Пцр на инфекционный гепатит

Обновлено: 23.04.2024

Потребность в интерпретации лабораторных тестов при вирусных гепатитах больше, чем при других инфекционных заболеваниях, потому что многочисленные тесты, назначаемые при подозрении на вирусный гепатит, предназначены для решения различных задач.

Врачами СИТИЛАБ подготовлены информационные материалы по лабораторным тестам при вирусных гепатитах в помощь специалистам.

Гепатит А

Вирус гепатита А (HAV), семейство Picornaviridae, родHepatoviridae.

Распространён по всему миру, самая низкая заболеваемость в Северной и Центральной Европе.

Почти всегда фекально-оральным путём через загрязненную пищу. Например, в мидиях вирус может сохраниться в течение многих месяцев. Из-за гигиенических мер профилактики новые случаи инфекции стали редкими в Северной Европе. Встречающиеся случаи - чаще привозные.

Всегда острый гепатит, часто проходящий незамеченным у детей, живущих в эндемичных районах. У взрослых течение болезни более тяжёлое, в редких случаях приводит к печеночной недостаточности. Никогда не переходит в хроническую форму и никогда не вызывает цирроз печени. Вирус выделяется с калом.

Медицинский персонал, сантехники, рабочие водоканала, наркоманы. Жители эндемичных районов, особенно старшего возраста, путешественники. Инфицирование HCV-положительных пациентов вирусом гепатита А может привести к тяжёлой форме заболевания.

При активной иммунизации длительно сохраняется иммунитет (10 лет). Иммунизация может быть проведена даже перед поездкой. Возможна также пассивная иммунизация в случае контакта с зараженными людьми.

Диагностика гепатита А

Определяются антитела классов IgG и IgM. Скрининговый тест при подозрении на новую или прошлую инфекцию. В начале заболевания может быть отрицательным. Тест может также использоваться для оценки напряжённости иммунитета перед прививкой.

Положительный в случае новой инфекции. Следует отметить, что тест может быть положительным в течение двух лет после перенесенного гепатита A. Антитела к HAV класса IgM могут быть положительными в течение короткого времени после прививки. В редких случаях, например, инфекция вирусом Эпштейна-Барр, тест может быть сомнительным или слабо положительным.

При гепатите А РНК вируса может определяться в крови.

Гепатит В

Вирус гепатита В (HBV), ДНК-содержащий вирус, семейство Hepadnaviridae, род Orthohepadnaviridae.

Распространён по всему миру, самая высокая заболеваемость в Юго-восточной Азии и Африке. Распространённость в Центральной Европе - 1-2%. В России больны хроническим гепатитом В около 8 млн человек.

HBV наиболее часто передается при половых контактах. Возможна вертикальная передача плоду при родах, через кровь от больного (переливание крови, препаратов крови; татуировки; пирсинг; повреждения кожи). HBV может обнаруживаться во всех жидкостях организма. Самая высокая концентрация вируса определяется в крови (до 1000 блн. инфекционных частиц/мл). Попадание в кровь приблизительно 10 вирусов достаточно для инфицирования.

2-3 месяца, в единичных случаях до 1 года.

HBV может вызывать как острый, так и хронический гепатит. Клиническое течение острого гепатита может быть различным от инапарантной формы (носительство) до молниеносного течения. Приблизительно у 10% инфицированных гепатит В протекает в хронической форме, выделяют хроническую инфекцию без клинической активности и хронический гепатит В. Приблизительно у 10% больных хроническим гепатитом В развивается цирроз печени. Кроме того, больные хроническим гепатитом В имеют высокий риск развития гепатоцеллюлярной карциномы.

Медицинский персонал, лица, перенёсшие переливание крови, реципиенты органов и тканей, диализные больные, лица, имеющие контакты с больными гепатитом В, новорождённые, рожденные от больных матерей, жители домов инвалидов и престарелых.

Иммунизация является успешной, если титр антител кHBsAg 100 мМЕ/мл или больше спустя 4-8 недель после третьей прививки. В этом случае иммунитет к заболеванию может сохраняться достаточно долго (по крайней мере, 10 лет). Лицам, у которых после 3-х должным образом проведённых прививок, через 8 недель титр антител к HBsAgне повысился, необходимо провести повторную вакцинацию (другой вакциной или большими дозами). Все новорождённые и подростки между 12 и 14 годами должны быть привиты, так же как и лица, входящие в группу риска. До проведения вакцинации необходимо провести исследование на антитела к HBsAg, если титр антител меньше 10 мМЕ/мл, то необходима срочная вакцинация.

Диагностика гепатита В

При гепатите В возможно определение антител, антигенов и ДНК вируса.

Поверхностный белок вируса гепатита В, обнаруживается в сыворотке в трех различных формах: на поверхности неповрежденных инфекционных частиц, или как свободный протеин (нитевидный или сферический). Основной маркер острого и хронического гепатита В. В большинстве случаев HBsAg обнаруживается уже в инкубационном периоде и при остром течении гепатита выявляется в крови в течение 5-6 месяцев. Обнаружение поверхностного антигена вируса гепатита В дольше 6 месяцев после начала заболевания свидетельствует о возможной хронизации процесса. Возможно пожизненное носительство HBsAg. Из-за наличия различных форм HBsAg в сыворотке, при его обнаружении невозможно дифференцировать заболевание и HBsAg-носительство. Для этого необходимо провести дополнительные исследования (определение ДНК вируса гепатита В, HBeAg и антител к HBeAg).

Методы иммуноферментного анализа, применяемые для определения HBsAg в сыворотке крови, являются скрининговыми и в очень редких случаях могут давать ложноположительные результаты. Поэтому в случае получения положительного результата для подтверждения его специфичности специалисты лаборатории ставят подтверждающий тест - повторное исследование сыворотки крови пациента с иммуноингибированием и разведением. Исследование проводится для подтверждения положительного результата исследования на HBsAg.

Показатель наличия иммунитета к вирусу гепатита В, проводится перед вакцинацией и через 4-8 недель после вакцинации для контроля за эффективностью вакцинации.

Антитела к HBcAg класса IgM выявляются в сыворотке при остром гепатите и реактивации хронического гепатита. При молниеносной форме течения заболевания только этот тест может давать положительный результат.

Определение антител к НBcAg класса IgG применяют в целях диагностики текущего или перенесенного в прошлом гепатита В. Однако наличие антител не дает возможности дифференцировать острую, хроническую или перенесенную в прошлом инфекцию.

HBeAg - маркер активной репликации вируса гепатита B. HBеAg является продуктом распада сердцевинного антигена вируса гепатита В (НBсAg).

Является показателем начала сероконверсии, свидетельствует о прекращении репликации вируса. Однако обнаружение антител к HBeAg не всегда является показателем отсутствия инфекционности. Иногда возможно появление мутантной, дефектной HBeAg-отрицательной формы вируса, то есть вирус данный антиген синтезировать не способен или синтезирует в малых количествах, при этом, хотя в крови обнаруживаются антитела к HBeAg, высокая репликативная активность вируса сохраняется.

Определяется ДНК вируса гепатита В в крови. При положительном результате исследования необходимо провести количественное исследование.

Определяется количество копий ДНК вируса гепатита B в 1 мл крови (вирусная нагрузка). Исследование проводится для контроля за эффективностью лечения.

Гепатит С

РНК-содержащий вирус, семейство Flaviviridae. В настоящее время выделяют 8 генотипов (1-7, 10) с многочисленными подгруппами.

Распространён повсеместно, наиболее высокая заболеваемость в Южной Азии, Египте и Центральной Африке. По данным Robert-Koch-Institute (RKI). гепатит С является причиной 20% острых гепатитов, больше чем 40 % всех случаев цирроза печени, 70-85% хронических гепатитов и 60% всех опухолей печени.

Как и при гепатите В, заражение происходит при переливании крови и продуктов крови. Передача инфекции половым путём не играет значительной роли; перинатальная передача низка (4%). Возможно заражение при инъекциях, аутогемотерапии, через инструменты стоматолога, при эндоскопии.

6-12 недель, иногда до 1 года.

Острый гепатит С часто имеет умеренное клиническое течение и остается незамеченным, у 85% заболевших развивается хронический гепатит и у 20% больных хроническим гепатитом развивается цирроз печени. Характерной особенностью клинического течения заболевания является небольшое увеличение активности трансаминаз, которое часто не связывают с возможностью вирусного гепатита. Это приводит к поздней диагностике заболевания.

Медицинский персонал, лица после переливания крови, диализные пациенты, дети, рождённые от матерей, больных гепатитом С.

В настоящее время вакцин нет.

Диагностика гепатита С

Антитела к HCV обычно определяются спустя 6-8 недель после инфицирования. В единичных случаях позже. Отрицательный результат не исключает недавно приобретенную инфекцию HCV. Положительный результат может свидетельствовать об остром или хроническом гепатите С. Данное исследование не позволяет различить острый и хронический гепатит, а также стадию выздоровления после гепатита С. Антитела к HCV необходимо определять у всех пациентов с незначительным повышением активности трансаминаз и у людей, относящихся к группе риска.

Определение суммарных антител к вирусу гепатита С является скрининговым тестом для диагностики заболевания. В случае получения положительного результата для подтверждения его специфичности используют подтверждающий тест - определение широкого спектра антител к белкам специфичным для вируса гепатита С (сore, NS1 NS2, NS3, NS4, NS5) в сыворотке крови больного. Исследование считается положительным, если выявляются антитела к 2 или более белкам вируса гепатита С. Подтверждающий тест на антитела к вирусу гепатита С используют для подтверждения специфичности скринингового метода.

Положительный результат может свидетельствовать об остром гепатите С или обострении хронического гепатита С. Отрицательный результат свидетельствует о том, что гепатит С не выявлен (при отрицательном результате исследования суммарных антител к гепатиту С), или у пациента хронический гепатит С вне обострения (при положительном результате исследования суммарных антител).

Определяется РНК вируса гепатита С в крови. Положительный результат свидетельствует о репликации вируса. При положительном результате должно проводиться количественное исследование, чтобы определить степень виремии. Метод выбора - так называемый "Real time" ПЦР. РНК вируса необходимо определять в случае положительного результата исследования на антитела, кроме того, и при отрицательном результате, если подозревается гепатит С (особенно в случае диализных пациентов). Исследование на РНК вируса гепатита С показано для новорожденных, рождённых от матерей больных гепатитом С. Так как у новорожденных в крови могут определяться материнские антитела, по этой причине обнаружение антител к HCV не может использоваться у этой категории пациентов.

Исследование проводится для определения вирусной нагрузки.

Определяется генотип вируса для выбора схемы лечения. В настоящее время в лабораторной практике определяется 5 генотипов.

Гепатит D

Дефектный РНК-содержащий вирус. Для репликации необходим вирус гепатита В. Обнаруживается только у лиц, инфицированных вирусом гепатита В.

Низкий уровень заболеваемости в Северной Европе; более высокий в Средиземноморских странах и в странах Черноморского региона; высокая заболеваемость в Центральной Африке и Южной Америке.

Как и гепатит B, парентеральным путем, при переливании зараженной крови или при сексуальных контактах.

Несколько недель или месяцев.

В случае коинфекции (одновременное заражение гепатитом B и гепатитом D) - острый гепатит с очень тяжёлым клиническим течением, часто наблюдается высокая смертность. В случае суперинфекции (заражение вирусом гепатита D HBV-положительных пациентов) развивается хронический гепатит с более тяжёлым течением, чем просто хронический гепатит B.

Такие же, как и для гепатита B, и лица, проживающие в эндемичных областях.

В настоящее время вакцин против гепатита D нет, но иммунизация против гепатита B защищает от инфицирования.

Диагностика гепатита D

Определяются IgG и IgM антитела. Скрининговое исследование назначается, если подозревается новая или хроническая инфекция. Антитела к HDV обнаруживаются спустя 1-2 недели после появления клинических признаков заболевания.

РНК к вирусу гепатита D обнаруживается в крови при появлении клинических признаков заболевания. Как правило, результат исследования на ДНК вируса гепатита В в этот период отрицательный.

Гепатит Е

РНК-содержащий вирус семейства Caliciviridae.

Высокая заболеваемость встречается в Центральной Америке, Южной Азии и в некоторых регионах Африки.

Как и у гепатита А - фекально-оральный.

Острый гепатит, который никогда не переходит в хроническую форму. У беременных женщин может развиться тяжёлый гепатит с молниеносной формой клинического течения с высокой летальностью.

Жители эндемичных районов, путешественники.

Вакцин в настоящее время нет.

Диагностика гепатита Е

Обнаружение антител класса IgM к вирусу гепатита Е свидетельствует об острой стадии гепатита Е. Антитела к вирусу гепатита Е IgM выявляются в крови после появления желтухи. Чувствительность данного исследования, по данным литературы, составляет более 93%. Отрицательный результат исследования не исключает инфицирования вирусом гепатита Е. Показания к назначению исследования: наличие клинической картины заболевания или лабораторных данных (повышение АЛТ, АСТ, билирубина), обследование в эндемичных районах.

Антитела класса IgG к вирусу гепатита Е появляются в период разгара заболевания. Антитела класса IgG могут исчезать после перенесенного заболевания в течение 6 месяцев, но у некоторых лиц могут определяться в крови до 6-8 лет и более. Показания к назначению исследования: диагностика гепатита Е, проведение эпидемиологических исследований.

Определение РНК вируса гепатита С (ВГС) в сыворотке крови методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме реального времени.

Определяемый фрагмент – специфичный участок РНК вируса гепатита С. Выявляемые генотипы: 1а, 1b, 2a, 2b, 2c, 2i, 3, 4, 5a, 6 независимо от субтипа. Специфичность определения – 100%. Чувствительность определения – 60 МЕ/мл.

Согласно рекомендации ВОЗ, установление диагноза гепатита С возможно на основании троекратного обнаружения РНК ВГС в сыворотке крови больного при отсутствии других маркёров гепатита. В острую фазу гепатита С РНК вируса выявляют в крови уже через 1-2 недели после инфицирования, т. е. задолго до появления антител к гепатиту С.

Выявление РНК гепатита С в сыворотке крови используется в комплексной диагностике в дополнение к определению антител к вирусу гепатита С для подтверждения присутствия вируса в крови. Не входит в перечень обязательных исследований при госпитализации.

На результат исследования могут оказать влияние такие факторы, как наличие в образце веществ, влияющих на протекание ПЦР; присутствие в крови гепарина и его производных; высокий уровень криоглобулинов в крови.

Специальной подготовки к исследованию не требуется.С общими рекомендациями для подготовки к исследованиям можно ознакомиться здесь >>

Клинические признаки гепатита.
Профилактические скрининговые исследования (РНК вируса гепатита С - самый ранний маркёр при острой инфекции).
Обследования контактных лиц.
Диагностика гепатитов смешанной этиологии - выявление ведущего вируса.
Выявление стадии активной репликации вируса при хроническом состоянии.
Контроль эффективности проводимой терапии.
Цирроз печени.

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Обращаем внимание, что сроки выполнения ПЦР-исследований могут быть увеличены при проведении подтверждающих тестов.

ПЦР диагностика гепатита - А, В, С, качественный, количественный и генотипирование

С проблемой поражения печени вирусной природы может столкнуться доктор любой специальности. Вирусные гепатиты сегодня - это очень важная проблема для здравоохранения всего мира. Их диагностика проводится с учетом клинических проявлений, инструментально-аппаратных (УЗИ, фиброскан) методов, лабораторных данных анализов крови и мочи. Особое место занимают специфические иммунодиагностические методы.

Что такое ПЦР- диагностика гепатитов

вирус гепатитов А, В, С;
вирус герпеса;
вирус Эпштейна-Барра;
микробактерию туберкулеза;
хеликобактер пилори;
вирус иммунодефицита.

Качественное выявление ДНК/РНК - определение наличия или отсутствия возбудителя;
Количественное выявление ДНК/РНК (в реальном времени) - высчитывают количество микроба;
Генотипирование (секвенирование) - выявление генотипа, субгенотипов и определение нуклеотидной последовательности вирусного генома.

Виды гепатитов

Вирусные гепатиты - группа заболеваний, которая включает в себя самостоятельные (гепатит А, В, С) формы, имеющие свой механизм развития болезни, клинические и эпидемиологические особенности. Все эти инфекции объединены резко выраженными проявлениями поражения печени.

чувство тяжести и боль в правом подреберье;
увеличение печени;
окрашивание слизистой, склер, кожи в желтый цвет (желтуха).

Гепатит В (генотип HBV) и С (генотип HCV) - это парентеральные вирусные инфекции. Передаются половым путем, при бытовых гемо (кровяных) контактах, медицинских и немедицинских (вне стен лечебного учреждения, очень часто - это салоны татуажа) инъекциях, от мамы к ребенку.

Когда назначается анализ на ПЦР и как к нему подготовиться

похудение, слабость;
горечь во рту;
кожный зуд;
тяжесть и боль в эпигастрии.

за две недели до анализа прекратить антибактериальную терапию - антибиотики могут влиять на достоверность исследования;
ограничить жареную, жирную пищу, спиртные напитки;
ужинать накануне не позже 20 часов;
кровь сдавать утром с 8 до 10 часов, нежелательно даже пить воду, за 1 час до анализа не нужно курить.

Нормы и интерпретация результатов

Генотипирование направлено на определение клинически значимых генотипов HCV (гепатита С). Результаты теста позволяют определить прогноз заболевания, предсказать длительность лечения.

Несмотря на успехи медицины, распространение болезней, связанных с поражением печени, остается очень высоким. В этой ситуации особое значение имеет современная лабораторная диагностика вирусных гепатитов, понимание патогенеза заболевания, форм течения болезни и стадий иммунного ответа.

Исследование позволяет обнаружить в крови пациента вирус гепатита С и диагностировать заражение. Рекомендовано в качестве подтверждающего исследования при положительном результате серологического скрининга — анализа на антитела к гепатиту С — или на ранних стадиях заболевания, когда антитела к вирусу ещё не появились.

Этот анализ принимается по сокращённому графику. Это связано с тем, что биоматериал должен попасть в лабораторию в очень короткий срок. Проверьте расписание сокращённого графика приёма на странице вашего отделения. При сдаче вне графика срок выполнения исследования может быть увеличен на 1-3 дня.

Приём и исследование биоматериала

Когда нужно сдавать анализ Вирус гепатита С, РНК (HCV, ПЦР) плазма, кач.?

Показания к исследованию:

подтверждение диагноза после положительного результата анализа на антитела;
подозрение на инфицирование, в том числе внутриутробное;
периодический осмотр для пациентов центров и отделений гемодиализа, гематологии и трансплантологии, находящихся в лечебном учреждении более 30 дней, а также для пациентов с иммунодефицитами различной этиологии;
выяснение причины повреждения печени.

Подробное описание исследования

Гепатит С

Гепатит С (ВГС, вирусный гепатит С) — воспалительное поражение печени, которое вызывает одноимённый вирус — Hepatitis C virus (HCV). Инфицирование происходит через кровь.

Заболевание может протекать в острой и хронической форме.

В большинстве случаев острый гепатит С на ранней стадии никак себя не проявляет, поэтому пациенты часто не обращаются к врачу. Некоторые выздоравливают после острой инфекции — иммунная система справляется с ней сама. Однако в большинстве случаев заболевание переходит в хроническую форму.

Длительное воспаление, вызванное хроническим гепатитом С, повреждает печень, что зачастую приводит к осложнениям.

Распространённые осложнения хронического гепатита С:

цирроз печени — заболевание, при котором ткани печени погибают и замещаются соединительной тканью;
острая печёночная недостаточность;
гепатоцеллюлярная карцинома — рак печени.

Диагностика гепатита С

Диагностика гепатита С осуществляется в три этапа:

Скрининговое серологическое исследование — определение антител к вирусу в крови.
Подтверждающее ПЦР-исследование — качественное и количественное определение РНК вируса.
Уточняющее ПЦР-исследование для выбора тактики лечения — определение одного из семи возможных генотипов вируса и его субтипа.

Как правило, подтверждающее ПЦР-исследование проводят, если предварительный скрининговый анализ показал положительный результат.

Описание возбудителя

Вирус гепатита С — это РНК-содержащий вирус семейства Flaviviridae, возбудитель острого и хронического вирусного гепатита. Известно 7 основных генотипов вируса гепатита С.

Как правило, вирус разрушает клетки печени, вызывая серьёзные заболевания: хронический гепатит С, цирроз печени, гепатоцеллюлярную карциному.

Особенности и преимущества методики

ПЦР (полимеразная цепная реакция в режиме реального времени) — исследование генетического материала вируса — вирусной РНК.

Метод ПЦР позволяет выявить фрагменты РНК вируса даже на ранней стадии, когда другие методы его не найдут. Кроме того, для ПЦР меньше, чем для других методов исследования, характерны ложноотрицательные результаты.

Благодаря качественному методу подтверждается присутствие вируса гепатита С и его активное размножение в крови.

Что ещё назначают с этим исследованием?

Использованная литература

Рекомендации по диагностике и лечению взрослых больных гепатитом С. Министерство здравоохранения РФ. — М. 2017.
ВОЗ. Информационный бюллетень. Всемирный день борьбы с гепатитом. — 2019.
Калинина О.В., А.В. Дмитриев. Структурно-функциональная организация и жизненный цикл вируса гепатита С. Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. — 2015, № 2, с. 9—13.

Другие названия этого исследования

Blood, HCV,Hepatitis C virus,Hepatitis C Virus RNA,Real-time PCR

вирус гепатита С (ВГС),вирусный гепатит С,гепатит С,гепатит С определение РНК,качественное определение РНК,ПЦР качественный на гепатит С,ПЦР на гепатит С,ПЦР-тест на гепатит С

Подготовка к исследованию

За 1—2 дня до исследования исключить из рациона продукты с высоким содержанием жиров. За 2 дня до сдачи крови на вирусные гепатиты исключить из рациона цитрусовые, оранжевые фрукты и овощи.

Правила взятия крови у детей:

Для контроля показателей в динамике следует сдавать анализ в одинаковых условиях: в той же лаборатории, в то же время суток. Женщинам стоит учесть фазу менструального цикла.

Лекарства и медицинские процедуры могут повлиять на результат анализа.

Не следует сдавать кровь сразу после физиотерапевтических процедур, инструментального обследования, рентгенологического и ультразвукового исследований, массажа.

Лучше всего выполнять исследование крови до начала приёма лекарственных препаратов или через 10—14 дней после их отмены. О принимаемых в данный момент лекарствах следует предупредить медсестру, а также врача, который выполняет диагностику или назначает лечение.

Исследования для оценки эффективности лечения, как правило, проводят через 1—2 недели после последнего приёма препарата.

Противопоказания и ограничения

За 1—2 дня до исследования исключить из рациона продукты с высоким содержанием жиров.
За 2 дня до сдачи крови на вирусные гепатиты исключить из рациона цитрусовые, оранжевые фрукты и овощи.

Интерпретация результата

Отрицательный результат

Отсутствие РНК вируса в крови — инфицирование не подтверждено.
Концентрация вируса гепатита С в плазме ниже предела чувствительности метода (до 60 МЕ/мл). Если вероятность заражения высока или у пациента есть симптомы вирусного гепатита С, рекомендуется пройти исследование повторно. Сроки следует обсудить с врачом.

Положительный результат:

В крови обнаружена РНК вируса — инфицирование подтверждено.

Референсные значения

Отрицательный результат — РНК не обнаружена.

Дополнительное обследование при отклонении от нормы

1.36. Билирубин непрямой (Билирубин прямой, Билирубин общий)
19.45. Вирус гепатита С, РНК (HCV, ПЦР) плазма, кол.
1.28. Гамма-ГТ
20.35. Гепатит С, anti-HCV IgG авидность (п/кол)
20.34. Гепатит С, anti-HCV IgM (п/кол)
1.33. Фосфатаза щелочная
1.20. Аланинаминотрансфераза (АЛТ) (венозная кровь)
1.21. Aспартатаминотрансфераза (АСТ) (венозная кровь)

Читайте также: