Рекомендуется выполнение теста 321 вирус гепатита с кач анализ что это

Обновлено: 27.03.2024

Определение РНК вируса гепатита С (ВГС) в сыворотке крови методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме реального времени.

Определяемый фрагмент – специфичный участок РНК вируса гепатита С. Выявляемые генотипы: 1а, 1b, 2a, 2b, 2c, 2i, 3, 4, 5a, 6 независимо от субтипа. Специфичность определения – 100%. Чувствительность определения – 60 МЕ/мл.

Согласно рекомендации ВОЗ, установление диагноза гепатита С возможно на основании троекратного обнаружения РНК ВГС в сыворотке крови больного при отсутствии других маркёров гепатита. В острую фазу гепатита С РНК вируса выявляют в крови уже через 1-2 недели после инфицирования, т. е. задолго до появления антител к гепатиту С.

Выявление РНК гепатита С в сыворотке крови используется в комплексной диагностике в дополнение к определению антител к вирусу гепатита С для подтверждения присутствия вируса в крови. Не входит в перечень обязательных исследований при госпитализации.

На результат исследования могут оказать влияние такие факторы, как наличие в образце веществ, влияющих на протекание ПЦР; присутствие в крови гепарина и его производных; высокий уровень криоглобулинов в крови.

Специальной подготовки к исследованию не требуется.С общими рекомендациями для подготовки к исследованиям можно ознакомиться здесь >>

  • Клинические признаки гепатита.
  • Профилактические скрининговые исследования (РНК вируса гепатита С - самый ранний маркёр при острой инфекции).
  • Обследования контактных лиц.
  • Диагностика гепатитов смешанной этиологии - выявление ведущего вируса.
  • Выявление стадии активной репликации вируса при хроническом состоянии.
  • Контроль эффективности проводимой терапии.
  • Цирроз печени.

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Обращаем внимание, что сроки выполнения ПЦР-исследований могут быть увеличены при проведении подтверждающих тестов.

Определение РНК вируса гепатита С (ВГС) в сыворотке крови методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме реального времени.

Определяемый фрагмент – специфичный участок РНК вируса гепатита С. Выявляемые генотипы: 1а, 1b, 2a, 2b, 2c, 2i, 3, 4, 5a, 6 независимо от субтипа. Специфичность определения – 100%. Чувствительность определения – 60 МЕ/мл.

Согласно рекомендации ВОЗ, установление диагноза гепатита С возможно на основании троекратного обнаружения РНК ВГС в сыворотке крови больного при отсутствии других маркёров гепатита. В острую фазу гепатита С РНК вируса выявляют в крови уже через 1-2 недели после инфицирования, т. е. задолго до появления антител к гепатиту С.

Выявление РНК гепатита С в сыворотке крови используется в комплексной диагностике в дополнение к определению антител к вирусу гепатита С для подтверждения присутствия вируса в крови. Не входит в перечень обязательных исследований при госпитализации.

На результат исследования могут оказать влияние такие факторы, как наличие в образце веществ, влияющих на протекание ПЦР; присутствие в крови гепарина и его производных; высокий уровень криоглобулинов в крови.

Специальной подготовки к исследованию не требуется.С общими рекомендациями для подготовки к исследованиям можно ознакомиться здесь >>

  • Клинические признаки гепатита.
  • Профилактические скрининговые исследования (РНК вируса гепатита С - самый ранний маркёр при острой инфекции).
  • Обследования контактных лиц.
  • Диагностика гепатитов смешанной этиологии - выявление ведущего вируса.
  • Выявление стадии активной репликации вируса при хроническом состоянии.
  • Контроль эффективности проводимой терапии.
  • Цирроз печени.

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Обращаем внимание, что сроки выполнения ПЦР-исследований могут быть увеличены при проведении подтверждающих тестов.

Гепатит С – распространенная патология печени, которая способна привести к серьезным последствиям. Чтобы обнаружить заболевание, используются передовые методы диагностики, например, тест 321 на вирус гепатита С. Нужно помнить, что предварительное ознакомление с процедурой и подготовка к сдаче теста увеличат шансы на точный результат.

Показания к назначению

Различают две формы гепатита С: острую и хроническую, при этом заболевание ярко выражено только во время острой стадии. Развитие хронической формы недуга начинается с ослабления симптомов, мучивших пациента до этого. Кажется, что болезнь отступила, так как хроническая стадия редко имеет явную симптоматику. Иногда встречаются следующие приглушенные признаки:

  • желтушность кожи и белков глаз;
  • позывы к рвоте, отсутствие аппетита;
  • спазмы и тяжесть в области живота;
  • осветление каловых масс и потемнение мочи;
  • снижение иммунитета, постоянная усталость.

Если запустить гепатит С до хронической стадии и не заметить его ранее, то болезнь может повлечь серьезные последствия. По этой причине необходимо вовремя распознать этот вирусный недуг с помощью лабораторных исследований.

Существует несколько методов диагностики гепатита С, которые стали доступны в большинстве больниц. Однако если подозрения инфекциониста или гепатолога пали на вирус HVC, то пациенту будет назначено комплексное обследование для проверки всех систем организма. Тем не менее подавляющая часть анализов связана с забором крови из вены и исследованием полученного биоматериала на антитела.

К таким методам диагностики гепатита С относятся:

Данные методы, кроме биопсии, являются обязательными для каждого пациента, который может оказаться носителем вируса гепатита С. Биопсия же используется в случае противоречивости прочих анализов или при трудностях установления причины заболевания. Кроме этого, метод нужен для подтверждения или опровержения подозрений по поводу рака печени.

Нужна ли подготовка

Перед любым анализом биоматериала лучше подготовиться, чтобы результат получился максимально правдоподобным. Для исследования методом ПЦР могут брать слюну, мочу и мазок уретры, но для нахождения возбудителя гепатита используется кровь.

Выполнения следующих рекомендаций достаточно для подготовки перед сдачей анализа ПЦР:

  • За полторы недели до процедуры нужно отказаться от медикаментов сильного действия, иначе результаты анализа будут искажены. Разумеется, отказ от лекарств должен быть обговорен с лечащим врачом.
  • Отменяются внутривенные инъекции Гепарина и прочих средств, которые снижают свертываемость крови. При невозможности прекращения приема препаратов по жизненным показаниям уведомляется специалисту. Он назначит другие лекарственные средства, которые не повлияют на результат исследования.
  • Кушать перед сдачей крови не нужно за 8 часов, так как пища меняет биохимический состав крови. Допустимо выпить немного воды.
  • За 2 суток до анализа нельзя пить алкоголь и кушать копченые, жирные и соленые блюда.
  • Перед сдачей крови не нужно заниматься в спортзале и выполнять физически тяжелую работу. Также не рекомендуются физиотерапевтические процедуры.

Изредка применяется провокация: специальное снижение иммунитета на короткое время. Это позволяет увеличить количество патогенных микроорганизмов и усилить воспалительный процесс. Анализ берут через 1–3 дня после проведения провокации. Однако нужно отметить, что она практически не применяется для выявления возбудителя гепатита С, но получила большее распространение для определения бактериальных инфекций.

На результат влияет и пациент, и врач. При недостаточной подготовке и игнорировании правил проведения исследования анализ дает неверный результат. Также и неправильная транспортировка проб крови может привести к попаданию вируса со стороны.

Как проводится

Основной инструмент для проведения теста – реактор, в качестве которого используется термоциклер или амплификатор. Суть состоит в повторении одного и того же цикла, состоящего из 3 шагов:

  • Денатурация. Вследствие нагрева биоматериала ДНК расщепляется на 2 цепочки.
  • Охлаждение. Лаборант добавляет праймеры, предназначенные для идентификации участков ДНК и связывания с ними.
  • Элонгация. На данном этапе вирусный ДНК достраивается, за счет чего образуется его копия.

В итоге получается ряд репликаций фрагмента патогенного ДНК. Таким образом, в биоматериале выявляется присутствие вируса, после чего его сравнивают с образцами патогенов для определения вида гепатита.

Качественный ПЦР анализ – это первый этап, а основную массу информации врачи получают из количественного метода. Этот анализ позволяет отследить масштабы заболевания и эффективность терапии. Генотипирование – третья стадия, которая применяется для определения генотипа вируса.

Качественный анализ проводится сразу после идентификации антител. Впоследствии через 1, 3 и 6 месяцев нужно сдать еще один такой же тест. Это позволяет дать оценку течению заболевания. При хороших результатах терапии достаточно проводить по одному ПЦР в год для отслеживания рецидивов.

Тест 321, который основан на методике качественного анализа, признан ультрачувствительным способом диагностики по сравнению с прочими методами выявления вируса HVC. Тем не менее рекомендуется сдавать не один такой тест, чтобы исключить ошибки.

Расшифровка результатов

Тест 321 – необходимая процедура в ходе диагностики гепатита С. Чтобы не допустить ошибочных результатов, рекомендуется сдать анализ не один раз, кроме этого, важно подобрать хорошую клинику с квалифицированным медицинским персоналом. Внимание стоит обратить и на подготовку к сдаче анализа.

Антитела к вирусу гепатита С в сыворотке в норме отсутствуют
Суммарные антитела к вирусу гепатита С представляют собой антитела классов IgM и IgG, направленные к комплексу структурных и неструктурных белков вируса гепатита С.
Это исследование является скрининговым для выявления пациентов с ВСГ. Суммарные антитела к вирусу гепатита С можно выявить в первые 2 недели заболевания, и их присутствие свидетельствует о возможной инфицированности вирусом или перенесенной инфекции.

Однозначный ответ на основании результатов данного теста получить невозможно, так как тест определяет суммарные антитела IgM и IgG. Если это ранний период острого вирусного гепатита С, то об этом свидетельствуют антитела IgM, а если это период реконвалесценции или состояние после перенесенного ВГС, то на это указывают антитела IgG.

Оценка результатов исследования

Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие суммарных антител (JgM и JgG) к ВГС в сыворотке крови. Положительный результат – выявление суммарных антител (JgM и JgG) к ВГС свидетельствует о начальной стадии острого вирусного гепатита С, остром периоде инфекции, ранней стадии реконвалесценции, перенесенном вирусном гепатите С или хроническом вирусном гепатите С.

Однако обнаружение суммарных антител к ВГС недостаточно для постановки диагноза ВГС и требует подтверждения для исключения ложноположительного результата исследования. Поэтому при получении положительного результата скринингового исследования на суммарные антитела к ВГС в лаборатории проводится подтверждающий тест. Окончательный результат определения суммарных антител к ВГС выдается совместно с результатом подтверждающего теста.

Антитела к вирусу гепатита С JgM

Антитела к вирусу гепатита С JgM в сыворотке в норме отсутствуют. Наличие антител класса JgM к ВГС в крови пациента позволяет верифицировать активную инфекцию. Антитела класса JgM могут выявляться не только при остром ВГС, но и при хроническом гепатите С.

Антитела класса JgM к ВГС появляются в крови пациента спустя 2 недели после развития клинической картины острого вирусного гепатита С или обострения хронического гепатита и обычно исчезают спустя 4-6 месяцев. Снижение их уровня может свидетельствовать об эффективности лекарственной терапии.

Оценка результатов исследования

Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие антител JgM к ВГС в сыворотке крови. Положительный результат – выявление антител JgM к ВГС свидетельствует о начальной стадии острого вирусного гепатита С, остром периоде инфекции, ранней стадии реконвалесценции или активном хроническом вирусном гепатите С.

Обнаружение вируса гепатита С методом ПЦР (качественно)

Вирус гепатита С в крови в норме отсутствует.
В отличие от серологических методов диагностики ВГС, где обнаруживают антитела к ВГС, ПЦР позволяет выявить наличие непосредственно РНК ВГС в крови как качественно, так и количественно. Определяемым фрагментом в обоих служит консервативный участок генома гепатита С.

Обнаружение только антител к ВГС подтверждает лишь факт инфицирования пациента, но не позволяет судить об активности инфекционного процесса (о репликации вируса), о прогнозе заболевания. Кроме того, антитела к вирусу ГС обнаруживают как в крови больных острым и хроническим гепатитом,так и у тех пациентов, кто болел и выздоровел, а нередко антитела в крови появляются только спустя несколько месяцев после появления клинической картины заболевания, что затрудняет диагностику. Обнаружение вируса в крови методом ПЦР – более информативный метод диагностики.

Качественное выявление ВГС методом ПЦР в крови свидетельствует о виремии, позволяет судить о размножении вируса в организме и является одним из критериев эффективности противовирусной терапии.

Аналитическая чувствительность метода ПЦР составляет не менее 50-100 вирусных частиц в 5 мкл, прошедшей выделение ДНК-пробы, специфичность – 98%. Обнаружение РНК вируса гепатита С с помощью ПЦР на ранних этапах развития вирусной инфекции (возможно уже через 1-2 недели после заражения) на фоне полного отсутствия каких-либо серологических маркеров может служить самым ранним свидетельством инфицирования.

Однако изолированное выявление РНК вируса гепатита С на фоне полного отсутствия каких-либо других серологических маркеров не может полностью исключить ложноположительный результат ПЦР. В таких случаях требуется всесторонняя оценка клинических, биохимических и морфологических исследований и повторное неоднократное подтверждение наличия инфекции ПЦР.

Согласно рекомендациям ВОЗ для подтверждения диагноза вирусного гепатита С необходимо троекратное выявление РНК вируса гепатита С в крови пациента.

Обнаружение РНК вируса гепатита С методом ПЦР используется в целях:

Обнаружение вируса гепатита С методом ПЦР (количественно)

Количественный метод определения содержания РНК вируса гепатита С в крови дает важную информацию об интенсивности развития заболевания, об эффективности лечения и о развитии резистентности к антивирусным препаратам. Аналитическая чувствительность метода составляет от 5.102 копий/мл вирусных частиц в сыворотке крови, специфичность – 98%.

Уровень виремии оценивают следующим образом: при содержании РНК ВГС от 10^2 до 10^4 копий/мл – низкий; от 10^5 до 10^7 копий/мл – средний и выше 10^8 копий /мл – высокий.

Количественное определение содержания РНК ВГС в сыворотке крови методом ПЦР имеет важное значение для прогноза эффективности лечения интерфероном-альфа. Показано, что наиболее благоприятный прогноз заболевания и наибольшую вероятность положительного ответа на противовирусную терапию имеют лица с низким уровнем виремии. При эффективном лечении уровень виремии снижается.

Генотипирование вируса гепатита С - определение генотипа

Метод ПЦР позволяет не только выявить РНК ВГС в крови, но и установить его генотип. Наиболее важное значение для клинической практики имеют 5 субтипов ВГС – 1а, 1b, 2а, 2b и 3а. В нашей стране наиболее часто встречается субтип 1b, далее идут 3а, 1а, 2а.

Определение генотипа (субтипа) вируса имеет важное значение для прогноза течения ВГС и подбора пациентов с хроническим ВГС к проведению лечения интерфероном-альфа и рибавирином.

При инфицировании пациента субтипом 1b хронический ВГС развивается примерно в 90% случаев, при наличии субтипов 2а и 3а – в 33-50%. У пациентов с субтипом 1b заболевание протекает в более тяжелой форме и часто заканчивается развитием цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы. При инфицировании субтипом 3а у больных более выражен стеатоз, поражение желчевыводящих путей, активность АЛТ и менее выражены фиброзные изменения в печени, чем у пациентов с субтипом 1b.

Показаниями к лечению хронического ВГС интерфероном–альфа являются:

При лечении интерфероном-альфа больных вирусным гепатитом С с субтипом 1b эффективность терапии отмечается в среднем в 18% случаев, у инфицированных другими субтипами – в 55%. Использование комбинированной схемы лечения (интерферон-альфа + рибавирин) повышает эффективность терапии. Стойкий ответ наблюдается у 28% больных с субтипом 1b и у 66% - с другими субтипами ВГС.

Читайте также: