Вирус гепатита с скрининг анти-hcv подтверждающий тест маркерный спектр

Обновлено: 13.05.2024

Подтверждающий тест на антитела к вирусу гепатита С — показатель инфицированности вирусом гепатита С, посредством обнаружения в крови одновременно антител класса IgG и IgM, образующихся к белкам вируса гепатита С для подтверждения скрининговых исследований.

Гепатит С — наиболее тяжёлая форма вирусного заболевания, которая поражает клетки печени, а также некоторые клетки крови (нейтрофилы, моноциты, В-лимфоциты).

Основные пути передачи вируса гепатита С:

кровь и/или другие жидкости организма инфицированного человека;
трансплацентарный путь;
реже — половой и парентеральный пути (от матери к ребёнку).

Клиническая картина при гепатите С
Основные клинические проявления гепатита С очень неспецифичны: слабость, утомляемость, тошнота, отсутствие аппетита, потеря веса; при циррозе печени может появиться желтуха. Как правило, гепатит С протекает бессимптомно и в большинстве случаев диагностируется случайно. Гепатит C может вызвать как острую, так и хроническую инфекцию гепатита, которая влечет серьёзное пожизненное заболевание. Особо тяжёлый исход хронического гепатита С — цирроз печени и гепато-целлюлярная карцинома.

В отличие от других вирусных гепатитов, гепатит С имеет менее яркую клиническую картину и в большинстве случаев переходит в хронические формы. Чаще всего хронический гепатит С приводит к развитию цирроза печени и очень редко — к развитию гепато-целлюлярной карциномы. С большой частотой возникают аутоиммунные осложнения. Длительность инкубационного периода от 5 дней до 3 недель. В конце инкубационного периода повышаются уровни печёночных трансаминаз, возможно увеличение печени и селезёнки. Острый период протекает со слабостью, снижением аппетита. В 30% случаев возникает лихорадка, артралгия, полиморфная сыпь. Возможны диспептические явления и полинейропатии. Очень редко возникает холестаз. Лабораторные показатели отражают цитолиз.

В норме антитела к вирусу гепатита С в крови отсутствуют.

Вирус гепатита С человека в своём составе содержит ряд белков, к которым образуются антитела. Это нуклеокапсидный белок С — core (сердцевинный), оболочечный Е₁-Е₂, белки — NS₁, NS₂, NS₃, NS₄, NS₅. К этим белкам и образуются антитела, которые можно обнаружить в сыворотке крови.

Появление суммарных антител к вирусу гепатита С у человека характеризуется вариабельностью, но в среднем продукция антител начинается с 3–6 недель после инфицирования. Первыми, с 3–6 недель заболевания, начинают образовываться антитела класса IgM. Через 1,5–2 месяца начинается заметная выработка антител класса IgG, достигая максимума концентрации к 3–6 месяцу заболевания. Этот вид антител может обнаруживаться в сыворотке крови годами. Следовательно, обнаружение антител позволяет провести диагностику инфицирования гепатитом С, начиная с 3–6 недель и более после инфицирования. Следует учитывать, что обнаружение антител класса IgM и IgG в такой постановке метода (ИФА) является скрининговым и недостаточным для постановки диагноза вирусного гепатита С и требует проведения подтверждающего теста. Принимая во внимание чувствительность современных тест-систем (метод ИФА), проводить исследование рекомендуется не раньше 4–6 недель после возможного инфицирования.

подозрение на вирусный гепатит;
положительные данные и сомнительные данные, полученные в предварительных исследованиях на вирусный гепатит С (определение суммарных антител к гепатиту С);
подтверждение инфицирования вирусом гепатита С при получении ранее выполненных положительных или сомнительных результатов.

Интерпретация результатов
В норме антитела к белкам вируса гепатита С в сыворотке крови отсутствуют.

всем мире. В настоящее время абсолютно очевидны серьезные проблемы, связанные с данной инфекцией: высокая частота формирования хронических форм, бессимптомное течение, манифестация заболевания на поздних стадиях (цирроз печени), четкая ассоциация с развитием гепатоцеллюлярной карциномы. Ассамблея ВОЗ в 2016 г. определила глобальную стратегию по борьбе с вирусными гепатитами, предполагающую элиминацию этих инфекций к 2030 г. Важнейшими целями этой программы, принятой 194 странами мира, являются сокращение числа новых случаев заражения вирусными гепатитами на 90% и числа случаев смерти от него на 65% по сравнению с уровнем 2016 г.

Актуальность проблемы объяснима еще и фактом выявления значительной частоты коинфекции ВГС и вирусом гепатита В (ВГВ). Маркеры вируса гепатита В (ВГВ) обнаруживаются у пациентов с ХГС в 22% случаев, что определяет важность вакцинации больных ХГС без коинфекции ВГВ против вирусного гепатита В. Установлена низкая частота перинатальной передачи ВГС от матерей с ХГС детям (3,5%), в то время как у женщин с сочетанием ХГС и ВИЧ-инфекции перинатальная передача ВГС составляет 14–16%.

Группы риска по заражению ВГС: медицинские работники; лица, использующие инъекционные наркотики; пациенты с ВИЧ; лица, которым были сделаны татуировки с помощью нестерильных инструментов; пациенты, получающие переливание крови или ее компонентов до 1992 г., пациенты отделений гемодиализа, дети, рождённые от матерей с ВГС.

Большинство пациентов с ОГС не демонстрируют каких-либо симптомов заболевания, у некоторых из них наступает спонтанная элиминация вируса, с которой ассоциируются следующие факторы: женский пол, молодой возраст, течение заболевания с клинической симптоматикой, клиренс РНК ВГС в течение 4 недель от начала клинической манифестации заболевания, генотип интерлейкина 28В (ИЛ 28В) СС. Однако ни один из этих параметров не может лечь в основу предсказания характера течения заболевания у каждого конкретного пациента.

Хронический гепатит С - хроническое заболевание печени, продолжающееся более 6 месяцев, в основе которого лежат инфицирование и поражение печени ВГС и манифестирующее морфологически некротическими, воспалительными и фибротическими изменениями печеночной ткани различной степени тяжести.

Диапазон исходов инфекции, вызванной ВГС, широк и колеблется от минимального до тяжелого поражения печени, включая развитие ЦП и ГЦК. Через 20– 30 лет после инфицирования ВГС вероятность развития ЦП колеблется от 4 до 45%. Прогрессирование фиброза печени имеет нелинейный характер и длится, как правило, в течение 20–40 лет от момента инфицирования. У части больных этот процесс происходит чрезвычайно медленно.

Выделен ряд факторов, которые могут оказывать отрицательное влияние на естественное течение гепатита С: возраст старше 40 лет к моменту инфицирования, мужской пол, раса (неевропейская), злоупотребление алкоголем, ожирение, нарушение обмена железа, метаболический синдром и др.

Верификация диагноза гепатита С основывается на обнаружении специфических маркеров гепатита С – определение суммарных антител к гепатиту С и маркерного спектра, состоящего из антител к структурным и неструктурным белкам вируса класса М и G.

Антитела класса М к core-антигену начинают выявляться в крови, начиная с 2 недели от начала заболевания, могут циркулировать как при остром, так и хроническом течении заболевания. Обнаружение антител класса М у новорожденного ребенка от матери, инфицированной гепатитом С, означает внутриутробное инфицирование плода. Антитела класса G начинают синтезироваться через 3-4 недели от начала заболевания, их циркуляция достаточно длительная.

При положительном результате на суммарные антитела в вирусу гепатита С (анти-HCV) обязательно необходимо проводить подтверждающее исследование, используя тест на выявление маркеров гепатита и определение РНК вируса с помощью полимеразной цепной реакции в реальном времени.

Вирусный гепатит С (ВГС/HCV) — антропонозная вирусная инфекция из группы гепатитов с парентеральным механизмом передачи, характеризующаяся поражением печени и внепеченочными проявлениями. Протекает преимущественно в виде субклинических (безжелтушных) и легких форм, реже со среднетяжелым течением в острой фазе с тенденцией к хронизации, которая в дальнейшем может привести к развитию цирроза печени и первичной гепатокарциномы.

Возбудитель — РНК-геномный вирус, включенный в состав рода семейства Flaviviridae. В связи с вариабельностью генома HCV y лиц, перенесших инфекционный процесс, не вырабатывается специфическая невосприимчивость к повторным заражениям. Не исключается возможность множественного инфицирования различными генотипами и субтипами возбудителя.

В лабораторной диагностике и мониторинге HCV-инфекции используют два основных подхода: серологические методы, основанные на обнаружении специфических антител к HCV (анти-HCV антител), и молекулярно-биологические методы, основанные на обнаружении РНК вируса.

Суммарные антитела к вирусу гепатита С (HCV) представляют собой антитела классов IgM и IgG, направленные к комплексу структурных и неструктурных белков HCV. Это исследование является скрининговым для выявления HCV-инфицированных пациентов. Антитела класса М появляются в первые 2-3 недели от начала заболевания, сероконверсия в антитела класса G проходит с 3-4 недели от начала заболевания, они сохраняются в крови на протяжении длительного времени (до 10 лет или пожизненно) и свидетельствуют об инфицированности вирусом или перенесённой инфекции. При хроническом вирусе гепатита С антитела определяются постоянно в высоких концентрациях.

В настоящее время нет ни клинических, ни биохимических, ни серологических маркеров, позволяющих достоверно дифференцировать острый и хронический гепатит С. Антитела класса M к ВГС появляются не только при первичной инфекции, но и при реактивации вируса. Альтернативным методом является определение авидности антител класса G к ВГС.

У лиц с иммунодефицитом (больные онкологическими заболеваниями, пациенты на гемодиализе, пациенты, находящиеся на лечении иммунодепрессантами и другие), а также в раннем периоде ВГС (до 12 недель после заражения) anti-HCV могут быть в низких концентрациях. В данных группах пациентов диагностика гепатита С проводится с помощью одновременного выявления anti-HCV IgG, определения индекса авидности IgG и РНК вируса гепатита С.

Низкоавидные IgG-антитела в среднем, выявляются до 3-4 мес от начала инфекции, но иногда вырабатываются и в течение более длительного срока. Выявление низкоавидных IgG-антител служит дополнительным подтверждающим лабораторным свидетельством первичной инфекции.

Важно знать, что у новорожденных и грудных детей до полугода в крови присутствуют перешедшие через плаценту материнские антитела класса G, при условии, что мама ребенка была инфицирована этим вирусом. Поэтому интерпретация результатов исследования IgG и их авидности в этом возрасте затруднительна. После 6 месяцев концентрация этих антител значительно снизится, они элюминируют. В этих случаях для дифференциальной диагностики дополнительно необходимо проводить ПЦР-исследование.

Авидность специфических антител является одним из важнейших маркеров первичной инфекции. Авидность (лат. - avidity) - характеристика сродства (прочности связи) между специфическими антителами и соответствующими антигенами. При впервые возникшей инфекции IgG-антитела обладают поначалу низкой авидностью, т.к. их концентрация пока низка. Через 3-4 месяца от начала острой инфекции лимфоцитами синтезируются уже высокоавидные IgG-антитела, их концентрация выше, конформационно они более подходят к антигенам, соответственно связь с антигенами более прочная. Высокая авидность специфических IgG-антител позволяет исключить недавнее первичное инфицирование. Определение индекса авидности IgG к вирусу гепатита С позволяет косвенно определить давность заболевания, дифференцировать первичную инфекцию от обострения хронической или латентно текущей инфекции, для которой характерен индекс авидности низкий.

Тест на авидность основан на взаимодействии денатурирующего раствора (мочевины) на исследуемую пробу, содержащую комплексы антиген-антител. Мочевина разрывает непрочные связи между антигенами и антителами и не влияет существенно на прочную связь. Результат выражается в виде индекса авидности (ИА).

диагностика острого гепатита С;
определение давности заболевания.

>37% - высокоавидные - результат позволяет исключить первичное инфицирование вирусом простого герпеса в течение последних 3-4 мес.

Подтверждающий тест на антитела к вирусу гепатита С (иммуноблот) — подтверждение положительных результатов скрининговых тестов на наличие антител к вирусу гепатита С.

Гепатит С — наиболее тяжёлая форма вирусного заболевания, которое поражает клетки печени, а также некоторые клетки крови (нейтрофилы, моноциты, В-лимфоциты).

кровь и/или другие жидкости организма инфицированного человека;
трансплацентарный путь;
реже — половой и парентеральный пути (от матери к ребенку).

В норме антитела к вирусу гепатита С в крови отсутствуют.

Подтверждающий тест позволяет выполнять раздельную оценку наличия специфических IgG антител к различным антигенам вируса гепатита С (структурным нуклеокапсидным: Cor-1 и Cor-2 и неструктурным: хеликаза, NS₃, NS₄, NS₅). Используется в качестве подтверждающего исследования для уточнения неясных результатов скрининговых ИФА тестов, направленных на суммарную оценку наличия антител к вирусу гепатита С.

Подтвердить результаты определения антител скрининговых ИФА-тестов помогает высокоспецифичное развёрнутое исследование антител методом иммуноблота, которое позволяет не только выявить, но также и идентифицировать антитела, направленные против определённых структурных и неструктурных компонентов вируса гепатита С, имеющих разную значимость.

Как и ИФА-тесты, этот метод информативен, в среднем, начиная с 3–4 недели инфекции — период появления в крови специфических антител.

Показания
Подтверждение положительных или сомнительных результатов, полученных при скрининговом исследовании антител к вирусу гепатита С.

Подготовка
Кровь рекомендуется сдавать утром, в период с 8 до 12 часов. Взятие крови производится натощак, спустя 4–6 часов голодания. Допускается употребление воды без газа и сахара. Накануне сдачи исследования следует избегать пищевых перегрузок.

Интерпретация результатов
Способ представления результата: на бланке результата отражен результат выявления антител к используемым антигенам, раздельно для Cor-1 и Cor-2, хеликазы, NS₃, NS₄, NS₅ (отрицательный/сомнительный/положительный). Выдаётся общее заключение, сделанное на основании комплексной оценки результатов.

Отрицательный результат иммуноблота: человек не был инфицирован вирусом гепатита С (результат скрининговых ИФА тестов — ложноположительный).

Положительный результат иммуноблота: была инфекция вирусом гепатита С.

Сомнительный результат: возможно, была инфекция вирусом гепатита С.

Читайте также: