Вакцина вирусного энтерита гусей инструкция

Обновлено: 23.04.2024

Вирусный энтерит (гепатит, гепатоэнтерит, гепатоэнтерит-асцит, чума) гусей (болезнь Держи) — Enteritis viralis anserculorum-острая контагиозная болезнь гусят и мускусных уток сопровождающаяся поражением желудочно – кишечного тракта, печени, сердца, почек, головного мозга, прогрессирующим исхуданием и высокой смертностью.

Историческая справка.

Вирусный энтерит гусей встречается во всех странах мира, а также в России. Вспышки вирусного энтерита гусей существенно повлияли на развитие промышленного гусеводства, но в настоящее время благодаря изысканиям специфических средств защиты данное заболевание можно отнести к контролируемым инфекциям.

Этиология. Возбудитель энтерита гусят относится к семейству Parvoviridae. Это мелкий ДНК содержащий вирус, имеющий кубический тип симметрии, диаметр вириона 20нм, размножающийся в ядре клеток. Термостабилен, при 4°С сохраняется от 2 до 5 лет, выдерживает нагревание при 60° С 1час. В условиях термостата не теряет активности до 6 суток. Гемагглютинирующими свойствами не обладает. Культивируется на эмбрионах гусей и мускусных уток, легко адаптируется к культуре клеток фибробластов и почек, полученных из этих эмбрионов. Устойчив к действию эфира, хлороформа, 0,25% раствора трипсина, 0,1% раствора дезоксихлората натрия, низкого рН среды, к антибиотикам и к нагреванию до 60°С в течении 15 минут. В замороженном состоянии сохраняется до года, в лиофильновысушенном в течение пяти лет в патологическом материале, хранящемся в 40% растворе глицерина при температуре 2-4°С до двух лет.

Эпизоотологические данные. К вирусу восприимчивы только гусята разных пород и мускусные утки. Наиболее чувствителен молодняк с 6- до 14-20 дневного возраста. У взрослых гусей болезнь протекает бессимптомно. Переболевшая птица в течение 3-4 лет остается вирусносителем. Основной путь распространения возбудителя трансовариальный. Вирус также легко передается контактным путем, алиментарно и аэрогенно. Распространению болезни способствуют : плохие санитарно-гигиенические условия содержания, повышенная плотность молодняка на выращивании. В небольших хозяйствах заболевание регистрируется в марте – апреле, в крупных хозяйствах с непрерывным циклом производства возникновение болезни не связано с сезоном года. Переболевшая птица остается вирусносителем в течение нескольких лет.

Патогенез. Патогенез болезни изучен недостаточно. Вирус в организм утят попадает перорально с кормом, водой, где прикрепляется к криптам слизистой оболочки кишечника, вызывая их отслоение и лизис, в дальнейшем проникает в кровь и разносится по всем органам.

Вторичное поражение может локализоваться в лимфоидных органах. При поражении кишечника происходит слущивание эпителия слизистой оболочки. Максимальное выделение вируса с пометом больных гусят происходит с 3-го по 7-й день, после заражения, затем постепенно уменьшается.

Клинические признаки. Инкубационный период продолжается от 2 до 6 дней и более. При сверхостром течении болезни птица гибнет в течение нескольких часов без проявления клинических признаков. Некоторые гусята переболевают бессимптомно.

Переболевшие гусята отстают в росте и развитии от своих сверстников, у некоторых гусят отвисает живот, помет становится жидким, водянистым, с фиброзными пленками, иногда с примесью крови.

При подостром течении болезни наиболее характерно заметное снижение роста молодняка в первые 2-3 недели жизни (на 50-80 %).

Скученность, отказ от корма, выпадение пуха и пера, дерматиты. Часто наблюдают конъюнктивиты, истечение из носа, отвисание живота. Погибает 20-30% поголовья. Оставшиеся в живых ослаблены, медленно набирают массу тела, легко подвержены влиянию неблагоприятных условий.

При хроническом течении болезни к 7-й неделе жизни у 20-30% птицы наблюдают энтериты, почти прекращается рост. Смертность составляет 2-3%, в осложненных случаях 10-12%.

Патологоанатомические изменения. У гусят 4-6 дневного возраста воспалительные изменения в кишечнике выражены сильнее, и в большинстве случаев обнаруживают катарально — фибринозный энтерит. Одновременно с поражением кишечника отмечается катаральный гастрит. Железистый желудок растянут, наполнен полужидким содержимым с примесью слизи, слизистая оболочка его гиперемирована, набухшая, покрыта слизью. Сердечная мышца дряблая, бледно-серого или серо-красного цвета. Печень набухшая, желтого, реже бледно-серого цвета, в отдельных участках гиперемирована, под капсулой встречаются пятнистые кровоизлияния, на разрезе рисунок долек сглажен. Другие органы без видимых изменений.

У гусят в возрасте от 6 дней до 2 недель патологоанатомические изменения более выражены и характеризуются: истощением, выделениями из носовых отверстий и ротовой полости серозной или серозно-слизистой жидкости. У истощенных гусят подкожная клетчатка и скелетная мускулатура суховатая. Иногда находят студневидные инфильтраты желтого, бледно-розового цвета в подкожной клетчатке в области грудобрюшной полости и бедренных мышц, такого же характера инфильтраты обнаруживают в межмышечной клетчатке. Кровеносные сосуды подкожной клетчатки, брыжейки, кишечника расширены, кровенаполнены. У отдельных павших гусят в грудобрюшной полости обнаруживают серозный транссудат. Селезенка уменьшена, реже несколько увеличена, бледно-красного цвета, иногда слабо гиперемирована, набухшая, вишнево-красного цвета. Печень очагово или диффузно окрашена в желтый цвет, в отдельных случаях с точечными и мелкопятнистыми кровоизлияниями под капсулой; иногда с признаками застойной гиперемии. Желчный пузырь, обычно, растянут, переполнен желчью. Почки бледно-серого цвета, увеличены, иногда гиперемированы. В легких явления гиперемии и отека. Полость железистого желудка заполнена слизью, слизистая оболочка набухшая, гиперемирована. В мышечном желудке содержится корм с кисловатым запахом. При гистоисследованиях отмечают признаки серозно — катарального или фибринозного воспаления слизистой тонких кишок. В печени-очаговый или диффузный некроз, в легких — очаговая гиперемия, отек. Характерные некрозы в поджелудочной железе, селезенке, признаки интерстициального нефрита.

Диагноз. Предварительный диагноз подтверждают лабораторными методами. Для исследования берут часть кишечника, провентрикула, паренхематозные органы. Диагноз ставят комплексно на основе анализа эпизоотологических, клинических данных, патологоанатомических изменении и результатов лабораторных (вирусологических и гистологических) исследований с выделением вируса и его идентификацией.

Вирус выделяют из проб патматериала, заражая гусиные эмбрионы, титруют его на гусиных фибробластах, индентифицируют при помощи РН, РИГА и ИФА.

Серологические методы исследования (РИГА, РН и другие) применяют для диагностики и определения напряженности иммунитета после вакцинации.

Дифференциальный диагноз. Вирусный энтерит гусят необходимо дифференцировать от сальмонеллеза, колибактериоза, пастереллеза, инфлюэнцы, аспергиллеза, отравления. В этих случаях при бактериологическом исследовании выделяют соответствующие возбудители (S.Typhimurium, E. Coli, Pasteurella multocida, B. septicaemiae anserum exudativa).

Отравление исключают на основании химико-токсикологических исследований внутренних органов, содержимого желудочно-кишечного тракта павших гусят и проб корма.

Иммунитет и средства специфической профилактики. После переболевания у утят вырабатывается нестерильный иммунитет. В сыворотках реконвалисцентов находят вируснейтрализующие антитела в титрах 10-12 log². Иммунизированные гусыни передают потомству пассивный иммунитет. Титр материнских антител достигает 4-6 log² и защищает гусят от заражения в первые 3-4 недели жизни. С лечебной и профилактической целью 1-5 –дневным гусятам вводят сыворотку или кровь гусей-реконвалисцентов двухкратно с интервалом 2-3 дня подкожно в области шеи по 0,5-2 мл. В последнее время для этого предложены гипериммунные сыворотки.

Специфическую профилактику птицы проводят аттенуированными культуральными вирусвакцинами. Вакцинируют гусят в суточном возрасте, взрослых гусей вакцинируют перед началом яйцекладки.

Лечение. Применяют сыворотку реконвалисцентов, с целью подавления секундарной микрофлоры применяют антибиотики и нитрофурановые препараты.

Профилактика. Важное значение придают охране хозяйств от заноса вируса и соблюдению ветеринарно-зоогигиенических требований. Для профилактики заболевания не разрешается вывозить инкубационные яйца из хозяйств, неблагополучных по вирусному энтериту. Гусынь необходимо содержать в сухих, хорошо вентилируемых помещениях на глубокой несменяемой подстилке, которую наслаивают по мере загрязнения.

Размещают не более 3-4 гусей на 1 м² площади пола. В обычных условиях гуси начинают массовую яйцекладку в конце февраля. В зимнее время на водоемах делают проруби и огораживают их металлической сеткой на глубину до 1м.

В теплое время года при температуре воздуха не ниже 15-20° С гусятам с 7-10 дневного возраста разрешен сухой выгул, на водный выгул их выпускают в хорошую погоду с 15-20 дневного возраста при температуре не ниже 15°С.

С первого дня жизни гусятам дают полноценную мучную смесь в виде рассыпчатой влажной мешанки с добавлением 10- 15% общей массы свежей зелени, количество которой к месячному возрасту доводят до 100г.

При содержании большими группами на ограниченных водных выгулах лучшие результаты дает кормление через каждые 3-4 часа. С 1 месячного возраста гусят кормят 4 раза в день.

Каждую новую партию гусят помещают в продезинфицированное помещение с подстилкой из опилок, торфа, соломы. Температура воздуха в первый день жизни возле источника обогрева должна быть не ниже 28 °С.

Меры борьбы. При подтверждении диагноза на хозяйство Постановлением Губернатора области накладываются ограничения.

По условиям ограничений запрещают:

перемещение птицы внутри хозяйства;
ввоз и вывоз гусиных яиц для инкубации и гусей всех возрастов для выращивания;
вывоз кормов, оборудования и инвентаря.

По условиям ограничений разрешается:

вывоз гусей на птицекомбинаты для убоя. Мясо после потрошения тушек реализуют на общих основаниях;
инкубацию гусиных яиц для выращивания гусят проводят внутри данного хозяйства;

Яйца подлежат обязательной дезинфекции.

В неблагополучном хозяйстве проводят следующие мероприятия:

клинически больных вирусным энтеритом гусят убивают и утилизируют или уничтожают, а птиц без клинических признаков болезни выращивают до 2-2,5-месячного возраста и сдают для убоя на мясо;
гусят последующих выводов 1-2 суточного возраста вплоть до объявления хозяйства благополучными обрабатывают сывороткой или цитратной кровью реконвалисцентов путем подкожного введения в нижнюю треть шеи в дозе 0,5 мл двукратно с суточным интервалом;
проводят тщательную механическую очистку и дезинфекцию производственной территории; помет и подстилку подвергают биотермическому обеззараживанию; птичники содержат постоянно чистыми и не допускают скученного содержания в них птицы;
все отходы инкубации утилизируют или уничтожают;

Дезинфекцию проводят в порядке, предусмотренном действующей Инструкцией по проведению ветеринарной дезинфекции, дезинвазии, дезинсекции и дератизации.

Для влажной дезинфекции применяют 3%-ный раствор формальдегида с экспозицией 3 часа. Аэрозольную дезинфекцию проводят формалином из расчета 20мл/м³ или раствором гипохлорита натрия с 5% активного хлора из расчета 50мл/м³ при экспозиции 12 часов.

Ограничения хозяйства (отделения, фермы) снимают через 60 дней после последнего случая заболевания птицы вирусным энтеритом и проведения заключительной дезинфекции.

По внешнему виду вирусвакцина представляет собой сухую однородную пористую массу бледно-розового или бледно-желтого цвета, легко растворимую в воде.

Форма выпуска

Вирусвакцина расфасована по 20. 30. 40. 50. 60, 90, 100, 120, 150, 180, 200, 250, 300, 350, 400. 450, 500 прививных доз (объем: 3; 4; 5; 6; 9 см 3 ) в стеклянные флаконы соответствующей вместимости. Флаконы вакуумированы или заполнены инертным газом, герметично укупорены резиновыми пробками. укрепленными алюминиевыми колпачками.

Биологические свойства

Порядок применения

Вирусвакцина предназначена для профилактики вирусного энтерита гусей в неблагополучных по данной болезни гусеводческих хозяйствах (фермах, фермерских и подсобных хозяйствах). Запрещается прививать клинически больных и/или ослабленных птиц. Противопоказанием для проведения вакцинации является наличие в хозяйстве остропротекающих инфекционных болезней птиц.
Вакцинации подлежат гуси родительского стада за 40-50 суток до начала сезона яйцекладки, двукратно с интервалом 20 суток.
Гусят, полученных от невакцинированных птиц родительского стада, вакцинируют в суточном возрасте и ревакцинируют перед яйцекладкой.
Гусят, полученных от вакцинированных птиц родительского стада, вакцинируют в 10-15- суточном возрасте и ревакцинируют перед яйцекладкой.
Вирусвакцину вводят внутримышечно (в область бедра) взрослым гусям в объеме 1,0 см 3 , а гусятам - 0,5 см 3 .
При применении вирусвакцины в соответствии с инструкцией побочных явлений не наблюдается.

Сроки ожидания

Ограничений в использовании мяса и яиц от птиц, привитых вирусвакциной ВНИВИП против вирусного энтерита гусей нет.

Условия хранения

Вирусвакцину хранят и транспортируют в сухом темном месте при температуре 2 - 6°С. Допускается хранение при любой температуре ниже 0°С.
Срок годности вирусвакцины 12 месяцев с даты выпуска при соблюдении хранения и транспортирования. По истечении срока годности вирусвакцина к применению не пригодна.

Состав:
Вакцина сухая культуральная против вирусного энтерита гусей.
Каждая доза вакцины содержит: живой вирус вирусного энтерита гусей, штамп BBS-99, наполнитель.

Фармацевтическая форма:
лиофилизат

Иммунобиологические свойства:
Вакцина индуцирует создание иммунитета у птицы против вирусного энтерита гусей. У суточных гусят, полученных от невакцинированного родительского стада, иммунитет формируется на 10-14 сутки после прививки и сохраняется до появления возрастной устойчивости (до 25-суточного возраста). У взрослых гусей протективный титр гуморальных антител появляется через 21 день после прививки и сохраняется в течение 3,5-4 месяцев продуктивного периода, что позволяет получать устойчивых к вирусному энтериту гусят.

Вид животных:
гуси.

Показания к применению:
вакцину применяют с профилактической целью в неблагополучных по энтерита гусей хозяйствах для иммунизации клинически здоровой птицы. При использовании родительского стада гусей более 4-х месяцев продуктивного периода, проводят ревакцинацию через 3-3,5 месяца после последней прививки.

Противопоказания:
Запрещено вакцинировать больных гусей или гусят.

Способ применения и дозы:
гусей вакцинируют внутримышечно по следующей схеме:

Возрастная группа	Доза
Возрастная группа	Вакцинация	Ревакцинация
Гусята от не вакцинированного родительского стада	в суточном возрасте однократно 0,5 см 3	перед началом яйценоскости двукратно по 1 см 3
Гусята от вакцинированного родительского стада	14-21 суточном возрасте единовременно по 0,5 см 3 (в конце племенного сезона прививки гусят проводят в суточном возрасте 7-14)	перед началом яйценоскости двукратно по 1 см 3
Взрослые гуси родительских стад	перед началом яйценоскости дважды по 1 см 3 , первый раз за 40-50 дней до начала яйценоскости, повторно - через 21 день	по необходимости в период яйценоскости однократно по 1 см 3

Перед применением во флакон с вакциной вносят стерильный физиологический раствор, или стерильную дистиллированную воду в объеме, достаточном для растворения лиофилизата. Содержимое флакона переносят в большую ёмкость, флакон дважды ополаскивают физраствором и сливают в ёмкость с вакциной. Вакцины добавляют физраствором до указанного на флаконе объема (из расчета 1 см 3 на одну дозу).

Побочные эффекты:
не выявлены.

Меры предосторожности:
При нарушении целостности флакона, отсутствия этикетки, изменении цвета таблетки, наличия в флаконе посторонних включений, плесени вакцины бракуют. Запрещается применять препарат после окончания срока годности или при несоблюдении температурного режима хранения. Нагрев вакцины выше +30°С не допускается.

Взаимодействие с другими средствами:
Период вакцинации не применять антибиотики и сульфаниламиды.

Особые указания при яйценоскости:
При необходимости допускается прививки в период яйценоскости. При применении в период яйцекладки возможно кратковременное снижение яйценоскости, для предупреждения чего применяют антистрессовые препараты. Яйца, полученные от родительского стада, привитого в период яйценоскости, использовать для инкубации не ранее чем через 2 недели после прививки.

Период введения:
продукты птицеводства используют без ограничений.

Срок годности:
12 месяцев.

Условия хранения и транспортировки:
Хранить в сухом темном месте при температуре от +2 до +8°С и относительной влажности не более 80-85%. Не применять после истечения срока годности.

Упаковка:
стеклянные флаконы ёмкостью 10-20 см 3 , закрытые резиновыми пробками и обкатанные алюминиевыми колпачками.

Название и местонахождение владельца регистрационного удостоверения:
Государственная исследовательская станция птицеводства НААН Украины, ул. Центральная 20, с. Борки, Змиевской район, Харьковская область, Украина, 63421.

Вирусный энтерит гусей (ВЭГ) - острая высококонтагиозная болезнь гусей и муксусных уток, характеризующаяся поражением желудочно-кишечного тракта, печени и высокой летальностью. В естественных условиях болеют гусята и муксусные утята в возрасте от 1 до 30 дней. Заражение в основном происходит алиментарным и аэрогенным путем, возможна трансовариальная передача вируса. Переболевшая птица может оставаться вирусоносителем в течение нескольких лет. Болезнь широко распространена в мире и вызывает гибель 30—90% заболевших гусят. У реконвалесцентов ВН-антитела обнаруживали в течение 80 мес. В желтке яиц, снесенных гусями через 68—72 мес. после переболевания, также обнаружены антитела. Вылупившиеся из них гусята в течение двух недель оставались резистентными к заражению вирулентным штаммом вируса.

по применению набора для выявления антител к вирусу энтерита в сыворотках крови гусей иммуноферментным методом.

(Организация – производитель: ГНУ ВНИВИП Россельхозакадемии г. С-Петербург, Ломоносов)

ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ

1. Набор для выявления антител к вирусу энтерита в сыворотках крови гусей иммуноферментным методом. 2. В состав набора входят иммуноспецифические и неспецифические компоненты:

Иммуноспецифические компоненты:

К.1 – положительная сыворотка крови гусей, содержащая антитела к вирусу энтерита гусей (положительный контроль), лиофилизированная, объем 1,0 см³ – 1 ампула (флакон); К.2 – нормальная сыворотка крови гусей, не содержащая антител к вирусу энтерита гусей (отрицательный контроль), лиофилизированная, объем 1,0 см³ - 1 ампула (флакон); К.3 – полистироловые 96-луночные планшеты с адсорбированным в лунках очищенным инактивированным антигеном вируса энтерита гусей (ВЭГ) – 2 шт.; К.4 – антивидовой (кроличий) иммунопероксидазный конъюгат против IgG гусей, лиофилизированный, объем 0,2 см³ – 1 ампула (флакон);

Неспецифические компоненты:

К.5–буферный раствор (концентрированный) для разведения контрольных и испытуемых сывороток, антивидового конъюгата и межэтапных промывок, объем 5,0 см³ – 1 флакон; К.6 – набор солей для приготовления фосфатно- цитратного буферного раствора, таблетка, 0,63 г, - 2 шт.; К.7 – детергент твин-20, объем 5,0 см³ – 1 флакон; К.8 – субстрат – ортофенилендиамин (ОФД), таблетка, 5 мг , 2 шт.; К.9 – гидроперит, таблетка, 1,5 г –1 шт.; К.10 – натрий хлористый, кристаллический порошок, 22,0 г – 1флакон. 3. Иммуноспецифические компоненты расфасованы в стеклянные ампулы (флаконы). Ампулы запаивают, а флаконы укупоривают пробками, укрепленными алюминевыми колпачками. По внешнему виду иммуноспецифические компоненты представляют собой:

сыворотки -сухую пористую массу белого цвета;
антивидовой иммунопероксидазный конъюгат- сухую пористую массу белого или кремового цвета;

При добавлении буферного раствора содержимое флаконов с лиофилизированными компонентами должно полностью раствориться в течение 1-3 мин. Неспецифические компоненты расфасованы в стеклянные флаконы, укупоренные резиновыми пробками,укрепленными алюминевыми колпачками. По внешнему виду неспецифические компоненты представляют собой:

буферный раствор (концентрированный) для разведения контрольных и испытуемых сывороток, антивидового конъюгата и межэтапных промывок - прозрачную бесцветную жидкость;
набор солей для приготовления фосфатно-цитратного буферного раствора - таблетку белого цвета;
субстрат-ортофенилендиамин (ОФД) - таблетку белого или кремового цвета;
детергент твин-20 - прозрачную жидкость светло-желтого цвета;
натрий хлористый- порошок белого цвета;
гидроперит - таблетку белого цвета.

II. ПРИНЦИП РЕАКЦИИ

7. Сущность непрямого варианта метода иммуноферментного анализа заключается в выявлении комплекса, образованного антигеном, сорбированным в лунках полистироливого планшета и специфическими антителами, содержащимися в пробах сывороток крови гусей. Специфический комплекс выявляется антивидовыми IgG, ковалентно связанными с ферментом – пероксидазой хрена, который при взаимодействии с субстратом (Н2О2) в составе хромогенной смеси (ОФД) вызывает ее окрашивание. Интенсивность окрашивания прямо пропорциональна концентрации специфических антител в исследуемой пробе.

III. ПОРЯДОК ПРИМЕНЕНИЯ

8. Набор предназначен для:

серологического контроля за распространением ВЭГ в популяциях гусей;
оценки эффективности иммунизации поголовья против данного заболевания;
ретроспективной диагностики ВЭГ у гусей по приросту уровня специфических антител.

Для исследования из гусеводческих хозяйств в лабораторию доставляют не менее 25 проб (по 0,2-0,3 см3) сыворотки крови гусей без признаков гемолиза и бактериальной контаминации. До постановки ИФА сыворотки можно хранить в морозильной камере бытового холодильникана (минус 20ºС) в течение 50-60 суток, при температуре 4ºС - более 3-х суток.

Для постановки ИФА используют:

пипетки одно- и восьмиканальные автоматические переменного объема до 0,02 см³ , до 0,2 см³ и до 1,0 см³ со сменными наконечниками;
посуду мерную лабораторную;
пробирки для разведения проб;
дистиллированную или деионизованную воду (рН= 6,0-6,2);
термостат с поддержанием температуры (37,0±0,5)ºС;
холодильник бытовой;
рН-метр;
спектрофотометр (ридер) с вертикальным лучом при длине волны 492 нм;

10. Подготовка иммуноспецифических компонентов.

10.1 К содержимому ампулы (флакона) с лиофилизированной положительной сывороткой крови гусей (К.1) добавить 1,0 см³ раствора № 1. Готовят перед использованием. Подготовленную сыворотку рекомендуется хранить при температуре минус 10ºС и ниже не более 15 сут. В течение срока годности размораживание допускается один раз. 10.2 К содержимому ампулы (флакона) с лиофилизированной нормальной сывороткой крови гусей (К.2) добавить 1,0 см³ раствора № 1. Готовят перед использованием. Подготовленную сыворотку рекомендуется хранить при температуре минус 10ºС и ниже не более 15 сут. В течение срока годности размораживание допускается один раз.

10.3 Рабочий раствор конъюгата

К содержимому ампулы (флакона) с антивидовым конъюгатом (К.4) добавить 21,0 см³ раствора № 1. Раствор конъюгата рекомендуется хранить при температуре минус 10ºС и ниже не более 15 сут. В течение срока годности размораживание допускается один раз. 10.4. Разведение испытуемых и контрольных сывороток крови. 10.4.1 При постановке ИФА в одном разведении все испытуемые и контрольные сыворотки (положительную и нормальную) развести 1:400 раствором №1. Для контрольных к 0,3 см3 раствора №1 добавить 0,1 см3 сыворотки крови гусей, для испытуемых к 1,0 см3 раствора №1 добавить 0,0025 см3 сыворотки крови гусей и трижды пипетировать, используя для каждой пробы новый наконечник. 10.4.2 При постановке ИФА методом раститровки контрольные пробы сывороток (положительная и нормальная), приготовленные по п.п. 10.1 и 10.2, разведены 1:100. Готовы к использованию. Все испытуемые пробы сывороток крови гусей развести 1:100 раствором №1. Для чего к 1,0 см3 раствора №1 добавить 0,01 см3 сыворотки крови и трижды пипетировать, используя для каждой пробы новый наконечник.

11. Постановка реакции

Расчет S/P-отношения:

Полученные значения S/P позволяют дифференцировать испытуемые сыворотки на положительные, отрицательные и сомнительные. Пробы сывороток крови со значениями S/P ниже или равными 0,2 считаются отрицательными, 0,21 - 0,23 – сомнительными, больше или равными 0,24 – положительными. Расчет титра сыворотки по одному разведению (1:400) проводят по формуле: Lg TИТР = 1,41 (lg S/P) + 3,56 Пример:

Отношение S/P	=0,22
Lg ТИТР	= 1,41(lg 0,22)+3,56
Lg ТИТР	= 1,41 (-0,658) + 3,56
Lg ТИТР	= 2,63
ТИТР	= Antilog 2,63
ТИТР	= 427

При постановке ИФА методом раститровки титром испытуемой сыворотки считается последнее ее разведение, в котором оптическая плотность превышает таковую отрицательного контроля в 2,0-2,1 раза. При постановке ИФА в одном разведении (инструментальном методе учета) пробы сывороток крови, содержащие антитела в титре 1:400 и ниже считаются отрицательными, 1:401-1:499 – сомнительными, а 1:500 и выше – положительными. 13. Интерпретация результатов По результатам ИФА определяют напряженность иммунитета в партии привитых гусей путем деления количества положительных проб на общее количество исследованных сывороток и выражают в процентах. Птицу считают иммунной к вирусному энтериту гусей (ВЭГ) при напряженности иммунитета 80 и более процентов (т.е. если в 80 и более процентах исследованных проб сывороток крови титр антител 1:800 и выше). Обнаружение антител у невакцинированной птицы свидетельствует о возможной циркуляции в стаде полевого вируса ВЭГ. В таких случаях через 21-30 суток проводят повторное исследование проб сывороток крови, полученных от этих же птиц. Нарастание титров и (или) увеличение количества птиц с высоким уровнем антител при отсутствии клинических и патологоанатомических признаков ВЭГ не является основанием для объявления в хозяйстве неблагополучия по данному заболеванию, но предусматривает установления за птицей тщательного наблюдения, проведения систематических серологических и вирусологических исследований.

IV. МЕРЫ ЛИЧНОЙ ПРОФИЛАКТИКИ

14. При работе с набором следует избегать нарушения целостности стеклянных ампул (флаконов) с компонентами набора. 15. При нарушении целостности флаконов и порезах рук стеклом первую помощь оказывают согласно общепринятым методикам. 16. Работу с химическими компонентами набора следует проводить очень осторожно. При попадании их на кожу или слизистые оболочки рекомендуется промывать пораженное место большим количеством водопроводной воды. 17. В связи с высокой токсичностью ОФД и серной кислоты приготовление субстратно-индикаторной смеси и стоп-раствора проводить в резиновых перчатках, избегая попадания на кожу и слизистые оболочки. 18. Запрещается прием пищи и воды, курение в помещении, где проводятся работы с компонентами набора. 19. Препарат следует хранить в местах недоступных для детей.

Разработана технология изготовления инактивированной вакцины против вирусного энтерита гусей (ВЭГ) и проведено сравнительное испытание двух схем вакцинации взрослых гусей инактивированной вакциной против вирусного энтерита Комбинированная иммунизация живой и инактивированной вакцинами родительского стада за 45 дней перед началом яйценоскости обеспечивает получение от них устойчивого к заболеванию потомства в течение 6 месяцев продуктивного периода. Лучшие результаты сероконверсии были получены при вакцинации живой и инактивированной вакцинами по сравнению с однократной иммунизацией инактивированной вакциной. Ключевые слова. Вирусный энтерит гусей, инактивированная вакцина, вакцинация, титры антител, гусята.

Вирусный энтерит гусей (ВЭГ, болезнь Держи, Enteritis viralis anserculorum) – острая контагиозная болезнь молодняка гусей и мускусных уток, которая характеризуется поражением печени, легких, катарально-геморрагическим воспалением кишечника и высокой летальностью гусят первых дней жизни [2].

Наиболее эффективным методом борьбы с вирусным энтеритом является вакцинация родительских стад, которая позволяет получать иммунный молодняк в течение продуктивного периода [5, 12].

В странах с развитым гусеводством созданы живые и инактивированные вакцины. Такие биопрепараты есть в Польше, Франции, Дании, Японии, России [3, 4, 6, 7, 8, 9, 10, 11].

Несмотря на то, что во многих странах мира разработаны средства профилактики, вопрос контроля парвовирусной инфекции остается актуальным [12].

В Украине для профилактики вирусного энтерита до 1999 года применялись живые вакцины российского производства. В связи с усложнением эпизоотической ситуации по этому заболеванию с 1999 по 2001 гг. в Институте птицеводства НААНУ разработана живая вакцина против вирусного энтерита гусей из отечественного штамма BBS-99. После проведения испытаний в лабораторных и производственных условиях в 2003 году была утверждена научно-техническая документация ТУ У 24.4.00497169.694-2003. Вакцина прошла широкую производственную проверку в 38 хозяйствах 16 областей Украины на поголовье 1200 тыс. гусей. Двухразовая вакцинация живыми вакцинами обеспечивает получение устойчивых к вирусному энтериту гусят 3 – 3,5 месяца продуктивного периода [1]. Во многих хозяйствах разных форм собственности продуктивный период продолжается 5 – 6 месяцев, поэтому гусята последних выводов не защищены от инфекции. Известно, что более продолжительный иммунитет создают инактивированные вакцины. Разработка инактивированной вакцины позволит решить проблему получения устойчивого к вирусному энтериту молодняка гусей в течение 5 – 6 месяцев продуктивного периода родительского стада.

Ц ЕЛЬ ИСЛЕДОВАНИЙ
Разработка технологии изготовления инактивированной вакцины и схемы иммунизации родительского стада гусей.

Для изготовления инактивированной вакцины использовали культуральную вируссодержащую жидкость, инактивированную 0,2% этиленимином при температуре + 370С в течение 24 часов. Инактивированный антиген объединяли с адъювантом в соотношении 30х70, согласно разработанному регламенту.

Контроль полноты инактивации вируса осуществляли путем проведения пяти последовательных пассажей на культуре клеток фибробластов эмбрионов гусей.

Контроль стерильности проводили согласно ГОСТ 4483-2005. Контроль безвредности - на клинически здоровых интактных гусятах суточного возраста, которым вводили по 1,0 см3 препарата внутримышечно.

Для определения эффективности инактивированной вакцины взрослых гусей иммунизировали перед началом продуктивного периода 2-мя разными схемами (табл.1). Уровень антител исследовали в реакции нейтрализации.

Табл. 1.Схемы вакцинации родительского стада гусей

За 45 суток до начала продуктивного периода

живая вакцина в дозе 105 ТЦД50 в
1 см3 внутримышечно

инактивированная вакцина в дозе
1 см3 внутримышечно

Через 14-21 суток после первой вакцинации

инактивированная вакцина в дозе
1 см3 внутримышечно

Гусят, полученных от вакцинированных родителей в течение продуктивного периода, инфицировали контрольным штаммом в дозе 1000 ЛД50 в 1 см3 в возрасте 5, 10, 15, 20 и 25 суток для установления коррелятивной связи между уровнем антител и устойчивостью к инфицированию.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИСЛЕДОВАНИЙ
Изготовлено 3 лабораторных серии инактивированной вакцины против вирусного энтерита гусей, которые прошли проверку в лабораторных условиях.

Две группы гусей были вакцинированы согласно указанных выше схем, с использованием одного из лабораторных образцов.

Согласно результатам, приведенным в таблице 2, применение инактивированной вакцины в двух схемах вакцинации позволяло поддерживать защитные титры антител (АТ) на уровне 6 log2 в течение 6 месяцев. Однако гуси, привитые комбинированной схемой, имели уровень антител более чем на 3 log2 выше, в отличие от гусей, вакцинированных только инактивированной вакциной.

Табл. 2 Титры АТ у гусей, вакцинированных двумя схемами.

Читайте также: