Тест на вирус чумы
Обновлено: 27.03.2024
Экспресс-тест для выявления специфических антигенов вируса чумы плотоядных.
ОПИСАНИЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ
Чума плотоядных — острая контагиозная вирусная болезнь, проявляющаяся лихорадкой, воспалением слизистой оболочки глаз, дыхательного и пищеварительного тракта, пневмонией, экзантемой и признаками поражения центральной нервной системы.
К вирусу чумы плотоядных восприимчивы многие виды отряда хищных животных: собаки, волки, шакалы, гиены, лисицы, песцы, еноты, хорьки, норки, ласки, куницы, горностаи, выдры, барсуки. Соболи сравнительно устойчивы, и в годы распространения чумы среди лисиц, песцов и норок они не заболевали. Очень чувствительны к вирусу чумы еноты и тхорзофретки (гибрид белого африканского и лесного хорьков), признанные в настоящее время лабораторными животными для изучения чумы плотоядных.
ИНСТРУКЦИЯ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ
Использование набора реагентов для иммунохроматографического выявления специфических антигенов вируса чумы плотоядных:
Материал для исследования.
· К вирусу восприимчивы практически все представители Carnivorae (в том числе собаки, хорьки, енотовые и крупные кошачьи).
· Оптимальный материал для исследования – выделения из глаз, менее предпочтительны назальный секрет, мочевой осадок и спинномозговая жидкость.
· Время проведения теста играет решающую роль. Обнаружение вируса возможно через 7-10 дней после инфицирования.
· Образцы следует тестировать, по возможности, немедленно. При необходимости возможно хранение в течение 4 часов при комнатной температуре (+15°С +25°С).
Процедура проведения анализа.
1. С помощью зонд-тампона соберите образец и внесите в пробирку с раствором для экстракции.
2. Вращая тампон в пробирке, дайте образцу перейти в раствор.
3. Извлеките тест-устройство из упаковки и поместите на хорошо освещённую горизонтальную поверхность.
5. Прочитайте результат через 5 – 10 минут. По истечении 10 минут результаты считывать не следует.
Чтение результатов.
(*) Ошибка. Видна только Т-линия, либо не видно ни одной линии. Нарушены условия хранения или проведения теста. Проверьте срок годности набора, повторите тест заново, строго следуя инструкции.
Важные замечания.
· При интерпретации результатов теста должны учитываться все имеющиеся анамнестические и клинические данные
· Локализация вируса сильно зависит от иммунного статуса животного.
· При слабом иммунном ответе вирус обнаруживается во всех эпителиальных тканях, тогда как в случае адекватного иммунного ответа обнаружить вирус зачастую удаётся только в ЦНС.
· Причинами ложноотрицательного результата могут быть неправильное время взятия образца (вирус начинает выделяться во внешнюю среду в среднем на 7-10 день после проникновения в организм) и его количество (мало вирусных частиц в образце).
Особые указания.
• Не используйте повторно компоненты набора.
• Не смешивайте компоненты наборов разных серий.
• Не используйте набор по истечении срока годности.
• Только для ветеринарии.
• Набор хранится при температуре +2°С+30 °С.
• Если набор хранился в холодильнике, то перед применением его следует поместить на 20-30 минут в комнатную температуру.
Синонимы: Мазок из носо- и ротоглотки для определения антигена SARS-CoV-2; Выявление антигена SARS-CoV-2 в мазках носоглотки или ротоглотки (качественно); Качественное определение антигена коронавируса SARS-CoV-2 в мазках со слизистой оболочки рото-/носоглотки.
Краткая характеристика вируса SARS-CoV-2
SARS-CoV-2 (severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 − тяжелого острого респираторного синдрома коронавирус 2) – официальное наименование вируса, вызвавшего эпидемию COVID-19.
COVID-19 (coronavirus disease 2019 − коронавирусная болезнь 2019) – название болезни, которую индуцирует новый вид коронавируса.
Источником передачи инфекции SARS-CoV-2 является, в основном, больной человек, в том числе находящийся в инкубационном периоде заболевания, составляющем от 2 до 14 (в среднем 5-7) дней. Клинические проявления могут быть неспецифичными симптомами ОРВИ (чаще – повышение температуры, сухой кашель, затруднение дыхания). Дополнительные эпидемиологические признаки − подтвержденный либо вероятный контакт с больными COVID-19, а также проявления в виде пневмонии с характерными изменениями в легких по данным компьютерной томографии (КТ), свидетельствуют о высокой вероятности COVID-19.
С какой целью используют исследование антигена вируса SARS-CoV-2
Как и исследование вирусной РНК методами ПЦР, определение антигена SARS-CoV-2 в мазках со слизистых оболочек носо- или ротоглотки методами иммуноанализа наиболее информативно в первые 1-5 дней от начала клинических проявлений инфекции (реже до 10 дней). На более поздних сроках инфекции (после 1-2 недель от начала клинических проявлений) становится информативным исследование крови для выявления специфических антител к SARS-CoV-2.
Для оценки аналитической специфичности проводились анализы на образцах, полученных у пациентов с положительными результатами анализов на наличие патогенных агентов, вызывающих острые респираторные вирусные инфекции (ОРВИ) у людей, методом ПЦР в реальном времени.
Исследованы положительные образцы, содержащие вирус гриппа типа А, вирус гриппа типа В, метапневмовирус, респираторно-синцитиальный, риновирус, вирус парагриппа, аденовирус и бокавирус. Кроме того, были исследованы патогены бактериальной природы: Mycoplasma pneumoniae, Chlamydophila pneumoniae, Streptococcus pneumoniae.
Результаты анализов, проведенных с использованием набора реагентов, свидетельствуют об отсутствии перекрестных реакций. Интерференция не наблюдалась при исследовании образцов, содержащих интерферирующие вещества в указанных концентрациях: присутствие муцина (до 5% по объему) или цельной крови (до 5% по объему) в мазках из носоглотки и/или ротоглотки не влияют на результат анализа.
Чувствительность метода, применяемого в исследовании на Антиген SARS-CoV-2 в мазке из рото- или носоглотки, качественный
Что может повлиять на результат исследования антигена вируса SARS-CoV-2
Характеристики исследования во многом зависят от качества взятия биоматериала: соблюдения правил, указанных в инструкции, для получения мазка со слизистой нужной локализации, обеспечения сохранности аналита при хранении и доставке в лабораторию, исключения вероятности внешнего загрязнения.
Тест на одновременное выявление антигена вируса чумы+парвовируса собак в одном образце состоит из тест-кассеты, пипетки, буферного раствора и осушителя.
Определение антигена чумы.
Взятая проба (выделения из носа, секрет глаз, слюна или сыворотка крови) помещается в буферный раствор, перемешивается, далее пипеткой наносится последовательно по 4 капли в каждое специальное отверстие в кассете с надписью CDV. Через 5-10 минут следует оценить результат. Спустя более чем 10 минут результат теста является недействительным. При обнаружении полосок в контрольной и тестовой зонах одновременно или только в контрольной зоне, результат следует считать достоверным.
При обнаружении полоски только в тестовой зоне или отсутствии полосок в тестовой и контрольной зонах, измерение необходимо провести заново, используя новую кассету.
Определение антигена парвовируса.
Взятая тампоном проба (фекалии собаки) помещается в буферный раствор, перемешивается, далее пипеткой наносится последовательно 3 капли в специальное отверстие в кассете с надписью CPV Ag. Через 5-10 минут следует оценить результат. Спустя более чем 10 минут результат теста является недействительным. При обнаружении полосок в контрольной и тестовой зонах одновременно или только в контрольной зоне, результат следует считать достоверным.
При обнаружении полосок в контрольной и тестовой зонах одновременно или только в контрольной зоне, результат следует считать достоверным.
При обнаружении полоски только в тестовой зоне или отсутствия полосок в тестовой и контрольной зонах, измерение необходимо провести заново, используя новую кассету.
Температура хранения тест-кассеты 2-30 градусов.
Тест выдает качественный результат (наличие или отсутствие антигена собачьей чумы+парвовируса). Результат проведения теста следует рассматривать в совокупности с другими клиническими данными для постановки окончательного диагноза. Для более точного определения результата рекомендуется применять другие методы (ПЦР).
Чума – это высокозаразное заболевание, которое проявляется в виде острой пневмонии или в виде поражения лимфатических узлов, сопровождающегося лихорадкой.
Возбудитель заболевания – чумная палочка.
Первично чума поражает грызунов (крыс, мышей, барсуков, белок и др.). Заражение человека происходит через укусы блох, инфицированных от больных грызунов. От человека к человеку заболевание передается чаще всего при вспышках легочной чумы воздушно-капельным путем.
На протяжении нескольких тысячелетий люди страдали от эпидемий чумы, уносящих огромное количество жизней. На данный момент она встречается очень редко, в основном в развивающихся странах.
Лечение состоит в приеме антибиотиков. Без лечения высок риск смерти больного.
Синонимы русские
Синонимы английские
Симптомы
Симптомы чумы зависят от ее формы.
Бубонная чума проявляется обычно спустя 2-5 дней после заражения:
- резким повышением температуры до 40-41 °C, ознобом и головной болью;
- бубонами – болезненными, увеличенными лимфатическими узлами в паховой, подмышечной области, в области шеи, которые окружены зоной отека; примерно на второй неделе заболевания они могут нагноиться;
- мышечными болями, сильным истощением, слабостью, болями в животе, диареей.
Септическая чума возникает при заражении крови чумной палочкой. Общие симптомы сходны с проявлениями бубонной чумы, однако сами бубоны отсутствуют.
При легочной чуме через 2-3 дня после заражения появляются быстро прогрессирующие симптомы:
- высокая температура тела, слабость, головная боль;
- кашель с кровавой или гнойной мокротой; , затруднение дыхания;
- тошнота и рвота.
Общая информация о заболевании
Чума – это высокозаразное заболевание, которое проявляется поражением легких или лимфатических узлов и сопровождается лихорадкой.
Возбудитель заболевания – чумная палочка.
Люди страдали от эпидемий чумы на протяжении нескольких тысячелетий, раньше погибало до 100 % жителей зараженных мест. На данный момент она встречается редко, как правило, в развивающихся странах.
Изначально чума поражает грызунов (крыс, мышей, кроликов, бурундуков, барсуков, белок, землероек и др.). Человек инфицируется через укусы блох, хозяином которых до этого было зараженное чумой животное.
Кроме того, заразиться можно от укусов и царапин кошек, при разделке тушек животных, воздушно-капельным путем от человека при эпидемиях легочной чумы, от животного путем вдыхания зараженной воздушной взвеси.
Попав с укусом блох в организм, бактерии мигрируют в близлежащие лимфатические узлы и размножаются внутри клеток. Так пораженные лимфоузлы превращаются в бубоны. Затем происходит разрушение структуры и отмирание тканей лимфатических узлов. Без лечения инфекция может распространиться на другие органы.
Выделяются три наиболее распространенных формы чумы.
- Бубонная чума – наиболее распространенная форма. Поражаются лимфатические узлы, чаще всего один. При адекватном лечении смертность от бубонной чумы составляет около 20 %. Больной не заразен для окружающих.
- Септическая чума – менее распространенная форма. Происходит заражение крови больного. Бубоны не образуются. При полноценном лечении летальность среди больных составляет примерно 25 %.
- Легочная чума является редкой формой заболевания, при которой поражаются легкие. При оказании больным медицинской помощи смертность от легочной чумы достигает 50 %.
Чума может приводить к следующим осложнениям:
- менингиту – воспалению оболочек головного и спинного мозга;
- гангрене (сгустки крови в кровеносных сосудах пальцев, образующиеся при чуме, могут нарушить приток крови к ним и привести к отмиранию конечностей);
- септическому шоку – состоянию, угрожающему жизни и характеризующемуся крайне низким кровяным давлением;
- смерти (без лечения смертность от чумы составляет примерно 60 %).
Кто в группе риска?
Риск заболеть чумой достаточно низок. В группу риска входят:
- лица, контактировавшие с больным животным или человеком;
- те, кого часто кусают блохи;
- проживающие в местности, где наблюдались вспышки чумы;
- люди, чья пища может быть доступна грызунам;
- жители местности с плохими санитарными условиями и высокой численностью крыс;
- контактирующие с чумной палочкой по роду занятий (ученые, доктора, ветеринары).
Диагностика
При подозрении на чуму незамедлительно проводится взятие материала из пораженных органов и крови, выполняется рентгенография грудной клетки. Лечение начинается до получения результатов исследований.
- Исследование под микроскопом мазков из мокроты, крови, пораженных лимфоузлов. С помощью специального окрашивания мазка визуально выявляют бактерии, вызывающие чуму (иерсиния пестис). Для подтверждения диагноза достаточно обнаружить хотя бы одного возбудителя.
- Посев крови, мокроты, жидкости из легких, из лимфоузлов на чуму. Исследование предполагает помещение отделяемого в питательную среду, где бактерии начинают размножаться и становятся доступными визуальной оценке. Рост чумной палочки в питательной среде происходит медленно.
- Исследование мазка методом иммунофлюоресценции. В ходе данного исследования в полученный материал добавляются меченые антитела (молекулы, специфически связывающиеся с чумной палочкой). Под воздействием ультрафиолетового излучения комплекс из бактерий, "скленных" с антителами, дает характерное зеленоватое свечение, что говорит о присутствии чумной палочки во взятом материале. Метод используется для экспресс-диагностики чумы, обладая относительно высокой специфичностью.
- Определение антител к возбудителю чумы. При заражении организма чумой иммунная системы больного начинает вырабатывать специфические молекулы для борьбы с инфекцией. Количество (титр) антител значительно повышается в течение 2-3 недель после инфицирования и снижается в течение нескольких месяцев или лет.
- Определение ДНК чумной палочки методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Метод основан на выявлении генетического материала чумной палочки в исследуемом материале.
- Выявление генетического материала чумной палочки в исследуемом материале.
В целях оценки общего состояния больного и состояния жизненно важных органов выполняются следующие анализы.
-
. Для чумы характерно значительное повышение уровня лейкоцитов. Уровень тромбоцитов бывает снижен. и аспартатаминотрансфераза (АСТ). Уровень этих печеночных ферментов может повышаться у значительного количества пациентов с чумой, что отражает вовлечение в патологический процесс печени
Другие методы исследования
- Рентгенография органов грудной клетки. При чуме на рентгене могут обнаруживаться затемнения в обоих легких.
Лечение
При подозрении на чуму проводится безотлагательное лечение. Пациенты с бубонной формой подвергаются стандартной изоляции. Легочная чума требует помещения больного в специальный изолятор с фильтрацией воздуха. Лечебные и диагностические мероприятия проводятся врачами в специальных противочумных костюмах.
Применяются высокие дозы антибиотиков. Также проводится симптоматическое лечение. Больной изолируется, проводится лекарственная терапия мощными антибиотиками (стрептомицином, гентамицином, доксициклином и др.).
Исследование предназначено для количественного определения антигена нуклеокапсидного белка (N) вируса SARS-CoV-2 в образце биоматериала. Тест является эффективной альтернативой ПЦР-тестированию и предназначен для диагностики COVID-19 у людей любого возраста без признаков ОРВИ. Анализ позволяет выявить специфический вирусный белок – нуклеокапсидный антиген SARS‑CoV‑2 в мазке биоматериала. Актуален для тех, кто беспокоится о своем здоровье и хочет быстро узнать свой COVID‑статус. Выполняется на полностью автоматизированном высокотехнологичном оборудовании и имеет очень высокую чувствительность и специфичность.
Результат теста выдается в количественном формате, позволяющем дополнительно к COVID-статусу определить вирусную нагрузку.
Синонимы русские
Антиген N вируса SARS-CoV-2, быстрый тест на ковид, антигенная детекция вируса SARS-CoV-2, определение антигена N вируса SARS-CoV-2, диагностика коронавирусной инфекции (COVID-19).
Синонимы английские
SARS-CoV-2 Antigen, SARS-CoV-2 Ag, Ag-RDTs (diagnostics tests) for COVID-19.
Метод исследования
Иммунохемилюминесцентный анализ (ИХЛА).
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Мазок из ротоглотки и носоглотки.
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Минимум за 1 час до взятия мазков из ротоглотки (зева) не употреблять пищу, не пить, не чистить зубы, не полоскать рот/горло, не жевать жевательную резинку, не курить.
- За 3-4 часа до взятия мазков из носа/носоглотки не закапывать капли/спреи и не промывать нос.
- Исследование не выполняется анонимно, необходимо предъявить паспорт.
Общая информация об исследовании
Коронавирусная инфекция (COVID-19) — это острая респираторная инфекция, вызываемая РНК-содержащим вирусом SARS-Cov-2.
Коронавирус SARS-CoV-2 появился в 2019 году, при этом первоначальный источник распространения вируса по-прежнему не установлен. Коронавирус SARS-Cov-2 представляет собой одноцепочечный РНК-содержащий вирус, относится к линии Beta-CoV B семейства Coronaviridae и имеет II группу патогенности. Вирион коронавируса состоит из 4 структурных белков - спайкового (S), оболочки (E), мембранного (M), нуклеокапсидного (N), - 16 неструктурных белков репликативно-транскрипционного комплекса и 5-10 регуляторных белков. Spike протеины (S белки) — это белки, образующие "шипы" на поверхности вирусной частицы, которые связываются с клетками человека и обеспечивают проникновение вируса. Именно к S-белку вырабатываются нейтрализующие антитела при проникновении коронавируса в организм, а также после вакцинации. Нуклеокапсидный белок (N-белок) - основной РНК-связывающий белок, который образует вирусный капсид (оболочку ядра вируса), играет важную роль в механизме развития COVID-19 и провоцирует интенсивный иммунный ответ.
Коронавирус SARS-CoV-2 попадает в организм человека через клетки-мишени, имеющие на своей поверхности рецепторы ангиотензинпревращающего фермента II типа (ACE2). Такие рецепторы располагаются на клетках эпителия дыхательного тракта, почек, пищевода, мочевого пузыря, подвздошной кишки, сердца, ЦНС. Однако основной и быстродостижимой мишенью являются альвеолярные клетки II типа (AT2) легких, что определяет развитие пневмоний.
Основной источник COVID-19 - больной человек, в том числе находящийся в инкубационном периоде заболевания, и бессимптомный носитель SARS-CoV-2. Наибольшую опасность для окружающих представляет больной человек в последние два дня инкубационного периода и в первые дни болезни. Инкубационный период COVID-19 составляет до 14 дней, в среднем симптомы появляются на 5-6-е сутки.
Ведущий путь передачи SARS-CoV-2 - воздушно-капельный, реализуется при кашле, чихании и разговоре на близком (менее 2 метров) расстоянии. Контактный путь передачи реализуется во время рукопожатий и при других видах непосредственного контакта с инфицированным человеком, а также через поверхности и предметы, контаминированные вирусом. Возможен фекально-оральный механизм передачи вируса.
Большинство людей с COVID-19 переносят заболевание в легкой и неосложненной форме, однако примерно у 14 % зараженных развивается тяжелая форма болезни, требующая госпитализации и кислородной поддержки. Около 5 % пациентов нуждается в лечении в условиях палаты интенсивной терапии. При тяжелом течении заболевание может быть осложнено острым респираторным дистресс-синдромом, сепсисом, полиорганной недостаточностью (острое поражение почек и сердца). Распространение SARS-CoV-2 из системного кровотока или через пластинку решетчатой кости может привести к поражению головного мозга. Изменение обоняния (гипосмия) на ранней стадии заболевания может свидетельствовать о поражении ЦНС. Пожилые пациенты и пациенты с сопутствующими состояниями (сердечно-сосудистые заболевания, сахарный диабет и др.) имеют повышенный риск развития тяжелой формы COVID-19 и летального исхода. Молодые люди и дети часто могут переносить инфекцию бессимптомно, что способствует распространению COVID-19 среди населения.
К основным симптомам COVID-19 относятся:
- повышение температуры тела;
- кашель (сухой или с небольшим количеством мокроты);
- одышка;
- ощущение сдавленности в грудной клетке;
- выраженная утомляемость;
- утрата обоняния или вкусовых ощущений;
- заложенность носа;
- покраснение глаз;
- головная боль;
- боль в мышцах или суставах.
Реже заболевание проявляется диареей, тошнотой и рвотой.
Лабораторная диагностика коронавирусной инфекции проводится с использованием молекулярно-генетических и серологических методов, которые позволяют выявить генетический материал вируса, специфические антитела к SARS-CoV-2 и антигенные структуры вируса. Согласно рекомендациям ВОЗ и управлению по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (Food and Drug Administration, США), количественное определение антигена нуклеокапсидного белка (N) вируса SARS-CoV-2 методом иммунохемилюминесцентного анализа является высокоэффективным тестом для диагностики коронавирусной инфекции. Показатели диагностической чувствительности и специфичности данного метода не уступают таковым при проведении ПЦР-анализа на РНК вируса SARS-CoV-2. Антигенная детекция вируса SARS-CoV-2 позволяет в сжатые сроки подтвердить/исключить наличие коронавирусной инфекции.
Тест на антиген может определить наличие COVID-19, если вирусная нагрузка высокая, т.е. в носоглотке находятся сотни тысяч и миллионы копий вируса, что чаще бывает в самом начале заболевания или в период пика коронавирусной болезни. При средней или низкой вирусной нагрузке результат теста может быть ложноотрицательным.
Положительный результат теста на антиген, если имеются симптомы заболевания, свидетельствует о том, что человек болен COVID-19. Однако если результат положительный, а симптомов нет, необходимо в течение ближайших двух дней выполнить ПЦР-анализ для подтверждения результатов.
Отрицательный результат теста на антиген не исключает инфицирования COVID-19:
- в странах/местах с высоким процентом заболеваемости;
- при семейном контакте с инфицированными;
- при клинической картине ОРВИ, пневмонии, тяжелом остром респираторном синдроме.
Тест на антиген не рекомендуется лицам с подозрением на COVID-19 без клинических проявлений, у которых количество вируса в носоглотке может быть небольшим и тест не сможет его выявить.
Читайте также: