Высокая вирусная нагрузка впч 52 типа

Обновлено: 25.04.2024

ГлавнаяHelixbook Human Papillomavirus высокого канцерогенного риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 типы), ДНК генотипирование [реал-тайм ПЦР]

Human Papillomavirus высокого канцерогенного риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 типы), ДНК генотипирование [реал‑тайм ПЦР]

Выявление возбудителя папиллома-вирусной инфекции (Human Papillomavirus), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) исследуется ДНК вирусов в образце биоматериала. При этом определяется наличие высококанцерогенных типов вируса (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58 и/или 59), производится их типирование.

Синонимы русские

Папиллома-вирусы человека высокого канцерогенного риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 типы), вирусы папилломы высокого канцерогенного риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 типы), ВПЧ высокого канцерогенного риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 типы).

Синонимы английские

Papillomavirus hominis, 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 types, DNA.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Соскоб из прямой кишки, соскоб урогенитальный.

Общая информация об исследовании

Вирусы папилломы человека (ВПЧ) широко распространены, поражают эпителий кожи и слизистых оболочек и обладают онкогенным потенциалом. ВПЧ передается при тесном контакте с инфицированным эпителием, поэтому основные пути заражения – половой и контактно-бытовой. Возможна передача ВПЧ от инфицированной матери к плоду. Человек может быть инфицирован несколькими типами ВПЧ.

К факторам, провоцирующим развитие ВПЧ-инфекции, относятся: ранее начало половой жизни, большое количество половых партнеров, сниженный иммунитет, применение оральных контрацептивов, авитаминозы, инфекции, передаваемые половым путем, курение и проживание в крупных городах.

Инкубационный период может длиться от 2 месяцев до 2-10 лет. Характерно скрытое течение заболевания, при котором отсутствуют клинические проявления, а при кольпоскопическом, цитологическом и гистологическом обследовании выявляется норма. В 30 % случаев в течение 6-12 месяцев может произойти избавление от вируса. Диагностика скрытой ВПЧ-инфекции осуществляется только методом ПЦР.

При острой инфекции возникают доброкачественные образования, такие как папилломы, бородавки, кондиломы. У детей папиллома-вирусы могут приводить к папилломатозу гортани. Поражение клеток трофобласта папиллома-вирусами чревато спонтанным абортом.

Объединение ДНК папиллома-вируса с геном клетки приводит к дисплазии/неоплазии (чаще всего в переходной зоне шейки матки). К папиллома-вирусам высокого онкогенного риска относятся ВПЧ типов 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 и 68. Инфицирование ими приводит к относительно доброкачественному бовеноидному папулезу или плоскоклеточным интраэпителиальным неоплазиям шейки матки.

Для выявления ВПЧ высокого онкогенного риска используется в основном полимеразная цепная реакция в режиме реального времени, которая позволяет найти ДНК ВПЧ в исследуемом биоматериале и идентифицировать его отдельные типы. Принцип метода основан на амплификации (многократном увеличении числа копий) специфичного для данного возбудителя участка ДНК.

Для чего используется исследование?

  • Для выявления папиллома-вирусной инфекции высокого онкогенного риска.
  • Для подтверждения/исключения персистирования определенного типа ВПЧ.
  • Чтобы оценить степень канцерогенного риска у женщин с дисплазией эпителия шейки матки.

Когда назначается исследование?

  • При первичном скрининге рака шейки матки (наряду с цитологическим исследованием) у женщин старше 30 лет.
  • После хирургического лечения цервикальной интраэпителиальной неоплазии (CIN II) для выявления/исключения персистенции определенного типа ВПЧ высокого онкогенного риска (оценка в динамике).
  • При сомнительных результатах цитологического исследования гинекологических мазков.

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Причины положительного результата

Причины отрицательного результата

  • Отсутствие папиллома-вирусной инфекции.
  • Низкое содержание ВПЧ в крови.

Выявление ДНК ВПЧ в исследуемом материале свидетельствует о наличии папиллома-вирусной инфекции. Если ДНК ВПЧ в исследуемом биоматериале не выявляется, то наличие папиллома-вирусной инфекции маловероятно.

Важные замечания

  • Положительный результат исследования на ДНК ВПЧ чаще всего не позволяет прогнозировать развитие рака шейки матки, поскольку примерно в 80 % случаев инфицирование заканчивается спонтанным выздоровлением. Однако выявление ВПЧ-инфекции при дисплазии эпителия шейки матки обладает большой прогностической значимостью и позволяет судить о степени канцерогенного риска.
  • Разработаны вакцины против ВПЧ типов 16 и 18 (причина 70 % случаев рака шейки матки) и 6 и 11 (причина 90 % случаев генитальных бородавок). Вакцины предназначены для предупреждения инфицирования ВПЧ.

Также рекомендуется

  • Цитологическое исследование мазков (соскобов) с поверхности шейки матки (наружного маточного зева) и цервикального канала – окрашивание по Папаниколау (Рар-тест)
  • Цитологическое исследование мазков (соскобов) с поверхности шейки матки (наружного маточного зева) и цервикального канала на атипию
  • Human Papillomavirus, ДНК количественно [реал-тайм ПЦР]

Кто назначает исследование?

Акушер-гинеколог, дерматовенеролог, уролог, инфекционист, проктолог, педиатр, ЛОР.

ФГБУ "Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства им. В.Н. Городкова" Минздрава России

Инфекция шейки матки, ассоциированная с 52, 58 и 59-м типами вируса папилломы человека

Журнал: Российский вестник акушера-гинеколога. 2015;15(5): 10‑14

Цель исследования — определение интенсивности свободнорадикальных процессов и антиоксидантной активности у беременных с недифференцированной дисплазией соединительной ткани. Материал и методы. Основную группу составили 60 беременных, которые были обследованы в сроки беременности 22, 36 и 40 нед с недифференцированной дисплазией соединительной ткани. В контрольную группу включены 30 соматически здоровых беременных с физиологическим течением беременности. Изучено функциональное состояние плацентарной системы при помощи ультразвукового исследования и допплерометрии, реактивность сердечно-сосудистой системы плода с помощью кардиотокографа. Свободнорадикальное окисление и антиоксидантную активность определяли методом индуцированной хемолюминесценции. Результаты. Установлено, что синдром недифференцированной дисплазии соединительной ткани во время беременности сопровождается развитием окислительного стресса и повышением антиоксидантной активности. Заключение. Недифференцированная дисплазия соединительной ткани, имеющая генерализованный характер ее поражения с вовлечением в патологический процесс репродуктивной системы, отражается на течении беременности и родов. Результаты хемолюминесцентного анализа свидетельствуют о высокой концентрации свободных радикалов, развитии окислительного стресса, повышении антиоксидантной активности в организме женщин с недифференцированной дисплазией соединительной ткани, что диктует необходимость дальнейших исследований для определения комплекса диагностических и профилактических мер при недифференцированной дисплазии соединительной ткани и беременности. Авторы информируют об отсутствии конфликта интересов.

ФГБУ "Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства им. В.Н. Городкова" Минздрава России

Высокая распространенность папилломавирусной инфекции (ПВИ), ее доказанная роль в развитии злокачественных новообразований половых органов свидетельствуют об актуальности данной проблемы. В настоящее время известно более 150 типов вируса папилломы человека (ВПЧ), 40 из которых вызывают заболевания аногенитальной области. По степени канцерогенного риска согласно классификации IARC (International Agency for Research on Cancer), в 2012 г. выделено три группы ВПЧ: канцерогенные — 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58 и 59-й (1-я группа), вероятно канцерогенные — 26, 30, 34, 53, 66, 67, 68, 70, 73, 82, 69, 85 и 97-й (2-я группа: 2А, 2В), неканцерогенные — 6, 11-й и др. (3-я группа). Все типы подразделены на определенные филогенетические группы. Наибольший клинический интерес представляет филогенетическая группа α, к которой относятся следующие типы ВПЧ высокого онкогенного риска (ВПЧ ВР): α5 (ВПЧ 51), α6 (ВПЧ 56), α7 (ВПЧ 18, ВПЧ 39, ВПЧ 45, ВПЧ 59), α9 (ВПЧ 16, ВПЧ 31, ВПЧ 33, ВПЧ 35, ВПЧ 52, ВПЧ 58) [1, 2]. Разделение по группам важно для динамического наблюдения за вирусной инфекцией и более точного прогнозирования ее развития, так как разные типы ВПЧ обладают разным онкогенным потенциалом, а также способностью к персистенции [3, 4].

Цель исследования — определить особенности течения цервикальной ПВИ, ассоциированной с 52, 58 и 59-м типами ВПЧ.

Материал и методы

В проспективное исследование в результате целенаправленного отбора включены 84 пациентки в возрасте 18—58 лет с цервикальной, обусловленной 52, 58 и 59-м типами ВПЧ, обследованные на специализированном приеме по патологии шейки матки женской консультации Омска. Средний возраст инфицированных пациенток составил 29,9±1,0 года (медиана и интерквартильный размах — 27 (23,0—32,5 года). Критерии включения в исследование: возраст от 18 до 60 лет, позитивный цервикальный ВПЧ-тест на наличие 52, 58 и 59-го типов, информированное согласие пациентки. Критерии исключения: беременность и лактация, отказ от участия в исследовании.

Комплексная диагностика включала жидкостную цитологию (Bethesda, 2001); кольпоскопическое исследование; гистологическое исследование цервикальных биоптатов и эндоцервикальных образцов и расширенный скрининг для дифференциального выявления ДНК ВПЧ, включая определение ВПЧ ВР 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58 и 59-го типов методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени (тест-система РеалБест ДНК ВПЧ ВКР генотип) [1]. При трактовке вирусной нагрузки ВПЧ учитывали порог клинической значимости — 3 lg на 10 5 клеток, порог прогрессии (более 5 lg на 10 5 клеток) [21].

Статистический анализ данных проводился с применением пакета Statistica 6, возможностей MS Excel. Во всех процедурах статистического анализа критический уровень значимости р принимался равным 0,05. Проверка нормальности распределения производилась с использованием критерия Шапиро—Уилки, проверка гипотез о равенстве генеральных дисперсий — с помощью F-критерия Фишера. Средние выборочные значения количественных признаков приведены в тексте в виде M±SE, где M — среднее выборочное, SE — стандартная ошибка среднего. При распределении значений в ряду, отличном от нормального, указывались медиана (P 0,5), 25-й перцентиль (P 0,25) и 75-й перцентиль (P 0,75). При анализе таблиц сопряженности оценивались значения информационной статистики Кульбака (статистика 2I).

Результаты

В возрасте моложе 35 лет (включительно) были 79,8±4,4% пациенток группы наблюдения. Распределение инфицирования шейки матки 52, 58 и 59-м типами ВПЧ в зависимости от возраста было следующим: ранний репродуктивный возраст (18—25 лет) — 33 пациентки, средний (26—35 лет) — 34, старше 36 лет — 17.

Проведен анализ частоты ВПЧ-ассоциированных поражений шейки матки, которые подразделяют на клиническую (экзофитная кондилома), латентную (отсутствие клинических, морфологических изменений при обнаружении ДНК ВПЧ), субклиническую форму (невидимые невооруженным глазом, бессимптомные, выявляются только при кольпоскопии и/или морфологически), CIN I—III степени и РШМ [1]. Случаев клинической формы ПВИ не наблюдалось. Среди инфицированных женщин наблюдались пациентки с CIN (46—54,8%), относительно латентной формой инфекции без клинических ее проявлений (12—14,3%), субклинической формой инфекции (24—28,6%) и РШМ (2—2,4%).

В зависимости от тяжести гистологически верифицированного предрака CIN I установлена в 51,2%, CIN II — в 32,5%, CIN III — в 16,3% наблюдений.


Таблица 1. Формы папилломавирусной инфекции, ассоциированной с 52, 58 и 59-м типами, в зависимости от возраста


Таблица 2. Частота выявления ВПЧ 52, 58 и 59-го типов у женщин с ПВИ


Рис. 1. Распределение ВПЧ-ассоциированных поражений шейки матки при моно- и сочетанной формах инфекции.

Проведена оценка вирусной нагрузки ВПЧ 52, 58 и 59-го типов среди 84 инфицированных женщин (включая моно- и сочетанное инфицирование) (табл. 3). В 30 случаях ее уровень был ниже порога клинической значимости, в 30 случаях вирусная нагрузка ВПЧ 52, 58 и 59-го типов была в пределах от 3 до 5 lg на 10 5 клеток, в 33 случаях вирусная нагрузка была выше порога прогрессии. Превышение порога прогрессии варьировало в диапазоне 25—46,7% в зависимости от типа ВПЧ (рис. 2).


Таблица 3. Распределение уровня вирусной нагрузки по типам ВПЧ в группе обследованных пациенток (моно- и сочетанная инфекция) Примечание. * Здесь и в табл. 4: число наблюдений вирусной нагрузки не совпадало с числом обследованных пациенток в связи с сочетанным инфицированием.


Рис. 2. Вирусная нагрузка ВПЧ 52, 58 и 59-го типов у женщин с ПВИ.

При анализе взаимосвязи клинических форм ПВИ и уровня вирусной нагрузки установлено двукратное превышение случаев c нагрузкой, превышающей 5 lg на 10 5 клеток, у женщин с CIN: 25 против 10 (менее 3 lg на 10 5 клеток) и 11 (от 3 до 5 lg на 10 5 клеток) случаев, p=0,0091 (табл. 4).


Таблица 4. Зависимость формы ПВИ при 52, 58 и 59-м типах ВПЧ (моно- и сочетанная инфекция) от вирусной нагрузки

В случае моноинфекции латентная форма не сопровождалась нагрузкой выше порога прогрессии, субклиническая форма протекала на фоне превышения порога прогрессии в 1 случае против остальных 11, в то время как ЦИН и РШМ — в 13 против 7 случаев с меньшей вирусной нагрузкой (табл. 5). Установлено наличие статистически значимой связи между тяжестью формы ПВИ и уровнем вирусной нагрузки 52, 58 и 59-го типов (2I=16,29; p<0,05).


Таблица 5. Формы ПВИ при моноинфекции 52, 58 и 59-м типами ВПЧ

Согласно данным исследований, основанных на большом клиническом материале, среди различных возрастных групп повышение уровня вирусной нагрузки увеличивает тяжесть поражения шейки матки ВПЧ [5, 20, 22—24]. Согласно исследованию G. Shen и соавт. [25], отмечена положительная корреляция между уровнем вирусной нагрузки и степенью поражения шейки матки. Полученные нами данные доказывают влияние вирусной нагрузки для 52, 58 и 59-го типов ВПЧ на прогрессирование цервикальной неоплазии.

Выводы

1. Среди когорты женщин с папилломавирусной инфекцией шейки матки, ассоциированной с 52, 58 и 59-м типами ВПЧ, значительная доля женщин моложе 35 лет (79,8%).

2. Установлен возрастзависимый характер частоты субклинической формы инфекции и цервикальной неоплазии у инфицированных женщин.

3. Папилломавирусная инфекция, ассоциированная с 52, 58 и 59-м типами ВПЧ, сопровождалась наличием CIN и рака шейки матки в 57,1% случаев.

4. Высокая частота цервикальной неоплазии при моноинфекции (54%), сопоставимая с ее частотой при сочетании с другими типами ВПЧ ВР (59,6%; р>0,05), а также взаимосвязь тяжести поражения с уровнем вирусной нагрузки подтверждают высокий риск формирования предрака и рака шейки матки при наличии моноинфекции 52, 58 и 59-го типов ВПЧ.

ФГБНУ Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова

ФГБНУ Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова

ФГБНУ Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова

ФГБНУ Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова

ФГБНУ Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова

ФГБНУ Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова

ФГБНУ Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова

Распространенность папилломавирусов человека высокого и низкого онкогенного риска на территории Российской Федерации

Журнал: Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. 2021;39(4): 39‑47

ФГБНУ Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ

Оценка распространенности папилломавирусов человека (ВПЧ) высокого и низкого онкогенного риска на территории Российской Федерации.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

РЕЗУЛЬТАТЫ

В клинических образцах 5013 пациентов выявлено 8593 штамма ВПЧ (моноинфекция — у 3057 пациентов, смешанная инфекция — у 1956 пациентов). Показано, что на территории РФ доминирующими являются ВПЧ16 — 13,8% (95% ДИ 13,0—14,5), ВПЧ6 — 10,7% (10,0—11,3), ВПЧ51 — 6,8% (6,3—7,3), ВПЧ44 — 6,8% (6,2—7,3), ВПЧ53 — 6,3% (5,8—6,8), ВПЧ31 — 5,6% (5,2—6,2), ВПЧ56 — 5,5% (5,0—6,0), ВПЧ52 — 5,4% (5,0—5,9), тогда как доля остальных типов варьировала от 5 до 0,4%. Описаны возрастные, половые и региональные особенности распределения ВПЧ разных типов.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Проведенный мониторинг циркулирующих штаммов ВПЧ позволит прогнозировать эффективность на территории РФ ВПЧ-вакцин различного состава и представляет интерес при разработке отечественной ВПЧ-вакцины.

ФГБНУ Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова

ФГБНУ Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова

ФГБНУ Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова

ФГБНУ Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова

ФГБНУ Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова

ФГБНУ Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова

ФГБНУ Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова

Дата принятия в печать:

ВПЧ-инфекция является серьезной медицинской проблемой. ВПЧ инфицируют клетки базального слоя эпителия, что приводит к их неконтролируемому размножению, последствием чего может быть появление папиллом, остроконечных кондилом, а также возникновение злокачественных опухолей различной локализации [3, 4]. В мире ежегодно регистрируется более 630 тысяч новых случаев онкологических заболеваний, вызванных ВПЧ, что составляет 4,5% всех случаев рака (8,6% у женщин и 0,8% у мужчин) [5, 6]. В довакцинальном периоде ежегодно у 530 тысяч женщин диагностировали рак шейки матки (РШМ), из них 270 тыс. погибали, что подчеркивает острую необходимость массовой вакцинопрофилактики ВПЧ-инфекции [5]. ВПЧ также является основной причиной вагинальных и анальных злокачественных новообразований (70—90%), а также значительной доли рака полового члена (35—50%), рака вульвы и ротоглотки (30—40%) [5—8]. Экономический ущерб, наносимый этой инфекцией, огромен и исчисляется миллиардами затраченных средств. В России финансовое бремя ВПЧ-ассоциированных заболеваний оценивается в 63 млрд рублей в год [9].

Среди штаммов ВПЧ наибольшую клиническую значимость имеют представители рода Alphapapillomavirus. Имеются убедительные доказательства канцерогенности для человека 13 типов ВПЧ (ВПЧ высокого онкогенного риска, ВПЧ-ВР), принадлежащих к видам α5 (ВПЧ51), α6 (ВПЧ56), α7 (ВПЧ18, 39, 45, 59, 68) и α9 (ВПЧ16, 31, 33, 35, 52, 58) [10]. На 13 наиболее распространенных типов ВПЧ-ВР приходится 96% случаев РШМ [11]. Кроме того, по крайней мере, 7 других филогенетически родственных типов (ВПЧ26, 53, 66, 67, 70, 73, 82) в редких случаях были ассоциированы с РШМ в виде моноинфекции ВПЧ и относятся к потенциально канцерогенным типам [11]. Существуют также типы ВПЧ рода Alphapapillomavirus, которые вызывают появление доброкачественных генитальных кондилом, которые, в первую очередь, относятся к виду α10 — ВПЧ 6, 11, 13, 44 (ВПЧ низкого онкогенного риска, ВПЧ-НР) [1]. В целом ДНК ВПЧ при генитальных кондиломах и папилломах гортани выявляется в 95% случаев, причем наиболее частыми типами являются ВПЧ6 и ВПЧ11 [12].

Точные сведения о распространенности ВПЧ-инфекции в России отсутствуют, так как официально регистрируются лишь некоторые из ее клинических проявлений, а имеющиеся сведения основаны на результатах выборочных исследований и расчетных показателях. В России ранее проводились исследования по оценке распространенности типов ВПЧ, однако они в основном были ограничены одной областью, небольшим количеством дифференцируемых типов ВПЧ-ВР, или в них не учитывались ВПЧ-НР [13—18]. Так, использованные тест-системы позволяли дифференцировать ограниченное количество типов ВПЧ-ВР (от 8 до 12 типов), что не охватывает всего разнообразия клинически значимых ВПЧ. Обобщение данных этих работ затруднительно, поскольку в них использованы разные тест-системы, отличающиеся как по количеству, так и по набору дифференцируемых ВПЧ-типов. Опубликованное в 2019 г. исследование А.Е. Донникова и соавт. охватывает большую выборку пациентов, обследованных в 2010—2016 гг. на широкий спектр типов ВПЧ (21 тип), проживающих в Российской Федерации (РФ) [19].

Генотипирование штаммов ВПЧ, выявленных у пациентов, позволяет оценить риск развития дисплазии эпителия пораженных вирусом тканей и прогнозировать развитие заболевания. По данным ВОЗ на 2019 г., 100 стран мира ввели ВПЧ-вакцину в национальные календари иммунизации. В России ВПЧ-вакцина пока не входит в национальный календарь. В связи с этим исследование генетического разнообразия ВПЧ актуально как с точки зрения прогнозирования эффективности существующих вакцин с учетом их состава, так и при разработке отечественной ВПЧ-вакцины.

Цель настоящего исследования — оценка распространенности ВПЧ-ВР и ВПЧ-НР на территории РФ с учетом возрастных, половых и региональных особенностей.

Материал и методы

Клинические образцы — урогенитальные соскобы от пациентов разного пола и возраста, у которых врач заподозрил ВПЧ-инфекцию (n=12 945). Образцы собраны в период с января по декабрь 2019 г. у пациентов, проживающих в шести из семи федеральных округов (ФО) РФ — Центральном (n=7522), Южном (n=908), Северо-Западном (n=359), Сибирском (n=880), Уральском (n=423), Приволжском (n=1797), Северо-Кавказском (n=1056). Из Дальневосточного ФО, население которого составляет 5,6% от населения РФ, образцов на исследование не поступало.

Группы пациентов. Пациентов с подтвержденной ВПЧ-инфекцией разделили на группы в соответствии: с полом — женщины (n=4488), мужчины (n=525); возрастом — 0—14 лет (n=10), 15—19 лет (n=345), 20—29 лет (n=4346), 30—39 лет (n=2743), 40—49 лет (n=803), 50—59 лет (n=243), старше 60 лет (n=93); регионом проживания (ФО) — Центральный (n=4902), Приволжский (n=1320), Южный (n=737), Сибирский (n=572), Северо-Кавказский (n=537), Уральский (n=365), Северо-Западный (n=150).

Статистические методы. Качественные признаки представляли в форме доли штаммов ВПЧ разных типов от общего числа штаммов в группе с 95% доверительным интервалом (95% ДИ). Частоты качественных признаков в группах сравнивались с помощью точного критерия Фишера (The Fisher exact test, two sided). Достоверными считали различия при уровне значимости p≤0,05. При множественных сравнениях учитывали поправку Бонферрони. Анализ данных проводили в пакете R-Studio version 1.2.1335 и Microsoft Excel.

Ограничения исследования. В настоящем исследовании рассмотрены возрастные, половые и региональные особенности распределения ВПЧ разных типов без учета клинических форм папилломавирусных заболеваний, поскольку авторы не располагали данными о диагнозах заболеваний.

Результаты и обсуждение

В результате обращения пациентов в медицинские центры различных регионов РФ по поводу подозрения на ВПЧ-инфекцию в течение 2019 г. было проведено лабораторное обследование 12 945 человек, по результатам которого ДНК ВПЧ выявлена у 5013 (38,7%) пациентов. Важно отметить, что у 3057 пациентов выявлена моноинфекция ВПЧ, тогда как у 1956 пациентов — смешанная инфекция (два и более типа ВПЧ), поэтому при общем количестве ВПЧ-положительных пациентов, равном 5013 человек, количество положительных находок (штаммов ВПЧ разных типов) составляет 8583 штамма.

Анализ возрастной структуры обследованных пациентов показал, что положительные находки наиболее часто встречаются у самой мобильной, работоспособной и сексуально-активной группы населения — лиц 20—29 и 30—39 лет, затем в возрастной группе 40—49 лет (табл. 1), что согласуется со знаниями по эпидемиологии ВПЧ-инфекции [6]. В настоящем исследовании доля обследованных лиц в возрасте 20—39 лет составляет 80,4%, что закономерно совпадает с пиком половой активности человека и обращений к врачу с заболеваниями, передаваемыми половым путем. Необходимо отметить, что встречаются положительные находки и среди детей в возрасте 0—14 лет, а также пожилого населения 60 лет и старше, однако их удельный вес значительно меньше — 0,1 и 1,3% соответственно. Установлено, что среди женского населения частота обращения к врачу с ВПЧ-инфекцией в 8,5 раза выше (n=4488), чем среди мужского населения (n=525). Самый высокий уровень обращений к врачу с ВПЧ-инфекцией отмечается как у мужчин, так и у женщин в возрастных группах 20—29 (31,8 и 46,1% соответственно), 30—39 (43,6 и 34,9% соответственно) и 40—49 лет (17,1 и 11,1% соответственно), самые низкие — в возрасте 0—14 лет (0,2 и 0,1% соответственно) и 60 лет и старше (1,9 и 1,2% соответственно). Необходимо также отметить, что у женского населения в возрастной группе 20—29 лет удельный вес положительных находок превышает таковой среди мужского населения в 1,44 раза, а в группе 15—19 лет — в 7,75 раза, что может быть обусловлено известным фактом более раннего начала половой жизни у женщин [20].

Таблица 1. Возрастно-половая структура пациентов с положительным результатом анализа на ДНК ВПЧ, % (95% ДИ)

ГлавнаяHelixbook Human Papillomavirus высокого канцерогенного риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68 типы), ДНК количественно, скрининг с определением возможности интеграции вируса в геном [реал-тайм ПЦР]

Human Papillomavirus высокого канцерогенного риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68 типы), ДНК количественно, скрининг с определением возможности интеграции вируса в геном [реал‑тайм ПЦР]

Синонимы русские

Папиллома-вирусы высокого канцерогенного риска, вирусы папилломы высокого канцерогенного риска, ВПЧ высокого канцерогенного риска.

Синонимы английские

Human Papillomavirus, DNA; HPV, Viral Load.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Женщинам исследование рекомендуется производить до менструации или через 2-3 дня после её окончания.
  • Мужчинам не мочиться в течение 3 часов до взятия урогенитального мазка.

Общая информация об исследовании

Вирусы папилломы человека (ВПЧ) представляют собой широко распространённую и вариабельную группу вирусов, поражающих эпителий кожи и слизистых оболочек и обладающих онкогенным потенциалом. ВПЧ передаётся при тесном контакте с инфицированным эпителием, поэтому основные пути заражения – половой и контактно-бытовой. Возможна передача ВПЧ от инфицированной матери к плоду.

К факторам, провоцирующим развитие ВПЧ-инфекции, относятся ранее начало половой жизни, большое количество половых партнеров, сниженный иммунитет, применение оральных контрацептивов, авитаминозы, инфекции, передаваемые половым путём, курение и проживание в крупных городах.

Инкубационный период может длиться от 2 месяцев до 2-10 лет. Характерно скрытое течение заболевания, при котором отсутствуют клинические проявления, а при кольпоскопическом, цитологическом и гистологическом обследовании выявляется норма. В 30 % случаев в течение 6-12 месяцев может произойти избавление от вируса. Диагностика скрытой ВПЧ-инфекции осуществляется только методом ПЦР.

ВПЧ может по-разному воздействовать на эпителий: способствовать возникновению доброкачественных образований (папиллом, кондилом) или объединению ДНК папиллома-вируса с геном клетки, что приводит к дисплазии (неоплазии) и в дальнейшем к раку (чаще всего в переходной зоне шейки матки).

К папиллома-вирусам высокого онкогенного риска относятся ВПЧ типов 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68.

Для выявления возбудителя используется метод полимеразной цепной реакции, которая позволяет обнаружить ДНК вируса. Принцип метода основан на многократном увеличении числа копий специфичного для данного возбудителя участка ДНК.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это метод молекулярной диагностики, позволяющий выявлять генетический материал возбудителя на ранних этапах заболевания. Он характеризуется высокими показателями диагностической чувствительности и специфичности, быстротой получения конечного результата и доступностью. Особенностью метода является возможность выявлять ДНК вируса даже при малом содержании её в исследуемом биологическом материале. Метод основан на многократном увеличении числа копий специфичного для данного возбудителя участка ДНК. Для диагностики может использоваться разнообразный биологический материал, взятый у детей, взрослых лиц, людей с патологией иммунной системы, беременных женщин. Метод позволяет определять количество молекул ДНК исследуемого вируса, что является важным в диагностике острой формы инфекции, реактивации персистентной инфекции, носительстве вируса, а также при контроле эффективности проводимой противовирусной терапии.

По данным исследований, количественное содержание вируса в материале коррелирует со степенью неоплазии: чем выше вирусная нагрузка, тем выраженнее цитологические изменения в эпителии. При обследовании необходимо учитывать генотип вируса, наличие и степень цитологических и гистологических изменений в тканях, увеличение или снижение вирусной нагрузки через несколько месяцев (6 месяцев и более) после предыдущего обследования.

В исследовании проводится определение суммарного количества ДНК 14 типов ВПЧ высокого канцерогенного риска (ВКР) с отдельным определением ДНК ВПЧ 16, 18 и 45 генотипов. ВПЧ ВКР являются главной этиологической причиной развития РШМ и предшествующей ему тяжелой дисплазии. ВПЧ обнаруживается в 95 % случаев РШМ, из них 16, 18, 45 генотипы в совокупности являются причиной 75 % плоскоклеточных раков и 94 % аденокарцином шейки матки.

Известно, что развитие РШМ часто ассоциировано с интеграцией ДНК вируса в геном клетки-хозяина. Наиболее часто интегрируют ВПЧ 16 и 18 генотипов, при этом происходит разрыв участка Е1/Е2 при сохранении онкогена Е6/Е7. В тест-системе, на которой выполняется данное исследование, по разным каналам прибора детектируются разные участки генома ВПЧ 16, 18 и 45 типов. Выявление области Е6 при отсутствии области Е1/Е2 позволяет косвенно судить о возможности интеграции вируса в геном человека. В случае обнаружения возможности интеграции вируса в геном в бланк ответа выводится соответствующая информация.

Для чего используется исследование?

  • Чтобы оценить риск развития новообразований, ассоциированных с ВПЧ (рак шейки матки, рак прямой кишки, рак аногенитальной области и других локализаций).
  • Для контроля за эффективностью лечения предраковых заболеваний, ассоциированных с ВПЧ.
  • Для мониторинга папиллома-вирусной инфекции и прогнозирования ее течения.

Когда назначается исследование?

  • При выявлении цитологических изменений в мазке на атипию, в мазке по Папаниколау, в гистологическом препарате.
  • При кондиломах и других морфологических изменениях половых путей.
  • При скрининге рака шейки матки у женщин старше 25-30 лет (в качестве дополнительного исследования).
  • При наблюдении за инфицированными ВПЧ.
  • При лечении рака и предраковых состояний, ассоциированных с ВПЧ.

Что означают результаты?

Уровень вирусной нагрузки интерпретируется с учетом результатов цитологического исследования мазков, гистологических изменений в биоптате и генотипа вируса, изменении его количества с течением времени.

  • Количество ДНК ВПЧ не определяется при отсутствии вируса в исследуемом образце или его минимальном количестве (ниже детектируемого уровня) – риск развития патологического процесса, связанного с ВПЧ, минимальный.
  • Клинически малозначимая концентрация вируса (менее 10 3 копий ДНК ВПЧ на 10 5 клеток) – минимальный риск развития дисплазии, транзиторное течение вирусного процесса.
  • Клинически значимая концентрация вируса (более 10 3 копий ДНК ВПЧ на 10 5 клеток) – хроническая инфекция с высоким риском развития дисплазии и РШМ.
  • Более 10 5 копий ДНК ВПЧ на 10 5 клеток при установленном факте персистентного течения инфекции (ВПЧ выявляется более 1 года) – усиленная вирусная нагрузка, ассоциированная с повышенным риском тяжелой дисплазии, часто встречается при РШМ.
  • Снижение вирусной нагрузки в 10 раз за 6 месяцев – транзиторная инфекция.
  • Рост вирусной нагрузки через 6 и более месяцев после лечения указывает на возможность рецидива.

Важные замечания

  • Инфицирование ВПЧ не всегда приводит к раку шейки матки.
  • Возможно одновременное заражение несколькими генотипами ВПЧ.
  • Результат анализа должен интерпретироваться с учетом заключений цитологического и гистологического исследований.

Также рекомендуется

Кто назначает исследование?

Акушер-гинеколог, дерматовенеролог, уролог, инфекционист, проктолог , педиатр, ЛОР.

ГлавнаяHelixbook Human Papillomavirus низкого (HPV 6, 11, 44) и высокого (HPV 16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 73, 82) канцерогенного риска, ДНК (выявление, генотипирование и количественное определение) [реал-тайм ПЦР, Россия]

Human Papillomavirus низкого (HPV 6, 11, 44) и высокого (HPV 16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 73, 82) канцерогенного риска, ДНК (выявление, генотипирование и количественное определение) [реал‑тайм ПЦР, Россия]

Молекулярно-генетическое исследование, которое позволяет определить и дифференцировать 21 генотип вируса папилломы человека в исследуемом материале, что дает возможность охарактеризовать онкогенный потенциал инфекции и спланировать тактику лечения.

Синонимы русские

Вирус папилломы человека (ВПЧ) с определением генотипа.

Синонимы английские

Human Papillomavirus (HPV), DNA, Genotyping.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Соскоб из прямой кишки, соскоб урогенитальный.

Общая информация об исследовании

Вирус папилломы человека – ДНКсодержащий вирус из семейства паповавирусов, ассоциированный с развитием остроконечных кондилом, бородавок, предраковых изменений аногенитальной области, рака шейки матки. Существует более 100 типов ВГЧ, около 30 из них могут инфицировать половые пути, и около 14 генотипов связаны с развитием рака шейки матки, прямой кишки, полового члена и новообразований других локализаций (например, орофарингеальной плоскоклеточной карциномы).

Онкогенные папиллома-вирусы имеют в составе ДНК белки Е6/Е7, которые способны супрессировать процессы апоптоза (запрограммированной гибели) в клетках с измененным генетическим материалом. Генотипы 1, 2, 3, 5 считаются неонкогенными, а генотипы 6, 11, 42, 43, 44 относятся к папиллома-вирусам низкого онкогенного риска. ВПЧ высокого онкогенного риска – это генотипы 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68, 73 и 82.

Основной путь распространения вируса – половой. Возможна вертикальная (от матери к ребенку) и контактно-бытовая передача инфекции. В организм человека может попасть несколько типов ВПЧ одновременно. Заражаются обычно после начала половой жизни в возрасте 16-25 лет. При инфицировании онкогенными генотипами вируса между 25 и 35 годами вероятны интраэпителиальные поражения и через несколько лет развитие рака. В 70 % случаев в течение первого года и в 90 % случаев через 2 года после инфицирования возможно самоизлечение.

Инфицирование различными путями, а также разными типами вируса обуславливает особенности течения заболевания, локализацию эпителиальных изменений и риск развития неопластических процессов в местах поражения кожи и слизистых. Подошвенные бородавки вызываются генотипами 1, 2, 4, 63, а обычные бородавки – 2-м и 7-м типом ВПЧ. Папиллома-вирус 6-го, 7-го, 11-го, 16-го и 32-го типов может стать причиной папиллом ротовой полости и гортани, а ВПЧ 6-го, 11-го, 42-го, 44-го типов – аногенитальных бородавок. Папилломы, вызванные даже неонкогенными или низкоонкогенными папиллома-вирусами, рекомендовано удалять. Следует также отметить, что риск возникновения новообразований выше у людей с иммуннодефицитами.

Инфицирование онкогенными вирусами не означает, что у пациента будет раковое заболевание, однако требует дальнейшего тщательного регулярного наблюдения за инфицированным. При выявлении изменений кожи и слизистой с образованием кондилом, бородавок или внутриэпителиальной дисплазии рекомендовано исключение папиллома-вирусной инфекции и определение генотипа вируса, что позволяет оценить риск развития рака и определить тактику лечения.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) выявляет ДНК вируса папилломы человека (ВПЧ) с высокой специфичностью и чувствительностью. Определение ДНК различных генотипов вируса должно обязательно проводиться с учетом результатов цитологического и гистологического исследований биоптата, удаленной папилломы, бородавки, мазка из шейки матки или участка с дисплазией, метаплазией или признаками малигнизации.

Для чего используется исследование?

  • Для подтверждения наличия папиллома-вирусной инфекции.
  • Для диагностики одновременного инфицирования несколькими типами ВПЧ.
  • Для дифференциальной диагностики генотипов ВПЧ.
  • Для того чтобы оценить риск развития новообразований, ассоциированных с ВПЧ (рак шейки матки, рак прямой кишки, рак аногенитальной области, орофарингеальная карцинома).

Когда назначается исследование?

  • При выявлении цитологических изменений в мазке на атипию, в мазке по Папаниколау.
  • При наличии кондилом, бородавок и других морфологических изменений эпителия различных локализаций.
  • При выявлении вируса папилломы человека неуточненного типа (по данным лабораторного анализа).

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

* Контроль взятия материала (КВМ) – требуется для анализа качества взятия исследуемого материала. В относительном типе анализа используется для нормализации количества ДНК вируса в образце.

Причины положительного результата

  • Инфицирование вирусом папилломы человека