Вирус эпидемической диареи свиней

Обновлено: 23.04.2024

Вирус эпидемической диареи свиней ( вирус PED или PEDV ) - это коронавирус, который поражает клетки, выстилающие тонкий кишечник свиньи , вызывая эпидемическую диарею свиней , состояние тяжелой диареи и обезвоживания . Старые свиньи в основном болеют и теряют вес после заражения, тогда как новорожденные поросята обычно умирают в течение пяти дней после заражения вирусом. PEDV не может передаваться людям и не загрязнять продукты питания человека.

Впервые он был обнаружен в Европе , но становится все более проблематичным в азиатских странах, таких как Корея , Китай , Япония , Филиппины и Таиланд . Он также распространился в Северную Америку: она была обнаружена в США 5 мая 2013 года в Индиане , [1] и в Канаде зимой 2014. В январе 2014, новый вариант штаммом PEDV с тремя удалениями, один вставка и несколько мутаций в области S (spike) 1 были идентифицированы в Огайо Лабораторией диагностики болезней животных Департамента сельского хозяйства Огайо. [2]

PEDV несет значительное экономическое бремя, учитывая, что он очень заразен, что приводит к значительной заболеваемости и смертности поросят. Показатели заболеваемости и смертности в вакцинированных стадах были ниже, чем в невакцинированных, что свидетельствует о появлении нового полевого штамма (ов) PEDV, против которого действующая вакцина, основанная на штамме CV777, была частично защитной. [3] Потребители, вероятно, почувствуют последствия вирусного заболевания в виде более высоких цен на продукты из свинины. [4]

СОДЕРЖАНИЕ

Байесовское исследование 138 геномов показало, что вирус имеет шесть подтипов. [5] Группы 1 и 2 возникли в Северной Америке, а группы 3–5 - из Азии. Скорость эволюции генома была оценена как 3,38 × 10 -4 замен / сайт / год, как и у других РНК-вирусов. Самый недавний общий предок существующих штаммов появился около 1943 года.

ПЭД - острое заболевание с инкубационным периодом 1-4 дня. Вирус вызывает диарею и рвоту, что приводит к сильному обезвоживанию. У новорожденных смертность от вирулентных штаммов может достигать 100%. Старые свиньи обычно выздоравливают через 7-10 дней. [6]

PED передается фекально-оральным путем, и инфекционная доза невысока. Поросята, предварительно отлученные от груди, выделяют большое количество вируса с фекалиями, что приводит к быстрому распространению и высокой смертности. Старые животные не выделяют с фекалиями столько вируса, сколько поросята. Он также может передаваться через зараженные фомиты. Исследование показало, что при аэрозольной форме вирусные частицы могут распространяться на расстояние до 10 миль от источника инфекции. [6]

Патологоанатомические исследования грудных животных включают содержимое пустого желудка с небольшим количеством молочного творога. Кишечник тонкостенный, расширенный, наполненный водянистым содержимым. Диагноз PED подтверждается с помощью ПЦР фекалий или кишечника пораженных животных или иммуногистохимии на фиксированных формалином тканях. [6]

    , из Центров по контролю за заболеваниями США , от 4 июня 2014 г. World Pork Expo , с 4 июня 2014 г. World Pork Expo , от 4 июня 2014 г. Всемирная выставка свиноводства. , составленный Национальным советом США по свинине Д-р Роджер Мэйн, Университет штата Айова, Ветеринарная диагностическая лаборатория, с Конгресса по свиноводству в Айове 2014 г., 22–23 января, Де-Мойн, Айова, США. Д-р Дарин Мэдсон, Университет штата Айова, Ветеринарная диагностическая лаборатория, из семинара по здоровью свиней 2013 г., 16–18 августа 2013 г.

Высшее систематика: Riboviria > Orthornavirae > Pisuviricota > Pisoniviricetes > Nidovirales > Cornidovirineae > Coronaviridae


Профилактика эпидемической (эпизоотической) диареи свиней заключается в обязательном серомониторинге импортного поголовья и спермы, ограничении ввоза кормов и продуктов убоя из неблагополучных по ЭДС хозяйств, соблюдении требований по кормлению животных и проведении дезинфекции, дератизации и дезинсекции.

Ключевые слова: эпидемическая (эпизоотическая) диарея свиней (ЭДС), трансмиссивный гастроэнтерит свиней (ТГС), вирус ЭДС, инфекционность и вирулентность вируса ЭДС, безмолозивные поросята, профилактика эпидемической диареи свиней

Prevention of porcine epidemic (epizootic) diarrhea in pigs includes obligatory serum monitoring of imported stock and sperm, restriction on imports of feed and slaughter products from the PED-hazardous farms, observance of the animal feeding requirements, and carrying out disinfection, deratization and desinsection.

Кeywords: porcine epidemic (epizootic) diarrhea (PED) transmissible gastroenteritis of swine (TGE) PED virus PED virus infectivity and virulence non-colostrum piglets prevention of porcine epidemic diarrhea

Владимир МАКСИМОВИЧ, доктор ветеринарных наук
Геннадий ДРЕМАЧ, кандидат ветеринарных наук
ВГАВМ

Для свиноводов многих стран мира африканская чума свиней (АЧС) сродни катастрофе, так как болезнь может проникать на сопредельные территории. В то же время в разных государствах регистрируют не менее опасное заболевание — эпидемическую (эпизоотическую) диарею свиней (ЭДС). Эффективной вакцины для специфической профилактики ЭДС и АЧС сегодня не существует.

Эпидемическая диарея свиней — высоко­контагиозная болезнь, характеризующаяся острым течением и сопровождающаяся диареей, рвотой и отсутствием аппетита.

Болеют свиньи всех пород и возрастных групп. На комплексе поражается почти 100% поголовья, при этом падеж составляет 50%. При инфицировании поросят в первые дни жизни летальность может достигать 100%. Переболевшие ЭДС поросята-отъемыши отстают в росте от здоровых сверстников на 14 дней. Потери живой массы к концу откорма доходят до 8 кг в пересчете на голову.

По клиническому проявлению, характеру патолого-анатомических изменений и эпизоотологическим особенностям ЭДС напоминает трансмиссивный гастроэнтерит свиней (ТГС), однако вирусы, вызывающие эти болезни, различаются в антигенном отношении. Поэтому ЭДС еще называют ТГС-подобной болезнью.

Эпидемическую диарею свиней относят к числу достаточно новых и малоизученных патологий. Впервые ее описали в 1971 г. в Великобритании. Вирусную природу ЭДС установили в 1989 г. Сегодня случаи заболевания свиней регистрируют в Китае, США и на Тайване, а также в странах Европейского Союза, за исключением Дании, Ирландии и Швеции.

В 2013 г. в штате Айова (США) эпидемическую диарею свиней вызвал высокопатогенный вирус, в результате чего погибло несколько миллионов поросят. В августе 2014 г. в Международное эпизоотическое бюро поступила информация о 12 новых вспышках ЭДС в Тайване.


Фото 1. Вирус эпидемической диареи свиней (фото сделано при помощи электронного микроскопа)

Возбудителя болезни относят к группе РНК-содержащих высокопатогенных коронавирусов (семейство Coronaviridae, род Alphacoronavirus). Вирусные частицы имеют сферическую форму, их диаметр варьирует в диапазоне от 95 до 190 нм (фото 1).

Вирус ЭДС агглютинирует эритроциты животных 12 видов и плохо культивируется на культурах клеток. Тем не менее культура клеток линии Verо оказалась пригодной для культивирования вируса ЭДС. Вирус ЭДС, адаптированный к размножению в культуре клеток, теряет инфекционность при температуре 60 °С в течение 30 минут. Различают вирусы двух типов: вирусы первого типа вызывают диарею у свиней на откорме и у взрослых свиней, а вирусы второго типа — только у поросят-сосунов.

Вирулентность вируса ЭДС может меняться. Об этом свидетельствует то, что болезнь поражает животных конкретной возрастной группы. Вирус чувствителен к фенолу и к дезинфектантам на основе хлора, йода и перекиси водорода. Данные об устойчивости вируса к факторам внешней среды отсутствуют.

Заболевают ЭДС, как правило, свиньи всех возрастных групп. При возникновении ЭДС в ранее благополучных по этой болезни хозяйствах летальность среди поросят в возрасте менее пяти недель достигает 100%, а в стационарно неблагополучных хозяйствах гибнут преимущественно взрослые особи, в частности свиньи на откорме. Человек и другие виды животных к ЭДС невосприимчивы.

Источником возбудителя инфекции служат больные и переболевшие эпидемической диареей свиньи. Например, в неблагополучных по ЭДС хозяйствах антиген возбудителя выявляли в 83,7% образцах фекалий от поросят, страдающих диареей (Pensaert M.B. et al., 1981). Выделение возбудителя во внешнюю среду происходит преимущественно с фекалиями.

На комплексы возбудитель попадает при ввозе племенного поголовья, при закупке контаминированного вирусом ЭДС корма, заносится транс­портом и персоналом. От больных животных передается здоровым через сперму, питьевую воду и предметы ухода. В организм свиней вирус проникает алиментарным путем. Доказана возможность передачи возбудителя аэрогенным путем. Например, геном вируса обнаруживали на расстоянии 16 км по ходу движения воздуха от неблагополучных по ЭДС ферм.

Механическими переносчиками вируса могут быть собаки, кошки и другие животные. Резервуаром возбудителя инфекции являются грызуны, обитающие на свиноводческих комплексах.

Очень часто (в 60% случаев) ЭДС протекает в виде смешанных инфекций. Так, при диарее в 40% случаев выявляли вирус ЭДС, в 9% случаев — вирус ЭДС и энтеротоксигенную кишечную палочку, в 12% случаев — вирус ЭДС и эймерии.

Иногда после завоза животных-вирусоносителей на откормочных площадках происходят вспышки ЭДС. Их продолжительность составляет 3–4 недели. Наиболее часто болезнь регистрируют в осенне-зимний период.

При первичном заносе высоковирулентного возбудителя в благополучное по ЭДС хозяйство болезнь протекает остро и типично. Все свиньи заболевают в течение 5–14 дней. В неблагополучных по ЭДС хозяйствах у переболевших этой болезнью животных между уровнем колострального (молозивного) иммунитета, уровнем активного стадного иммунитета и вирусом устанавливается баланс и заболевание не проявляется (такой уровень иммунной защиты, при котором вирус не оказывает патогенного действия на организм). Нарушить равновесие и тем самым спровоцировать развитие клинической формы патологии или осложнить ее течение могут такие факторы, как погрешности в кормлении, дефицит витаминов и незаменимых аминокислот в рационе, резкие колебания температуры, несоблюдение требований к параметрам микроклимата, стресс и т. д. По этой причине многие авторы относят ЭДС к факторным болезням. Обычно эпидемическая диарея свиней протекает в виде энзоотии, охватывает от 50 до 100% поголовья, при этом летальность достигает 50–100%.


Фото 2. Атрофия и укорочение ворсинок и микроворсинок в тонком и толстом отделах кишечника при ЭДС (фото сделано при помощи электронного микроскопа)

В организме животных вирус ЭДС поражает эпителиальные клетки, покрывающие ворсинки и выстилающие крипты тонкого и толстого кишечника (ободочной кишки). В энтероцитах, особенно в энтероцитах тощей кишки, происходят дегенеративные изменения и в последующем развивается атрофия и укорочение ворсинок и микроворсинок (фото 2).

Вследствие потери микроворсинок уменьшается поглощающая поверхность тонкого кишечника, что в совокупности с функциональными расстройствами и слущиванием значительного количества энтероцитов приводит к снижению всасывания питательных веществ и к развитию диареи. Гибель поросят наступает вследствие ацидоза и дегидратации.

При инфицировании ЭДС поросят в возрасте 1–2 недель инкубационный период составляет 24–36 часов, при инфицировании более взрослых животных — 2–3 дня. У новорожденных поросят болезнь протекает очень тяжело. Установлено, что ее клинические проявления могут существенно различаться в разных хозяйствах и даже на одном предприятии, когда часть пометов поражается ЭДС, в то время как в других диагностируют лишь диарею в легкой форме.

У больных ЭДС поросят рвота быстро сменяется профузным поносом (каловые массы жидкие, водянистые, зеленовато-коричневого цвета, без кровяных сгустков), продолжающимся в течение 3–4 дней. Гибель наступает в результате обезвоживания. Такую картину наблюдают в пометах свиноматок, у которых во время опороса была диарея. В этом случае летальность составляет 50%, а при заражении поросят в первые дни жизни доходит до 100%.

У молодняка в возрасте 7–14 дней болезнь протекает в более легкой форме. Доля животных с рвотой и диареей не превышает 20–30%, они активные, подвижные, с хорошим аппетитом.

У отъемышей и свиней на откорме, инфицированных ЭДС, рвота и диарея продолжаются 4–6 дней. При этом поросята угнетены, у них отмечают анорексию. Взрослые особи, заболевшие ЭДС, обычно выздоравливают, но в дальнейшем значительно отстают в росте и развитии от здоровых сверстников. У свиноматок ЭДС сопровождается диареей в течение 7 дней, рвотой, угнетением и анорексией. У выздоровевших маток отмечают агалактию.

При вскрытии обнаруживают такие патологические изменения, как катаральный или катарально-геморрагический гастроэнтерит, некроз и изъязвление слизистой оболочки, серозное воспаление брыжеечных лимфоузлов, зернистая дистрофия печени, почек и сердца, обезвоживание, истощение и общая анемия.

При гистологическом исследовании выявляют изменения в виде дистрофии эпителия слизистой кишечника, поверхностного некроза эпителия кишечника и кишечных ворсинок.

В диагностическое учреждение направляют как живых поросят, так и пробы — пораженные участки тонкого и толстого кишечника вынужденно убитых свиней, свежие фекалии, взятые у больных животных, и кусочки паренхиматозных органов.

Основные методы лабораторной диагностики, позволяющие выявить вирус ЭДС, — это ПЦР (полимеразная цепная реакция) в режиме реального времени и ИФА (иммуноферментный анализ). Для определения антител к коронавирусу при эпидемической диарее свиней используют метод ИФА.

В сомнительных случаях проводят биопробу на чувствительных животных, например на безмолозивных поросятах. Им вводят свободный от бактерий фильтрат суспензии фекалий, взятый от больных животных. После выздоровления переболевших поросят полученные образцы исследуют в диагностическом учреждении методами ПЦР в режиме реального времени и ИФА.

Диагноз ЭДС считается установленным, если вирус выделен и идентифицирован, а также когда обнаружены антитела в сыворотке крови (в диагностических титрах) и когда получены положительные биопробы на безмолозивных поросятах.

При проведении дифференциальной диагностики поочередно исключают такие патологии, как трансмиссивный гастроэнтерит свиней, ротавирусная диарея, гастроэнтеритная форма энтеровирусной инфекции и эшерихиоз. ЭДС дифференцируют также от классической чумы свиней, лептоспироза и сальмонеллеза.

К сожалению, эффективных специфических средств лечения свиней, больных эпидемической диареей, сегодня нет. Для подавления секундарной бактериальной микрофлоры в воду или в корм вводят антибиотики (неомицин, фрамицетин, апрамицин, триметоприм, линкомицин или тиамулин), используют сульфаниламидные и нитрофурановые препараты, выпаивают раствор электролитов.

В сыворотке крови переболевших ЭДС животных обнаруживают специфические антитела (их титры составляют 1 : 40–1280). Доказано, что в организме лактирующих свиноматок, переболевших ЭДС, образуются иммуноглобулины класса А. Новорож­денные поросята получают IgА с молозивом, и у них формируется колостральный иммунитет. В некоторых странах для профилактики ЭДС фекалии больных свиней разносят по территории фермы. У заразившихся и естественно переболевших животных вырабатывается иммунитет.

Эпизоотическая диарея свиней (ЭДС) является высококонтагиозными вирусным заболеванием свиней, характеризующаяся изнурительной диареей и обезвоживанием организма. Заболевание поражает свиней всех возрастов, но наиболее чувствительными к вирусу являются новорожденные поросята до 2-недельного возраста, при этом смертность может колебаться в пределах 30 - 100%.

Клинические признаки

ЭДС с симптомами очень похожа на трансмиссивный гастроэнтерит свиней (ТГС). Но главным отличиям ЭДС является отсутствие рвоты и более низкая смертность новорожденных поросят, а также более тяжелое течение болезни у свиней в период откорма. При этом более медленное распространение болезни по сравнению с ТГС.

Распространение ЭДС

В Украине ЭДС диагностирована в 2015 году.

Вирусные гастроэнтериты свиней
Патологию желудочно-кишечного тракта свиней вызывают вирусы пяти семей: Coronaviridae, Reoviridae, Caliciviridae, Astroviridae и Adenoviridae.
Однако ведущая роль в этиологии массовых острых гастроэнтеритов свиней и особенно поросят в неонатальный период развития принадлежит коронавирусу. По экономическому ущербу, наносимому промышленном свиноводству, особое значение имеют 2 Коронавирусных гастроэнтерита: трансмиссивный гастроэнтерит свиней (ТГС) и эпизоотическая диарея свиней (ЭДС). Рассмотрим, в чем их различия.

Характеристика возбудителей ТГС и ЭДС
Вирус ТГС является более патогенным по сравнению с вирусом ЭДС. Он вызывает гибель 80-100% поросят до 10-дневного возраста. Более выраженная при этом патогенность вируса ТГС обусловлена более масштабным разрушением энтероцитов от основания к вершине ворсинок тонкого кишечника.
При этом инфицированные энтероциты разрушаются и отшелушиваются в просвет кишечника, ворсинки быстро атрофируются.
Таким образом в первые сутки после заражения у поросят резко нарушается пищеварение и всасывание, развивается диарея, следствием которой является тяжелая дегидратация организма. Потеря воды с фекалиями у поросят в первые дни после рождения достигает 150 мл в сутки.
Вирус ЭДС размножается в энтероцитам нижней части ворсинок и крипт (рис. 1 Б). Видимо, по этой причине вирус ЭДС вызывает менее интенсивную диарею и меньшую смертность по сравнению с вирусом ТГС, но по той же причине может длительно находиться в кишечнике животных.


Эпизоотологические данные
ЭДС в хозяйствах может протекать в двух формах: эпизоотической (острой) и энзоотической (хронической) формах.
Эпизоотическая форма ЭДС наблюдается при занесении вируса в хозяйство, где все или большинство животных чувствительны к нему. Заболевание характеризуется внезапной диареей у животных разного возраста и гибелью 30 - 100% поросят до 2-недельного возраста. Обычно вспышка болезни в хозяйстве продолжается 3-4 недели и затем прекращается после формирования иммунитета примерно у 80% животных.
Энзоотическая форма ЭДС обычно встречается в крупных свиноводческих хозяйствах, и она связана с персистенцией вируса и наличием чувствительных к вирусу поросят при непрерывных опоросах.

Клинические признаки
Инкубационный период ЭДС составляет примерно 48 часов, клинические признаки заболевания проявляются в течение 7-14 дней. Главным и часто единственным видимым клиническим признаком ЭДС является водянистая диарея.
На некоторых фермах заболевают свиньи всех возрастов, а заболеваемость приближается к 100%. ЭДС очень сходна с ТГС, за исключением более медленного распространения и немного ниже смертности новорожденных поросят. Поросята в возрасте до 1 недели могут погибнуть от дегидратации после 3-4-дневного диареи.
Смертность поросят в среднем составляет 50%, но может достигать 100%. Более старшие поросята выздоравливают через 1 неделю. После острой вспышки диарея у них может наблюдаться 2-3 недели после отлучения.
Поскольку клинические признаки ТГС и ЭДС похожи, для постановки правильного диагноза лучше делать лабораторные диагностические исследования.

Клиническая картина и патолого-анатомические изменения при ЭДС


ПРОФИЛАКТИКА И КОНТРОЛЬ
Борьба против ЭДС основана на общих превентивных мерах, подобных тем, как и при других опасных вирусных заболеваниях, например, АЧС.
Подсосные поросята, страдающие ЭДС, должны иметь свободный доступ к воде, чтобы уменьшить дегидратацию.
Откорм свиней рекомендуется приостановить.
Поскольку ЭДС не распространяется очень быстро, можно применять общесанитарные превентивные меры и на время задержать проникновение вируса в репродукторные свинарники с опоросами и новорожденными поросятами.
Задержка естественного заражения поросят к достижению более старшего возраста может значительно уменьшить заболеваемость и гибель свиней. Если вирус циркулирует в последовательных пометах подсосных поросят, можно попробовать прекратить его перманентную передачу путем перемещения свиней сразу после окончания подсосного периода в другое место не менее, чем на 4 недели. Одновременно с этим прибытие новых животных в хозяйство должно быть приостановлено.

Лактогенный иммунитет
На сегодняшний день это один из способов прекращения заболевания в хозяйстве.
Лактогенный иммунитет стимулирует целенаправленное скармливание супоросным свиноматкам фекалий больных ЭДС свиней или суспензии кишечника погибших от ЭДС поросят. Благодаря этому продолжительность вспышки заболевания в хозяйстве сокращается.
Однако при данном подходе напряженность иммунитета сильно варьирует в связи с неопределенным содержанием вируса ЭДС в фекалиях или суспензии кишечника. Данный подход имеет свои минусы - такие как потенциальная опасность распространения других инфекционных заболеваний, связанных с возможным содержанием в фекалиях других патогенов (вирус РРСС, цирковирус и др.).
 После сенсибилизации кишечника свиноматок вирусным антигеном образуются иммуноциты, продуцирующие антитела, которые мигрируют в молочную железу, где секретируют антитела в молозиво и молоко.
 Медиатором лактогенного иммунитета служит секреторный иммуноглобулин IgA, который нейтрализует вирус на поверхности слизистой оболочки и предупреждает развитие инфекции.
 При этом иммуноглобулины IgG, составляющие более 60% суммарного иммуноглобулина в молозиве, не дают такого эффекта, как антитела класса IgA, которые эффективно нейтрализуют патогены, потому проникают оральным путем.
 Таким образом, только пассивный перенос IgA от иммунизированной матери создает эффективный пассивный иммунитет у новорожденных поросят.

Специфическая профилактика
Кроме этого в других странах для специфической профилактики ЭДС применяются различные живые вакцины культуральных аттенуированных штаммов вируса ЭДС. Создание инактивированной вакцины против ЭДС не представляется реальным вследствие низкого накопления вируса как в культуре клеток, так и в организме. Живые препараты вводят супоросным свиноматкам, как правило, орально или внутримышечно.

Этиология

Вирус ЭДС на основе антигенных и генетических критериев относят к группе 1 рода Сoronavirus семейства Сoronaviridae вместе с вирусом ТГС, коронавирусами кошек, собак и человека 229Е. Геном прототипного штамма СV777 имеет размер 28033 нуклеотидов [1, 17, 30, 50]. Подобно другим коронавирусам, вирус ЭДС содержит 3 белка: негликолизированный белок N (57-58 кД), который вместе с геномной РНК формирует нуклеокапсид вируса; трансмембранный гликопротеин М (27-32 кД) и пепломерный гликопротеин S (180-200 кД) [11; 16; 50].

Нет доказательства существования более одного серотипа вируса ЭДС.

Прототипный штамм CV777 по нуклеотидной последовательности гена N гомологичен корейским и японским изолятам более чем на 90% [31,37,53].

Вирус ЭДС является чувствительным к эфиру и хлороформу. Его плотность в градиенте сахарозы равна 1,18 г/см 3 . Вирус, адаптированный к культуре клеток, теряет инфекционность при >60°С в течение 30 мин., но сохраняет стабильность при 50°С. При 4°С вирус стабилен при рН 4,0-9,0, при 37°С он стабилен при рН 6,5-7,5. Вирус ЭДС не обладает гемагглютинирующей активностью [36].

Культивирование. Аттенуация

При серийном пассировании вирус (10 5,0 ТЦД50/мл) вносили в культуру клеток через 48 часов после посева клеток, когда монослой ещё полностью не сформировался. После развития выраженного ЦПЭ, вирус выделяли из клеток путём повторного замораживания-оттаивания [19, 23]. Титр вируса достигал пика (около 10 5,5 БОЕ/мл) через 15 часов после инокуляции [19, 36]. Изолят KPEDV-9 на 90 пассаже достиг титра 10 6,5 ТЦД50/мл [33], a изолят DR13 на 55 пассаже достиг уровня 10 6,0 ТЦД50/мл и до 100 пассажа накапливался в пределах 10 6,5 – 10 7,0 ТЦД50/мл [47].

Вирус ЭДС, длительно адаптированный к клеткам Vero успешно размножался в культурах клеток как свиного, так и несвиного происхождения: МА 104, CPK и ESK в присутствии трипсина [32]. В линиях клеток свиньи KSEK-6 и IBRS-2 изолят P-5V серийно размножался даже без добавления трипсина [23], хотя роль трипсина в повышении уровня репродукции вируса ЭДС была показана экспериментально [7].

Имеются сведения о выделении вируса ЭДС в культурах клеток мочевого пузыря и почки свиньи, выращенных в плашках, покрытых коллагеном, в присутствии трипсина в поддерживающей среде [43].

Эпизоотология

Фекально-оральный путь является главным, если не единственным, путём передачи вируса ЭДС. Острые вспышки инфекции в восприимчивых хозяйствах часто происходят через 4-5 дней после продажи или покупки свиней. Вирус ЭДС не отличается от вируса ТГС в отношении способов передачи, но похоже, что первый легче вызывает персистентную инфекцию в хозяйстве после окончания острой вспышки[41].

Клинические признаки

Главным и часто единственным клиническим признаком ЭДС является водянистая диарея. Вспышки могут значительно варьировать по заболеваемости и летальности. На некоторых фермах заболевают свиньи всех возрастов, и заболеваемость приближается к 100%. ЭДС очень сходна с ТГС за исключением более медленного распространения и несколько более низкой смертности новорождённых поросят. Поросята в возрасте до 1 недели могут погибнуть от дегидрации после 3-4-дневной диареи. Средняя смертность поросят обычно составляет 50%, но может достигать 100%. Взрослые свиньи выздоравливают примерно через 1 неделю. После острой вспышки диарея у поросят может наблюдаться в течение 2-3 недель после отъёма. В последние годы типичные острые вспышки с высокой смертностью новорождённых поросят в Европе наблюдают редко, но они часто происходят в Корее [5] и Японии [48].

При острой вспышке ЭДС в хозяйстве все откормочные свиньи заболевают с развитием диареи в течение недели. У животных отмечают частичную потерю аппетита, депрессию и водянистую диарею. К концу откормочного периода ЭДС часто протекает тяжелее, чем ТГС. Животные проявляют большую болезненность в области живота и, как правило, выздоравливают через 7-10 дней. Смертность составляла 1-3%, обычно на ранней стадии диареи или даже до проявления диареи. При некропсии у таких животных обнаруживают острый некроз спинной мускулатуры. Наиболее высокая смертность наблюдается у свиней, чувствительных к стрессу. По сравнению с ТГС ЭДС распространяется медленнее. Распространение вируса из одного свинарника в другой может занять 4-6 недель, некоторые свинарники, не имеющие контакта между собой, могут оставаться свободными от инфекции.

Патогенез

Вирус размножался в цитоплазме эпителиальных клеток ворсинок тонкой и ободочной кишок, что было показано иммунофлуоресценцией и электронной микроскопией. Инфицированные эпителиальные клетки обнаруживали уже через 12-18 часов, а их максимальное количество наблюдали через 24-36 часов после заражения. Репликация вируса в тонком кишечнике приводила к разрушению эпителиальных клеток и укорочению ворсинок. Отношение высоты ворсинок к глубине крипт уменьшается до 3:1 по сравнению с нормой 7:1. Дегенерацию инфицированных клеток эпителия ободочной кишки не наблюдали [41].

Трехдневные поросята, заражённые орально прототипным штаммом СV777 вируса ЭДС, заболевали через 22-36 часов после инокуляции. Изменения в тонком кишечнике у поросят при ЭДС подобны изменениям при ТГС. Однако репликация вируса и развитие инфекционного процесса при ЭДС протекают медленнее, чем при ТГС [9,10].

Репликация вируса ЭДС y поросят была обнаружена только в кишечном тракте. Shibata et al. [43] показали, что свиньи в возрасте 2 дней – 12 недель, заражённые полевым вирусом ЭДС, проявляли устойчивость к заражению в зависимости от возраста. Погибали только 2-7-дневные поросята.

Клинические признаки ЭДС, описанные в Корее и Японии, идентичны тем, которые наблюдали в Европе, за исключением того, что нет доказательств репликации азиатских штаммов вируса в ободочной кишке [26, 48] и не было случаев внезапной смерти откормочных животных.

Патанатомические изменения выражаются повреждением только тонкого кишечника, который заполняется и растягивается жёлтой жидкостью [14, 15, 48]. Вакуолизация и слущивание энтероцитов ворсинок тонкого кишечника начинаются через 24 часа после заражения и совпадают с началом диареи. Инфицированные ворсинки быстро укорачиваются и их энзиматическая активность резко снижается. Морфологические изменения ворсинок подтверждены сканирующей ЭМ [12], которая показала большое сходство изменений при ЭДС и ТГС. Гистопатологические изменения в ободочной кишке не были выявлены.

Формирование вирионов в основном происходит внутри клеток и завершается путём почкования через мембраны эндоплазматического ретикулума (ЭПР) [13, 21]. В ободочной кишке наблюдали лишь некоторые изменения в энтероцитах. Они содержали вирусные частицы, но не подвергались слущиванию.

Диагноз на ЭДС нельзя поставить только на основании клинических признаков. Острые вспышки ЭДС у свиней всех возрастов нельзя клинически отличить от таковых при ТГС. Этиологический диагноз можно установить на основе обнаружения вируса ЭДС, или его антигена, или специфических антител. Наиболее чувствительными, быстрыми и надёжными методами являются прямая иммунофлуоресценция (ИФ) [19, 43] и иммуногистохимия срезов тонкого кишечника новорожденных поросят [18, 48]. Однако эти исследования можно проводить только на поросятах, убитых во время острой фазы диареи, предпочтительно в течение первых 2 дней после начала болезни. Данные методы также часто ненадёжны при исследовании кишечника свиней, погибающих естественно в результате резкого нарушения пищеварения.

Для выявления антигенов вируса ЭДС в фекалиях, а также для демонстрации специфических антител в сыворотке крови был создан ряд наборов иммуноферментного анализа (ИФA). Они чувствительны и надёжны для постановки диагноза, особенно группового. Для антигенных версий ИФA использовали поли- и моноклональные антитела и вирус, размноженный в организме поросят [2, 3, 51].

Для антительного ИФA антигеном является полуочищенный вирус, размноженный либо в организме животных, либо в культуре клеток [2, 4, 33], или вирусные белки S и N, выделенные из инфицированных клеток Vero [29]. Антитела также обнаруживали в молоке свиноматок методом ИФА [8].

Другие диагностические тесты на обнаружение вируса ЭДС в фекалиях включают обратную транскрипцию – полимеразную цепную реакцию (RT-PCR) [22, 25]. RT-PCR была разработана для дифференциальной диагностики вирусов ЭДС и ТГС в образцах кишечника и фекалий больных свиней [27, 28].

Специфические антитела к вирусу ЭДС можно обнаружить в сыворотке крови свиней после естественного или экспериментального заражения, используя ИФA, блокирующий ИФA, непрямую ИФ и нейтрализацию вируса ЭДС в культуре клеток Vero [2, 20, 41, 43]. Сыворотки крови инфицированных свиней следует получать не раньше 2 недель после начала диареи.

Прoфилактика и контроль

Так как ЭДС не распространяется очень быстро, можно применять общесанитарные превентивные меры и на время задержать проникновение вируса в репродукторные свинарники с опоросами и новорождёнными поросятами. Задержка естественного заражения поросят до достижения более старшего возраста может значительно уменьшить заболеваемость и гибель свиней. Вместе с тем по аналогии с ТГС ранний контакт супоросных свиноматок с инфицированными вирусом ЭДС фекалиями или скармливание суспензии кишечника больных поросят стимулирует лактогенный иммунитет и сокращает вспышку ЭДС в хозяйстве. Если вирус циркулирует в последовательных помётах подсосных поросят, можно попытаться прекратить его перманентную передачу путём перемещения свиней сразу после окончания подсосного периода в другое место не менее, чем на 4 недели. Одновременно с этим поступление новых животных в хозяйство должно быть временно прекращено.

B Азии, в отличие от Европы, вспышки ЭДС оказались настолько суровыми, что возникла потребность создания вакцины против ЭДС. Возможным путём создания вакцины является аттенуация вируса длительным пассированием в культуре клеток. Cерийное пассирование приводит к снижению патогенности вируса для новорожденных поросят и свиноматок, но сохраняет его способность вызывать протективный иммунный ответ у привитых свиней [34, 47].

Аттенуированный штамм KPEDV-9 на 93 пассаже в культуре клеток Vero был использован для орального и внутримышечного введения безмолозивным поросятам в возрасте 1-4 дня. Из 8 поросят, получивших 10 мл суспензии вируса в концентрации 10 8 ТЦД50/мл перорально, только 3 развили мягкую диарею. Все поросята, привитые вирусом в дозах 10 6 и 10 7 ТЦД50/мл, не показали каких-либо признаков инфекции [34]. Штамм DR13 на 100 пассаже в клетках Vero не вызвал диарею, анорексию и виремию у новорождённых поросят и беременных свиноматок. Только 1 из 14 поросят проявлял слабую диарею [47]. Эти данные были подтверждены в последующих экспериментах [44, 45].

Супоросные свиноматки, привитые внутримышечно аттенуированным штаммом KPEDV-9 в дозе 10 7 ТЦД50, развили высокие титры противовирусных антител в крови и молозиве, которые легко выявляли в ИФА. Новорождённых поросят, родившихся от вакцинированных свиноматок, заражали перорально полевым вирулентным вирусом ЭДС в дозах 10 и 5 ЛД 50 и наблюдали в течение 2 недель. При 10 ЛД50 смертность была 20% по сравнению со 100% в контрольной группе, при 5 ЛД50 все иммунные поросята выжили по сравнению с гибелью 60% контрольных поросят [34]. Аналогичные результаты были получены в опытах со штаммом DR13, аттенуированным подобным способом [47]. Было также показано, что оральное введение аттенуированного DR13 приводит к более выраженному иммунитету у свиноматок и лучшей защите потомства от инфекции по сравнению с внутримышечным введением [46]. Однако эффективность применения аттенуированных штаммов в полевых условиях предстоит установить.

В Японии с 1997 для профилактики свиноматок применяют коммерческую живую вакцину из штамма Р-5V, аттенуированного в культуре клеток. Вакцина считается эффективной, хотя не все свиноматки развивают выраженный лактогенный иммунитет [49].

Известны опыты пассивной защиты поросят иммуноглобулинами несвиного происхождения. Оральное введение новорождённым поросятам желтка куриных яиц или коровьего молозива, содержащих иммуноглобулины к вирусу ЭДС, оказывало иммунопрофилактический эффект, предотвращая болезнь или уменьшая смертность [35, 42].

Эпидемическая диарея свиней (ЭДС) - возбудителем ЭДС является коронавирус, похожий на вирус, вызывающий ТГЭ. Коронавирус широко распространён в Европе. Он разрушает ворсинки кишечника, сокращая тем самым площадь его всасывающей поверхности и вызывая дегидрацию. Слабое здоровьем стадо после заболевания приобретает сильный иммунитет периодом на 2-3 недели. Свиноматки передают этот иммунитет поросятам через молозиво. Из небольших племенных стад вирус исчезает спонтанно, но на откормочных фермам существует продолжительное время в связи с постоянным размещением новых свиней.

КЛИНИЧЕСКИЕ ПРИЗНАКИ

Острое заболевание

Начинается, когда инфекция впервые проникает в слабое стадо. В таких случаях она поражает до 100% свиноматок, вызывая различные формы тяжести диареи. Различают 2 направления заболевания:

- Поражает только свиней на доращивании
- Поражает всех свиней независимо от возраста
- Инкубационный период болезни длится 2 дня, а её эпизод - 7-14 дней. У поросят-сосунов диарея может быть как мягкая, так и тяжёлая с уровнем смертности до 40%.

Эндемическое заболевание

В больших племенных стадах, особенно при экстенсивном содержании, не все самки заболевают в период первой инфекции, и может произойти повторное заболевание. Это наблюдается у поросят, не получивших от лактирующей свиноматки антител.

Болезнь можно распознать по проявляющимся клиническим признакам, но трудно отличить от ТГЭ. Если при остром заболевании страдают отъёмыши и свиньи на доращивании, но не поросята, то можно предположить диарею 1-го типа, т.к. при втором типе заболевают также и поросята. Вирус диареи можно выделить из проб кала и идентифицировать при помощи электронного микроскопа, но невозможно будет различить ЭДС и ТГЭ. Для измерения уровня титров необходимо взять кровь свиней на анализ.

Поскольку данное заболевание вирусное, то определённого лечения против него нет. Часто вторичная бактерия усугубляет картину, и её можно уничтожить широким спектром антибиотиков - неомицином, фрамицетином, апрамицином или триметопримом.

Если инфекция проникает в стадо впервые, то нужно удостовериться, что все взрослые свиньи находятся на ранней стадии болезни, и способны развить начальный иммунитет. Этого можно достичь, выпаивая свиней трижды в день в течение 2 дней водой с добавленными в неё фекалиями.

Читайте также: