Пцр при гриппе свиней
Обновлено: 17.04.2024
Вирус гриппа является возбудителем острых респираторных заболеваний у человека и животных. Он принадлежит к семейству Orthomyxoviridae. Существует три типа вируса гриппа: A, B, C. Вирус типов В и С обычно обнаруживают у людей. Грипп типа А поражает широкий круг хозяев: птиц, людей, свиней, лошадей, морских млекопитающих. Вирус гриппа типа А делят на подтипы на основании антигенных свойств его поверхностных гликопоротеинов - гемагглютинина (Н1-15) и нейраминидазы (N1-9).
Грипп свиней распространен в большинстве стран мира с развитым свиноводством. Хотя смертность от него минимальна, заболеваемость может доходить до 100%. В настоящее время среди свиней наиболее распространены три подтипа вируса гриппа А: H1N1, H3N2 и H1N2. Подтип H1N1 считают классическим свиным гриппом, известным с 1918 года. С 1979 г. у свиней выделяют антигенно отличающийся вариант H1N1 птичьего происхождения. Вирус подтипа H1N1 является наиболее распространенным, антитела к нему обнаруживают у 25% свиней по всему миру. Подтип H3N2 был впервые выявлен у свиней в 1970 г., он считается результатом межвидового перехода вируса гриппа от человека к свиньям. Подтип H1N2 выделяют от свиней с 1994 г., этот подтип является результатом реассортации вирусов гриппа свиней, человека и птиц.
В связи с тем, что свиньи восприимчивы к вирусам гриппа А птиц и человека, они считаются промежуточным хозяином, в котором происходит реассортация генов между свиными, человеческими и птичьими вирусами. Реассортация может приводить к возникновению новых антигенных вариантов вируса гриппа, потенциально способных вызывать эпидемии среди людей. Это обстоятельство определяет значимость гриппа свиней не только для ветеринарии, но и для здравоохранения людей.
В этих условиях разработка методов быстрой и высокоспецифичной диагностики гриппа свиней является крайне актуальной задачей.
Методика основана на амплификации высококонсервативного фрагмента гена, кодирующего матриксный протеин М1 вируса гриппа свиней, и позволяет выявлять вирус гриппа А всех подтипов.
2. Сущность метода
Выявление вируса гриппа свиней проводится методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (ПЦР-РВ), в которой используются вирусспецифичные праймеры и TaqMan зонд. Метод ПЦР-РВ позволяет проводить детекцию продуктов амплификации в процессе реакции и вести мониторинг кинетики накопления ампликонов. В реакционную смесь добавляют ДНК-зонд, меченый на 5' - конце флюоресцентным красителем, а на 3' - конце - фосфатной группой и гасителем флюоресценции. Зонд комплементарен внутреннему участку амплифицируемой области генома. Гаситель поглощает испускаемое флюоресцентной меткой излучение, а фосфатная группа в 3' - положении блокирует полимеразу. На этапе отжига зонд связывается с комплементарным участком ДНК. Во время стадии элонгации полимераза синтезирует комплементарную цепь ДНК и, дойдя до участка, гибридизованного с зондом, начинает расщеплять последний за счёт 5' - экзонуклеазной активности. В результате флюоресцентная метка отделяется от тушителя, и её свечение может быть детектировано. Таким образом, увеличение флюоресценции будет прямо пропорционально количеству наработанного ПЦР-продукта.
Поскольку геном вируса гриппа свиней представляет собой РНК, проведению собственно ПЦР-РВ предшествует этап обратной транскрипции.
3. Область применения
Методика предназначена для использования в научно-исследовательских и диагностических учреждениях ветеринарного профиля.
4. Оборудование и реактивы
1. ДНК-амплификатор для ПЦР в режиме реального времени (модель Bio-Rad iQ5 или аналоги);
2. Вакуумный насос;
3. Устройство для фильтрации Vacuum Manifold;
4. Микроцентрифуга для пробирок;
5. Микроцентрифуга для плашек на 96 лунок;
7. Набор автоматических пипеток;
8. Холодильник на +4°С и на -20°С;
9. Полипропиленовые плашки 96 лунок на 200 мкл;
10. Одноразовые наконечники к автоматическим пипеточным дозаторам;
11. Одноразовые наконечники для пипеток переменного объёма с аэрозольным барьером;
12. Полипропиленовые пробирки на 0,5 и 1,5 мл.
Ферменты и реактивы:
1. АМV обратная транскриптаза (10 ед./мкл);
2. Tag ДНК-полимераза (5 ед./мкл);
3. Смесь дезоксинуклеозидтрифосфатов (дНТФ). Водный раствор дезоксинуклеозидтрифосфатов с концентрацией 10 мМ каждого;
4. 5-кратный реакционный буфер для обратной транскрипции;
5. 10-кратный реакционный буфер для ПЦР;
6. Смесь праймеров для обнаружения вируса гриппа свиней (праймеры М1, М2 в концентрации 10 пM/мкл каждого);
7. TaqMan зонд (М* в концентрации 5 пМ/мкл);
8. Контрольная РНК: водный раствор РНК вируса гриппа свиней в концентрации 0,01 мкг/мкл;
9. 6М гуанидинтиоцианат;
10. 96% этиловый спирт.
5.1. Выделение РНК
5.1.1. Из образцов исследуемого биологического материала (носовые смывы, экссудат трахеи, 10% суспензия легочной ткани и бронхов, вируссодержащие культуры клеток) отбирают 0,1 мл в полипропиленовую пробирку объемом 1,5 мл, смешивают с 0,2 мл 6М раствора гуанидин-тиоцианата (ГТЦ) и инкубируют при комнатной температуре 3-5 мин. Добавляют 0,3 мл этилового спирта, перемешивают и наносят на миниколонки со стекловолокнистыми фильтрами GF/F. C помощью вакуумного насоса и устройства для фильтрации Vacuum Manifold смесь фильтруют. Далее фильтры промывают 3 мл 80% этанола и центрифугируют в течение 1 мин при 13000 g для удаления остатков этанола. Переносят миниколонку в новую пробирку, добавляют 50 мкл воды и через 3-5 минут центрифугируют 30 сек. при 10000-13000 g.
Полученный раствор РНК сразу используют в реакции обратной транскрипции или хранят при -70°С.
Кроме описанной выше методики также могут быть использованы отечественные или импортные коммерческие наборы для выделения РНК фирм Биоком, Qiagen и других производителей.
5.2. Постановка ОТ-ПЦР в режиме реального времени
1. В пробирку вносят следующие компоненты в указанном порядке из расчёта на одну пробирку:
Выявление вируса гриппа серотипов А и В (Influenza virus A/B), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется генетический материал (РНК) вируса в образце биоматериала.
Синонимы русские
Синонимы английские
Influenza serotypes A/B, RNA [real-time polymerase chain reaction, RT-PCR, quantitative RT-PCR, qPCR, qRT-PCR].
Метод исследования
Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Мазок из зева (ротоглотки) и носа, мокроту.
Как правильно подготовиться к исследованию?
Общая информация об исследовании
Influenza virus – это оболочечный вирус, характеризующийся наличием сегментированного негативного РНК-генома и нуклеокапсида в форме спирали. Он относится к семейству Orthomixoviridae. На основании структурных различий нуклеопротеида выделяют 3 серотипа Influenza: A, B и С. Серотип A встречается как людей, так и у животных, в то время как варианты B и C поражают преимущественно людей. Именно серотип А ответственен за подавляющее большинство случаев сезонных (эпидемических) и пандемических вспышек гриппа.
Идентификация вируса гриппа должна быть осуществлена в кратчайшие сроки, что связано с высокой заразностью этого заболевания. Кроме того, эффективность противовирусных препаратов максимальна при их назначении в первые 48 часов после инфицирования, что также диктует необходимость своевременной постановки окончательного диагноза. Среди многих "быстрых" диагностических тестов особое место занимает полимеразная цепная реакция в режиме реального времени (РТ-ПЦР). Полимеразная цепная реакция в реальном времени (РТ-ПЦР) – это метод молекулярной диагностики, позволяющий выявлять в биологическом материале (например, в мокроте) фрагменты генетического материала (РНК) возбудителя инфекции. Благодаря высокой чувствительности и специфичности метода, а также возможности получить результат в наболее короткие сроки, РТ-ПЦР заменила другие, применяемые ранее, методы диагностики гриппа: выделение вируса в культуре клеток, а также серологические исследования и иммуноферментный анализ.
В отличие от других тестов, чувствительность исследования РТ-ПЦР практически не изменяется при взятии материала на фоне начатой терапии противовирусными препаратами. Это связано с тем, что в реакции выявляется не сам вирусный агент, а фрагмент вирусной ДНК. По этой же причине положительный результат исследования не всегда указывает на наличие живого вируса (репликацию) и не всегда означает, что пациент остается заразным для окружающих.
В отличие от других лабораторных тестов (в первую очередь, экспресс-тестов для определения антигена вируса гриппа), результат РТ-ПЦР в меньшей степени зависит от распространенности гриппа среди населения. РТ-ПЦР характеризуется редкими ложноположительными и ложноотрицательными результатами как во время эпидемии, так и в период низкой заболеваемости гриппом.
При обследовании пациента с клиническими признаками Influenza-ассоциированной инфекции верхних дыхательных путей следует выполнить анализ отделяемого носо/ротоглотки. При обследовании пациента с признаками Influenza-ассоциированной инфекции нижних дыхательных путей анализ мазков из зева и носа необходимо дополнить исследованием мокроты. Исследование мокроты также должно быть осуществлено при отрицательном результате, который дал анализ отделяемого верхних дыхательных путей у пациента с клиническими признаками гриппа. Следует повторить РТ-ПЦР при отрицательном результате исследования мокроты у пациента с клиническими признаками Influenza-ассоциированной инфекции нижних дыхательных путей.
Для более точной диагностики Influenza рекомендуется сочетание РТ-ПЦР с дополнительными общеклиническими исследованиями. Кроме того, необходимо исключить бактериальную суперинфекцию.
Типирование Influenza virus A (H1N1, H3N2) – идентификация субтипов вируса гриппа типа А путем качественного выявления в исследуемом материале вирусной нуклеиновой кислоты (РНК).
Синонимы русские
Идентификация субтипов H1N1 и H3N2 вируса гриппа А методом полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР).
Синонимы английские
Influenza virus A RT-PCR subtyping, Influenza virus reverse transcription PCR test.
Метод исследования
Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Мазок из зева (ротоглотки) и носа, мокрота.
Общая информация об исследовании
Вирус гриппа относится к РНКсодержащим вирусам. Род вирусов гриппа включает три типа вирусов: А, В и С. Вирусная частица имеет сферическую форму, в центре которой находится генетический материал вируса – РНК, а в оболочке присутствуют сложные белки – гемагглютинин (Н) и нейраминидаза (N). Для вирусов гриппа типа А характерна постоянная изменчивость этих поверхностных белков: на данный момент известно 15 вариантов гемагглютинина и 9 вариантов нейраминидазы. Их сочетание в определенной комбинации определяет субтип вируса. Вирусы субтипов H1N1 и H3N2 вызывают сезонный грипп человека.
Попадая в организм человека, вирус гриппа проникает в клетки эпителия слизистой оболочки дыхательных путей и размножается в них. Пораженные вирусом клетки дегенерируют, погибают и отторгаются. Таким образом, в отделяемом дыхательных путей (слизь, мокрота и т.п.) присутствуют погибшие эпителиальные клетки вместе с вирусными частицами.
Идентификация субтипа вируса проводится методом полимеразной цепной реакции. Принцип метода основан на обнаружении в материале специфичных фрагментов вирусной РНК, их избирательном синтезе с образованием огромного числа копий, что позволяет их легко детектировать, в том числе визуально. К преимуществам метода ПЦР можно отнести:
прямое определение наличия возбудителя – выявление специфического участка РНК возбудителя дает прямое указание на присутствие вируса;
высокую специфичность – в исследуемом материале идентифицируется уникальный, характерный только для данного вируса фрагмент РНК;
высокую чувствительность – ПЦР позволяет обнаружить возбудитель, даже если его исходная концентрация в исследуемом материале чрезвычайно мала.
Однако стоит отметить, что обнаружение вирусной РНК методом ПЦР не обязательно указывает на обнаружение жизнеспособного вируса или продолжающееся его размножение.
Для чего используется исследование?
Когда назначается исследование?
При нетипичных проявлениях заболевания;
при высоком риске осложнений от гриппа (возраст более 65 и менее 2 лет, беременные, а также женщины в период первых двух недель после родов, лица с хроническими заболеваниями легких, сердца, почек, пациенты с иммунодефицитом или гематологическими заболеваниями);
при идентификации возбудителя у пациентов, заболевших вне эпидемиологического сезона.
Что означают результаты?
Референсные значения: не обнаружено.
Положительный результат – если искомый фрагмент вирусной РНК обнаружен - инфицирование вирусом гриппа А определенного субтипа.
Отрицательный результат – если искомый фрагмент вирусной РНК не обнаружен – отсутствие инфекции.
Что может влиять на результат?
Количество дней, прошедшее от начала болезни (после 4 дней возрастает вероятность необнаружения вируса).
Исследуемый образец – при инфекции нижних дыхательных путей вирус может не выявляться в образце, полученном из верхних дыхательных путей (мазки из носа, ротоглотки). В таких случаях необходимо повторить анализ с исследованием отделяемого нижних дыхательных путей.
Важные замечания
- У иммунокомпетентных лиц с неосложненным гриппом вирусовыделение в верхних дыхательных путях, как правило, значительно уменьшается после 4 дней болезни, соответственно, снижается вероятность выделения возбудителя. Поэтому образцы для исследования у таких пациентов должны быть получены в первые четыре дня заболевания, когда выделение вируса максимально. И напротив, у пациентов с ослабленным иммунитетом и при инфекции нижних дыхательных путей (вирусная пневмония) выделение вируса в бронхиальный секрет сохраняется дольше.
- Ожидание результата исследования или отрицательный результат при очевидной клинической картине не должны быть препятствием для назначения противовирусной терапии.
Также рекомендуется
Общий анализ крови с лейкоцитарной формулой
Influenza virus A/H1, РНК [реал-тайм ПЦР]
Mycoplasma pneumoniae, ДНК [ПЦР]
Adenovirus, ДНК [реал-тайм ПЦР]
Streptococcus pneumoniae, ДНК [реал-тайм ПЦР]
Кто назначает исследование?
Инфекционист, терапевт, врач общей практики, педиатр, эпидемиолог.
Литература
Инфекционные болезни: национальное руководство / Под ред. Н. Д. Ющука, Ю. Я. Венгерова. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. С. 701-710.
Клиническая лабораторная диагностика: национальное руководство: в 2 т. – T. II / Под ред. В. В. Долгова, В. В. Меньшикова. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2012. С. 649-653.
Guidance for Clinicians on the Use of RT-PCR and Other Molecular Assays for Diagnosis of Influenza Virus Infection by Centers of Disease Control and Prevention, U.S. Department of Health and Human Services, 2016.
Henry's Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods, 23e by Richard A. McPherson MD MSc (Author), Matthew R. Pincus MD PhD (Author). St. Louis, Missouri : Elsevier, 2016. Page 1316.
Историческая справка, распространение, степень опасности гриппа свиней. Клиническое проявление болезни. Патологоанатомические признаки гриппа свиней. Особенности дифференциальной диагностики болезни. Основа профилактики, средства лечения гриппа свиней.
| Рубрика | Сельское, лесное хозяйство и землепользование |
| Вид | реферат |
| Язык | русский |
| Дата добавления | 24.09.2009 |
| Размер файла | 18,7 K |
Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.
Министерство аграрной политики Украины
Харьковская государственная зооветеринарная академия
Кафедра эпизоотологии и ветеринарного менеджмента
Реферат на тему:
Студент 3 курса 9 группы ФВМ
Историческая справка, распространение, степень опасности и ущерб
Течение и клиническое проявление
Диагностика и дифференциальная диагностика
Иммунитет, специфическая профилактика
Список используемой литературы
Определение болезни
Грипп свиней [лат. -- Influenza suis; англ. -- Swine influenza, Swine (Hog, Pig) flu; инфлюэнца свиней, энзоотическая бронхопневмония] -- высококонтагиозная, остро протекающая болезнь преимущественно молодых животных, характеризующаяся лихорадкой, катаральным воспалением слизистых оболочек дыхательных путей, конъюнктивы и поражением легких.
Историческая справка, распространение, степень опасности и ущерб
Болезнь регистрируют во многих странах Европы и Америки, а также на территории нашей страны. В отдельных хозяйствах грипп свиней причиняет существенный ущерб -- в результате заболевания количество нормальных опоросов может сократиться почти вдвое и резко снижается число поросят в помете.
Возбудитель болезни
Возбудитель -- РНК-содержащий, гемагглютинирующий вирус размером 70. 120 нм из рода Orthomyxovirus типа А, семейства Orthomyxoviridae. Установлено антигенное родство между вирусами гриппа свиней и вирусами типа А человека и птиц. Вирус гриппа свиней может вызвать заболевание людей. Доказана возможность заражения свиней вирусом гриппа человека. В период острого течения вирус в высоких концентрациях накапливается в эпителии слизистых оболочек носовой полости, трахеи, бронхов и в легочной ткани. Показана возможность проникновения вируса через плаценту к плоду, в результате чего последний может погибнуть. Вирус репродуцируется в куриных эмбрионах, не приводя к их гибели, в организме мышей, хорьков и в различных культурах клеток, вызывая в них цитопатический эффект. Из лабораторных животных к вирусу чувствительны белые мыши, крысы, хорьки и хомяки при интраназальном заражении.
Возбудитель гриппа малоустойчив к физическим и химическим воздействиям. При температуре 60 "С инактивируется за 20 мин, при 18. 22 °С жизнеспособен до 6 сут, при 2. 4 "С -- от 20 сут до 3 мес. Низкие температуры консервируют вирус -- при --20. --70 °С он сохраняется несколько месяцев. Вирус чувствителен к кислой и щелочной реакции среды. Растворы хлорамина, хлорной извести, формальдегида, фенола в принятых для дезинфекции концентрациях вызывают гибель вируса в течение 5. 10 мин.
Эпизоотология
Гриппом болеют свиньи всех возрастов и пород, но наиболее восприимчивы поросята 15. 50-дневного возраста. Вспышки отмечаются в любое время года, но часто они приурочены к холодным периодам, особенно в помещениях с неудовлетворительным микроклиматом.
Источник возбудителя инфекции -- больные свиньи и вирусоносители. Они выделяют вирус в больших количествах с истечениями из носа, при чиханье, кашле. Здоровые животные заражаются аэрогенно. Кроме того, вирус гриппа может передаваться и распространяться через яйца паразитирующих в легких свиней стронгилид, цикл развития которых осуществляется с участием промежуточного хозяина -- дождевого червя. В организме последнего возбудитель сохраняется до 19 мес, и в этих случаях свиньи заражаются при поедании дождевых червей. Носителями вируса могут быть и грызуны. Иногда свиньи заражаются также от птиц и человека.
Факторами передачи возбудителя служат все объекты внешней среды, загрязненные вируссодержащими выделениями больных животных, откуда они в виде капельного или пылевого аэрозоля попадают в дыхательные пути здоровых свиней.
Грипп среди свиней проявляется в виде эпизоотических вспышек с охватом свинопоголовья в помещениях, имеющих связь друг с другом общей вентиляцией. Отмечены случаи массовых заболеваний свиней в период усиления эпидемии гриппа среди людей.
Заболеваемость при первичной вспышке может достигать 100 %, а летальность зависит от условий содержания и санитарно-гигиенического состояния животноводческих помещений. Часто грипп осложняется вторичной микрофлорой, и летальность значительно возрастает.
Патогенез
Вирус гриппа, попав на слизистые оболочки верхних дыхательных путей в виде капельного или пылевого аэрозоля и обладая выраженным тропизмом к эпителиальным клеткам, репродуцируется в них и вызывает дегенерацию. Погибшие и пораженные эпителиальные клетки представляют хорошую питательную среду для микрофлоры, обитающей на слизистой оболочке органов дыхания. Наиболее благоприятная среда создается для развития гемофильных бактерий (Haemophilus influenza).
В результате воздействия вируса, бактерий и их токсинов повышается проницаемость капилляров, развивается септико-токсический процесс с присущими ему клиническими проявлениями. Одновременно иммунокомпетентная система обеспечивает выработку вируснейтрализующих, антитоксических и антибактериальных антител, которые защищают организм от интенсивных разрушительных процессов.
Течение и клиническое проявление
Инкубационный период при гриппе длится 1. 2сут, иногда до 6. 7сут. Болезнь протекает остро, подостро и атипично (латентно).
При остром течении температура тела повышается до 41 . 42 "С, животные отказываются от корма, больше лежат. Слизистые оболочки глаз гиперемированы, отечны. Дыхание затруднено, после незначительного передвижения отмечается сухой кашель, из носовых отверстий выделяется серозный экссудат, который засыхает вокруг ноздрей, образуя корочки, затрудняющие дыхание. Вследствие этого больные часто трясут головой, трутся о различные предметы для устранения этих корочек. У отдельных животных возникают носовые кровотечения. Чтобы облегчить затрудненное дыхание, возникающее вследствие отека и воспаления слизистой оболочки носоглотки, животные принимают позу сидящей собаки. Развивается острая сердечная недостаточность, и кожа ушей, нижней стенки живота, хвоста и копытца становится синюшной. У отдельных животных появляются экзематозная сыпь на коже, диарея, сменяющаяся запором, поражаются суставы.
У поросят 15. 60-дневного возраста, которые наиболее восприимчивы, грипп протекает с явлениями катаральной или катарально-гнойной пневмонии. При этом у них наблюдают одышку, кашель, в легких прослушиваются хрипы. Кашель особенно резко выражен после движения. У таких животных болезнь часто заканчивается смертью. Если среди взрослого
свинопоголовья летальность не превышает, как правило, 2. 4 %, то среди поросят этой возрастной группы она достигает 60. 70 % и более, что во многом зависит от условий содержания и особенно от обеспеченности их организма материнскими иммуноглобулинами и уровня воздухообмена в помещении.
Продолжительность болезни при остром течении до 10. 12 дней. У многих животных выздоровление может наступить через 4. 6 дней. Возможны рецидивы заболевания.
При подостром течении заболевание среди свинопоголовья распространяется медленно с охватом в течение нескольких недель животных всех возрастных групп. Клинически заболевание проявляется признаками бронхопневмонии и плеврита. В результате развития экзематозных поражений появляются зуд кожи, расчесы и корочки, особенно в области ушей, хвоста, промежности. Животные плохо развиваются, резко отстают в росте, поросята становятся заморышами. Часто болезнь осложняется вторичной микрофлорой, и больные погибают или от сальмонеллеза, или от пастереллеза, или от гемофильной инфекции.
В хозяйствах с хорошими условиями содержания и кормления у свинопоголовья возможно атипичное течение. У инфицированных свиней температура тела остается в пределах нормы, но отмечаются конъюнктивиты, риниты и сухой, быстро проходящий кашель. Заболевшие выздоравливают в течение 3. 6 дней.
Патологоанатомические признаки
При остром течении на кожных покровах часто обнаруживают экзематозные поражения, кожа ушей, нижней стенки живота, копытца синюшная. В грудной полости, в бронхах и бронхиолах содержится серозная кровянистая жидкость, слизистая оболочка бронхов отечная, гиперемированная, иногда с кровоизлияниями. Реберная плевра отечная, гиперемированная, под плеврой иногда находят мелкоточечные кровоизлияния. Добавочные и сердечные доли легких уплотнены, на разрезе в бронхиолах видны слизистые пробки, диафрагмальные доли, как правило, без изменений. У некоторых животных выявляют серозный или серозно-фибринозный перикардит. Бронхиальные, средостенные, подчелюстные, заглоточные, околоушные и шейные лимфатические узлы увеличены, имеют очаги гиперемии и иногда точечные кровоизлияния. При осложнениях вторичной микрофлорой обнаруживают крупозную или гнойную пневмонию и плеврит.
Диагностика и дифференциальная диагностика
Диагноз на грипп свиней ставится комплексно. Но поскольку по течению, клиническим и патологоанатомическим признакам грипп имеет сходство с многими заболеваниями органов дыхания (аденовирусная инфекция, хламидийная и микоплазменная пневмонии и др.), решающее значение имеют результаты лабораторных исследований.
В лабораторию посылают истечения из носовых отверстий, кусочки пораженных легких, слизистой оболочки носовой полости, трахеи, бронхов, а также средостенные и бронхиальные лимфатические узлы от 2. 4 поросят в первые 2. 3 дня болезни. Одновременно посылают сыворотки крови, взятые с 5. 7-дневным интервалом для выявления антител против вируса гриппа.
В лаборатории материалом заражают куриные эмбрионы, культуру клеток почки поросенка, белых мышей (интраназально), идентифицируют вирус в РТГА, методом флуоресцирующих антител, реакцией нейтрализации и др. Сыворотки крови исследуют на наличие специфических антител.
Грипп дифференцируют от пастереллеза, сальмонеллеза, классической чумы, микоплазменной и хламидийной пневмоний, гемофилезного полисерозита и актинобациллезной плевропневмонии проведением соответствующих исследований.
Иммунитет, специфическая профилактика
У переболевших свиней в течение 8. 10 мес в крови обнаруживают вируснейтрализующие антитела и антигемагглютинины, которые предохраняют их от повторного инфицирования. В ряде стран для профилактики гриппа используют инактивированные вакцины.
Профилактика
Основой профилактики является строгое соблюдение ветеринарно-санитарных и зоогигиенических требований по кормлению, уходу и содержанию свиней разных возрастных групп. В первую очередь принимают меры по недопущению заноса вируса в хозяйство путем карантинирования вновь ввозимых животных, по предотвращению температурных стрессов и обеспечению в помещениях хорошего воздухообмена.
Специфических средств лечения при гриппе нет. Больным дают антимикробные препараты (предотвращение размножения в дыхательных путях вторичной микрофлоры) -- антибиотики широкого спектра действия (стрептомицин, тетрациклин, левомицетин и др.) и сульфаниламидные препараты, применяют индивидуально или групповым методом (с кормом или водой). Назначают витамины группы В, С и др. Особое внимание обращают на улучшение кормления, микроклимата в помещениях и соблюдение температурного режима содержания.
Меры борьбы
При возникновении гриппа больных животных изолируют и лечат. Подозреваемым в заражении свиньям с кормом или водой назначают антимикробные препараты. Помещения еженедельно подвергают профилактической дезинфекции горячим раствором гидроксида натрия, взвесью свежегашеной извести, растворами хлорсодержащих препаратов. В летний период организуют лагерное содержание.
Список используемой литературы
1. Бакулов И.А. Эпизоотология с микробиологией Москва: "Агропромиздат", 1987. - 415с.
2. Инфекционные болезни животных / Б.Ф. Бессарабов, Е.С. Воронин и др.; Под ред. А.А. Сидорчука. -- М.: КолосС, 2007. -- 671 с.
3. Алтухов Н.Н. Краткий справочник ветеринарного врача Москва: "Агропромиздат", 1990. - 574с.
6. Справочник ветеринарного врача / П.П. Достоевский, Н.А. Судаков, В.А. Атамась и др. - К.: Урожай, 1990. - 784с.
7. Гавриш В.Г. Справочник ветеринарного врача, 4 изд. Ростов-на-Дону: "Феникс", 2003. - 576с.
Подобные документы
Определение парвовирусной болезни свиней. Историческая справка, степень опасности и ущерб. Возбудители болезни, эпизоотология, патогенез, течение и клиническое проявление. Патологоанатомические признаки, диагностика, профилактика и лечение, меры борьбы.
реферат [14,9 K], добавлен 24.09.2009
Определение африканской чумы свиней. Историческая справка, степень опасности и ущерб. Возбудитель болезни, эпизоотология, патогенез, течение и клиническое проявление. Патологоанатомические признаки, диагностика и профилактика, лечение и меры борьбы.
реферат [14,2 K], добавлен 25.09.2009
Определение вирусного гастроэнтерита свиней. Историческая справка, степень опасности, ущерб. Возбудитель болезни, эпизоотология, патогенез, течение и клиническое проявление. Патологоанатомические признаки, диагностика, профилактика, лечение, меры борьбы.
реферат [14,3 K], добавлен 25.09.2009
Везикулярная экзантема свиней - распространение болезни и степень опасности. Возбудитель - Calicivirus, РНК-содержащий вирус. Течение и клиническое проявление заболевания, патологоанатомические признаки. Диагностика, специфическая профилактика, лечение.
реферат [17,7 K], добавлен 26.09.2009
Историческая справка, распространение репродуктивно-респираторного синдрома свиней. Американский и европейский генотип вируса болезни. Отличительная особенность репродуктивно-респираторного синдрома свиней. Течение и клиническое проявление болезни.
реферат [24,8 K], добавлен 24.09.2009
Историческая справка, распространение, степень опасности актинобациллезной плевропневмонии. Патогенез, течение и клиническое проявление болезни. Анализ эпизоотологических данных как основа для установления диагноза. Профилактика и лечение болезни.
реферат [19,2 K], добавлен 25.09.2009
Распространение, степень опасности, эпизоотология, патогенез, течение и клиническое проявление гриппа у лошадей. Патологоанатомические признаки болезни, ее дифференциальная диагностика, иммунитет, специфическая профилактика, лечение и меры борьбы.
Читайте также: