Анализ мочи и мокроты на туберкулез

Обновлено: 25.04.2024

Этот анализ принимается по сокращённому графику. Это связано с тем, что биоматериал должен попасть в лабораторию в очень короткий срок. Проверьте расписание сокращённого графика приёма на странице вашего отделения. При сдаче вне графика срок выполнения исследования может быть увеличен на 1-3 дня.

Приём и исследование биоматериала

Когда нужно сдавать анализ Микобактерии, ДНК (Mycobacterium tuberculosis complex, ПЦР) моча, кач.?

Диагностика туберкулёза дыхательной системы.
Контроль эффективности лечения.
Раннее выявление обострения туберкулёза при хроническом течении.

Подробное описание исследования

Исследование направлено на диагностику туберкулёза дыхательных путей - заболевания, которое является наиболее распространенной причиной смертности от инфекций во всем мире. Высокоточные методы, такие как ПЦР, позволяют диагностировать заболевание еще до появления симптомов. В данном исследовании в качестве биоматериала используется моча: ее легко собрать, а риск инфицирования работников лаборатории значительно ниже, чем при анализе крови или мокроты.

По данным ВОЗ, в 2017 году 10 миллионов человек заболели туберкулезом, 1.6 миллиона из них умерли от этой болезни.

Россия входит в число стран, где туберкулез наиболее распространен. Для снижения этого показателя принимаются меры по профилактике и своевременной диагностике: это позволило сократить число больных и носителей.

Основная сложность диагностики состоит в том, что инфицированный туберкулезом человек может долго не подозревать о своей болезни, пока его иммунная система сдерживает возбудителя – бактерию Mycobacterium tuberculosis. Это очень коварный микроорганизм, со множеством механизмов для защиты от иммунной системы и длительного скрытого выживания в организме и в окружающей среде.

На самом деле, Mycobacterium tuberculosis инфицировано около трети всего населения планеты, но клинически заболевание развивается лишь у немногих из них. Как правило, это те люди, чей иммунитет недостаточно сформирован или ослаблен: дети, пожилые люди, иммунокомпрометированные лица (ВИЧ-инфицированные). Либо те, кто находится в условиях недостаточной санитарии и больших скоплений людей в замкнутом пространстве (например, в тюрьмах).

Обычно туберкулез поражает легкие, но может затрагивать и другие органы и даже кости. Источником инфекции является больной туберкулезом в открытой форме, который выделяет микобактерии во внешнее пространство. Есть еще люди с закрытой формой – которые больны, но не опасны для окружающих. Инфекция передается воздушно-капельным путем или от беременной женщины плоду еще в утробе, так как Mycobacterium tuberculosis может попадать прямо в кровоток.

Симптомами заболевания являются:

Потеря веса/ анорексия
Потеря аппетита
Обильная потливость в ночное время.
Высокая температура
Общая слабость

Если речь идет о легочной форме заболевания, симптомы могут включать:

Кашель
Кровохарканье (кашель с кровью)
Боль в груди

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — метод исследования, позволяющий обнаружить ДНК возбудителя в биоматериале даже в небольшом количестве. Специфичность ПЦР достигает 100%. Этот метод дает возможность обнаружить генетический материал микобактерий даже в моче. При обезвреживании и разрушении микобактерий клетками иммунной системы, фрагменты их наследственного материала попадают в кровь. Они очень маленькие, поэтому проходят через почечный фильтр и обнаруживаются в моче. Моча – самый простой для сбора биоматериал, представляющий наименьший риск заражения для сотрудников лаборатории.

Лабораторная диагностика туберкулеза. Выявление бактерий туберкулеза.

В распознавании и дифференциальной диагностике туберкулеза, а также в определении эффективности проводимого лечения важную роль играют лабораторные методы исследования. Среди них большое значение имеют прежде всего способы обнаружения микобактерии туберкулеза в различных выделениях, воспалительных экссудатах, жидкостях и тканях организма больного.

При туберкулезе легких микобактерии находят прежде всего в мокроте. Частота, массивность и постоянство бацилловыделения зависят от формы процесса. Оно часто имеет место при инфильтративном и особенно деструктивном туберкулезе легких. Реже или периодически выделяют микобактерии больные очаговыми, диссеминированными и цирротическими формами туберкулеза без явного распада легочной ткани. Существенное значение имеет при этом состояние бронхов. При их специфическом поражении, но сохраненной дренажной функции микобактерии выявляются с мокротой сравнительно чаще и с большим постоянством, чем при нормальном состоянии бронхов или при их стенозе, вызывающем блокаду каверны.

Микобактерии туберкулеза находят в большом количестве в обильно выделяющейся мокроте, а в скудном отделяемом, наоборот, они встречаются реже и в виде единичных экземпляров. У больных, не выделяющих мокроту, лучшие результаты дает применение раздражающих аэрозольных ингаля пий 10—15% раствора поваренной соли в 1% растворе питьевой соды Н. М. Рудой и соавт. (1971) применяют с этой целью смесь, состоящую из 5 мл 10% раствора хлорида натрия, 1 мл химопсина, растворенного в физиологическом растворе, и 20 капель солутана.

Второе место по эффективности выявления бацилловыделения у больных, не выделяющих мокроту, занимает исследование промывных вод трахеи и бронхов, которое предложил Я. С. Зобин (1939). В настоящее время для анестезии гортани у взрослых применяют 0,25% раствор дикаина, разведенный в 10% растворе новокаина. Этот раствор наливают во время фонации на голосовые связки в количестве 0,5—1 мл. У больных с повышенным глоточным рефлексом этим раствором смазывают заднюю стенку глотки. Затем в трахею шприцем с напаянной канюлей вводят 10—20 мл физиологического раствора комнатной температуры.

При этом в результате раздражения слизистой оболочки бронхов возникает кашель, при котором из глубоких дыхательных путей вместе с введенной жидкостью выделяются слизь и мокрота. Это отделяемое исследуют на присутствие микобактерии туберкулеза или другой микробной флоры.

Исследование промывных вод бронхов редко сопровождается серьезными осложнениями. Только при сильном, длительном и приступообразном кашле иногда появляется кровохарканье, может аспирироваться инфекционный материал в здоровые участки легочной ткани, нарастает сердечная недостаточность. Такие явления отмечаются главным образом у больных с сопутствующей бронхиальной астмой, пороком сердца, гипертонией. В подобных случаях, очевидно, не следует прибегать к данному методу исследования. При отсутствии таких противопоказаний, особенно у больных с ограниченными формами процесса, у которых чаще всего и возникает необходимость в исследовании промывных вод бронхов, обычно не наблюдается каких-либо осложнений, и поэтому его можно производить не только в клинических, но и в амбулаторных условиях.

Менее эффективно производимое натощак исследование промывных вод желудка, в которых может содержаться бациллярная мокрота или бронхиальная слизь, чаще заглатываемая детьми, а иногда и взрослыми (Аrmand-Dellille, 1927). Кроме того, микобактерии могут проникать в желудок через его слизистую оболочку при гематогенном распространении инфекции в организме, а также при забрасывании бациоллосодержащей желчи (М. Д. Розанова, 1950). Пользоваться этим методом рекомендуется в тех случаях, когда не удается получить мокроту при раздражающих ингаляциях, при противопоказаниях к применению промывания бронхов или при невозможности их проведения по другим причинам.

Наименее информативно определение бацилловыделения с помощью исследований мазков слизи из гортани, а также промывания только верхних отделов дыхательных путей.

У части больных можно выделить микобактерии из крови. По наблюдениям 49 авторов, обобщенным в 1954 г. Dalencour, бациллемия отмечалась в среднем у 5,3% больных различными формами туберкулеза. П. И. Беневоленский (1945) установил ее у 3,7% больных туберкулезом легких (исключая страдающих гематогенным процессом). Чаще обнаруживают микобактерии в крови при туберкулезе кожи, обширных гематогенных диссеминациях в легких, при менингите. Однако, по сводным данным Kallos (1937). основанным на изучении гемокультур, выделенных от 14 502 больных, туберкулезная бациллемия имела место всего лишь у 1,13% из них.

Частота выявления микобактерии зависит не только от формы заболевания, метода получения материала, но и от способа его исследования (бактериоскопия, посев, заражение животных). Микобактерии туберкулеза обнаруживают при прямой бактериоскопии мазков мокроты, окрашенных по Цилю—Нельсену, при микроскопии с использованием метода обогащения — флотации и люминесцентного способа исследования. Методы обогащения повышают частоту обнаружения микобактерии туберкулеза в мокроте, промывных водах желудка и бронхов, в экссудате, спинномозговой жидкости, в каловых массах на 10—20% по сравнению с результатами прямой бактериоскопии.

Среди бактериоскопических методов выявления бацилловыделения наиболее чувствительным является люминесцентная микроскопия, повышающая возможность обнаружения в мокроте микобактерии на 15—20% по сравнению с обычной бактериоскопией, а при исследовании мазков из флотационных колец — на 8—10%. При этом облегчается изучение некоторых биологических свойств возбудителя — старения культур, аутолиза клеток и др.

Некоторые авторы утверждают, что при флюоресцентной (люминесцентной) микроскопии микобактерии туберкулеза можно выявить даже чаще, чем при посевах мокроты и других материалов на различные питательные среды. Kolbel (1955) обнаружил их при простой бактериоскопии у 39,7% больных, при бактериологическом методе — у 52,1%, а при люминесцентной микроскопии — у 73,6%. На преимущество последнего метода указывают Т. Н. Ященко и И. С. Мечева (1973), Н. С. Страхов и соавт. (1973).

Для суждения об эффективности проводимой антибактериальной терапии придают прогностическое значение уменьшению (или сохранению) в динамике массивности бацилловыделения. Поэтому целесообразно не только констатировать бацилловыделение, но и оценивать его количественный показатель. При этом при бактериоскопии бацилловыделение оценивается как обильное, если находят микобактерии в каждом поле зрения, умеренное — при наличии «единичных микробов в 40—50 полях зрения и скудное — при нахождении их единичных экземпляров в препарате.

Туберкулез является одной из опасных и одновременно распространенных инфекций в нашей стране. Если вы поищите литературу по фтизиатрии на территории США, то удивитесь, ее практически нет. Причина - туберкулез практически искоренен на территории США и считается социально значимым заболеванием, которое прямо указывает на качество жизни населения страны.

В нашей стране риск заболеть туберкулезом подстерегает нас везде, так как среди нас множество сограждан, приезжих из стран Азии, которые являются либо больными, либо носителями туберкулеза. А туберкулез это одно из тех заболеваний, где актуальна латинская поговорка "Quo bene diagnostit - bene curat" - "Кто хорошо диагностирует, тот хорошо лечит", так как чем раньше врач выявляет заражение туберкулезом, тем он успешнее лечит своего пациента. Сегодня в статье я предлагаю разобрать современную отечественную диагностику туберкулеза. Какой анализ на туберкулез сдать, чтоб точно исключить заболевание?

Кому необходимы данные методы диагностики туберкулеза?

Методы обследования, отмеченные в заголовке данной статьи, необходимо выполнять всем у кого заподозрена туберкулезная инфекция. Она может быть заподозрена в ходе:

выяснения жалоб, анамнеза,
объективного осмотра пациента,
лучевых методов обследования органов грудной клетки (флюорографии, рентгенографии, КТ),
бронхоскопии с забором мокроты на исследование,
анализов выпота, полученного при плевральной пункции,
операциях на органах грудной клетки (при выявлении характерной диссеминации на висцеральной и париетальной плеврах).

Если в ходе данного обследования заподозрена туберкулезная инфекция, то ее необходимо исключать. Именно тут и начинают привлекаться иммунологические методы диагностики: проба Манту с 2 ТЕ, диаскинтест и T-SPOT.ТБ.

Какой иммунологический метод диагностики туберкулезной инфекции выбрать?

Если детям поголовно делают пробу Манту и у них начинают выявляться ложноположительные результаты, то у взрослых эти результаты оказываются ложноположительными уже чуть ли не в половине случаев. Следовательно, от пробы Манту у взрослых в нашей стране постепенно отказываются и заменяют диаскинтестом. В чем между ними отличия?

По сути, они одинаковые по механизму выявления инфекции, отличие лишь в том, что вводится пациенту для выявления реакции. При пробе Манту вводится туберкулин - продукт жизнедеятельности возбудителя туберкулеза, а при диаскинтесте - белки характерные для возбудителя туберкулеза, но полученные путем генетического изменения штаммов кишечной палочки. То есть, материал вводимый при диаскинтесте никак не связан напрямую с микобактериями туберкулеза.

Проба Манту и диаскинтест - это отечественные разработки, созданные в СССР и дорабатываемые в России.

На сегодняшний день изготовление тестов T-SPOT.TB локализовано в нашей стране во Владимирской области по лицензии выданной компанией из Великобритании Oxford Immunotec. В 2012 году тест можно было выполнить только в Санкт-Петербурге, сегодня сдать анализ на туберкулез методом T-SPOT.TB можно во всех городах присутствия "Лабораторий будущего ЛабКвест" (АО "ЛабКвест", Центральный офис: 121059, Москва, Бережковская набережная, д. 20, стр. 13, федеральный телефон 8 (800) 700-09-99).

Какой метод исследования оказывается более точным, чем T-SPOT.ТБ?

На сегодняшний день более точным методом исследования оказывается микробиологический, в ходе которого в материалах, полученных от пациента, пытаются выявить сами микобактерии туберкулеза. В качестве материала могут выступать:

трехкратно сданная мокрота,
мокрота полученная в ходе диагностической или лечебной бронхоскопии,
жидкости полученной в ходе плевральной пункции,
тканях полученных в ходе операции (к примеру, на грудной клетке).

Все эти материалы, как правило, окрашиваются методом Циля-Нильсена и выявленные микробы достоверно укажут, что у пациента туберкулезная инфекция.

Единственное, метод напрямую будет зависеть от качества забора материала и его направления на исследование. К примеру, мокрота, полученная при бронхоскопии, значительно более ценна, чем трехкратно сданные "плевки", а измененные ткани, полученные в ходе операции, более ценны, чем жидкость полученная при плевральной пункции.

Следовательно, микробиологический метод диагностики более точен, чем T-SPOT.TB, но качество направляемого материала может подвести и свести ценность метода к нулю.

Резюме

В нашей стране с 2012 года доступны все современные методы выявления туберкулезной инфекции, единственное, одни из них могут быть оплачены полисом обязательного медицинского страхования (ОМС), а другие нет. В рамках ОМС могут быть выполнены проба Манту и диаскинтест. Надо лишь получить направление врача. А вот T-SPOT.TB в рамках ОМС недоступен и может быть выполнен лишь за счет ДМС, либо личных средств граждан.

Видео современная диагностика и лечение туберкулеза у детей и подростков к.м.н., ст.н.с., детско-подросткового отдела ФГБУ НМИЦ ФПИ А.В. Казаков

- Вернуться в оглавление раздела "Пульмонология."

Автор: Искандер Милевски. Дата обновления: 11.9.2020

Информация на сайте подлежит консультации лечащим врачом и не заменяет очной консультации с ним.
См. подробнее в пользовательском соглашении.

Бактериологический метод диагностики туберкулеза. Влияние химиотерапии на диагностику туберкулеза.

Наилучшие результаты получают при одновременном использовании двух различных плотных сред. При этом не следует ограничиваться однократным или даже повторным исследованием, а необходимо последовательно, через известные интервалы производить посевы мокроты или промывных вод бронхов. Целесообразность такой диагностической тактики подтверждается повседневным опытом и, в частности, наблюдениями, проведенными в Институте туберкулеза в Будапеште. При троекратном исследовании методом посева мокроты у значительной группы больных туберкулезом легких микобактерии были обнаружены у 70,3% из них, после 5 анализов — у 80,7%, а после 10 — у 97,9%.

При бактериологическом способе исследования удается не только выявить и подсчитать количество выросших колоний микобактерии туберкулеза, но и изучить их различные свойства, дифференцировать от кислотоупорных сапрофитов и атипичных штаммов, определить типовую принадлежность, ферментативную активность, лекарственную чувствительность и др.

Успехи различных способов культивирования микобактерии, естественно, ограничили сферу применения биологического метода исследования, т. е. заражения животных исследуемым материалом. Но они ни в какой мере пе исключают его. Путем заражения высокочувствительных к туберкулезу лабораторных животных, главным образом морских свинок, можно обнаружить микобактерий, даже если они содержатся в исследуемом материале в небольшом количестве. Это обстоятельство приобретает, конечно, весьма важное диагностическое значение. Тем же способом удается лучше дифференцировать вирулентные и атипичные штаммы от сапрофитов, определить тип микробов, к которым одни виды животных чувствительны, а другие устойчивы, а также установить патогенность и вирулентность микобактерий туберкулеза.

Следует подчеркнуть, что при специфической химиотерапии затрудняется обнаружение микобактерий в различных выделениях, жидкостях и тканях организма больного. Это явление связано с тем, что под влиянием антибактериальных препаратов, особенно при длительной терапии, понижается жизнеспособность микобактерий и изменяются их морфологические свойства и химический состав, что отражается на тинкториальной способности, так как может вести к снижению или утрате присущей микобактериям кислотоустойчивости. Мертвые микобактерий по Цилю—Нельсену окрашиваются так же, как и живые. Для их дифференциации применяют специальные методы окраски. Так, живые микобактерий, в которых содержится нативная дезоксирибонуклеиновая кислота, окрашиваются метиловым зеленым. Погибшие микробы лучше окрашиваются пиронином в розовый цвет, а сафранином — в красный. При докраске карболовым фуксином живые микобактерий окрашиваются в зеленый цвет, а погибшие — в красный.

Распознавание таких биологически и морфологически измененных форм возбудителя туберкулеза, особенно в условиях повседневной практики, естественно, встречает затруднения. Этим отчасти можно объяснить, что у некоторых больных даже деструктивным туберкулезом легких не находят микобактерий туберкулеза в мокроте уже вскоре после начатой химиотерапии. Нет сомнения, что только у части из них произошло стойкое и полное морфологическое и биологическое оздоровление стенок туберкулезных каверн. У остальных имеет место мнимая абациллярность, что подтверждается возможностью обострения процесса при динамическом наблюдении, а также обнаружением микобактерий в полости или стенках каверны при специальном исследовании. В этом можно убедиться, если произвести пункцию, казалось бы, излеченной каверны и исследовать ее содержимое после промывания физиологическим раствором. Пользуясь таким методом, Neef (1966) из 49 больных с остаточными, большей частью небольшими (до 0,5 см в диаметре), посттуберкулезными полостями в легких у 11 больных, т. е. почти в 1/4 случаев, обнаружил микобактерий, которые не удавалось найти в мокроте или в промывных водах бронхов всеми доступными способами.

Таким образом, в условиях современной химиотерапии возникает необходимость дальнейшего усовершенствования методов обнаружения микобактерий туберкулеза. В то же время обязательным условием является одновременное динамическое комплексное применение различных лабораторных способов исследования патологического материала: бактериоскопии, посева, по возможности заражения лабораторных животных. Необходимо, кроме того, использование ряда специальных методов для выявления не только классических, но и других вариантов возбудителя.

Так, применяя новые питательные среды, а также пенициллин и дигидрострептомицин, можно выделить из мокроты, спинномозговой жидкости, мочи и тканей больных туберкулезом L-формы микобактерий в виде мелких зерен и шаровидных тел.

При дифференциации типичных и атипичных микобактерий используют комплекс многих методов исследования: определяют кислотно- и спиртоустойчивость микобактерий; изучают особенности их роста при различной температуре, на отдельных питательных средах, при наличии и отсутствии солнечного света; исследуют морфологию культур и способность образовывать пигмент; устанавливают степень чувствительности к туберкулостатическим препаратам. Существенное диагностическое значение имеют некоторые биохимические тесты: амидазный и ниациновый, определение каталазной, дегидрогеназной, пероксидазной, уреазной и липазной активности и реакция восстановления нитратов. О вирулентности тех или иных штаммов микробов судят по результатам определения корд-фактора и цитохимическим тестам. Их патогенность устанавливают при заражении морских свинок, белых мышей, кроликов, кур. Эти исследования дополняются изучением антигенных структур, а также аллергическими пробами с туберкулином и сенситинами, серологическими реакциями у больных.

Определенную роль в клинике туберкулеза органов дыхания играет вторичная — смешанная — инфекция, что связано прежде всего с тем что при нем нередко отмечаются хронический бронхит и пневмония, пневмосклероз, бронхоэктазы. Эти изменения могут сопутствовать туберкулезу или становятся его осложнением, особенно при длительном течении. В том и другом случае, отмечают Н. В. Татарский и А. Я. Цигельник (1968), создаются условия для проявления активности вторичной флоры и развития ряда клинических симптомов: повышения температуры, увеличения количества мокроты, нарастания катаральных явлений в легких, амилоидоза и т. д. При бактериологическом исследовании при этом обнаруживают различного вида стрептококки и стафилококки, грамположительные и грамотрицательные кокки, кишечную палочку и т. д. Все они имеют различную степень чувствительности к отдельным антибиотикам. При этом обязательным является выделение чистых культур и определение их патогенности.

При дифференциальной диагностике туберкулеза и глубоких микозов— аспергиллеза, гистоплазмоза, актиномикоза, кокцидиомикоза, нокаридиоза, кандидомикоза и т. д. — важно не только тщательно исследовать нативные и окрашенные препараты мокроты на присутствие дрожжеподобных грибов рода Candida, Coccidoides immitis, Histoplasma capsulatum, Aspergillus fumigatus и т. д., но и производить посевы на специальные питательные среды, главным образом на среду Сабуро с агаром или без него. Положительные результаты приобретают большее диагностическое значение, если одновременно у больных выявляются кожные реакции на кокцидиоидин, гистоплазмин, аспергиллин, бластомицин и др., а также серологические реакции с соответствующими антигенами (реакция преципитации, связывания комплемента).

Читайте также: