость, ощущение заложенности в грудной клетке.

Рекомендованным методом специфической лабораторной диагностики является выявление РНК SARS-CoV-2 методом ПЦР.

Иммуноглобулины класса M (IgM) – ранние антитела, которые начинает вырабатывать иммунная система в ответ на инфекцию SARS-CoV-2. Их уровень обычно становится доступным для обнаружения не ранее 1-2 недель от контакта с возбудителем, а общий период вероятного выявления антител класса M чаще составляет менее 2-3 месяцев – в течение этого времени IgM антитела постепенно полностью сменяются на IgG.

Качественное определение специфических антител класса G (IgG) к Spike (S) антигену коронавируса SARS-CoV-2 выполняют с целью оценки иммунного ответа на вакцинацию вакцинным препаратом на основе RBD-домена Spike, а также оценки иммунного статуса после COVID-19.

Специальной подготовки не требуется. Рекомендуется взятие крови не ранее, чем через 4 часа после последнего приема пищи.

В каких случаях проводят анализ крови на Антитела к спайковому (S) белку SARS-CoV-2, IgG, качественное определение:

оценка иммунного статуса пациента после COVID-19;
оценка иммунного ответа после вакцинации вакцинным препаратом на основе RBD-домена Spike коронавируса SARS-CoV-2.

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Название (рус.) НАБОР ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ АНТИТЕЛ К ВИРУСУ НЬЮКАСЛСКОЙ БОЛЕЗНИ (НБ) В РЕАКЦИИ ТОРМОЖЕНИЯ ГЕМАГГЛЮТИНАЦИИ (РТГА) Состав и форма выпуска В состав набора входят следующие компоненты - Иммуноспецифические компоненты: № 1 антиген специфический вируса НБ, лиофилизированный - сухая пористая масса белого или светло-желтого цвета, 4 мл - 2 флакона; № 2 гипериммунная сыворотка крови кур к вирусу НБ (положительный контроль), цельная, лиофилизированная - сухая пористая масса белого или светло-желтого цвета, 0,5 мл - 1 флакон; № 3 нормальная сыворотка крови кур (отрицательный контроль), не содержащая антител к НБ, цельная, лиофилизированная - сухая пористая масса белого или светло-желтого цвета, 0,5 мл - 1 флакон. Неспецифические компоненты: № 4 набор солей для приготовления забуферного физиологического раствора: натрий хлористый, натрий фосфорнокислый двузамещенный и калий фосфорнокислый однозамещенный - порошок белого цвета, 10,2 г - 1 флакон; № 5 натрий лимоннокислый - порошок белого цвета, 3,0 г - 1 флакон; № 6 микропанели полистироловые круглодонные для иммунологических реакций, 96 луночные - 4 штуки. Набор рассчитан на анализ 500 проб сывороток крови кур. Фармакологические свойства Принцин метода основан на способности сывороток крови кур, содержащих специфические антитела, тормозить гемагглютинирующую активность антигена НБ. Показания Для выявления специфических антител к вирусу ньюкаслской болезни (НБ) в сыворотках крови кур в реакции торможения гемагглютинации (РТГА) в микроварианте. Дозы и способ применения Для постановки реакции используют: одно и восьмиканальные пипетки любой модели с варьируемым или стабильным объемом в пределах 0,025 - 0,05 мл. Для приготовления забуференного физиологического раствора растворить содержимое флакона №4 в 1 л дистиллированной воды. Для приготовления 3% раствора лимонокислого натрия рстворить содержимое флокона №5 в 100 мл забуференного физиологического раствора. Подготовка антигена. Антиген во флаконах ресуспендируют в забуфернном физиологическом растворе до исходного объема (4 мл). Приготовление взвеси эритроцитов петуха. Кровь берут из подкрыльцовой вены во флаконы с 3% раствором лимоннокислого натрия на забуференном физиологическом растворе ( рН 7,2 - 7,4) в соотношении 1 : 2, трижды отмывают забуференном физиологическом растворе путем центрифугирования при 1500 об/мин. Из осадка эритроцитов на забуференном физиологическом растворе ( рН 7,2 - 7,4) готовят 0,7 % суспензию. Для этого в 99,3 мл забуференного физиологического раствора добавляют 7,7 мл концентрата эритроцитов (осадок). Хранить суспензию можно в условиях холодильника (+4 °С) до появления признаков гемолиза эритроцитов. Получение сыворотки крови. Кровь берут из подкрыльцовой вены или путем скарификации гребня, собирают в стерильные пробирки, предваритедьно увлажненные стерильным физиологическим рствором. Образовавшийся сгусток отделяют от стенок тонким металлическим стержнем или пастеровской пипеткой и выдерживают при комнатной температуре (18 - 20 °С) в течение 12 - 18 часов или при температуре 37 °С (в термостате) в теченин 60 мин, а затем 8 - 10 ч при +4 °С (в холодильнике). Отстояшуюся сыворотку сливают в чистые пробирки и исследутся в РТГА. Для удаленя термолибильных ингибиторов сыворотку крови прогревают в водяной бане при 56 °С в течение 30 минут РТГА проводят в два этапа: определнние гемагглютинирующего титра антигена в реакции гемагглютинации (РГА) для расчета рабочей дозы; определение титра антител в пробах сыворотки крови. Постановка реакции гемагглютинации - для постановки РГА готовят двукратные разведения антигена от 1 : 2 до 1 : 4096. С этой целью во все лунки полистироловой панели пипеткой разливают забуференный физиологический раствор (0,05 или 0,025 мл), в первую вносят равный объем антигена, трехкратно пипетируют и переносят по 0,05 или 0,025 мл во вторую лунку и т. д. Из последней лунки удаляют по 0,05 или 0,025 мл соответственно. После разведения антигена во все лунки вносят 0,7 % суспензию эритроцитов петуха в объеме, равном исходному объему забуференного физиологического раствора. Микропанели аккуратно встряхивают и оставляют при комнатной температуре (18 - 20 °С). Учет реакции проводят после оседания эритроцитов в контроле. Для контроля эритроцитов на спонтанную гемагглютинацию и определения времени учета реакции в две лунки с забуференным физиологическим (0,05 или 0,025 мл) добавляют равный объем эритроцитов РГА оценивают положительно при оседании эритроцитов в виде хорошо выраженного , отрицательно - в виде . За титр антигена принимают его наибольшее разведение, показывающее четко выраженную агглютинацию в виде . (Примечание: Получение нечетких результатов может быть связано с изменившимся рН забуференного физиологического раствора.). Для постановки РТГА готовят рабочую дозу антигена (4 ГАЕ), исходя из его титра. Для этого исходный антиген разводят забуференным физиологическим раствором во столько раз, сколько получают от деления его титра на 4. Например: титр антигена 1 : 256. Для приготовления рабочего разведения необходимо взять 63 мл забуференного физиологического раствора и 1 мл исходного антигена (256 : 4 =64). Объем рабочей дозы антигена определяют, исходя из количества подлежащих исследованию сывороток. Для постановки РТГА микрометодом на исследование 1 сыворотки в 12 разведениях требуется 0,6 или 0,3 мл 4 ГАЕ антигена (в зависимости от первоначального объема забуференного физиологического раствора). Рабочую дозу антигена готовят непосредственно в день постановки реакции с обязательным контролем 4 ГАЕ. Для этого в 4 лунки разливают забуференный физиологический раствор в объемах, выбранных для постановки реакции. В первый добавляют равный объем рабочей дозы антигена и титруют согласно вышеописанной схеме. Учет реакции проводят после оседания эритроцитов в контроле. При правильном определении рабочей дозы в первой, второй лунках должна быть полная агглютинация ( ), в третьей частичная, в четвертой - отсутствие агглютинации ( ). Полная агглютинация в третьей лунке означает, что доза антигена завышена, а отсутствие агглютинации в первой или во второй лунках - свидетельствуют о недостаточном его количестве. Корректирование рабочей дозы (увеличение или уменьшение) проводят путем добавления антигена или забуференного физиологического раствора с обязательным повторным контролем 4 ГАЕ. Постановка РТГА - Для постановки реакции во все лунки полистироловой планшеты вносят забуференный физиологический раствор в объеме 0,05 (0,025) мл. Затем в первую лунку добавляют равный объем испытуемой сыворотки, трижды пипетируют и готовят ряд последовательных двукратных разведении (с 1 : 2 до 1 : 4096). После этого, во все лунки вносят рабочее разведение антигена в объеме 0,05 (0,025) мл, осторожно встряхивают и после 20 - 30 минут контакта сыворотки с антигеном в каждую лунку добавляют двойной объем (по отношению к объему забуференного физиологического раствора) суспензии эритроцитов. Контроли: сыворотки на изоагглютинацию (сыворотка + забуференный физиологический раствор в равных объемах + 0,7 % суспензия эритроцитов в двойном объеме). Агглютинация должна отсутствовать; эритроцитов на спонтанную агглютинацию (суспензия эритроцитов + забуференный физиологический раствор в равных объемах). Агглютинация должна отсутствовать; положительной специфической сыворотки (положительного контроля). Титр контрольной положительной сыворотки указан на флаконе + одно разведение. Реакцию учитывают через 25 - 40 минут. При наличии в сыворотке антител наблюдают торможение гемагглютинации - эритроциты выпадают в осадок в виде . Титром сыворотки - считают наибольшее ее разведение, дающее полное торможение гемагглютинации рабочей дозы антигена НБ. Интерпретация полученных результатов: По результатам РТГА определяют эффективность иммунизации в партии привитых цыплят путем деления суммарного количества проб с титром антител 1 : 8 и выше (после применения живых вакцин) или 1 : 16 (после применения инактивированных вакцин) на общее число исследованных сывороток и выражают в процентах. Птицу считают невосприимчивой к НБ при эффективности иммунизации 80 и более процентов после применения живых вирусвакцин и 90 и более процент
ов после использования инактивированных препаратов. При эффективности иммунизации менее 80 % после применения живых вирусвакцин и менее 90 % после применения инактивированных вирусвакцин птица подлежит повторной вакцинации. Обнаружение в РТГА высокого титра антител (1 : 2048 и выше у птиц, привитых живыми вакцинами, и 1 : 4096 и выше у птиц, привитых инактивированными вакцинами) свидетельствует о возможной циркуляции в стаде полевого вируса ньюкаслской болезни. В таких случаях через 21 - 30 суток проводят повторное исследование проб сывороток крови, полученных от этих же птиц. Снижение или стабилизация уровня антител и (или) уменьшение количества птиц с высоким уровнем антител при повторных исследованиях проб сыворотки крови свидетельствует об отсутствии циркуляции в хозяйстве эпизоотического вируса и является следствием поствакцинальных реакций. Нарастание титров и (или) увеличение количества птиц с высоким уровнем антител при отсутствии клинических и патологоанатомических признаков НБ не является основанием для объявления хозяйства неблагополучным по данному заболеванию, но предусматривает установление за птицей тщательного наблюдения, проведения систематических серологических и вирусологических исследовании. Нарастание титров и (или) увеличение количества птиц с высоким уровнем антител при наличии клинико-патологоанатомических признаков заболевания служит основанием для проведения детального эпизоотологического обследования хозяйства и установления окончательного диагноза по данному заболеванию. Обнаружение антител к вирусу ньюкаслской болезни у птиц, не привитых против НБ без клинических и патологоанатомических признаков заболевания свидетельствует о циркуляции полевых лентогенных штаммов вируса ньюкаслской болезни и не является основанием для объявления хозяйства неблагополучным по НБ. За птицей таких хозяйств устанавливают постоянное наблюдение. Особые указания Не предусмотрены. Условия хранения В сухом темном месте при температуре от 2 до 8 °С. Срок годности - 12 месяцев. Производитель Федеральный центр охраны здоровья животных ФГУ (ВНИИЗЖ ФГУ), Россия

1.1. Настоящие методические указания предназначены для серологического контроля напряженности иммунитета к ньюкаслской болезни (НБ), оценки эффективности иммунизации, определения оптимальных сроков вакцинации (ревакцинации) птицы, а также для контроля эпизоотической ситуации по НБ в хозяйствах.

1.2. Методика основана на обнаружении в сыворотке крови специфических к вирусу НБ антител (антигемагглютининов) в реакции торможения гемагглютинации.

1.3. Сроки серологического обследования поголовья определены Наставлениями по применению вакцин против НБ и могут быть скорректированы исходя из эпизоотической ситуации в конкретном хозяйстве.

1.4. Исследованию подлежат не менее 26 проб сывороток крови от птиц, взятых из различных мест птичника (зала) в объеме не менее 0,5 см 3 .

2.1. Оборудование и реактивы:

- испытуемые сыворотки птиц;

- 0,7 или 1 %-ная взвесь эритроцитов петуха на физиологическом или фосфатно-буферном растворе (pH 7,2 - 7,4) для исследований в микро- и макроварианте соответственно;

- микротитраторы одно- и восьмиканальные любой модели с варьируемым или стабильным объемом в пределах 0,025 - 0,05 см 3 .

2.2. Подготовка антигена,

2.2.1. Вакцину в ампулах (флаконах) ресуспендируют в физиологическом растворе до исходного объема вируса.

2.3. Приготовление взвеси эритроцитов петуха.

Кровь берут из подкрыльцовой вены во флаконы с 2 - 3 %-ным раствором лимонно-кислого натрия на физиологическом растворе (pH 7,2 - 7,4) в соотношении 1:2, трижды отмывают физиологическим раствором путем центрифугирования при 1500 об/мин 10 мин. Из осадка эритроцитов на физиологическом растворе (pH 7,2 - 7,4) готовят 0,7 или 1 %-ную суспензию. Хранить суспензию можно в условиях холодильника (4 °С) до появления признаков гемолиза эритроцитов.

Кроме нативных, в работе могут быть использованы стабилизированные (формалинизированные) эритроциты петуха.

2.4. Получение сыворотки крови.

2.4.1. Кровь берут из подкрыльцовой вены или путем скарификации гребня, собирают в стерильные пробирки, предварительно увлажненные стерильным физиологическим раствором. Образовавшийся сгусток отделяют от стенок тонким металлическим стержнем или пастеровской пипеткой и выдерживают при комнатной температуре в течение 12 - 18 ч или при температуре 37 °С (термостат) в течение 60 мин, а затем 8 - 10 ч при 4 °С (холодильник). Отстоявшуюся сыворотку сливают в чистые пробирки и исследуют в РТГА.

2.4.2. Для удаления термолабильных ингибиторов сыворотку крови прогревают на водяной бане при 56 °С в течение 30 мин.

2.5. Реакцию торможения гемагглютинации проводят в два этапа:

- определение гемагглютинирующего титра вируса в реакции гемагглютинации (РГА) для расчета рабочей дозы;

- определение титра антител в пробах сыворотки крови.

Реакцию ставят макро- или микрометодом.

Для постановки РГА готовят двукратные разведения вакцинного вируса от 1:2 до 1:4096. С этой целью во все лунки одного ряда полистероловой микропанели микро-титратором разливают физиологический раствор (0,05 или 0,25 см 3 ), в первую вносят в равном объеме вакцинный вирус, трехкратно пипетируют и переносят 0,05 или 0,025 см 3 во вторую лунку и т.д. Из последней лунки 0,05 или 0,025 см 3 удаляют и обезвреживают в 2 %-ном растворе едкого натра.

После разведения вируса во все лунки вносят 0,7 %-ную суспензию эритроцитов петуха в объеме, равном исходному объему физиологического раствора. Микропанели аккуратно встряхивают и оставляют при комнатной температуре (18 - 20 °С). Учет реакции проводят после оседания эритроцитов в контроле.

Для контроля эритроцитов на спонтанную гемагглютинацию и определения времени учета реакции в две лунки с физиологическим раствором (0,05 или 0,025 см 3 ) добавляют равный объем эритроцитов.

Реакция может быть поставлена макрометодом в полистероловых макропанелях, для чего все компоненты берут в объеме 0,2 см 3 . При этом в работе используют 1 %-ную суспензию эритроцитов петуха.

2.5.2. Для постановки РТГА готовят рабочую дозу исследуемого вируса (4 ГАЕ) исходя из его титра.

Для этого исходный вирус разводят физиологическим раствором во столько раз, сколько получают от деления его титра на 4.

Например: титр вируса 1:256. Для приготовления рабочего разведения необходимо взять 63 см 3 физиологического раствора и 1 см 3 исходного вируса (256:4 - 64).

Объем рабочей дозы вируса определяют, исходя из количества подлежащих исследованию сывороток. Для постановки РТГА микрометодом на исследование 1 сыворотки требуется 0,6 или 0,3 см 3 4 ГАЕ вируса (в зависимости от первоначального объема физиологического раствора), макрометодом - 2,4 см 3 .

2.5.3. Рабочую дозу вируса готовят непосредственно в день постановки реакции с обязательным контролем 4 ГАЕ.

Для этого в 4 лунки разливают физиологический раствор в объемах, выбранных для постановки реакции. В первую добавляют равный объем рабочей дозы вируса и титруют согласно п. 2.5.1.

Учет реакции проводят после оседания эритроцитов в контроле.

Полная агглютинация в третьей лунке означает, что доза вируса завышена, а отсутствие агглютинации в первой или во второй лунках свидетельствует о недостаточном его количестве. Корректирование рабочей дозы (увеличение или уменьшение) проводят добавлением вируса или физиологического раствора с обязательным повторным контролем 4 ГАЕ.

2.6. Постановка РТГА.

2.6.1. Для постановки реакции во все лунки полистероловой микро- или макропанели вносят физиологический раствор в объеме 0,05 (0,025) или 0,2 см 3 . Затем в первую лунку добавляют равный объем испытуемой сыворотки, трижды пипетируют и готовят ряд последовательных двукратных разделений (с 1:2 до 1:4096).

После этого во все лунки вносят рабочее разведение вируса в объеме 0,05 (0,025) или 0,2 см 3 , осторожно встряхивают и после 26 - 30 мин контакта сыворотки с вирусом в каждую лунку добавляют двойной объем (по отношению к объему физиологического раствора) суспензии эритроцитов,

- сыворотки на изоагглютивацию (сыворотка + физиологический раствор в равных объемах + 1 %-ная суспензия эритроцитов в двойном объеме). Агглютинация должна отсутствовать;

- эритроцитов на спонтанную агглютинацию (суспензия эритроциты + физиологический раствор в равных объемах). Агглютинация должна отсутствовать.

2.7. Интерпретация полученных результатов.

2.7.1. По результатам РТГА определяют эффективность иммунизации в партии привитых цыплят путем деления суммарного количества проб с титром антител 1:8 и выше (после применения живых вакцин) или 1:16 и выше (после применения инактивированных вакцин) на общее число исследованных сывороток и выражают в процентах.

2.7.2. Птицу считают невосприимчивой к НБ при эффективности иммунизации 80 и более процентов после применения живых вирусвакцин и 90 и более процентов после использования инактивированных препаратов.

2.7.8. При эффективности иммунизации менее 80 % после применения живых вирусвакцин или менее 90 % после применения инактивированных вирусвакцин птица подлежит повторной вакцинации.

2.7.5. Снижение или стабилизация уровня антител и (или) уменьшение количества птиц с высоким уровнем антител при повторных исследованиях проб сыворотки крови свидетельствует об отсутствии циркуляции в хозяйстве эпизоотического вируса и является следствием поствакцинальных реакций.

2.7.6. Нарастание титров и (или) увеличение количества птиц с высоким уровнем антител при отсутствии клинических и патологоанатомических признаков НБ не является основанием для объявления хозяйства неблагополучным по данному заболеванию, но предусматривает установление за птицей тщательного наблюдения, проведения систематических серологических и вирусологических исследований.

2.7.7. Нарастание титров и (или) увеличение количества птице высоким уровнем антител при наличии клиникопатологоанатомических признаков заболевания служит основанием для проведения детального эпизотологического обследования хозяйства и установление окончательного диагноза по данному заболеванию.

2.7.8. Обнаружение антител к вирусу ньюкаслской болезни у птиц, не привитых против НВ, без клинических и патолоанатомических признаков заболевания свидетельствует о циркуляции полевых лентогенных штаммов вируса ньюкаслской болезни и не является основанием для объявления хозяйства неблагополучным по НВ. За птицей таких хозяйств устанавливают постоянное наблюдение.

Методические указания по определению уровня антител к вирусу ньюкаслской болезни в реакции торможения гемагглютинации разработаны сотрудниками лаборатории препаратов, применяемых в птицеводстве Всероссийского государственного научно-исследовательского института контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов.

6.8. МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ УРОВНЯ АНТИТЕЛ К ВИРУСУ НЬЮКАСЛСКОЙ БОЛЕЗНИ В РЕАКЦИИ ТОРМОЖЕНИЯ ГЕМАГГЛЮТИНАЦИИ (РТГА)

УТВЕРЖДЕНЫ 23 июня 1997 г., N 13-7-2/988

1. Общие положения

1.4. Исследованию подлежат не менее 25 проб сывороток крови от птиц, взятых из различных мест птичника (зала) в объеме не менее 0,5 см.

2. Методика постановки реакции торможения гемагглютинации

2.1. Оборудование и реактивы:

- антиген сухой вирусвакцины против НБ из штаммов "Ла-Сота", "В1" или "ГАМ-61" или экстраэмбриональная жидкость куриных эмбрионов, инфицированных этими штаммами, с гемагглютинирующим титром не ниже 1:8;

- испытуемые сыворотки птиц;

- 0,7 или 1%-ная взвесь эритроцитов петуха на физиологическом или фосфатно-буферном растворе (рН 7,2. 7,4) для исследований в микро- и макроварианте соответственно;

- микротитраторы одно- и восьмиканальные любой модели с варьируемым или стабильным объемом в пределах 0,025. 0,05 см.

2.2. Подготовка антигена

2.2.1. Вакцину в ампулах (флаконах) ресуспендируют в физиологическом растворе до исходного объема вируса.

2.3. Приготовление взвеси эритроцитов петуха

Кровь берут из подкрыльцовой вены во флаконы с 2. 3%-ным раствором лимонно-кислого натрия на физиологическом растворе (рН 7,2. 7,4) в соотношении 1:2, трижды отмывают физиологическим раствором путем центрифугирования при 1500 об/мин 10 мин. Из осадка эритроцитов на физиологическом растворе (рН 7,2. 7,4) готовят 0,7 или 1%-ную суспензию. Хранить суспензию можно в условиях холодильника (4°С) до появления признаков гемолиза эритроцитов.

Хемилюминесцентный иммуноанализ (технология Architect, Abbott. SARS-CoV-2 IgG II Quant), количественный тест.

Синонимы: Анализ крови для количественного определения IgG-антител к спайковому (S) белку SARS-CoV-2; Количественное определение IgG антител к RBD домену S-белка SARS-CoV-2; IgG Антитела к коронавирусу SARS-CoV-2, включая нейтрализующие IgG; Тест на IgG антитела к спайковому (S) белку коронавируса; Антитела к рецептор-связывающему домену вируса, вызывающего COVID-19, Иммунитет к коронавирусу SARS-CoV-2; Антитела класса G к SARS-CoV-2 RBD; Анти-RBD антитела класса G.

Antibodies to RBD domain of spike (S) protein SARS-CoV-2, IgG; Antibodies IgG for RBD SARS-CoV-2 spike (S) protein; IgG antibodies to SARS-CoV-2 RBD domain of spike (S) protein of SARS-CoV-2; Сoronavirus immunity.

Диапазон количественного измерения: 2,9 - 5680 BAU/мл.

SARS-CoV-2 (severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 – тяжелого острого респираторного синдрома коронавирус 2) – официальное наименование вируса, вызвавшего эпидемию COVID-19. COVID-19 (coronavirus disease 2019 – коронавирусная болезнь 2019) – название болезни, которую индуцирует новый вид коронавируса.

Источником передачи инфекции SARS-CoV-2 является, в большинстве случаев, больной человек, в том числе находящийся в инкубационном периоде заболевания, который составляет от 2 до 14 (в среднем 5-7) дней. Клинические проявления могут быть аналогичны неспецифичным симптомам ОРВИ (повышение температуры, сухой кашель, затруднение дыхания). Дополнительные эпидемиологические признаки – вероятный либо подтвержденный контакт с больными COVID-19, а также проявления в виде пневмонии с характерными изменениями в легких по данным компьютерной томографии (КТ), свидетельствуют о высокой вероятности COVID-19.

Четыре структурных белка, которые кодирует РНК вируса SARS-CoV-2, – это спайковый (S), оболочечный (E), нуклеокапсидный (N) и мембранный (M). Структуры, выступающие на поверхности вируса подобно шипам и придающие вириону сходство с короной, сформированы спайковым (S) белком. S-белок состоит из двух субъединиц (S1 и S2). Нуклеокапсидный и спайковый белки в ходе инфекции вызывают наиболее выраженный антительный ответ. При этом нейтрализующая активность антител, вырабатываемых против SARS-CoV-2, преимущественно соотносится с антителами к S-белку (который является главной мишенью в вакцинологии). На S1 субъединице этого белка располагается рецептор-связывающий домен (RBD), который способен прочно связываться с рецепторами ангиотензин-превращающего фермента (ACE2), расположенными на клетках различных тканей, в том числе на эпителии легочных альвеол. Взаимодействие RBD домена с рецепторами ACE2 является начальным этапом внедрения вируса в клетку. Антитела, специфически связывающиеся с RBD областью S1 субъединицы спайкового белка коронавируса, способны ингибировать его связывание с клеточными рецепторами, оказывая выраженный нейтрализующий эффект.

С какой целью используют количественное определение уровня антител к спайковому (S) белку SARS-CoV-2, IgG

Присутствие специфических антител к вирусу SARS-CoV-2 класса G указывает на факт недавнего или прошлого взаимодействия с вирусом. Поэтому такие тесты используют в комплексной диагностике при наличии подозрений на инфекцию новым коронавирусом или ее осложнения. Основной метод лабораторного подтверждения острой инфекции COVID-19 – выявление методами полимеразной цепной реакции (ПЦР) РНК вируса в биоматериале, взятом из дыхательных путей, обычно в мазке из носоглотки и ротоглотки. Однако информативность РНК-тестирования зависит от достаточности содержания вируса в биоматериале выбранной локализации на той или иной стадии инфекции, а также качества взятия материала. Наиболее информативны ПЦР-исследования мазков из рото- и носоглотки в первые 1-5 дней от начала клинических проявлений инфекции. На более поздних сроках (более 1-2 недель) целесообразно дополнительно к ПЦР-тестированию мазков применять исследование крови на наличие специфических антител, вырабатываемых организмом в ответ на инфекцию SARS-CoV-2.

Оценка уровня IgG антител к SARS-CoV-2 может использоваться также с целью выявления иммунологических свидетельств прошлой (в том числе субклинической или бессимптомной) инфекции для оценки вероятного иммунного статуса обследуемого человека по отношению к этому вирусу, прослеживания контактов, популяционных эпидемиологических исследований.

Следует отметить, что результаты предлагаемого теста количественного исследования IgG антител к SARS-CoV-2 S-белку (RBD), независимо от используемой антигенной мишени, нельзя считать прямым методом определения нейтрализующих антител, поскольку оценка нейтрализующей активности антител требует специальных методов, малодоступных для рутинного практического использования. Но результаты этого теста проявляют очень высокую корреляцию с результатами тестов нейтрализации при проведении параллельных исследований.

Когда (спустя какой срок) можно определять уровень антител к спайковому (S) белку SARS-CoV-2, IgG после вакцинации

Оценка напряженности поствакцинального протективного иммунитета должна проводиться с использованием тест-систем, специфичных к наличию S-белка или RBD домену S-белка вируса SARS-CoV-2, не ранее чем на 42-й день после первого этапа вакцинации.

Читайте также: