Производство пробирок для анализов на вирус
Обновлено: 24.04.2024
Е.Б. Лукоянычева–заведующая иммунологической лабораторией ГУЗ КОКБ.
Правила забора биологического материала для иммунологических исследований: Методические рекомендации / Авт.-составитель О.М.Луппова.- Кемерово: ГУЗ КОКБ ,2008.-25 стр.
Введение 4
Раздел 1. Общие правила забора биологического материала и оформления сопроводительных документов
Раздел 2.Технология забора крови из периферической вены для лабораторного исследования
Раздел 3.Правила взятия венозной крови с помощью закрытой системы (вакуумного шприца-контейнера)
Раздел 4.
Транспортировка образцов крови
Раздел 5.
Требование к маркировке пробирок
Раздел 6
Образец оформления пробирок и заполнения сопроводительных документов
Приложение № 1
Забор крови на иммунограмму
Приложение №2.
Забор крови на циркулирующий иммунный комплекс
Приложение №.3
Забор крови на криоглобулины
Приложение №.4
Забор крови на группу крови и резус принадлежность
Приложение №5.
Забор крови на реакцию Кумбса
Приложение №6
Забор крови на гемоконтактные гепатиты В и С (HBsAg, анти – HCV)
Приложение №7.
Забор крови на развернутый комплекс маркеров гепатитов
Приложение №8.
Забор крови на клещевой энцефалит, боррелиоз
Приложение №9.
Забор крови на антитела к антигенам описторхисов, лямблий, хеликобактеру
Приложение №10.
Забор крови на цитомегаловирус, токсоплазмоз, герпес
Приложение №.11
Забор крови на а/т к тироидной пероксидазе
Приложение №12
Забор крови на ВИЧ 23
Приложение № 4(образец заполнения)
Список литературы
Данное методическое пособие предназначено для медицинских сестер Кемеровской областной клинической больницы.
Методическое пособие поможет правильно произвести забор биологического материала и оформить сопроводительные документы.
Правильно произведенный забор биологического материала и правильно оформленные направления исключат ошибку на преаналитическом этапе исследования.
Формы сопроводительных документов составлены так, чтобы сократить время медицинской сестры, затрачиваемое на оформление направлений.
Необходимо, чтобы образцы крови были правильно взяты и вовремя доставлены в лабораторию. Нарушения, допущенные на преаналитическом этапе, могут повлиять на результат исследования и его дальнейшую интерпретацию.
Раздел 1.
Общие правила забора биологического материала и оформления сопроводительных документов
Перед забором крови пациенту следует сообщить:
1. На какой вид исследования будет проводиться забор крови.
2. Требования необходимые для данного исследования.
Порядок забора венозной крови
1. Исследование проводится утром натощак, последний прием пищи за 12 часов до взятия крови.
2. Исключение приема алкоголя не менее чем за 24 часа до взятия крови.
3. Утренний прием лекарственных препаратов, лечебно-диагностических процедур (массаж, ЭКГ, физиотерапевческое лечение и др.) проводится после взятия крови.
5. Пациент перед процедурой должен находиться в покое, сидеть или лежать не менее 5 минут.
6. Продолжительность пережатия сосудов жгутом должна составлять не более 1 минуты.
7. Нельзя просить работать пациента кулаком и массировать предплечье по ходу вен.
Раздел 2
Технология забора крови из периферической вены для лабораторного исследования
подготовить на манипуляционном столе стандартный набор для забора крови из периферической вены, проверив целостность упаковок и сроки годности:
1. лоток для использованных материалов;
2. пробирки для крови;
3. упаковка с 2-мя стерильными салфетками (5х5см) или 4-5 шариками;
5. кожный спиртовой антисептик во флаконе с дозатором;
сделать необходимые надписи на пробирках;
оформить сопроводительные документы в лабораторию;
обеспечить удобное освещение;
помочь пациенту найти удобное положение;
разъяснить пациенту суть предстоящей процедуры, создавая атмосферу доверия, предоставляя возможность задать вопросы;
обработать руки спиртовым антисептиком;
вскрыть упаковки со стерильными материалами;
руку больного уложить в положении максимального разгибания, для чего под руку следует положить валик, имеющий влагостойкое покрытие.
наложить жгут на 10 - 15 см выше выбранной зоны, не нарушая ток крови;
выбрать вену для венепункции;
обработать место венепункции кожным антисептиком и дать высохнуть самостоятельно;
Не пальпируйте вену повторно!
надеть на стерильный шприц иглу;
снять с иглы защитный колпачок;
пальцами левой руки фиксировать кожу над веной;
ввести под кожу иглу срезом вверх под углом 30-40 0 ;
установить иглу параллельно вене и быстрым движением проколоть ее стенку;
иглу продвинуть немного вверх по длине вены;
набрать необходимое количество крови в шприц
- запрещается забор крови свободным кровотоком из иглы в пробирку, а также присоединение к игле нового шприца;
- для безопасного забора крови предпочтительно использовать вакуумный шприц-контейнер.
иглу извлечь из вены;
прижать место венепункции стерильной салфеткой на 2-3 минуты;
осторожно, предупреждая разбрызгивание крови, вылить содержимое шприца через иглу в одну или несколько пробирок.
Раздел 3
Правила взятия венозной крови с помощью закрытой системы (вакуумного шприца-контейнера)
Закрытые системы взятия венозной крови представляют собой новое поколение вакуумных шприцев - контейнеров с реактивами. Их использование имеет следующие преимущества перед традиционными способами:
полностью исключается контакт медперсонала с кровью на всех этапах взятия крови и ее транспортировки;
особо прочный пластик закрытых систем позволяет осуществить безопасную доставку крови на любые расстояния;
благодаря наличию широкого спектра пробирок с заранее добавленными реагентами для различных видов анализов (ЭДТА для гематологии, цитрат натрия для коагулогии, активатор свертывания для получения сыворотки), значительно облегчается работа медсестер и лаборатории. Международная цветовая маркировка предотвращает их не правильное применение;
уменьшается количество ошибочных анализов, связанных с неправильным взятием проб крови и неверным соотношением реагентов.
закручивающаяся крышка предотвращает "аэрозольный эффект" при открывании;
1. Надеть иглу на контейнер и закрепить легким поворотом по часовой стрелке. Провести пункцию вены.
1. Провести пункцию вены иглой. Благодаря защитной мембране кровь из иглы не вытекает.
2. Медленно оттягивая поршень, наполнить контейнер кровью. После заполнения кровью контейнер вместе с иглой вынуть из вены. Поршень зафиксировать в конечном положении до характерного щелчка. В случае взятия нескольких образцов крови, контейнер отсоединить. Иглу оставить в вене и на нее надеть следующий контейнер.
2. Создать вакуум в контейнере.
Для этого отвести поршень в конечное положение (до характерного щелчка) и отломить его
3. По окончании взятия крови, шток поршня обломить. Вы получаете транспортный контейнер с кровью и антикоагулянтом или готовую пробирку для сепарации сыворотки.
3. Насадить контейнер на иглу. Взятие крови осуществляется под действием вакуума. В этом случае вы также получаете транспортный контейнер с кровью и антикоагулянтом или готовую пробирку для сепарации сыворотки.
Транспортировка образцов крови
При транспортировке образца внутри лечебно-диагностического учреждения, пробирки с кровью должны находиться в контейнере, который в случае повреждения пробирки будет предотвращать разлитие крови.
Порядок доставки крови в лаборатории
- Штативы с кровью поместить в герметичный контейнер;
наружные части контейнера двукратно с интервалом в 15 минут протереть дезинфицирующим средством (концентрация по режиму для вирусных гепатитов);
доставить контейнер в лабораторию;
вынимать образцы крови из контейнера только в перчатках!
после возвращения из лаборатории контейнер вновь двукратно с интервалом в 15 минут протереть дезинфицирующим средством (концентрация по режиму, предусмотренному для гемоконтактных вирусных гепатитов).
Требование к маркировке пробирок.
Маркировку пробирок и заполнение сопроводительных документов следует проводить аккуратно и четко.
Фамилию, имя, отчество пациента писать четко и разборчиво.
В направлении заполнять все графы.
Не допускается, чтобы этикетка на пробирке была размыта, порвана или плохо приклеена.
Вакуумные пробирки с цитратом натрия используются для исследования плазменного и тромбоцитарного звена системы гемостаза. Цитрат натрия – единственный антикоагулянт, который удовлетворяет всем требованиям к стабилизации пробы для выполнения этого вида исследований. Цитрат натрия останавливает реакции свертывания крови, связывая ионы кальция, при этом, в отличие от других антикоагулянтов, в частности, ЭДТА и гепарина, не вызывает изменений в иных звеньях системы гемостаза.
Концентрация цитрата натрия
ВАЖНО! В вакуумных системах для взятия крови применяют раствор цитрата натрия в концентрации 109 ммоль/л (0,109 М) или 129 ммоль/л (0,129 М), что соответствует 3,2% и 3,8% 2-водного трехзамещенного цитрата натрия. При выборе пробирок с цитратом натрия следует обращать внимание не на процентную концентрацию цитрата, а на его молярную концентрацию!
В настоящее время, в соответствии с рекомендациями Института Клинических Лабораторных Стандартов (CLSI), предпочтительным является применение пробирок с концентрацией цитрата натрия 3,2% (109 ммоль/л)!
Согласно требованиям ВОЗ, во избежание существенных диагностических ошибок при определении Международного Нормализованного Отношения (МНО), для теста протромбинового времени следует использовать 0,109 М (109 ммоль/л) раствор трехзамещенного цитрата натрия в соотношении кровь: антикоагулянт = 9:1. Другие международные источники также рекомендуют использовать в тесте ПВ раствор трехзамещенного цитрата натрия в концентрации (109 ммоль/л). Раствор цитрата натрия с концентрацией 129 ммоль/л (3,8%) не должен быть использован в данном тесте*.
Пробирки с цитратом натрия в концентрации 3,8% (129 ммоль/л) используются для исследования тромбоцитарного звена системы гемостаза.
Соотношение кровь:антикоагулянт
Важным моментом на преаналитическом этапе коагулологических исследований является четкое соблюдение соотношения кровь:антикоагулянт 9:1. Взятие меньшего количества крови, чем определено ее номинальным объемом, (т. е., недостаточное заполнение пробирки), изменяет соотношение плазмы к антикоагулянту, что, в свою очередь, изменяет коэффициент разведения белков плазмы, а относительный избыток цитрата может нарушить процессы рекальцификации и активации свертывания крови. Если пробирка для взятия крови содержит от 80% до 90% целевого объема заполнения, возможно незначительное артефактное удлинение ПВ и АЧТВ. Однако, если пробирки заполнена кровью менее чем на 80% от ее номинального объема заполнения, ПВ и АЧТВ будут ложно завышены даже у здоровых пациентов, а влияние на другие тесты коагуляции может быть смещенным непредсказуемо. Ложное завышение ПВ и АЧТВ в недостаточно заполненных пробирках более выражено при концентрации цитрата 3,8% в сравнении с 3,2%. Поэтому Международный совет по стандартизации в гематологии (ICSH) категорически не рекомендует анализировать образцы крови пациента из пробирок, заполненных менее, чем на 80% от номинального объема.
Вероятность того, что объем крови может быть больше номинального менее вероятна, поскольку объем вакуума в пробирках четко дозирован и сила аспирации не позволяет избытку крови попасть в пробирку.
Влияние гематокрита
Институт клинических и лабораторных стандартов (CLSI) Всемирная федерация гемофилии акцентируют внимание на необходимости корректировки соотношения цитрат / кровь при гематокрите> 55%. Для этого рекомендовано использовать формулу:
где C - объем цитрата в миллилитрах (мл), который следует добавить к объему крови (V) в мл для образования образца крови с антикоагулянтом.
Пример: Для Hct 70% при объеме взятия крови 4,5 мл перед добавлением антикоагулянта, получается следующий результат:
то есть, 0,25 мл цитрата необходимо смешивают с 4,5 мл крови.
Если у пациента тяжелая анемия, объем плазмы увеличивается, так что после смешивания с тринатрий цитратом в пробирке может быть достаточно остаточного кальция для продолжения коагуляции в образце, что приводит к активации и возможному сокращению АЧТВ наряду с потреблением факторов свертывания крови, в том числе фибриногена. Однако низкий гематокрит в меньшей степени влияет на результаты, поэтому обычно нет необходимости корректировать соотношение цитрата к крови для образцов, взятых у пациентов с анемией.
Последовательность взятия образцов крови
При взятии крови для выполнения гемостазиологических тестов очень важно во время венепункции не допустить попадания в пробирку с цитратом частичек поврежденных тканей, а также других антикоагулянтов. Это важно, поскольку даже минимальное количество тромбина, который образуется при активации свертывания, резко ускоряет ферментные реакции гемостаза, что ведет к ложному укорочению времени основных скрининговых тестов – АЧТВ и ПВ и искажению других параметров. А попадание в пробу крови других антикоагулянтов может частично заблокировать определенные звенья системы гемостаза и тоже оказать значительное влияние на результаты анализа. В связи с этим, Международный совет по стандартизации в гематологии (ICSH) рекомендует использовать следующую последовательность взятия образцов крови:
1. Пробирка без наполнителя
2. Пробирка с цитратом натрия
3. Пробирка для сыворотки с активаторами свертывания или без них, с гелем или без него
4. Пробирки с гепарином с гелем или без него
5. Пробирки с ЭДТА
6. Пробирки с ингибитором глюкозы
7. Другие пробирки
Если кровь берется только на гемостаз, сначала необходимо взять кровь в пустую пробирку, затем в пробирку с цитратом.
В соответствии с рекомендациями Института Клинических Лабораторных Стандартов (CLSI) после взятия крови в пробирку с цитратом, необходимо, осторожно переворачивая пробирку, проверить полученный образец на предмет образования сгустков. При выявлении сгустков, образец, естественно, отбраковывается.
Сразу после взятия крови в пробирку с раствором цитрата необходимо осторожно перемешать содержимое, переворачивая пробирку 3–4 раза.
Условия центрифугирования
- Плазма, обогащенная тромбоцитами – 5 - 7 мин. при 150 - 200 g. Эта плазма используется только для выполнения функциональных тестов тромбоцитов (агрегации, адгезии, трансформации). Оптимальным вариантом является отдельная пробирка с цитратом для этих исследований. Одна часть обогащенной плазмы отбирается для выполнения тестов, а вторая повторно центрифугируется для получения бедной тромбоцитами плазмы, которая является контролем для данных тестов.
- Плазма, бедная тромбоцитами (концентрация тромбоцитов < 10 000 /мкл) - 10 - 15 мин. при 1 500 - 2 000 g.Эта плазма является основным материалом для выполнения большинства гемостазиологических исследований: скрининговых тестов коагуляции и фибринолиза, а также для определения факторов, маркеров и ингибиторов различных звеньев свертывающей системы.
- Плазма, свободная от тромбоцитов (концентрация тромбоцитов < 1 000 /мкл) – 20 - 30 мин. при 2 000 - 3 000 g.Этот вид материала оптимален для выполнения тестов, на результаты которых могут повлиять как сами тромбоциты, так и секретируемые ими биологически активные вещества, например, тромбоцитарные факторы 3 и 4, протеин S. К таким тестам, в частности, относятся тесты на антифосфолипидные антитела, включая волчаночный антикоагулянт. Плазма, свободная от тромбоцитов также используется для случаев, когда материал требуется заморозить из-за невозможности его быстрого исследования, так как замораживание вызывает повреждение тромбоцитов и выброс их факторов в пробу с соответствующим изменением результатов тестов.
Надежность процедуры центрифугирования следует проверять каждые шесть месяцев или после ремонта центрифуги, чтобы убедиться в том, что количество тромбоцитов в плазме находится в допустимых пределах.
Транспортировка и хранение проб
Допустимый интервал времени между взятием образца и его исследованием зависит от температуры, при которой образец транспортируется и хранится.
В соответствии с рекомендациями Института Клинических Лабораторных Стандартов (CLSI) образцы, предназначенные для исследования показателей гемостаза следует обрабатывать и хранить следующим образом:
- Образцы для определения ПВ, не центрифугированные или центрифугированные с плазмой, оставшейся поверх клеток, в закрытой пробирке необходимо хранить при температуре от +18 до +24°C. Они должны быть протестированы в течение 24 часов с момента сбора образца. Хранение при температуре от +2 до +4 °C может привести к холодовой активации фактора VII и, следовательно, повлиять на результаты ПВ. Если пациент находится на терапии гепарином или на пероральной антикоагулянтной терапии препаратами на основе кумарина, ПВ может изменяться в зависимости от времени хранения образца, если только в состав используемого набора реагентов не входит нейтрализатор гепарина.
- Образцы для рутинных анализов АЧТВ у пациентов (которые не находятся на терапии гепарином), не центрифугированные или центрифугированные с плазмой, оставшейся поверх клеток в закрытой пробирке, необходимо хранить при температуре от +2 до +4°C или от +18 до +24°C. Они должны быть протестированы в течение четырех часов с момента сбора образца.
- Образцы для анализа АЧТВ, предположительно содержащие нефракционированный гепарин, хранят при температуре от +2 до +4°C или от +18 до +24°C. Их следует центрифугировать в течение одного часа после взятия, а плазму протестировать в течение четырех часов с момента сбора образца. Если планируется транспортировка пробы для исследования, например, в централизованную лабораторию, то во избежание перемешивания отцентрифугированного образа, необходимо после центрифугирования плазму удалить и провести исследование в течение четырех часов.
- Образцы для других анализов (например, тромбиновое время, протеин С, фактор V и фактор VIII) необходимо хранить при температуре от +2 до +4°C или от +18 до +24°C. Они должны быть отцентрифугированы и протестированы в течение четырех часов с момента взятия образца.
- Если невозможно провести определение ПВ в течение 24 часов и АЧТВ и других показателей плазменного звена системы гемостаза в течение 4 часов, плазму следует заморозить. Она может храниться при температуре - 20°C до двух недель или при -70°C - до шести месяцев. Замороженные образцы плазмы следует быстро размораживать при температуре 37°C при осторожном перемешивании. После размораживания их следует анализировать немедленно, или, если это невозможно, допустимо проведение исследования в течение двух часов, но при этом образец до проведения исследования должен храниться при температуре +4°C. Следует учитывать, что замораживание плазмы может повлиять на результат определения АЧТВ.
Список литературы:
1. Kitchen S, Adcock DM, Dauer R, et al. International Council for Standardisation in Haematology (ICSH) recommendations for collection of blood samples for coagulation testing. Int J Lab Hematol. 2021;43:571–580.
3. Вавилова Т.В., Гильманов А.Ж., Мамаев А.Н. Коагулологические исследования. - Клиническая лабораторная диагностика. Национальное Руководство: в 2 т. -Том 1 / под ред. В.В.Долгова, В.В.Меньшикова. –М., ГЭОТАР-Медиа, 2012. –С.749-815.
5. Крюкова В. А. Современные представления о преаналитике коагулологических исследований. Тромбоз, гемостаз и реология, №3 (27), октябрь 2006 г.
6. Преаналитический этап в гемостазиологии / А.А.Козлов, А.Л.Берковский, Е.В.Сергеева, А.В.Суворов – М.: Принт. 2013. – 48 с.
Об актуальных изменениях в КС узнаете, став участником программы, разработанной совместно с АО "Сбербанк-АСТ". Слушателям, успешно освоившим программу выдаются удостоверения установленного образца.
Программа разработана совместно с АО "Сбербанк-АСТ". Слушателям, успешно освоившим программу, выдаются удостоверения установленного образца.
Продукты и услуги Информационно-правовое обеспечение ПРАЙМ Документы ленты ПРАЙМ Методические рекомендации № МР 3.1.0169-20 "Лабораторная диагностика COVID-19" (утв. Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 30 марта 2020 г.)
Обзор документа
Методические рекомендации № МР 3.1.0169-20 "Лабораторная диагностика COVID-19" (утв. Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 30 марта 2020 г.)
Методические рекомендации № МР 3.1.0169-20
"Лабораторная диагностика COVID-19"
(утв. Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 30 марта 2020 г.)
1. Рекомендации предназначены для специалистов диагностических лабораторий независимо от организационно-правовой формы собственности и заинтересованных сторон, участвующих в лабораторном обследовании лиц на новую коронавирусную инфекцию (COVID-19).
2. Организация лабораторной диагностики COVID-19 осуществляется в соответствии с требованиями санитарного законодательства по работе с микроорганизмами II групп патогенности.
4. К работе с тест-системами для диагностики COVID-19 в лаборатории организаций допускаются специалисты, давшие письменное согласие и прошедшие инструктаж, проведенный сотрудниками лабораторий Роспотребнадзора, имеющих санитарно-эпидемиологическое заключение на работу с возбудителями инфекционных заболеваний человека II группы патогенности.
5. Данные о количестве и результатах всех проведенных исследований на COVID-19 (включая исследования, проведенные любыми методами, в том числе приобретенными тест-системами) ежедневно предоставляются лабораториями организаций в центры гигиены и эпидемиологии (и/или филиалы) в субъектах Российской Федерации.
6. В случае получения положительного или сомнительного результата на COVID-19 руководитель лаборатории организации обязан немедленно проинформировать ближайший территориальный орган Роспотребнадзора и в течение 2-х часов передать положительно (сомнительно) сработавший материал в центр гигиены и эпидемиологии в субъекте Российской Федерации.
7. Территориальные органы Роспотребнадзора по субъекту Российской Федерации при получении информации из лаборатории организации о выявлении материала, подозрительного на наличие возбудителя COVID-19 немедленно организуют комплекс противоэпидемических мер по недопущению рисков распространения инфекции, включающих изоляцию и госпитализацию лица, в материале которого определено наличие возбудителя COVID-19, и работу с контактными.
8. Обязательному обследованию на COVID-19 подлежат:
- лица, прибывшие из-за рубежа с наличием симптомов инфекционного заболевания (или при появлении симптомов в течение периода медицинского наблюдения);
- контактные лица с больным COVID-19;
- лица с "внебольничной пневмонией";
- медицинские работники, имеющие риск инфицирования (скорая (неотложная) медицинская помощь, инфекционные отделения, отделения для больных внебольничной пневмонией) 1 раз в неделю (до появления IgG);
- лица старше 65-ти лет при появлении респираторных симптомов;
- лица при появлении респираторных симптомов, находящиеся в закрытых коллективах (интернаты, пансионаты для пожилых и другие учреждения).
9. Диагноз COVID-19 устанавливается после лабораторного подтверждения на базе учреждений Роспотребнадзора.
Выписка больных COVID-19 проводится при получении 2-х отрицательных результатов лабораторных исследований с промежутком не менее 1 суток.
Контактные с больным COVID-19 лица обследуются дважды: в день начала медицинского наблюдения (в кратчайшие сроки с момента установления медицинского наблюдения) и при отсутствии клинических проявлений за период медицинского наблюдения - на 10-12-е сутки наблюдения. При появлении (выявлении) клинических симптомов обследуются немедленно.
10. Научно-исследовательские работы с возбудителем COVID-19 могут проводиться только в лабораториях, имеющих санитарно-эпидемиологическое заключение на работу с возбудителями инфекционных болезней человека II группы патогенности.
11. Материал для лабораторных исследований:
- респираторный материал для ПНР исследования (мазок из носоглотки и ротоглотки и мокрота (при наличии) и/или эндотрахеальный аспират или бронхоальвеолярный лаваж);
- сыворотка крови для серологического исследования (на 1-й и 14-й день);
- для посмертной диагностики используют аутоптаты легких, трахеи и селезенки.
12. Сбор клинического материала и его упаковку осуществляет работник медицинской организации, обученный требованиям и правилам биологической безопасности при работе и сборе материала, подозрительного на зараженность микроорганизмами II группы патогенности.
Каждый образец материала помещают в отдельную транспортную емкость, обеспечивая требования в соответствии с таблицей настоящих методических рекомендаций.
Образцы материала от людей, подлежащие сбору для лабораторной диагностики COVID-19
| Тип образца | Требования к сбору материала | Транспортировка | Условия хранения до тестирования | Комментарии |
|---|---|---|---|---|
| Мазок с носоглотки и зева(ротоглотки) | Пластиковые пробирки и тампоны для мазков** | 4°С | 5дней*: -70°С | Носоглоточные и орофарингеальные тампоны должны быть помещены в одну пробирку для увеличения вирусной нагрузки |
| Бронхоальвеолярный лаваж | Стерильный контейнер | 4°С | 48 часов*: -70°С | Возможно небольшое разведение образца** |
| Эндотрахеальный аспират, аспират носоглотки или смыв из носа | Стерильный контейнер | 4°С | 48 часов*: -70°С | 44 |
| Мокрота | Стерильный контейнер | 4°С | 48 часов*: -70°С | Убедитесь, что материал поступает из нижних дыхательных путей |
| Ткани биопсии или аутопсии, включая легкие | Стерильный контейнер с транспортной средой** | 4°С | 24часа*: -70°С | Для обнаружения вируса** |
| Сыворотка (две пробы: острая фаза и через 2 недели после острой фазы) | Пробирки для разделения сыворотки | 4°С | Острая фаза - первая неделя болезни |
* при невозможности обеспечить хранение при минус 70°С, образцы хранить при минус 20°С;
** для транспортировки образцов используют транспортную среду для хранения и транспортировки респираторных мазков или физиологический раствор (при условии транспортировки до лаборатории не более 24 часов после взятия образца) или сухой зонд-тампон (при условии транспортировки до лаборатории не более 4 часов после взятия образца).
13. Все образцы, собранные для лабораторных исследований, должны рассматриваться как потенциально инфекционные, и медицинский персонал, который собирает или перевозит клинические образцы, должен строго соблюдать требования биологической безопасности как при работе с микроорганизмами II группы патогенности.
Медицинские работники, которые собирают образцы, должны использовать соответствующие средства индивидуальной защиты (СИЗ).
Медицинские работники, выполняющие аэрозольные процедуры (например, аспирацию или открытое отсасывание образцов дыхательных путей, интубацию, сердечно-легочную реанимацию, бронхоскопию), используют:
- респираторы типа FFP3 или эквивалент, или более высокий уровень защиты (пневмошлем);
- очки для защиты глаз или защитный экран;
- противочумный халат и перчатки, водонепроницаемый фартук при проведении процедур, где ожидается, что жидкость может попасть на халат или специальные защитные комплекты.
Необходимо ограничить число лиц, присутствующих в комнате, до минимума, необходимого для сбора образцов. Обязательно следовать требованиям санитарных правил по использованию СИЗ.
Все используемые материалы должны быть утилизированы надлежащим образом. Дезинфекция рабочих зон и обеззараживание возможных разливов крови или инфекционных жидкостей организма должны проводиться в соответствии с утвержденными процедурами с использованием дезинфекционных средств на основе хлора.
14. При выявлении положительных результатов первичного исследования, материал от больного направляют на подтверждающее тестирование в определенные Роспотребнадзором лаборатории на базе центров гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора в субъектах Российской Федерации или на базах научно-исследовательских организаций Роспотребнадзора.
Единичный отрицательный результат теста, особенно если это образец из верхних дыхательных путей, не исключает инфекции.
Обнаружение любого другого патогена в образцах от больного не исключает заболевания COVID-19.
При повторном положительном результате исследования материала, отобранного у одного и того же лица, при наличии подтверждения предыдущего положительного результата, подтверждения в Референс-центре не требуется.
15. Перевозка образцов должна осуществляться в соответствии с требованиями санитарного законодательства по отношению к микроорганизмам II группы патогенности.
15.1. Все клинические образцы (сыворотка крови, смывы и мазки, и др.) направляются в Референс-центр в пробирках объемом 1,5-2,0 мл.
15.2. Пробирки должны иметь завинчивающиеся крышки с внешней резьбой и уплотнительным кольцом, исключающим протекание биологической жидкости.
15.3. На пробирке указывается фамилия, имя, отчество пациента, вид образца, дата сбора образца
15.4. Пробирки с образцами от одного пациента помещаются в зип-пакет размером 5x7 см или 6x8 см с ватой (или другим гигроскопичным материалом) в количестве, достаточном для адсорбции всего образца в случае его утечки. На пакете указывается фамилия, имя, отчество пациента, дата сбора образцов (например, Иванов И.И., 19.02.2020 г.). Не допускается упаковывание образцов материалов от разных людей в один и тот же зип-пакет.
15.5. Зип-пакеты помещаются в герметичный металлический контейнер. На контейнере указывается наименование организации (НИО или ЦГиЭ в субъекте Федерации) и фамилии пациентов.
15.6. Металлические контейнеры помещают в термоизолирующие пенопластовые коробки (термоконтейнеры, сумки-термосы). В термоконтейнеры и сумки-термосы помещают охлаждающие элементы. К наружной стенке термоконтейнера или термоса прикрепляют этикетку с указанием вида материала, условий транспортирования, названия пункта назначения и отправителя.
15.7. Условия транспортирования проб:
- при температуре от 2 до 8°С - в случае, если контейнер будет доставлен в референс-центр в течение 3 суток;
- при температуре минус 70°С - в случае, если контейнер будет доставлен в референс-центр в срок, превышающий 3 суток.
Не допускается замораживание-оттаивание материала.
В отдельный полиэтиленовый пакет вкладывают сопровождающие документы, включая информацию о пациенте, пакет укладывается внутрь термоконтейнера или сумки-термоса. Пример:
| Дата поступления | Кто направил | ФИО | Возраст | Регион, откуда прибыл | Предварительный диагноз или симптомы | Вид материала |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 19.02.2020 | ЦГиЭ в N-ской области | Иванов И.И. | 50 лет | КНР, Пекин | ОРВИ | Мазок с носоглотки и зева |
| сыворотка крови |
16. Результаты лабораторных исследований оформляются соответствующими документами в установленном порядке и направляются в адрес организации, направившей материал.
17. При получении положительных результатов на вирус SARS-CoV-2 на любом из этапов диагностики информация немедленно направляется в территориальные органы Роспотребнадзора.
| Руководитель Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации | А.Ю. Попова |
Обзор документа
Роспотребнадзор выпустил рекомендации о лабораторной диагностике коронавируса, которые содержат:
- условия допуска к работе с тест-системами;
- порядок учета полученных в ходе диагностики данных;
- перечень лиц, которые подлежат обязательному обследованию;
- виды образцов материала от людей, подлежащих сбору для лабораторной диагностики.
Для просмотра актуального текста документа и получения полной информации о вступлении в силу, изменениях и порядке применения документа, воспользуйтесь поиском в Интернет-версии системы ГАРАНТ:
С 1 по 30 апреля на исследование COVID - скидки до 70%!
Пробирка Эппендорфа ![эппендорфы.jpg]()
Пробирка Эппендорфа – подвид химико-лабораторной посуды, сосуд конической формы с герметично защелкивающейся крышкой.
Eppendorf - история пробирки
Первая пробирка Эппендорф появилась на рынке в 1963 году и быстро завоевала популярность в немецких медицинских и биологических научных лабораториях. Она позволила лаборантам легко и удобно работать с пробами маленьких объемов. Пробирка стала незаменима для проведения экспериментов, позволив свести к минимуму необходимое количество образца. Разработка вакцин и новых лекарств, постановка ПЦР и биохимических анализов была бы немыслима сегодня без пробирки, чьи особенности постоянно совершенствуются.
Ранее взятие пробы крови у маленьких животных и детей было невозможным, т.к. в те времена требовалось как минимум 200 мл крови. Набор проб был не точным, о стерильности и воспроизводимости вообще было сложно говорить. И все это каких-то 50 лет назад. Представьте количество заболеваний, которые оставались не диагностированными и смертей связанных с ними.
Только в 1961 изобретение поршневой пипетки позволило механически измерять жидкости с высокой точностью, следовательно, появилась потребность в емкости, которая могла бы вмещать столь малые объемы жидкости. В то время не было никаких устройств для последующей обработки этих образцов, и институт Гамбург-Эппендорф модернизировал оборудование для работы с микрообъемами: смесители, центрифуги, фотометры и такие расходные материалы, как пробирки и наконечники. В те времена сложно было себе представить центрифугирование малых объемов жидкости, минимум 10 мл, центрифуги издавали массу шума и проблем для лаборантов. Стеклянные пробирки часто лопались и ценные образцы разливались внутри установки. Благодаря изобретению дозаторов и микропробирок, впервые в мире стало возможным оснастить лабораторию в комплексе. Прошло 50 лет и это оборудование остается востребованным и по сей день.
С 1963 года продано более миллиарда пробирок Эппендорф по всему миру. Параллельно с Эппендорфом, данную технологию начали использовать и другие компании – производители медицинского оборудования, такие как Nerbe и Nuova Aptaca по собственным патентам и под своим брендом. Такое явление создало естественную конкуренцию и позволило расширить выбор микропробирок на европейском рынке. Как известно, конкуренция - двигатель прогресса, она способствует улучшению технологий и качества продукта. На сегодняшний день существует широкий выбор пробирок типа Эппендорф.
На данном этапе пробирки с замком устанавливают новые стандарты для простой и безопасной работы с пробами в микрообъемах. Несмотря на многие дополнения (размеры, цвета, степени чистоты) сегодня пробирка имеет ту же коническую форму, что и в 1979 году.
Среднестатистическая лаборатория использует сотни пробирок каждую неделю, подтверждая ее статус как самого важного расходного материала в научно-исследовательской работе. Микропробирки для ПЦР исследований на сегодняшний день являются самыми востребованными в Европе, а главное доступными.
Лабораторная посуда из полипропилена отличается особенными физико-химическими свойствами. Оптимальный режим использования полипропилена характеризуется температурой 0-125°С. Позволяется стерилизации пробирок паром, химическими соединениями (этанол, формалин), газом этиленоксидом на протяжении 20-ти минут при температуре 121°С.
Полипропиленовые пробирки Эппендорфа характеризуются повышенной стойкостью реакции на воздействие разбавленных кислот (концентратов), альдегидов, щелочей, углеводородов алифатического происхождения. Сравнительно высокий показатель химической устойчивости наблюдается к углеводородам ароматического, галоидзамещенного типа, кетонам, эфирам.
Разновидности пробирок Эппендорф
Полипропиленовые пробирки-Эппендорфы изготавливаются в нескольких вариациях:
- коническая пробирка с захлопывающейся крышкой по 0,5 миллилитров;
- конические пробирки Эппендорфов по 1,5 миллилитров.
1962 - Компания Эппендорф разрабатывает маленький пластиковый контейнер для жидкости;
1963 - Запуск первой пробирки Эппендорф в производство;
1964 - Комплексное оснащение лаборатории для работы с микрообъемами;
1975 - Производство пробирки без крышки – для автоматизированных систем;
1979 - Производство пробирки с жесткой крышкой;
1988 - Производство пробирки с замком Safe-Lock;
1992 - Установлен стандарт высшей степени чистоты Biopur;
2000 - Стандарт чистоты PCR: производство в чистом помещении
2001 - Производство пробирки LidBac для выращивания бактериальных культур;
2004 - Производство пробирки LoBind, мало сорбирующей модекулы ДНК, РНК, белков, пептидов, вирусов;
Читайте также: