Правила работы с инфицированным материалом в лаборатории
Обновлено: 19.04.2024
Тема 1. Правила работы с вируссодержащими материалами. Устройство вирусологической лаборатории
Раздел I. Общая вирусология
Цель занятия: ознакомиться с вирусологической лабораторией кафедры, оборудованием. Изучить правила и технику безопасности при работе с вируссодержащим материалом.
Оборудование и материалы: таблицы - схемы устройства вирусологической лаборатории, настольный бокс, люминесцентный и инвертированный микроскопы, центрифуги, холодильники, магнитные мешалки, термостаты, спиртовки, стеклянная посуда (груши, пробирки, флаконы, матрасы, чашки Петри, пипетки), аппараты Такачи, основные реактивы и питательные среды, журнал регистрации студентов, получавших инструктаж по технике безопасности, документация лаборатории и основные утвержденные инструкции по правилам работы в ветеринарных учреждениях, мультимедийное оборудование, презентации MS Office Power Point по теме занятия.
Объяснение преподавателя: цели и задачи вирусологических лабораторий, оборудование, режим работы вирусологических лабораторий, предупреждения лабораторных заражений, методы хранения и уничтожения вирусов в лабораториях, консервирование, документация в вирусологических лабораториях, техника безопасности при работе студентов с вируссодержащим материалом, с лабораторными животными.
Сотрудники вирусологической лаборатории и студенты обязаны соблюдать правила работы, предупреждающие загрязнения вируссодержащего материала посторонней микрофлорой, обеспечить личную безопасность и не допустить рассеивания вирусов во внешней среде.
При работе с вируссодержащим материалом необходимо выполнять следующие требования:
· не допускать рассеивания вирусов во внешней среде;
· предотвратить контаминацию (загрязнение) вируссодержащего материала посторонней микрофлорой;
· обеспечить личную безопасность.
Запрещено выходить за пределы лаборатории в халатах и спецобуви или надевать верхнюю одежду на халат, курить, принимать пищу в производственных помещениях и хранить в них продукты питания. В боксе работают в стерильном халате, маске, шапочке, в некоторых случаях надевают очки и перчатки. Обязательно меняют обувь. Не допускаются хождение и разговоры во время работы.
Весь материал, поступающий в лабораторию на исследование, должен рассматриваться как инфицированный! С инфекционным материалом следует обращаться крайне осторожно. При распаковке его банки необходимо протирать снаружи дезинфицирующим раствором и ставить их на поднос или в кювет. Рабочее место на столе покрывают несколькими слоями марли, увлажненной 3 – 5 % раствором хлорамина. Жидкости, содержащие вирусы, переливают над кюветами с дезинфицирующим раствором. При работе с пипеткой пользуются грушей. Пипетки, предметные стекла, стеклянную посуду и резиновые изделия, задействованные в работе с инфекционным материалом, обеззараживают погружением в 5 % раствор хлорамина или растворы фенола, лизола, серной кислоты. Запрещается выносить из лаборатории оборудование, инвентарь, материалы и т. д. без предварительной их дезинфекции. По окончании работы рабочее место приводят в порядок и дезинфицируют. Вирусосодержащий материал, необходимый для дальнейшей работы, ставят на хранение в холодильник и опечатывают. Руки в перчатках промывают в банке с 5 % раствором хлорамина, затем перчатки снимают, обеззараживают вторично, дезинфицируют и моют.
УТВЕРЖДЕНА
Минздравом СССР
17 января 1991 года
ИНСТРУКЦИЯ
по мерам профилактики распространения инфекционных
заболеваний при работе в клинико-диагностических лабораториях
лечебно-профилактических учреждений
Общие положения
С целью профилактики инфицирования медицинского персонала лечебно-профилактических учреждений особое значение имеет выполнение требований противоэпидемического режима.
Ответственность за организацию и соблюдение противоэпидемического режима при работе с потенциально опасным материалом возлагается на руководителя клинико-диагностической лаборатории (КДЛ).
Инструктаж среднего и младшего медицинского персонала проводится ответственным за технику безопасности не реже одного раза в квартал.
Инструкция составлена в соответствии с ГОСТом 42-21-2-85 "Стерилизация и дезинфекция изделий медицинского назначения. Методы, средства и режимы", а также приказом Минздрава СССР (1989 год) "О мерах по снижению заболеваемости вирусным гепатитом в стране".
I. Основные правила работы в КДЛ
Медицинскому персоналу КДЛ следует избегать контактов кожи и слизистых оболочек с кровью и другими биологическими жидкостями, для чего необходимо:
1. Работать в медицинских халатах, шапочках, сменной обуви, а при угрозе забрызгивания кровью или другими биологическими жидкостями - в масках, очках, клеенчатом фартуке.
2. Работать с исследуемым материалом в резиновых перчатках, все повреждения кожи на руках должны быть закрыты лейкопластырем или напальчником. Избегать уколов и порезов.
3. Проводить разборку, мойку, прополаскивание лабораторного инструментария, посуды после предварительной дезинфекции в резиновых перчатках.
4. В случае загрязнения кожных покровов кровью или другими биологическими жидкостями следует немедленно обработать их в течение 2 мин тампоном, обильно смоченным 70% спиртом, вымыть под проточной водой с мылом и вытереть индивидуальным тампоном. При загрязнении перчаток кровью их протирают тампоном, смоченным 3% раствором хлорамина, 6% раствором перекиси водорода.
При подозрении на попадание крови на слизистые оболочки их немедленно обрабатывают струей воды, 1% раствором протаргола; рот и горло прополаскивают 70% спиртом, или 1% раствором борной кислоты, или 0,05% раствором перманганата калия.
5. Запрещается есть, пить, курить и пользоваться косметикой на рабочем месте.
6. Запрещается пипетирование крови ртом; следует использовать автоматические пипетки, а при их отсутствии - резиновые груши.
7. Поверхность рабочих столов в конце каждого рабочего дня подвергается дезинфекции, а в случае загрязнения биологическим материалом - немедленно.
II.Способы взятия крови
Взятие крови следует проводить в резиновых перчатках, соблюдая правила асептики, обрабатывая перчатки 70% спиртом перед каждым взятием. Перед проколом кожу пальца обследуемого обрабатывают стерильным тампоном (шариком из ваты), смоченным 70% спиртом.
После взятия крови к раневой поверхности прикладывают новый стерильный тампон, смоченный 70% спиртом. Извлекать скарификаторы следует только с помощью пинцета, хранящегося в растворе дезинфекционного средства.
Стерильные тампоны хранятся в упаковке из бумаги, указанной в ГОСТе 42-21-2-85, в количестве не более 20 штук. Стерильные лабораторные инструменты хранятся в той же упаковке, в которой проводилась их стерилизация. Существует несколько вариантов взятия крови для гематологического исследования.
I вариант. После прокола пальца несколько капель крови (не менее 3-4), спускают на индивидуальное предметное (часовое) стекло, перемешивают и используют для работы.
II вариант. Кровь набирают в индивидуальные стерильные, предварительно выверенные капилляры объемом 20 мкл и капилляры Панченко непосредственно с поверхности кожи проколотого индивидуальным копьем пальца пациента.
III вариант. Кровь в количестве 40 мкл набирают стерильным индивидуальным капилляром Панченко, предварительно смоченным цитратом в соотношении цитрата и крови 1: 4 по объему.
IV вариант. После прокола кожи пальца 6-8 капель крови спускают в пластиковую пробирку, в которую предварительно внесено небольшое (на кончике глазной лопаточки) количество трилона Б.
Пробирку с кровью тщательно перемешивают, вращая ее между ладонями. Разлив крови пипетками по пробиркам осуществляется в лаборатории.
Приготовление моющего раствора
Количество компонентов для приготовления 1 л моющего р-ра
Моющее средство "Биолот", г
При механизированной очистке (струйный метод)
Вода питьевая, мл
Моющее средство "Биолот", г
Вода питьевая, мл
При ручной очистке
Раствор перекиси водорода:
При механизированной очистке (струйный метод, использование ультразвука) и ручной очистке
Моющее средство "Прогресс", "Айна", "Астра", "Лотос", "Лотос-автомат", "Маричка", г
При механизированной очистке с использованием ультразвука
Вода питьевая, мл (см3)
Примечание. При использовании моющего средства, содержащего 0,5% перекиси водорода и 0,5% синтетического моющего средства "Лотос" и "Лотос-автомат", применяют ингибитор коррозии - 0,14% олеат натрия (1,4 г на 1 л раствора). В скобках указано количество питьевой воды в мл.
Предстерилизационная очистка (ручной способ)
Процесс при проведении очистки
Время выдержки, мин
Замачивание в моющем растворе при полном погружении изделия при применении моющего средства "Биолот"
Бачок, ванна, раковина
То же при применении моющего средства "Прогресс", "Астра", "Лотос", "Лотос-автомат", "Айна", "Маричка"
Мойка каждого изделия в моющем растворе при помощи ерша и ватно-марлевого тампона
Ополаскивание проточной водой:
- при применении моющего средства "Биолот"
Ванна, раковина с устройством для струйной подачи
- при применении моющего средства "Маричка", "Прогресс"
- при применении средств "Астра", Лотос", "Айна", "Лотос-автомат"
Ополаскивание дистиллированной водой
Сушка горячим воздухом
До полного исчезновения влаги
1. Температура раствора в процессе мойки не поддерживается.
2. Моющий раствор перекиси водорода с синтетическими моющими средствами, в том числе "Лотос", "Лотос-автомат", с ингибитором коррозии можно использовать в течение суток с момента изготовления, если цвет раствора не изменился. Неизмененный раствор можно подогревать до 6 раз, в процессе подогрева концентрация перекиси водорода существенно не изменяется.
3. Раствор моющего средства "Биолот", применяемый как при ручном, так и при механическом способе, используется однократно, так как при повторном использовании фермент, входящий в состав моющего средства, разрушается в процессе очистки.
III. Дезинфекция лабораторного инструментария, посуды,
спецодежды, биоматериала, оборудования
Лабораторные инструменты, иглы, капилляры, предметные стекла, пробирки, меланжеры, счетные камеры, кюветы фотоэлектроколориметра, пипетки, наконечники, резиновые груши, баллоны и т.д., посуда после каждого использования должны подвергаться дезинфекции.
1. Использованные изделия промывают в емкости с водой. Промывные воды обеззараживают кипячением в течение 30 мин или засыпают сухой хлорной известью, известью белильной термостойкой, нейтральным гипохлоритом кальция (НГК) в соотношении 200 г на 1 л, перемешивают и обеззараживают в течение 60 мин. Промытые изделия кипятят в закрытой емкости в воде в течение 30 мин или в 2% растворе соды в течение 15 мин. (В случае кипячения изделий в 2% растворе соды дальнейшая предстерилизационная очистка не проводится.)
2. Лабораторные инструменты могут быть обеззаражены погружением в раствор с дезинфицирующим раствором.
В качестве дезинфицирующих используются следующие растворы: 3% раствор хлорамин, 6% перекись водорода, 6% перекись водорода с 0,5% моющего средства ("Прогресс", "Астра". "Айна", "Лотос", "Лотос-автомат"), 4% формалин, 0,5% НГК, 0,5% сульфохлорантин; время обеззараживания 60 мин.
Дезинфицирующие растворы используются однократно.
Емкости для проведения дезинфекции должны быть четко маркированы, иметь крышки.
При дезинфекции изделий, имеющих внутренние каналы, растворы дезинфекционного средства в объеме 5-10 мл пропускают через канал с помощью груши для удаления остатков крови, сыворотки и пр., после чего изделия полностью погружают в дезинфицирующий раствор во вторую емкость.
При погружении инструментов в горизонтальном положении полости каждого инструмента должны быть заполнены дезинфицирующим раствором.
3. Каждая партия сухих хлорсодержащих дезинфектантов перед использованием должна подвергаться контролю на содержание активного хлора.
4. Посуду, соприкасающуюся с кровью или сывороткой и не предназначенную для последующего контакта с обследуемым, после дезинфекции промывают проточной водой для полного удаления дезинфектанта и проводят необходимую технологическую обработку.
5. Блоки кювет анализатора ФП, кюветы измерительной аппаратуры, пластиковые пробирки и т.д. обеззараживают только 6% раствором перекиси водорода и промывают проточной водой.
6. С предметных стекол с фиксированным и окрашенным мазком крови после проведения микроскопии удаляют остатки иммерсионного масла, стекла кипятят в мыльном растворе не менее 15 мин до полного отхождения краски, затем промывают проточной водой, подсушивают на воздухе и протирают.
7. Остатки крови, мочи, спинномозговой жидкости и т.д., пробы, содержащие разведенную сыворотку без добавления кислот, щелочей сливают в специальную тару и обеззараживают сухой хлорной известью, известью белильной термостойкой, НГК в соотношении 1:5 в течение 1 часа. При удалении сгустков следует предварительно отделить материал металлическим шпателем, который затем обеззараживают. Посуду из-под мочи, кала обрабатывают по описанной выше методике, но ее можно не подвергать стерилизации.
8. При загрязнении кровью или секретами мебели, инвентаря, приборов их следует немедленно дважды протереть ветошью, ватными или марлевыми тампонами, обильно смоченными дезинфицирующими растворами.
Использованную ветошь сбрасывают в специально выделенную емкость с дезинфицирующим раствором, маркированную "Для дезинфекции использованной ветоши".
9. При загрязнении кровью или секретами спецодежды ее снимают, предварительно обработав дезинфицирующим раствором участок загрязнения.
Стирка спецодежды на дому категорически запрещается. Смена спецодежды должна осуществляться не менее 2 раз в неделю.
10. Перчатки после окончания работы обеззараживают погружением в 3% раствор хлорамина или 6% раствор перекиси водорода на 1 час или кипячением в течение 30 мин.
11. Одноразовый инструментарий (плашки, наконечники, автоматические пипетки и т.д.) обеззараживают и утилизируют в паровом стерилизаторе при 2,0 кг/2 (132° С) в течение 60 мин.
IV. Предстерилизационная очистка
После дезинфекции лабораторный инструментарий, соприкасающийся с раневой поверхностью или слизистыми оболочками обследуемого, подлежит обязательной предстерилизационной очистке и стерилизации.
Медицинская статистика и оргметодработа в учреждениях здравоохранения N 3/2016
Трифонов Г.С.
Научный консультант редакции журнала
Алгоритм действий при аварийной ситуации с биологическим материалом
В медицинских организациях все пациенты должны рассматриваться как потенциально инфицированные ВИЧ, поэтому при оказании медицинской помощи необходимо выполнять все правила и требования по безопасности на рабочем месте. При выполнении лечебно-диагностических манипуляций, а также при работе с биологическими жидкостями (кровь, сперма, влагалищные выделения, любые жидкости с примесью крови, синовиальная, цереброспинальная, плевральная, перикардиальная, амниотическая) персонал должен использовать средства индивидуальной защиты - медицинские халаты/костюмы, медицинские шапочки, медицинские перчатки, маски, защитные очки, при необходимости - защитные экраны, клеенчатые фартуки.
К аварийным ситуациям при проведении лечебно-диагностических мероприятий, а также при сборе и удалении отходов относятся:
1) разрыв медицинских перчаток при проведении работы с биологическим материалом;
2) проколы, порезы колющим и режущим инструментарием;
3) попадание крови и других биологических жидкостей на слизистую оболочку и кожные покровы;
4) разбрызгивание крови и других биологических жидкостей.
При возникновении аварийной ситуации с биологическим материалом на рабочем месте необходимо предпринять следующие действия:
1. Пострадавшему в результате аварийной ситуации прекратить работу и провести дезинфицирующие мероприятия в зависимости от аварийной ситуации:
1) при попадании биологической жидкости на кожные покровы это место обработать 70% раствором этилового спирта, промыть в проточной воде с мылом и повторно обработать 70% раствором этилового спирта;
2) при попадании биологической жидкости на руки, защищенные перчатками, - перчатки необходимо обработать салфеткой, смоченной дезинфектантом, затем вымыть проточной водой, снять перчатки рабочей поверхностью внутрь, руки вымыть и обработать кожным антисептиком;
3) при попадании биологической жидкости в глаза следует немедленно промыть их проточной водой или 1% раствором борной кислоты;
4) при попадании биологической жидкости на слизистую носа - обработать 1% раствором протаргола;
5) при попадании биологической жидкости на слизистую ротоглотки - немедленно прополоскать 70% раствором этилового спирта или 0,05% раствором марганцово-кислого калия или 1% раствором борной кислоты;
6) если контакт с кровью, другими биологическими жидкостями или биоматериалами сопровождается нарушением целостности кожи (укол, порез), то необходимо предпринять следующие меры:
- вымыть руки, не снимая перчаток, проточной водой с мылом;
- снять перчатки рабочей поверхностью внутрь и сбросить их в дезинфицирующий раствор;
- если кровь идет из раны, не останавливать ее в течение 1-2 мин, в противном случае выдавить кровь из раны;
- промыть в проточной воде с мылом;
Инструкция
по противоэпидемическому режиму
лаборатории диагностики СПИД*
Лаборатория по диагностике СПИД проводит серологические исследования сывороток лиц, относящихся к группам риска заражения вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), доноров, лиц, подозреваемых в клиническом проявлении СПИД, лиц, находящихся в контакте с инфицированным ВИЧ, или на диспансерном наблюдении, и других групп населения, которые могут быть включены в обследование по эпидемиологическим показаниям.
Работа в лабораториях диагностики СПИД осуществляется в соответствии с правилами противоэпидемического режима работы с возбудителями третьей группы патогенности.
Ответственность за организацию и проведение комплекса противоэпидемических и дезинфекционных мероприятий в диагностических лабораториях возлагается на главных врачей учреждений и заведующих лабораториями.
1. Устройство и содержание помещений
диагностических лабораторий
1.1. Для лаборатории диагностики СПИД необходим набор помещений, обеспечивающий ее профиль работы и соблюдение правил противоэпидемического режима. Помещения лаборатории могут располагаться либо в отдельном здании, либо в изолированной части здания, в составе отделов или лабораторий другого профиля. Размеры комнат диагностической лаборатории не регламентируются, но должны обеспечивать требования режима работы.
В случае организации диагностической лаборатории СПИД в отдельном здании (или отсеке) необходимо предусмотреть:
1) комнату для приема, регистрации поступающего на исследование материала и выдачи результатов;
2) комнату для разборки и подготовки сывороток к серологическим исследованиям;
3) комнату для серологической работы;
4) комнату для проведения реакции иммуноблота и других подтверждающих тестов (если постановка этих тестов входит в функции лаборатории);
5) в наборе помещений лаборатории необходимо предусмотреть автоклавную для стерилизации чистой и обеззараживания инфицированной посуды, препараторскую и моечную;
6) помещение для сотрудников лаборатории.
1.2. Размещение лабораторных комнат должно быть организовано так, чтобы максимально обеспечивать поточность поступающего на исследование материала с последующей его инактивацией.
Помещение, в котором происходят прием и регистрация поступающего на анализ материала, целесообразно разместить при входе в лабораторию смежно с помещениями, в которых проводятся разборка и подготовка сывороток к постановке серологических реакций с учетом соблюдения поточности работы с исследуемым материалом. Автоклавную, моечную, препараторскую комнаты целесообразно сгруппировать в одном узле (месте).
1.3. Лаборатория должна быть обеспечена водопроводом, канализацией, электричеством, центральным отоплением.
1.4. В случае отсутствия в населенном пункте водопровода и канализации работа возможна только при условии постоянного снабжения водой и своевременного обеззараживания инфицированного материала.
В лаборатории должны быть оборудованы раковины для мытья рук и раковины, предназначенные для мытья посуды из легко моющихся и не портящихся от дезинфектантов материалов.
1.5. Все помещения лаборатории должны иметь естественное и искусственное освещение, отвечающее требованиям, предусмотренным строительными нормами и правилами.
1.6. Для соблюдения требуемых условий постановки серологических реакций и получения адекватных результатов температура воздуха в лабораторных помещениях не должна превышать 25 град.C. Для районов с жарким климатом в летний период устанавливают кондиционеры с охлаждением. Желательно в лабораторных комнатах иметь приточно вытяжную вентиляцию.
1.7. Полы в лабораторных помещениях должны быть покрыты линолеумом либо керамической плиткой.
1.8. Рабочие поверхности столов, на которых проводятся прием, разборка сывороток, постановка серологических реакций, следует покрывать водонепроницаемым, несгораемым и не портящимся при дезинфекции материалом.
1.9. Лабораторная мебель должна быть легко моющейся.
1.10. В случае формирования лаборатории диагностики СПИД в составе других лабораторий (отделов) не допускается пользование общей термальной комнатой (термостатами) и общими холодильниками. Лаборатория СПИД должна пользоваться только своими термостатами и холодильниками, установленными в разборочной и серологической комнатах.
2. Правила и противоэпидемический режим при проведении серологической диагностики СПИД
2.1. Работа в диагностических лабораториях проводится с соблюдением мер индивидуальной защиты: в сменном боксовом халате, шапочке, сменной обуви и обязательно в резиновых перчатках.
2.2. Доставка образцов крови (сывороток) в лабораторию осуществляется в емкостях (контейнеры, стерилизационные коробки и др.) с закрывающимися крышками, из материала, который не портится при дезинфекции.
Не допускается перевозка материала в сумках, портфелях и других предметах личного пользования.
Оптимальной считается доставка контейнеров с исследуемым материалом в сумках - холодильниках.
Образцы крови (сыворотки) должны доставляться в пробирках или флаконах, герметично закрытых резиновыми или ватно-марлевыми, обернутыми полиэтиленовой пленкой, пробками.
Взятая для исследования цельная кровь должна быть доставлена в диагностическую лабораторию в течение 24 часов с момента взятия крови. В случае невозможности доставки образцов крови в установленное время материал пересылается только в виде сыворотки (без сгустков) в течение 7 дней от дня взятия крови при условии ее хранения до отправки в диагностическую лабораторию СПИД при температуре 4-8 град.С.
Поступающий в лабораторию материал должен сопровождаться направлением (приложение 1).
2.3. Перед работой все повреждения кожи на руках должны быть закрыты лейкопластырем или напальчниками. Распаковка материала, присланного в лабораторию для исследования, проводится с соблюдением мер предосторожности, в резиновых перчатках. Присланные образцы крови (сыворотки) в пробирках, флаконах перекладывают в штативы или другие емкости диагностической лаборатории, помещенные на эмалированные или металлические подносы, и переносят в комнату разборки и подготовки материала для серологических исследований. Контейнеры, в которых доставлен исследуемый материал, после разгрузки обрабатывают дезраствором.
2.4. Поступившие образцы крови (сыворотки) регистрируют в отдельном журнале регистрации поступающего на исследование материала (приложение 2).
2.5. Сыворотку отсасывают со сгустков крови в день поступления или не позднее 24 часов после поступления в лабораторию.
2.6. До проведения исследования сыворотки хранят при 4-8 град.C и могут быть использованы для серологических исследований в течение 10 дней от дня взятия крови.
2.7. Комнаты, предназначенные для разборки и подготовки материала к серологическим исследованиям, должны иметь:
- лабораторный стол, покрытый не портящимся при дезинфекции материалом;
- шкаф для посуды;
- холодильник на +4 град.C;
- центрифугу на 1,5 - 2 тыс. об/мин (в предбокснике);
В помещениях, предназначенных для приема, разборки материала и постановки серологических реакций, запрещается проводить другие виды работы.
2.8. Для обеззараживания перчаток, инфицированной посуды необходимо предусмотреть эксикаторы или другие емкости с закрывающимися крышками с соответствующими дезинфицирующими растворами, баки для сбрасывания посуды и другого инфицированного материала, предназначенного для автоклавирования.
Все емкости с дезрастворами должны быть промаркированы: название дезраствора, его концентрация, назначение и дата приготовления.
2.9. После регистрации и разборки сывороток их переносят в комнату для серологических исследований.
Комнаты, предназначенные для серологических исследований, должны иметь:
- лабораторный стол для размещения посуды, необходимой в работе (мерные цилиндры, колбы, бутыль с дистиллированной водой и т.д.);
- лабораторный стол для размещения аппаратуры (спектрофотометр, промыватель и т.д.);
- стол для серологической работы;
- холодильник на +4 град.C;
Плашку с диагностикумом помещают на эмалированный или металлический поднос (лоток) и проводят всю работу во втором (боксовом) халате, в резиновых перчатках.
2.10. Для защиты от возможного попадания вируссодержащего материала во время работы рекомендуется использовать защитные очки, экраны* или другие защитные средства, подвергающиеся дезинфекции. В боксе, где проводятся серологические исследования, не рекомендуется в качестве дезинфицирующих средств использовать хлорсодержащие препараты и аммиак в открытых емкостях.
* Настольный экран типа 2-ЭН и 2-ЭН с кюветом.
2.11. После окончания работы исследуемый материал (пробирки с сывороткой) переносят в холодильник, а использованную инфицированную посуду помещают в бак для грязной посуды. Туда же кладут для контроля режима работы парового стерилизатора стеклянные герметично запаянные трубки (ампулы) с никотинамидом или Д (+)-маннозой и 0,1% фуксина основного или фуксина кислого, генцианвиолета, фенолового красного (температура плавления 132 град.C). Баки плотно закрывают крышкой, завязывают шпагатом, пломбируют и сдают в автоклавную под расписку автоклаверу (приложение 3).
2.12. Хранение бака до автоклавирования не допускается более рабочей смены. Обеззараживание в паровом стерилизаторе (автоклаве) проводится при температуре 132+/-2 град.C под избыточным давлением 2,0 кгс/кв.см (0,20 МПа) в течение 60 мин. После обеззараживания лаборант проверяет ампулу с химическим контролем. Расплавление химического теста и его окрашивание красителем свидетельствует о достижении необходимой температуры. Только после этого бак с посудой передается в моечную.
2.13. Пробирки с кровью помещают в специальную маркированную емкость (кастрюлю, ведро, бак), закрывающуюся крышкой, с дезинфицирующим раствором (3% раствор хлорамина, осветленный раствор хлорной извести; 0,6% осветленные растворы нейтрального гипохлорита кальция (НГК), гипохлорита кальция технического (ГКТ); 0,5% растворы ДП-2, сульфохлорантина не менее чем на 2 часа. Приготовление растворов осуществляется в соответствии с приложениями 8, 9. Другой способ обеззараживания - в паровом стерилизаторе при режиме - 2 кгс/кв.см (0,2 МПа) при температуре 132+/-2 град.C в течение 60 минут.
Кипячение является наиболее простым и доступным методом дезинфекции. Дезинфицирующий эффект достигается после кипячения в течение 30 минут (от момента закипания).
2.14. Поверхность рабочих столов и все предметы, соприкасавшиеся с исследуемым материалом (пипетки, пробирки, ампулы), должны быть обеззаражены. С этой целью можно использовать следующие дезинфицирующие средства: 6% раствор перекиси водорода без моющего или с моющим средством, 4% раствор формальдегида, 0,6% раствор НГК, 0,4% раствор ГКТ, 0,5% раствор ДП-2, сульфохлорантина в течение 60 мин. методом погружения или двукратного протирания (для поверхностей).
При наличии видимых пятен крови их следует сначала залить дезинфицирующим раствором на рекомендуемое время обеззараживания, затем удалить смесь крови и дезинфицирующего средства, сбросить тампон или салфетку в дезинфицирующий раствор. После этого поверхность следует протереть дезинфицирующим раствором. Если применяется 70% этиловый спирт (при отсутствии других средств), поверхность следует протереть несколько (3-5) раз, поскольку спирт быстро испаряется.
2.15. Растворы перекиси водорода готовят ежедневно. Растворы хлорамина можно готовить 1 раз на две недели, хлорной извести, ГКТ, НГК - на 6 дней, однако готовые растворы используют только в течение рабочего дня.
2.16. Насасывание сывороток и другого исследуемого материала
производят только с помощью груши или автоматической пипетки с последующим обеззараживанием наконечников в емкости (эксикатор и др.) с дезинфицирующим раствором. Дезинфекцию наконечников к автоматическим пипеткам можно проводить 70 град.* спиртом или 6% перекисью водорода в течение 60 минут, или автоклавированием при 1,1 кгс/кв.см (0,1 МПа) при температуре 120+2 град.C в течение 45 минут.
* Нормы расхода 96 град. этилового спирта на одно исследование на СПИД в ИФА -10 г, других дезинфицирующих средств - см. приложение 10.
Одноразовый инструментарий (пластины, наконечники к автоматическим пипеткам и др.) обеззараживаются в паровом стерилизаторе при 2,0 кгс/кв.см (0,2 МПа), температуре 132+/-2 град.C в течение 60 минут и выбрасывают в специально отведенные места.
2.17. После дезинфекции и влажной уборки помещения проводят обеззараживание воздуха с помощью бактерицидных ламп типа ДБ-30 в течение 60 мин. При определении количества ламп исходят из расчета: 2,5 Вт на 1 куб.м для неэкранированных ламп и 1,0 Вт на 1 куб.м для экранированных. Неэкранированные лампы включают только в отсутствие людей.
При выходе из рабочей комнаты сотрудник лаборатории обязан убрать исследуемый материал со стола, обработать стол дезинфицирующим раствором, а руки после обеззараживания тщательно вымыть с мылом. Перчатки обеззараживают в 6% растворе перекиси водорода или 70 град. спирте.
2.18. Стирка халатов и другой спецодежды на дому категорически запрещается. Смена спецодежды должна осуществляться 1 раз в неделю. Перед стиркой спецодежду замачивают на 3 часа в 1,0% растворе хлорамина или 3% растворе перекиси водорода с 0,5% моющего средства (температура раствора 50 град.C) или автоклавируют при 1,1 кгс/кв.см (0,1 МПа) при температуре 120+2 град.C в течение 45 минут. Пятна крови предварительно смачивают растворами более высокой концентрации (как для поверхностей).
2.19. Для обеззараживания поверхности пола (текущая дезинфекция) в конце рабочего дня используют 1% раствор хлорамина, 1% осветленный раствор хлорной извести с последующим проветриванием помещения. Пролитая на пол кровь, сыворотка и др. заливаются раствором одного из дезинфицирующих средств, указанных для обеззараживания поверхности рабочего стола.
2.20. При работе с дезинфицирующими средствами необходимо соблюдать меры предосторожности, изложенные в "Правилах по охране труда работников дезинфекционного дела и по содержанию дезинфекционных станций, дезинфекционных отделов, отделений профилактической дезинфекции санитарно - эпидемиологических станций, отдельных дезинфекционных установок", утвержденных Минздравом СССР 09.02.79 N 1963-79.
2.21. Приготовление растворов дезинфицирующих средств проводят в хорошо проветриваемых помещениях с использованием мер индивидуальной защиты - резиновых перчаток, герметичных очков (тип ПО-2, ПО-3 или моноблок), респираторов с противогазовым патроном марки А или В (тип РУ-60М, РПГ-67 и др.), халата, шапочки, резинового фартука.
Запасы препаратов хранят в защищенном от попадания прямых солнечных лучей месте.
3. Центрифугирование исследуемого материала
Центрифугирование исследуемого материала (при освобождении сывороток от сгустков крови и элементов) проводят в комнатах, предназначенных для подготовки сывороток к серологическим реакциям. Исследуемый материал помещают в центрифужные стаканы или во флаконы с крышкой. Центрифугу обязательно закрывают крышкой. После окончания центрифугирования (после полной остановки ротора) сотрудник открывает крышку центрифуги, вынимает пробирки и убеждается в их целостности.
В случае подозрения на разрыв сосуда (пробирки) с исследуемым материалом крышку снимают не ранее чем через 40 минут после остановки ротора. Гнездо с разбитым сосудом (пробиркой) заливают раствором одного из дезинфицирующих средств на 60 минут. Затем удаляют содержимое гнезда, сбрасывают в дезинфицирующий раствор, протирают марлевой салфеткой, смоченной в дезрастворе. После окончания центрифугирования во всех случаях ротор, стенки центрифуги, крышку протирают одним из дезинфицирующих растворов.
Читайте также: