Определение вирусной нагрузки вич методом пцр

Обновлено: 24.04.2024

19517 04 Сентября

Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.

ВИЧ: причины появления, симптомы, диагностика и способы лечения.

Определение

ВИЧ (вирус иммунодефицита человека) – инфекционное хроническое заболевание, передающееся контактным путем, медленно прогрессирующее и характеризующееся поражением иммунной системы с развитием синдрома приобретенного иммунодефицита (СПИДа). СПИД – это финальная стадия ВИЧ-инфекции, когда из-за ослабленной иммунной системы человек становится беззащитным перед любыми инфекциями и некоторыми видами рака. Опасность представляют так называемые оппортунистические инфекции – заболевания, вызываемые условно-патогенной или непатогенной флорой: вирусами, бактериями, грибами, которые у здоровых людей не приводят к серьезным последствиям или протекают легко и излечиваются самостоятельно. При СПИДе они наслаиваются друг на друга, имеют затяжное течение, плохо поддаются терапии и могут стать причиной летального исхода.

Причины появления ВИЧ

Источником инфекции является человек, инфицированный ВИЧ, на любых стадиях заболевания. Вирус передается через кровь, сперму, секрет влагалища, грудное молоко.

Половой путь (незащищенный секс с инфицированным партнером) – доминирующий фактор распространения ВИЧ-инфекции.

Передача ВИЧ от матери ребенку может произойти на любом сроке беременности (через плаценту), во время родов (при прохождении через родовые пути) и грудного вскармливания (при наличии язвочек, трещин на сосках матери и во рту ребенка).

Высокий риск инфицирования существует при внутривенном введении наркотических веществ нестерильными шприцами, при переливании ВИЧ-инфицированной крови и ее препаратов, использовании медицинского и немедицинского инструментария, загрязненного биологическими жидкостями человека, инфицированного ВИЧ. Кроме того, опасность могут представлять органы и ткани доноров, используемые для трансплантации.

Попадая в кровоток, вирус проникает в Т-лимфоциты хелперы, или CD-4 клетки (рановидность лейкоцитов), которые помогают организму бороться с инфекциями. Т-хелперы имеют на поверхности так называемые CD4-рецепторы. ВИЧ связывается с этими рецепторами, проникает в клетку, размножается в ней и в конечном счете уничтожает ее. Со временем вирусная нагрузка увеличивается, а количество Т-хелперов снижается.

При отсутствии лечения через несколько лет из-за значительного снижения числа Т-хелперов появляются связанные со СПИДом состояния и симптомы.

Классификация заболевания

Стадия инкубации - от момента заражения до появления реакции организма в виде клинических проявлений острой инфекции и/или выработки антител (специфических белков, продуцируемых в ответ на проникновение антигена, в данном случае – вируса).
Стадия первичных проявлений клинических симптомов:

В дальнейшем продолжается активное размножение вируса и разрушение Т-лимфоцитов, развивается стадия вторичных изменений, для которой характерно прогрессирующее снижение веса, общая слабость, стойкое повышение температуры, озноб, выраженная потливость. Клинические проявления оппортунистических заболеваний обусловливают клиническую картину этой стадии: пациентов беспокоят кашель и одышка, тошнота, рвота, боли в животе, тяжелая диарея, кожные высыпания, сильные головные боли, снижение памяти и внимания и др.

Диагностика ВИЧ

Лабораторные методы исследования:

Скрининг (обследование здоровых людей) на ВИЧ должен быть проведен любому человеку, который считает, что может быть заражен, а также перед любой госпитализацией и операцией, всем беременным женщинам и их половым партнерам.

Обследование целесообразно проходить людям с высоким риском заражения ВИЧ, например, при наличии заболеваний, имеющих одинаковый с ВИЧ-инфекцией механизм передачи (вирусные гепатиты В и С, заболевания, передающиеся половым путем), лицам, имеющим регулярные незащищенные половые контакты, инъекционным наркоманам, детям, рожденным от матерей с ВИЧ-инфекцией, медицинским работникам, напрямую контактирующим с кровью на работе и др.

Существуют экспресс-тесты для скрининга ВИЧ, которые можно делать в домашних условиях. Для определения специфических антител/антигенов к ВИЧ (ВИЧ-1, 2, антиген p24) используют кровь, слюну или мочу. Точность любого экспресс-теста ниже, чем теста, проводимого в лаборатории.

Для стандартного скринингового обследования определяют антитела к ВИЧ 1 и 2 и антиген ВИЧ 1 и 2 (HIV Ag/Ab Combo) в крови с помощью иммуноферментного анализа (ИФА).

Внимание. При положительных и сомнительных реакциях, срок выдачи результата может быть увеличен до 10 рабочих дней. Синонимы: Анализ крови на антитела к ВИЧ1 и 2 и антиген ВИЧ1 и 2; ВИЧ-1 p24; ВИЧ-1-антиген, p24-антиген; ВИЧ 1 и 2 антитела и антиген p24/25, ВИЧ тест-системы 4-г.

ВИЧ-инфекция относится к тяжелым неизлечимым патологиям иммунодефицита человека.

С момента постановки диагноза производится постоянный контроль состояния больного.

Определяется тяжесть течения с помощью лабораторных анализов.

Данные показатели играют решающую роль в назначении антиретровирусной терапии.

Вирусная нагрузка при ВИЧ – это диагностика, позволяющая определить степень тяжести течения патологического процесса.

Показатели определяются с помощью оценки количества частиц вируса, присутствующего в определенном объеме биоматериала инфицированного.

При ВИЧ-инфекции подсчитывается количество копий РНК возбудителя в 1 мл плазмы крови пациента.

Совместно с данным анализом выполняется исследование крови на иммунный статус.

Это позволяет определить состояние иммунной системы (количество CD4).

Характеристика теста на наличие РНК вируса ВИЧ

Показатели вирусной нагрузки (ВН) – это основа мониторинга состояния пациента.

Тест проводится перед началом лечения.

Затем периодически на протяжении всего курса терапии для отслеживания динамики заболевания.

Высокоактивное антиретровирусное лечение – это единственное мероприятие, которое препятствует развитию СПИДа и повышает качество жизни пациента, а также ее продолжительность.

При отсутствии эффекта в результате проводимой медикаментозной терапии и определении высокой ВН лечащий врач корректирует лечебную тактику, при необходимости заменяет препараты.

Вирусная нагрузка определяется преимущественно методом ПЦР, но также используются другие методики исследования.

Количество вируса измеряется числом копий РНК вируса на 1 мл плазмы.

В норме вирусная нагрузка при иммунодефицитном состоянии составляет менее 12 тыс. копий ВИЧ.

Показатели значительно превышающие данные цифры говорят о тяжелом течение болезни и о необходимости коррекции проводимого лечения.

Если высокие показатели наблюдаются без проводимого лечения, врач назначает и расписывает схему терапии в срочном порядке.

Определение состояния иммунной системы при ВИЧ

Вирусная нагрузка выполняется совместно с тестом определения СD4, который при ВИЧ-инфекции является основным показателем количества иммунных клеток в организме.

СD-лимфоциты – это белые клетки крови, которые отвечают за реакцию иммунитета при проникновении в организм инфекционных возбудителей.

В здоровом организме на 1 мл крови определяется более 1000 СD-лимфоцитов.

При инфицировании вирусом иммунного дефицита здоровые клетки, отвечающие за состояние иммунитета, погибают ежедневно в больших объемах.

После чего организм заменяет их на новые.

Со временем вирус иммунодефицита угнетает иммунную систему настолько, что организм не справляется с своевременным возобновлением CD4-лимфоцитов.

Их уровень снижается, иногда до критических показателей.

Снижении количества иммунных клеток до уровня менее 250 – 300 клеток является основным критерием к назначению антиретровирусной терапии.

В противном случае у человека развивается СПИД.

Его опасность заключается в быстром возникновении множественных оппортунистических заболеваний, повышенной вероятности присоединения неинфекционных патологий и раковых процессов.

В результате человек за короткий период времени погибает.

Как правило, процесс снижения иммунных клеток длится не один год (чаще 7-9 лет).

Однако при правильном контролировании состояния больного можно избежать развитие СПИД – конечной стадии течения ВИЧ-инфекции.

Показатели СD4 могут варьироваться в крови, в зависимости от многочисленных факторов.

Это стрессовых ситуаций, менструального цикла у женщин, времени года и суток, присоединении простудных заболеваний.

Поэтому получить максимально точные результаты можно соблюдая некоторые правила.

Диагностика проводится в одно и то же время суток.

Как правило, в утренние часы.

Не выполняется тест при наличии ОРВИ или любых других, даже незначительных простудных состояниях.

Если показатели вирусной нагрузки и СD-лимфоцитов при ВИЧ находятся в пределах нормы, диагностика проводится 1 раз в 3-6 месяцев.

При низком уровне иммунных клеток и повышенном количестве РНК бактериального агента в плазме крови проводится противовирусная терапия.

В данном случае диагностика выполняется намного чаще.

Когда назначается тест на вирусную нагрузку при ВИЧ

Вирусная нагрузка при ВИЧ-инфекции необходима с следующих случаях:

Подозрение на инфицировании ВИЧ (к примеру, после случайного незащищенного сексуального контакта, переливание донорской крови, рождение ребенка от зараженной матери). Вирусная нагрузка является одним из наиболее ранних диагностических методов, определяющих наличие РНК вируса в крови. Большинство лабораторных исследований проводится не ранее, чем через месяц после предполагаемого инфицирования – это время за которое в крови начинают формироваться антитела к инфекции. Вирусная нагрузка определяется спустя две недели.
Взятие больного на диспансерное наблюдение.
У пациентов ВИЧ-инфицированных, перед назначением противовирусной терапии. Забор анализов выполняется 1 раз в 3, 6 месяцев или 1 раз в год, все зависит от получаемых результатов.
Спустя 4 недели после начала приема антиретровирусных препаратов, для контроля состояния мониторинг проводится 1 раз в 3 месяца.

Какие способы используют для определения вирусной нагрузки при ВИЧ

Для точного вычисления показателей вирусной нагрузки выполняется лабораторное исследование крови.

Иногда РНК возбудителя определяется в других биологических жидкостях, к примеру, в эякуляте или слюне.

Методы вирусной нагрузки:

ПЦР – диагностика (высокочувствительная методика, используемая в частных клиниках, позволяет распознать болезнь на самых ранних стадиях; наличие вирусного агента определяется уже при наличии 40 копий в 1 мл плазмы крови);
способ разветвленной ДНК (чаще используется в государственных лабораториях, является наиболее простым, но менее чувствительным по сравнению с ПЦР-диагностикой; определение показателей вирусной нагрузки возможно при больших объемах РНК вируса в плазме);
метод изотермической амплификации нуклеиновых кислот (NASBA) – высокочувствительное исследование, широко распространено в Европейских странах, на территории РФ практически не используется.

Как правило, на протяжении лечения применяется один и тот же метод диагностики.

Это позволяет сравнивать результаты и быть уверенными в их точности.

Расшифровка результатов теста на вирусную нагрузку при ВИЧ: норма и отклонение

При подозрении на ВИЧ–инфекцию выполнение вирусной нагрузки покажет нулевую реакцию.

Это значит полное отсутствие РНК вирусного агента в организме, другими словами человек является полностью здоровым.

Иногда определение вирусной нагрузки наблюдается не только при ВИЧ, но и на фоне патологических процессов, связанных с болезнями мочевыделительной системы.

В частности, терминальная стадия почечной дисфункции, а также серьезные расстройства эндокринной системы.

Данные патологии провоцируют образование специфических иммуноглобулинов в ответ на инфекции, которые определяются в ходе лабораторной диагностики.

Вирусная нагрузка, выполняемая у женщин в период беременности, может показать наличие антител к ВИЧ-инфекции.

Но в большинстве случаев данные показатели являются ложными и связаны со стрессовым состоянием, в котором пребывает организм при вынашивании плода.

Также с гормональными перестройками.

В данном случае вирусная нагрузка покажет низкие показатели.

Так как несмотря происходящие изменения в организме в период вынашивания плода, при отсутствии инфицирования показатели не могут быть слишком высокими.

Неопределенная вирусная нагрузка при ВИЧ возможна в следующих ситуациях – если лабораторное исследование проводилось до сероконверсии.

То есть периода, когда в плазме крови начинают формироваться первые иммуноглобулины (антитела), определяемые при проведении анализов на ВИЧ-диагностику.

В таких случаях вирусная нагрузка не определяется до первых проявлений болезни.

Нормой при ВИЧ-инфекции считается наличие менее 10 000 – 15 000 клеток вируса на 1 мл крови.

Также следует отметить, данные показатели расшифровки при проведении противовирусного лечения говорят о положительной динамике и высокой эффективности медикаментозной терапии.

Неопределяемая вирусная нагрузка при ВИЧ, после приема противовирусной терапии, не означает полное излечение.

В данном случае отсутствие показателей вирусной нагрузки говорит о неправильно проведенной диагностике.

Либо о значительном снижении РНК вируса в организме больного, до уровня, который достаточно сложно определить.

Вирусная нагрузка 200 000 при ВИЧ считается сильно завышенной.

Такое состояние пациента требует незамедлительного проведения медикаментозного лечения.

Если показатели, превышающую норму при ВИЧ-инфекции, не были своевременно обнаружены, это может привести к развитию СПИД.

И даже к скорому летальному исходу, в результате присоединения других заболеваний.

Вирусная нагрузка свыше 500000 при ВИЧ является показателем развития синдрома приобретенного иммунного дефицита (СПИДа).

Если в результате проведения противовирусной терапии у больного вирусная нагрузка повышается до 700 000 при ВИЧ, это говорит о неэффективности лечения и требуется замена на другие препараты.

Но в большинстве случаев высокие показатели являются основным критерием общего состояния.

Говорят о наличии в организме других, хронических или острых процессов, которые в любой момент могут привести к смерти пациента.

Вирусная нагрузка, определяемая от 20 000 и до 100 000, является опасным состоянием, которое требует постоянного контроля.

При высоких показателях исследования проводимая антиретровирусная терапия позволяет улучшить состояние больного и снизить уровень РНК вируса к норме.

Тест на вирусный контроль и наличие иммунных клеток проводится не реже 1 раза в месяц, иногда чаще.

При этом о необходимости корректирования медикаментозного лечения решает лечащий врач.

Неопределяемая вирусная нагрузка при ВИЧ

Неопределяемые результаты анализа на вирусную нагрузку при ВИЧ чаще говорят о значительном снижении РНК вирусного агента в плазме крови.

До столь мизерного уровня, что даже высокочувствительные методы не в состоянии определить наличие вирусного агента.

Неопределяемая вирусная нагрузка не означает полное излечение от ВИЧ-инфекции и ее исчезновение из всех биологических материалов больного.

Чаще такая реакция наблюдается у пациентов спустя полгода после начала приема антиретровирусных препаратов.

В данном случае снижается вероятность инфицирования своего полового партнера.

Так как в сперме и слюне также снижается количество частиц вируса.

Но пренебрегать правилами безопасности не стоит.

Неопределяемая вирусная нагрузка у беременной женщины является большим преимуществом, так как снижается вероятность заражения плода.

Придерживаясь врачебных рекомендаций относительно образа жизни, режима питания и отдыха, больному удастся поддерживать вирусную нагрузку на неопределяемом или нормальном уровне.

Использование антиретровирусных препаратов поддерживает иммунную систему и предотвращает размножение вирусных агентов.

Адекватная схема терапии позволяет поддерживать нормальное состояние больного.

Предотвращает прогрессирование вирусной инфекции с последующим развитием СПИДа.

Высокая вирусная нагрузка при ВИЧ: используемые препараты

Антиретровирусная терапия – это единственный способ борьбы с прогрессированием вирусной инфекции в организме человека.

Высокая вирусная нагрузка при ВИЧ является основным показателем к назначению необходимых препаратов, среди которых:

I. НИОТ, НтИОТ, ННИОТ (медикаменты препятствуют дальнейшее размножение РНК вируса внутри клетки).
II. Ингибиторы протеазы (предотвращает формирование новых копий вируса).
III. Ингибиторы интегразы (блокируют фермент вирусного агента, предотвращают поражение иммунных клеток).
VI. Ингибиторы проникновения ВИЧ инфекции в клетку-мишень.

Вирус иммунодефицита серьезное и опасное заболевание, требующее всестороннего контроля состояния пациента.

Доза и курс лечения назначается квалифицированным врачом.

Самолечение в данном случае недопустимо.

Если вам необходимо определить вирусную нагрузку при ВИЧ, обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.

Метод определения в пробах материалов, подвергающихся исследованию, любых ДНК и РНК, в случае неэффективности других методов.

Суть этого метода звучит в самом названии.

Поначалу исторический экскурс.

Автор разработки Кэри Мюллис, заработал Нобелевскую премию за работу 1983 года.

Первоначально планировалось научное применение метода, но впоследствии он завоевал свое место и в диагностической медицине.

Этим методом можно определять генетический материал всевозможных инфекций.

Гинекологические и урологические труднодиагностируемые инфекции выявляются этим методом.

Очень часто ПЦР используется для диагностики ВИЧ.

Основы метода, на основании которых работает исследование, основаны на уникальности фрагмента ДНК для каждой инфекции.

В случае с ВИЧ это РНК.

И создает большое количество копий этого фрагмента ДНК (или РНК).

Геометрическая прогрессия определяет число копий в течение цикла ПЦР (около 3-х минут).

По прошествии нескольких часов число фрагментов – несколько миллиардов.

Теперь несложно определить и возбудителя инфекции.

Метод силен своей универсальностью.

Для определения фрагментов ДНК (или РНК) возбудителя любой инфекции всегда используется одно и то же стандартное оборудование.

ПЦР славится и своей специфичностью (практически 100%).

Можно использовать один и тот же исследуемый материал для поиска разных возбудителей заболеваний.

У метода очень высокая чувствительность и оперативность.

Всего в течение дня, можно узнать, есть ли возбудитель в организме и какой.

Инкубационный период не мешает проведению исследования.

Нет еще клиники заболевания и антител в крови, но есть ДНК или РНК конкретного возбудителя в организме подвергающегося исследованию.

К недостаткам метода нужно отнести высокую квалификацию врача, берущего материал для исследования, и лаборанта, проводящего исследование.

Также важна высокая чистота помещения, в котором проводят исследование (практически 100%), чтобы результаты исследований были достоверными.

Для ИППП существуют специальные комплексные исследования, при которых определяют наличие сразу нескольких возбудителей.

А теперь поговорим о перспективах ПЦР для диагностики ВИЧ-инфекции.

Когда делают ПЦР на ВИЧ

От четырех до четырнадцати дней спустя, после инфицирования, можно обнаружить ВИЧ данным методом.

Достоверность результата оценивают, когда минуло четырнадцать дней спустя опасной половой связи.

Наличие отрицательного результата говорит о достоверности проведенного исследования.

Но для того чтобы получить непререкаемый результат исследования проводят еще и ИФА.

ПЦР является высокочувствительным методом, в основе которого лежит амплификация (усиление) небольшого участка провирусной ДНК (или РНК) за счёт праймеров.

Праймеры – это специальные реагенты.

Желательная (не обязательная) процедура взятия венозной крови на исследование на ВИЧ-инфекцию.

Проведение ПЦР для диагностики достаточно дорогостоящий анализ.

Его делают не всегда, а в особых случаях.

И если случилась медицинская авария, в которой есть ВИЧ-инфицированные и возможно заразившиеся.

Спустя четырнадцать дней достоверность на наличие ВИЧ-инфекции порядка 98%.

По истечении пяти дней после предполагаемого заражения - 80%.

Анализ ИФА можно делать только тогда, когда появятся антитела к ВИЧ в крови.

Проходит от одного до трёх месяцев, иногда до года.

Поэтому если есть озабоченность по поводу ВИЧ инфицирования, лучше не тянуть, а сделать этот дорогостоящий, но такой необходимый анализ.

Важно знать диагноз как можно раньше.

ПЦР анализ на ВИЧ
рассказывает подполковник
медицинской службы, врач
Ленкин Сергей Геннадьевич

Содержание данной статьи проверено и подтверждено на соответствие медицинским
стандартам врачем дерматовенерологом, урологом, к.м.н.

Ленкиным Сергеем Геннадьевичем

Наименование	Срок	Цена
Прием венеролога	900.00 руб.
ДНК ВИЧ (кровь)	5 д.	3450.00 руб.

Как делают

Нахождение ВИЧ в пробах крови методом ПЦР выполняется двумя вариантами:

исследуется провирус ВИЧ-инфекции, точнее его ДНК
исследуется плазма или сыворотка крови на РНК ВИЧ-инфекции

Периферическая кровь, точнее ее мононуклеарные клетки, исследуются на содержание провируса.

По причине того, что ИФА дает вероятность выше 98% - 99,9%, ПЦР не является 100% подтверждающим анализом на наличие ВИЧ-инфекции.

Большой процент ложноположительных срабатываний зависит и от чистоты лаборатории, где проводят исследования, и от квалификации проводящего исследования.

ПЦР на ВИЧ-инфекцию – единственная диагностика до появления антител к ВИЧ.

То есть до минимум трёх месяцев с начала инфицирования.

Прогресс заболевания ВИЧ-инфекцией характеризуется нарастанием количества вируса в крови.

Проведение ПЦР говорит о стадии заболевания ВИЧ и эффективности антиретровирусной терапии.

Помимо вышеперечисленных условий, есть обязательные исследования крови на ВИЧ-инфекцию для:

новорожденных от ВИЧ-инфицированной матери
наблюдения за концентрацией ВИЧ-инфекции

Все остальные условия являются необязательными.

Процедура сдачи ПЦР для диагностики наличия ВИЧ-инфекции в организме проста.

Берется венозная кровь и проводится анализ.

Нужно воздержаться от употребления любых продуктов около десяти часов.

Не употреблять алкоголь, ограничить физическую активность, исключить эмоциональные нагрузки.

Для этого нужна очень чистая лаборатория.

При получении положительного результата его обязательно перепроверяют.

Для этого используют референц-лабораторию.

Там проводят более точный исследовательский способ диагностики.

К сожалению, универсальность не 100%, и зачастую результат анализа ложноположительный.

Его используют вспомогательным методом для установления наличия или отсутствия ВИЧ-инфекции в организме.

Если проводят скрининг на наличие ВИЧ-инфекции или ставят диагноз ВИЧ инфицирования, то используют метод ПЦР.

Методом проводят и количественную оценку нахождения ВИЧ в организме.

Так определяется степень и тяжесть патологических изменений в организме.

Уровень концентрации ВИЧ-инфекции, в организме диагностируемого определяют методом ПЦР.

До лечения исследуется кровь методом ПЦР и после, и можно оценить правильность проводимого курса лечения.

Те ли препараты назначают или нужно другие.

Проводят анализ, и в том случае, если антитела в крови есть, но их наличие не говорит о достоверности наличия ВИЧ-инфекции в организме.

Результаты анализов

Есть много поводов для исследования на наличие ВИЧ-инфекции в организме.

Предстоящая операция, планирование беременности, наличие в анамнезе случайных половых связей и другие похожие причины.

Есть категории работников (например, медицинские работники, учителя и другие) для которых эта процедура необходима, для допуска работы с людьми.

Есть определенная тревожная симптоматика, при которой анализ на ВИЧ-инфекцию проводят:

при резкой потере веса
при длительной диарее (около 3-х недель)
при лихорадке невыясненной этиологии
при росте лимфоузлов в разных местах
при лимфо- и лейкопении
при наличии необъяснимой пневмонии, системном кандидозе, туберкулезе, манифестном токсоплазмозе и других серьезных заболеваниях

Интерпретацией результатов проведенных анализов занимается только лечащий врач.

Какой бы ни был результат - это не повод заниматься лечением самостоятельно.

К тому же результат ввиду несовершенства метода может быть как ложноотрицательным, так и ложноположительным.

Иногда схожие результаты анализов у разных людей свидетельствуют о различной клинике.

Чаще делают количественный ПЦР-анализ на ВИЧ-инфекцию.

Этот анализ дает сведения о количестве вируса и отображается единицей копия/мл.

Расшифровка результатов:

РНК вируса отсутствует или его очень мало (около 20 копий/мл)
мизерное количество РНК (чуть больше 20 копий/мл)
20 – 10 6 копий/мл
более чем 10 6 копий/мл

Самый опасный третий и четвертый результат.

Что делать, если результат анализа ПЦР на ВИЧ положительный

Анализы на ВИЧ-инфекцию делают в несколько этапов.

Это занимает период от двух до десяти дней.

Результаты анализов делятся на положительные, отрицательные и сомнительные.

Если результат сомнительный, то немного позже обязательно делают анализ еще раз.

Но даже положительный результат не окончательный.

Пересдача крови на анализ тоже делается.

На достоверность результата влияние оказывает некоторые заболевания и состояния организма.

Проведение анализа может быть конфиденциальным или анонимным.

При конфиденциальном обследовании имя обследуемого человека называется.

При анонимном обследовании анализ делают по идентификационному номеру.

Результат анализа может узнать только подвергшийся обследованию человек.

Даже положительный результат остается тайной.

Это врачебная тайна, и она не может быть нарушена.

Но даже подтвержденный положительный результат еще не приговор.

В современных условиях ВИЧ-инфицированные подвергаются пожизненной антиретровирусной терапии, что позволяет сохранить им жизнь.

Наоборот, чем раньше обнаружено наличие ВИЧ-инфекции в организме, тем плодотворнее будет лечение.

Перспективы метода в диагностике ВИЧ-инфекции

ПЦР относится к молекулярно-биологическим методам исследования.

Помимо диагностики ВИЧ-инфекции и ИППП, метод зарекомендовал себя в генетических разработках, в ветеринарной науке, сельском хозяйстве.

Продукты питания исследуют на содержание ГМО с помощью ПЦР.

Также сфера применения метода судебно-медицинская экспертиза.

Но все же нас интересуют, в первую очередь, перспективы ПЦР для постановки диагноза наличия ВИЧ-инфекции.

С помощью ПЦР выявляются даже единицы ВИЧ присутствия в крови.

Анализ характеризуется очень высокой чувствительностью – от одного до ста единиц ВИЧ.

Выраженная уникальность происходит за счет того, что идет поиск специфичной ДНК (или РНК) присущий конкретному возбудителю заболевания.

Реакция протекания операции копирования фрагментов РНК характеризуется высокой специфичностью метода ПЦР.

Поэтому амплификационная тест-система (ПЦР) выигрывает перед другими тест-системами иммунологического характера (например, ИФА).

Еще важна и скорость ПЦР анализа.

Один рабочий день уходит на проведение ПЦР.

Но есть у метода и негативные качества.

Если ВИЧ-инфекция попадет в исследуемую кровь случайно, из воздуха, при ее отсутствии в организме, реакция копирования вируса все равно будет идти.

Поэтому и нужна такая стерильность в лаборатории, в которой проводиться ПЦР.

Благодаря большому непостоянству генетического материала ВИЧ уменьшаются диагностические показатели чувствительности.

Хотя сам метод очень чувствительный.

Чувствительность метода ПЦР характеризуют 98%. У ИФА этот показатель выше – 99%.

А за данными статистики или вовремя не продиагностируемые заболевшие или, наоборот, неправильно продиагностируемые о наличии в организме ВИЧ-инфекции.

Для лабораторий, в которых ПЦР проводиться, разрабатываются специальные системы внутреннего контроля, с целью повышения качества диагностики.

На основе стандартизированных межлабораторных панелей качества минимализируют ошибки тестирования.

Если все сделано правильно, без ошибок, то с помощью ПЦР можно определить только один фрагмент провируса на десять тысяч – сто тысяч лимфоцитов.

Методом определяют и резистентность к препаратам антиретрорвирусной терапии.

Конечно, метод несовершенный, но у него большие перспективы.

Особенно на ранних стадиях инфицирования, когда в крови еще нет антигенов.

Метод хоть и недешевый, но правильно проведенный, с соблюдением всех условий правильной постановки, очень информативный.

Основная задача врачей состоит в том, чтобы выявить ВИЧ как можно раньше.

Проблема заключается в том, что заболевание долгое время не имеет симптомов.

В начальной острой фазе оно протекает как под маской гриппа.

В дальнейшем наступает латентный период, который может продолжаться 10 лет и более.

На протяжении этого времени нет никаких симптомов.

И даже в фазе преСПИДа не всегда удается заподозрить патологию.

Поэтому в России больше половины больных получают диагноз, когда количество CD4 лимфоцитов ниже 200 в мкл.

В этот период уже развиваются выраженные нарушения клеточного иммунитета.

Присоединяются оппортунистические инфекции.

Даже в развитых странах с современной медициной, таких как США и Германия, до 30% пациентов получают диагноз лишь на стадии СПИДа.

В этот период уже прогрессируют инфекционные поражения легких у больных и других органов.

Массовое обследование всех людей на ВИЧ не проводится ни в одной стране.

Есть лишь определенные категории пациентов, для которых проведение диагностики является обязательным.

Также некоторым людям оно рекомендовано, но не обязательно.

В первую очередь на ВИЧ обследуют:

пациентов, которым предстоит хирургическое вмешательство
тем, кто контактировал с носителем ВИЧ тем или иным способом
людей, имеющих клинические и лабораторные признаки дефицита клеточного иммунитета
у детей, рожденных от серопозитивных матерей
доноров крови или любого другого биоматериала

Рекомендовано обследование:

при госпитализации в стационар
при наступлении беременности

инъекционным наркоманам
в случае выявления любых ИППП в кожно-венерологическом диспансере (сифилис, вирусные гепатиты, гонорея и другие)
при высокой половой активности и частой смене партнеров

В перечисленных ситуациях анализ на ВИЧ берут далеко не всегда.

Только если пациент сам считает, что это необходимо.

Алгоритм диагностики ВИЧ следующий:

пациенту проводят скрининговое исследование
в случае положительного результата назначается подтверждающий тест

Любые диагностические тесты имеют определенную чувствительность и специфичность.

Для скрининговых тестов основным требованием является чувствительность.

Это означает, что риск ложноотрицательных результатов минимальный.

Очень важно не пропустить инфекцию, если она присутствует в организме.

При этом специфичность играет меньшую роль.

Специфичность – это показатель, отражающий вероятность ложноположительного результата.

Ложнореактивный тест в процессе скринингового обследования не страшен.

Потому что после скрининга в любом случае требуется подтверждение диагноза.

Для подтверждающего теста на первом месте уже стоит специфичность.

Потому что нельзя допустить, чтобы человек, не страдающий ВИЧ, ошибочно получил этот диагноз.

Скрининговые тесты обычно предполагают одновременное выполнение анализа на:

Преимущества этих методов состоят в том, что вместе они обладают высокой чувствительностью.

Данные способы полностью автоматизированы, проводятся быстро и недорого стоят.

Для окончательной диагностики применяют иммуноблоттинг.

Этот тест тоже серологический.

То есть, он основан на определении антител.

Но, в отличие от ИФА, имеет более высокую специфичность.

Суть метода состоит в том, что антигены вируса разделяются по молекулярной массе при помощи электрофореза.

Затем они переносятся на мембрану.

Она используется как индикатор.

Также существует ещё один метод – ПЦР.

Он редко используется как подтверждающий.

Но в некоторых ситуациях ПЦР необходима.

Она позволяет оценить вирусную нагрузку.

Это дает возможность вовремя определить, что антиретровирусная терапия стала неэффективной.

ПЦР позволяет подобрать оптимальное лечение и дать прогноз дальнейшему развитию заболевания.

Также ПЦР применяется в случае перинатального пути заражения.

У новорожденных серологическая диагностика малоинформативна.

Потому что у них в крови циркулируют материнские антитела к ВИЧ.

Они не имеют защитного значения.

Но способны проникать в кровь ребенка уже с 32 недели гестации.

Эти антитела определяются в крови в течение 1-1,5 лет после рождения.

Соответственно, все серологические тесты (анализы на антитела) всегда будут положительными.

И не важно, страдает ли реально ребенок этой инфекцией, или же это материнские иммуноглобулины, и малыш полностью здоров.

В этом случае методом выбора остается ПЦР.

Он определяет не антитела, а РНК вируса иммунодефицита.

Лабораторная диагностика

Ранняя диагностика возможна только при проведении скринингового обследования.

То есть, до возникновения каких-либо специфических симптомов дефицита клеточного иммунитета.

Скрининговые исследования имеют чувствительность до 100%, если проводится комботест.

То есть, одновременное проведение ИФА и выявления антигена р24.

При этом специфичность стандартного исследования составляет 99,5%.

Это означает, что у одного человека из 200 результат будет ложноположительным.

В последующем он будет опровергнут в ходе подтверждающего теста.

Для подтверждения используется иммуноблоттинг.

Некоторые клиники используют также ПЦР.

Но этот метод менее эффективен.

Он имеет меньшую чувствительность, чем серологические исследования.

Поэтому ПЦР не используется как основной способ подтверждения диагноза.

Иммуноблоттинг тоже может выдавать ложноотрицательные результаты.

Но только в случаях, когда диагностика проводится слишком рано.

Бывают ситуации, когда скрининговый тест положительный за счет выявления антигена р24.

Он начинает определяться раньше, чем вырабатываются антитела.

В этом случае иммуноблоттинг может быть отрицательным.

Потому что он не определяет антиген р24.

В такой ситуации (положительный скрининговый тест при отрицательном подтверждающем) рекомендовано повторное обследование.

Его нужно пройти через 3 недели.

Если же наблюдаются клинико-иммунологические признаки острой фазы ВИЧ, показано проведение ПЦР.

В нашей клинике вы можете пройти диагностику инфекции без очередей, по предварительной записи.

О том какие анализы
на ВИЧ сдать
рассказывает подполковник
медицинской службы, врач
Ленкин Сергей Геннадьевич

Ленкиным Сергеем Геннадьевичем

Клиника

Симптомы заболевания имеют определенное диагностическое значение.

В данной статье не будет обсуждаться этиология, патогенез, эпидемиология, профилактика ВИЧ – это темы отдельных публикаций.

А вот клинические симптомы стоит упомянуть.

Они возникают:

1. В период первичного заражения
2. В терминальной стадии

То есть, клинические признаки появляются в самом начале и в самом конце заболевания.

В начальный период симптомы неспецифичны.

Это повышенная температура тела, увеличение лимфоузлов, ломота в теле.

У человека может снижаться масса тела.

Во рту появляются язвы.

Обычно человек получает диагноз грипп или инфекционный мононуклеоз.

Редко его направляют на лабораторную диагностику с целью определения ВИЧ.

В дальнейшем симптомы появляются уже на стадии нарушения клеточного иммунитета.

Эти клинические признаки связаны с возникновением кандидоза, опоясывающего герпеса.

В дальнейшем могут присоединяться пневмоцистная пневмония, сепсис, появляются онкологические образования.

В 50% случаев ВИЧ обнаруживают уже на стадии клинических признаков дефицита клеточного иммунитета.

Методы диагностики

Скрининговым методом диагностики является ИФА.

Также проводится определение антигена р24.

Альтернативой являются экспресс-тесты на ВИЧ.

Большинство из них используют в качестве клинического материала капиллярную кровь.

Её берут либо из пальца, либо из мочки уха.

Такая кровь не требует центрифугирования.

Поэтому экспресс-тесты проводятся быстро, без специального оборудования.

Преимущества таких тестов:

возможность проведения на дому или в клинике, где не оборудована клинико-диагностическая лаборатория
быстрые результаты (через 15 минут)
возможность сразу же обследовать потенциального носителя инфекции в случае контакта с ним (например, при травме иглой)
возможность быстрой диагностики перед экстренными операциями

Недостатки таких тестов:

стоят дороже, чем ИФА
менее достоверны (тесты старых поколений не определяют антиген р24, а оценивают только уровень антител)
недостаточно информативны в острой фазе ВИЧ (реактивность теста ниже, чем ИФА)

Экспресс тесты дают ориентировочные результаты.

В дальнейшем они должны быть подтверждены с помощью других методов (иммуноблоттинга или РИФ).

Существуют также домашние тесты.

Но они дают большое количество ложноотрицательных результатов.

Во-первых, по причине меньшей чувствительности.

Во-вторых, из-за частых ошибок пациентов, которые проводят тестирование без участия медицинского персонала.

Еще один метод, достойный обсуждения, называется полимеразная цепная реакция.

С помощью ПЦР редко осуществляется подтверждение диагноза.

Метод имеет недостаточно высокую чувствительность.

Основные причины:

1. Тест проверяет наличие РНК ВИЧ 1 типа. В подавляющем большинстве случаев именно этот вирус вызывает заболевание в России. Тем не менее, 0,5% клинических случаев приходится на ВИЧ-2. Данный тип вируса обнаруживается с помощью серологических методов. Но он не определяется при ПЦР. Потому что для этого требуется проведение отдельного исследования на ВИЧ-2. Но оно удваивает стоимость диагностики, а потому большинству пациентов не назначается.

2. ВИЧ постоянно мутирует. В связи с этим появляются новые фрагменты РНК. Их изменение приводит к тому, что ПЦР может дать ложноотрицательный результат. Данный недостаток компенсируется, если проводится ПЦР с двойной мишенью. То есть, в процессе диагностики ведется поиск не одного, а двух специфичных фрагментов РНК. В этом случае вероятность отрицательного результата у ВИЧ-инфицированного пациента стремится к нулю.
3. Организм некоторых людей сдерживает ВИЧ-инфекцию. Их называют элитные контроллеры. Даже без антиретровирусной терапии репликация вируса подавляется. В результате его количество может снижаться ниже определяемого уровня. Кроме того, контроль ВИЧ-инфекции иммунитетом может быть временным. Он встречается гораздо чаще, чем постоянный. Тогда результат будет ложноотрицательным лишь в определенный период. А при повторном тестировании через несколько месяцев он может выдать положительный результат.
4. Успешная антиретровирусная терапия. Целью лечения является подавление репликации ВИЧ и снижение вирусной нагрузки до неопределяемого уровня. В случае успеха, ПЦР становится отрицательной. Хотя в реальности вирус в организме присутствует.

Таким образом, для первичной диагностики инфекции у взрослых пациентов молекулярный метод применяется редко.

Для ПЦР существует 5 основных показаний:

1. Оценка вирусологической нагрузки. Потому что ПЦР определяет не только сам факт наличия вируса в организме. Оценивается также количество копий РНК в мл. По этому показателю можно судить об эффективности лечения и стадии патологического процесса.
2. Первичная диагностика ВИЧ у новорожденных. У младенцев в крови циркулируют антитела матери. Поэтому ИФА будет всегда положительным. У новорожденных предпочтительным методом, позволяющим установить диагноз, остается ПЦР.

3. Диагностика на ранних сроках. Как уже говорилось, РНК вируса – это наиболее ранний маркер ВИЧ. ПЦР становится положительной за 2 недели и более до того, как начнут определяться антитела в крови.
4. Уточнение спорных результатов серологических тестов.
5. Проверка донорской крови.

Иногда требуется дифференциальная диагностика между ВИЧ-1 и ВИЧ-2.

Для этой цели тоже можно использовать ПЦР.

Но следует заметить, что иммуноблотинг тоже дает возможность диф диагностики.

И даже экспресс-тесты последних поколений различают два типа вируса.

Сроки

Существуют сроки, через какое время становятся положительными разные исследования на ВИЧ.

Слишком рано после контакта с больным сдавать анализы нет смысла.

Потому что они будут отрицательными.

Период, когда можно выявить вирус и подтвердить ВИЧ, называют серологическим окном.

Через такой промежуток времени только начинается выработка антител.

Они определяются через 1 месяц только у 60% больных.

Через 6 недель – у 80%.

Через 8 недель – у 90%, а через 12 недель – у 95% людей, заразившихся ВИЧ.

Именно через 3 месяца рекомендуют проходить обследование большинству людей.

Потому что тогда результат теста будет с большой вероятностью правильным.

Антиген р24 начинает определяться немного раньше, чем антитела к ВИЧ (приблизительно на 5 дней).

На ранних стадиях для диагностики может применяться только ПЦР.

В среднем РНК вируса начинает определяться за 2 недели до появления антител.

Бывают случаи, когда ПЦР дает положительный результат через 14 дней после инфицирования.

При этом следует понимать, что отрицательный ПЦР на 2-3 неделе не исключает заражения.

При таком результате теста следует провести диагностику повторно через некоторое время.

Обычно диагностика не проводится раньше 3 недель после вероятного заражения.

Но бывают исключения из этого правила.

Например, если имел место контакт с потенциальным вирусоносителем.

Тогда его можно проверить на ВИЧ.

Это позволяет убедиться в отсутствии вируса на момент контакта.

Высокая достоверность исследования возможна только через 3 месяца.

При отрицательном результате теста человек считается здоровым.

Проведение повторного исследования через 6 месяцев после возможного заражения возможно лишь в исключительных случаях.

Например, если появились признаки острой фазы инфекции.

Следует также учесть, что результаты диагностики через 12 недель после контакта достоверны только тогда, когда на протяжении данного периода не было других контактов с ВИЧ-инфицированным.

При сдаче анализов ответ центра диагностики человек получает достаточно быстро.

Он может узнать результаты через сутки.

Исключение – проведение ПЦР.

В этом случае приходится ожидать итогов 1-2 недели.

Все диагностические тесты на ВИЧ вы можете сделать в нашей клинике.

Вы получите высокоточную диагностику и быстрые результаты.

Метод определения Количественное определение, ПЦР с детекцией в режиме реального времени (real-time).

Определение РНК ВИЧ типа 1 в плазме крови методом ПЦР с детекцией в режиме реального времени. Исследование выполняется на оборудовании компании Hoffmann-La Roche (Щвейцария) по стандартизованной технологии с автоматизированной пробоподготовкой.

Исследование концентрации в крови РНК ВИЧ типа 1, которое применяют для прогноза и мониторинга эффективности терапии.

Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) является этиологическим агентом синдрома приобретенного иммунодефицита (СПИД). ВИЧ-инфекция может передаваться половым путем, через контаминированную кровь и ее продукты, или от инфицированной матери плоду. В период 3 – 6 недель после инфицирования обычно развивается недлительный острый синдром, для которого характерны гриппоподобные симптомы и высокие уровни виремии в периферической крови. В большинстве случаев после этого развивается ВИЧ-специфичный иммунный ответ и снижение виремии в плазме, обычно в течение 4 – 6 недель после появления симптомов. После сероконверсии (появления специфических антител) наступает клинически стабильная бессимптомная фаза, способная длиться годами. Для бессимптомного периода характерен невысокий уровень персистирующей виремии в плазме и постепенное снижение уровней CD4+ T-лимфоцитов, которое приводит впоследствии к развитию тяжелого иммунодефицита, множественным оппортунистическим инфекциям, онкогенезу и гибели. У лиц с установленной ВИЧ-1 инфекцией количественное измерение уровня РНК ВИЧ-1 в крови используют в целях прогноза и контроля антиретровирусной терапии.

Специальной подготовки к исследованию не требуется. С общими рекомендациями для подготовки к исследованиям можно ознакомиться здесь >>

Тест предназначен для использования при ведении пациентов, инфицированных ВИЧ-1, в комплексе с клиническими данными и другими лабораторными маркерами прогрессирования заболевания. Исследование применяют для прогноза (на основании исходных уровней РНК ВИЧ-1) или для мониторинга эффективности антиретровирусной терапии (на основании определения изменений уровней РНК ВИЧ-1 в плазме на протяжении курса антиретровирусной терапии).

Внимание: тест не предназначен для скрининга на ВИЧ-1 крови и ее продуктов или для подтверждающей диагностики ВИЧ-1-инфекции.

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Единицы измерения: количество выявленной РНК вируса иммунодефицита человека 1 типа, выраженное в C/ml (копии/мл). Одна копия РНК ВИЧ-1 соответствует 1.67 Международных единиц (МЕ) в соответствии в первым международным стандартном ВОЗ для РНК ВИЧ-1 в тестах по выявлению нуклеиновых кислот (NIBSC 97/656).

Обращаем внимание, что сроки выполнения ПЦР-исследований могут быть увеличены при проведении подтверждающих тестов.

Читайте также: