Антитела при бруцеллезе животных

Обновлено: 25.04.2024

Серологическая
диагностика бруцеллеза – наиболее распространенный метод прижизненной
диагностики у животных, при котором с помощью различных реакций проводится
выявление специфических антител к возбудителю, либо их отсутствие.

Серологическая диагностика бруцеллеза заключается в обнаружении специфических антител в сыворотке крови животных в:

— пластинчатой реакции агглютинации с роз бенгал антигеном (роз бенгал проба — РБП),

— реакции непрямой гемагглютинации (РНГА),

— реакции агглютинации (РА) в пробирках,

— реакции связывания комплемента (РСК),

— реакции иммунодиффузии с 0-полисахаридным антигеном (РИД).

В организме животного во время вспышки бруцеллеза происходят защитные реакции, вызванные внедрением возбудителя. На разных этапах течения заболевания в организме больного животного вырабатываются антитела, которые выявляются в одной или в нескольких реакциях. Поэтому для выявления бруцеллеза разработана не одна реакция. На разных стадиях заболевания животного в зависимости от дозы попавшего в организм возбудителя, и от резистентности самого организма животного в тот или иной момент наличие специфических антител к возбудителю бруцеллёза показывают лишь определённые реакции.

На ранних стадиях заболевания наиболее чувствительна реакция агглютинации (РА). Агглютинины в сыворотке крови больных животных в низких титрах можно выявить уже с 10-15-го дня заболевания.

Реакция связывания комплемента (РСК) – специфическая и высокочувствительная реакция диагностики бруцеллёза. Данная реакция позволяет выявлять комплементсвязывающие антитела к возбудителю бруцеллеза, появляющиеся в крови больного животного позже агглютининов примерно с 21-го дня заболевания.

Роз бенгал проба (РБП) применяется в качестве экспресс-метода на неиммунизированных противобруцеллезными вакцинами животных. В основе этой реакции лежит непосредственное соединение антигена и антитела. На постановку РБП тратится несколько минут, однако с ее помощью нет гарантированной возможности количественно оценить наличие антител. Антитела в сыворотке крови больных животных можно выявить уже на начальном этапе заболевания.

Реакции иммунодиффузии с 0-полисахаридным антигеном (РИД).

Сущность метода состоит в выявлении бруцеллезных антител, основанном на способности антител и антигена диффундировать в агаровом геле и при взаимодействии образовывать комплекс антиген-антитело, наблюдаемый в виде линии преципитации. Окончательный результат исследований становится известен лишь спустя 48 часов. Используется для контроля эпизоотического состояния по бруцеллезу животных не ранее чем через 1,5 месяца после вакцинации, для дифференциации положительных реакций, полученных в РА или (и) РСК. При получении положительного результата в реакции иммунодиффузии, животное признают больным бруцеллезом. Данная реакция выявляет специфические антитела в среднем спустя 1,5 месяца с момента заражения.

Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА) при бруцеллезе является специфической и высокочувствительной. Метод основан на выявлении бруцеллезным эритроцитарным антигеном специфических антител в сыворотке крови больных бруцеллезом животных или иммунизированных вакцинами против бруцеллеза животных.

Лечение бруцеллеза у животных не разработано. Для профилактики данного заболевания в благополучных хозяйствах осуществляется постоянный контроль за состоянием поголовья, перегруппировками, ввозом и вывозом животных, соблюдением ветеринарно-санитарных правил и проведение плановых серологических исследований.

Бруцеллез (лихорадка мальтийская, средиземноморская, гибралтарская, кипрская, ундулирующая, тифомалярийная, болезнь Банга) – инфекционное заболевание из группы бактериальных зоонозов, возбудителем которого являются микроорганизмы рода Brucella. Патогенными для человека являются В. melitensis, Br. abortus, Br. suis. Инфицирование человека происходит преимущественно алиментарным путем, реже контактным или аэрогенным. Представляет собой системное инфекционно-аллергическое заболевание со склонностью к хроническому рецидивирующему течению с преимущественным поражением опорно-двигательной, нервной и мочеполовой систем организма. В зависимости от клинической картины выделяют острую, подострую, хроническую и резидуальную форму бруцеллеза. Наиболее чувствительным в настоящее время является иммуноферментный анализ (ИФА), который рекомендуют в качестве экспресс-метода при массовых обследованиях.

Синонимы русские

Антитела к бруцеллезу.

Метод исследования

Иммуноферментный анализ (ИФА).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.
Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Бруцеллез - зоонозная инфекция, характеризующаяся полиорганным поражением и склонностью к хронизации. Значимым патогенетическим компонентом бруцеллеза является аллергическая реактивность. Передача бруцелл происходит в основном пищевым и водным путем, наиболее часто через молоко и мясо зараженных животных. У скотоводов может реализоваться воздушный и контактный путь передачи бруцеллеза. Диагноз устанавливается при выявлении возбудителя в крови, пунктате лимфатического узла или цереброспинальной жидкости.

Заболевание вызывается неподвижными полиморфными грамположительными микроорганизмами рода Brucella. Вид бруцелл, вызывающих инфекцию, оказывает влияние на тяжесть течения, наиболее тяжело протекает бруцеллез, обусловленный заражением Brucella melitensis. Бруцеллы высокоинвазивны, размножаются внутри клеток организма хозяина, но способны сохранять активность и вне клетки. В окружающей среде устойчивы, сохраняются в воде более двух месяцев, три месяца - в сыром мясе (30 дней - в засоленном), около двух месяцев - в брынзе и до четырех - в шерсти животных. Губительно для бруцелл кипячение, нагревание до 60 °С убивает их через 30 минут.

Резервуаром бруцеллеза являются животные, источником заражения для человека преимущественно являются козы, овцы, коровы и свиньи. В некоторых случаях возможна передача от лошадей, верблюдов, некоторых других животных. Выделение возбудителя больными животными происходит с испражнениями (кал, моча), молоком, амниотической жидкостью. Передача инфекции осуществляется преимущественно фекально-оральным механизмом, чаще всего пищевым и водным путем, в некоторых случаях возможна реализация контактно-бытового (при внедрении возбудителя через микротравмы кожи и слизистых оболочек) и аэрогенного (при вдыхании инфицированной пыли) пути.

Значительную эпидемиологическую опасность представляют собой молоко, полученное от больных животных, и молочные продукты (брынза, кумыс, сыры), мясо, изделия из животного сырья (шерсть, кожа). Животные загрязняют испражнениями почву, воду, корм, что также может способствовать заражению человека непищевым путем. Контактно-бытовой и воздушно-пылевой пути реализуются при уходе за животными и обработке животного сырья.

При бруцеллезе у беременных существует вероятность внутриутробной передачи инфекции, кроме того, возможна постнатальная передача при лактации. Люди обладают высокой восприимчивостью к бруцеллезу, после перенесения инфекции в течение 6-9 месяцев сохраняется иммунитет. Повторное инфицирование бруцеллами отмечается в 2-7 % случаев.

Инкубационный период бруцеллеза в среднем составляет 1-4 недели, но при формировании латентного носительства удлиняется до 2-3 месяцев. Острый бруцеллез обычно развивается быстро, у пожилых лиц начало может быть постепенным (в этом случае больные отмечают продромальные явления в виде общего недомогания, бессонницы, разбитости, артралгий и миалгий с постепенным нарастанием интоксикации на протяжении нескольких дней). Температура тела резко поднимается, сильный озноб чередуется с потом, развивается интоксикация, чаще всего умеренная, несмотря на выраженную температурную реакцию.

Хронический бруцеллез протекает волнообразно, с проявлением симптоматики полиорганных поражений. При этом симптомы общей инфекционной интоксикации обычно выражены умеренно, температура редко превышает субфебрильные значения. Промежутки между обострениями заболевания могут продолжаться 1-2 месяца. В случае формирования нового инфекционного очага внутри организма общее состояние ухудшается. Симптоматика хронического бруцеллеза зависит от преимущественного поражения той или иной функциональной системы возбудителем и выраженности аллергического компонента.

Достаточным для подтверждения диагноза является определение антигенов бруцелл и антител к ним в крови пациента при помощи серологических методов. Исследованию подвергается обычно сыворотка крови, но возможно обнаружение антигенов и в спинномозговой жидкости. Положительный результат серологического исследования не менее чем в 3-4 различных тестах, с характерной соответствующей динамикой показателей, является достаточным основанием для подтверждения этиологии заболевания. Начиная с 20-25-го дня болезни и в течение длительного периода (несколько лет) после выздоровления отмечается положительная реакция на кожную пробу Бюрне (подкожное введение бруцеллина).

Серологические методы также могут быть полезны для дифференцировки острой и хронической формы бруцеллеза. С этой целью может выполняться определение отдельных классов иммуноглобулинов.

Для чего используется исследование?

Когда назначается исследование?

При симптомах бруцеллеза (остросептической формы): высокая температура 39-40 °С и выше, озноб, потливость, слабость, миалгия, артралгия, артрит;
при обследовании пациентов с изолированным поражением мочеполовой системы и суставов при наличии в анамнезе указаний на употребление сырого козьего молока, особенно в эндемичных по бруцеллезу районах, и профессиональных особенностей (ветеринары, работники молочной и мясной промышленности);
при эпидемиологическом обследовании населения и при отборе лиц для вакцинации против бруцеллезной инфекции;
дифференциальная диагностика с гриппом, брюшным тифом, малярией, инфекционным мононуклеозом, лептоспирозом, лимфогранулематозом, ревматоидным полиартритом.

Что означают результаты?

Референсные значения: антитела не обнаружены.

Коэффициент позитивности (КП):

1,1 – положительный результат (антитела обнаружены).

КП – концентрация специфических антител в единице объема. Чем выше КП пробы, тем выше концентрация антител.

отсутствие инфекции;
слабая иммунная реакция пациента;
низкий уровень антител.

острая инфекция;
рецидив заболевания;
хроническая форма инфекции.

В случае получения сомнительного результата рекомендуется повторить исследование через 10-14 дней. При повторном результате "Сомнительно" результат следует рассматривать как отрицательный.

В случае заражения бактерией Brucella сначала появляются антитела IgM, затем через некоторое время антитела IgG. Диагноз "острый бруцеллез" подтверждается выявлением антител при острой симптоматике заболевания, совместным выявлением антител IgG, IgA, IgM или только IgM. Если было применено лечение, в течение 2-4 месяцев концентрация IgG, как правило, значительно уменьшается.

В случае хронического бруцеллеза особое значение имеют антитела IgG и IgA. Они свидетельствуют также о давно перенесенном заражении.

Наличие IgA, IgG при отсутствии IgM говорит о хронической инфекции или реинфекции бруцеллой.

Также рекомендуется

56 Клинический и биохимический анализы крови - основные показатели

12 Сифилис RPR (антикардиолипиновый тест/микрореакция преципитации), титр

Синонимы русские

Антитела к бруцеллезу.

Метод исследования

Иммуноферментный анализ (ИФА).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.
Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Бруцеллез - зоонозная инфекция, характеризующаяся полиорганными патологиями и склонностью к хронизации. Значимым патогенетическим компонентом бруцеллеза является аллергическая реактивность. Передача бруцелл происходит в основном пищевым и водным путем, наиболее часто через молоко и мясо зараженных животных. У скотоводов может реализоваться воздушный и контактный путь передачи бруцеллеза. Диагноз устанавливается при выявлении возбудителя в крови, пунктате лимфатического узла или цереброспинальной жидкости.

Хронический бруцеллез протекает волнообразно, с проявлением симптоматики полиорганных поражений. При этом общеинтоксикационный синдром (лихорадка и интоксикация) обычно выражены умеренно, температура редко превышает субфебрильные значения. Промежутки между обострениями заболевания могут продолжаться 1-2 месяца. В случае формирования нового инфекционного очага внутри организма общее состояние ухудшается. Симптоматика хронического бруцеллеза зависит от преимущественного поражения той или иной функциональной системы возбудителем и выраженности аллергического компонента.

Достаточным для подтверждения диагноза является определение антигенов к бруцеллам в крови пациента и серологических тестов. Исследованию подвергается обычно сыворотка крови, но возможно обнаружение антигенов и в спинномозговой жидкости. Достаточным для диагностирования считается положительный результат не менее чем в 3-4 различных серологических тестах. Начиная с 20-25-го дня болезни и в течение длительного периода (несколько лет) после выздоровления отмечается положительная реакция на кожную пробу Бюрне (подкожное введение бруцеллина).

Метод ИФА используется для дифференциации острой и хронической формы бруцеллеза. Исследование также полезно при поиске антител в плазме и сыворотке крови. Также выполняется определение отдельных классов иммуноглобулинов, чтобы определить наличие антигена и степень тяжести заболевания.

Для чего используется исследование?

Для выявления инфицирования (активного или хронического) бруцеллезом.

Когда назначается исследование?

При симптомах бруцеллеза (остросептической формы): высокая температура 39-40 °С и выше, озноб, потливость, слабость, миалгия, артралгия, артрит;
при обследовании пациентов с изолированным поражением мочеполовой системы и суставов при наличии в анамнезе указаний на употребление сырого козьего молока, особенно в эндемичных по бруцеллезу районах, и профессиональных особенностей (ветеринары, работники молочной и мясной промышленности);
при эпидемиологическом обследовании населения и при отборе лиц для вакцинации против бруцеллезной инфекции;
дифференциальная диагностика с гриппом, брюшным тифом, малярией, инфекционным мононуклеозом, лептоспирозом, лимфогрануломатозом, ревматоидным полиартритом.

Что означают результаты?

Референсные значения: антитела не обнаружены.

Коэффициент позитивности (КП):

1,1 – положительный результат (антитела обнаружены).

КП – концентрация специфических антител в единице объема. Чем выше КП пробы, тем выше концентрация антител.

отсутствие инфекции;
слабая иммунная реакция пациента;
низкий уровень антител.

острая инфекция;
хроническая форма инфекции;
субклиническая форма инфекции.

Антитела класса IgА начинают вырабатываться после появления IgG, и их выработка продолжается в течение года и более.

Наличие в крови иммуноглобулинов класса A свидетельствует об острой (если выявлены совместно с IgM, IgG) или (при отсутствии IgM) хронической или же субклинической форме инфекции, о давно перенесенном заражении.

Также рекомендуется

62 Клинический и биохимический анализы крови - основные показатели

12 Сифилис RPR (антикардиолипиновый тест/микрореакция преципитации), титр

Выявление специфических антител к возбудителям бруцеллеза (Brucella spp.) для диагностики заболевания и оценки эффективности проводимого лечения.

Синонимы русские

Бруцелла, бруцеллез (мальтийская, средиземноморская, ундулирующая лихорадка, септицемия Брюса), серологическая диагностика.

Синонимы английские

Brucella spp., Human brucellosis, serological diagnostics.

Метод исследования

Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Бруцеллез – это инфекционное зоонозное заболевание, характеризующееся лимфаденопатией, длительной лихорадкой, поражением опорно-двигательной, сердечно-сосудистой, нервной и других систем, а также высокой частотой хронизации. Возбудители заболевания - микроорганизмы Brucella spp. Они представляют собой грамотрицательные бактерии шаровидной или овоидной формы, обладают высокой способностью к инвазии и внутриклеточному паразитированию. Патогенны для человека следующие виды бруцелл: B. melitensis, B. abortus, B. suis, B. canis, B. ceti. При этом на долю B. melitensis приходится подавляющее большинство случаев заражения. Источник инфекции - крупный и мелкий рогатый скот, свиньи. Возбудитель инфекции может попадать в организм человека при употреблении мяса, сырых молочных продуктов (молоко, сыр) – алиментарный путь передачи. Также возможно заражение при непосредственном контакте с инфицированными тканями животных, их выделениями у ветеринаров, работников мясной промышленности, животноводства, сотрудников микробиологических лабораторий. Описаны случаи передачи микроорганизма от человека к человеку, в том числе случаи заражения младенцев при употреблении грудного молока больной матери.

Инкубационный период при бруцеллезе - 7-30 дней. Заболевание имеет разнообразные клинические проявления с поражением множества органов и систем. Различают острую, подострую и хроническую форму бруцеллеза. Встречается латентная форма заболевания с отсутствием выраженной клинической симптоматики или стертым течением инфекции.

Острая и подострая формы бруцеллеза характеризуются слабостью, головной болью, длительной лихорадкой с температурой 39-40 °С и выше, сопровождающейся ознобами и проливными потами. Отмечается лимфаденопатия, увеличение и болезненность при пальпации печени и селезенки, поражение нервной системы (раздражительность, явления менингизма, менингит), поражение сердечно-сосудистой системы, опорно-двигательной системы в виде артралгий. Хроническая форма заболевания распространена и характеризуется слабыми признаками интоксикации, рецидивирующим течением с периодами обострений. Отмечается поражение опорно-двигательного аппарата в виде артритов, периоститов, перихондритов крупных суставов с формированием ограничения их подвижности, анкилозов. Также наблюдаются миозиты, фиброзиты, целлюлиты. Поражается центральная и периферическая нервные системы в виде радикулитов, невралгий, невритов, неврозов. В патологический процесс могут вовлекаться сердечно-сосудистая система с развитием васкулитов, миокардита, эндокардита, урогенитальный тракт, органы эндокринной системы. Встречается также локализованная форма бруцеллеза. Она отмечается в 20-40 % случаев инфекции и характеризуется изолированным поражением какого-либо органа, например органов мочеполовой, нервной системы, сердца, а также поражением сустава. Как правило, локализованный бруцеллез – это последствие не распознанной ранее острой формы заболевания.

Диагностика бруцеллеза основана на эпидемиологических, клинических данных и результатах изменений лабораторных показателей. Следует отметить, что диагностика бруцеллеза затруднена из-за того, что заболевание может протекать в бессимптомной, хронической и локализованной форме.

Серологическая лабораторная диагностика бруцеллеза заключается в выявлении специфических антител против антигенов возбудителя Brucella spp. Данный метод обладает высокими показателями диагностической чувствительности и быстротой получения результата. На 6-7-й день от начала заболевания начинают синтезироваться специфические антитела класса IgM. На 2-й неделе заболевания преобладает синтез антител класса IgG, достигая максимального уровня, а затем в течение длительного времени сохраняясь в циркулирующей крови. Титры обоих классов антител непрерывно нарастают, достигая максимальных значений в течение четырех недель от начала инфицирования. Диагностически значимым является нарастание титра специфических антител не менее чем в 4 раза в парных сыворотках, взятых в первые дни болезни и через 2 недели от ее начала в свежем образце крови. Определение антител к Brucella spp. также рекомендуется для оценки эффективности проводимой терапии. При положительных эффектах лечения отмечается снижения уровня антител, в то время как сохранение высоких титров свидетельствует о неэффективности терапии.

Для чего используется исследование?

Для лабораторной серологической диагностики бруцеллеза.
Для диагностики острой, подострой, хронической форм бруцеллеза.
Для оценки эффективности проводимой терапии.

Когда назначается исследование?

При клинических проявлениях острой и подострой форм бруцеллеза: слабость, головная боль, длительная лихорадка с температурой 39-40 °С и выше с ознобами, лимфаденопатии, гепатоспленомегалия, артралгии, артриты, поражения сердечно-сосудистой, нервной систем.
При клинических проявлениях хронической формы бруцеллеза: интоксикация, артриты, артралгии, миалгии, миозиты, фиброзиты, целлюлиты, радикулиты, невралгии, васкулиты, миокардиты, эндокардиты.
При симптомах изолированных поражений органов урогенитального тракта, нервной системы, сердечно-сосудистой системы, опорно-двигательной системы, особенно в группе лиц с возможным профессиональным инфицированием (ветеринары, работники мясной промышленности, животноводства, сотрудники микробиологических лабораторий), в эндемичных по бруцеллезу районах.

Что означают результаты?

Диагностический титр: 1:100.

Причины положительного результата:

бруцеллез;
острая, подострая, хроническая форма бруцеллеза;
бруцеллез, протекающий в виде локализованных форм;
ложноположительные результаты.

Причины отрицательного результата:

отсутствие бруцеллеза;
отсутствие или снижение иммунного ответа;
ранние сроки инфицирования;
проведение исследования на поздних сроках от момента возможного инфицирования, когда в крови отсутствуют антитела.

Что может влиять на результат?

Клинический период и форма заболевания.
Особенности иммунного ответа у новорождённых детей, пожилых людей и лиц с патологией иммунной системы.

Важные замечания

При серологическом исследовании чаще всего выявляют антитела к общему для многих микроорганизмов липополигосахариду, компоненту клеточной стенки бактерий. Могут отмечаться ложноположительные результаты при наличии инфекции Yersinia enterocolitica O:9, Salmonella urbana группа N, Vibrio cholerae, Francisella tularensis, Escherichia coli O:157, Stenotrophomonas maltophilia и некоторых других микроорганизмов.
Может быть рекомендовано определение генетического материала возбудителя методом полимеразной цепной реакции.

Также рекомендуется

15 С-реактивный белок, количественно (высокочувствительный метод)

Кто назначает исследование?

Инфекционист, терапевт, хирург, врач общей практики, невролог, ревматолог, уролог, кардиолог.

Серологическая диагностика – наиболее распространенный метод диагностики бруцеллёза, при котором с помощью различных реакций проводится выявление специфических антител к бруцеллёзу и выявляется нарастание титра антител.

Серологическая диагностика бруцеллеза заключается в обнаружении специфических антител в сыворотке крови животных:

- в реакции агглютинации (РА) в пробирках,

- реакции связывания комплемента (РСК),

- реакции длительного связывания комплемента на холоде (РДСК),

- реакции иммунодиффузии с 0-полисахаридным антигеном (РИД),

- пластинчатой реакции агглютинации с роз бенгал антигеном (роз бенгал проба - РБП)

- реакция непрямой гемагглютинации (РНГА)

и в молоке коров - кольцевой реакции (КР) и других реакциях, утвержденных в установленном порядке.

Почему так много серологических реакций на бруцеллёз?

Во время бруцеллеза в организме животного происходят защитные реакции, вызванные внедрением возбудителя. На разных этапах развития заболевания в организме больного животного вырабатываются те или иные антитела, которые выявляются в одной или в нескольких реакциях. Так в начале заболевания образуются антитела, которые выявляются в основном в реакции агглютинации (РА), а самые поздние антитела (спустя шесть месяцев после заражения) улавливаются в реакции иммунодиффузии (РИД). Поэтому для выявления бруцеллеза разработана не одна реакция. На разных стадиях заболевания животного в зависимости от дозы попавшего в организм возбудителя, и от резистентности самого организма животного в тот или иной момент наличие специфических антител к бруцеллёзу показывают лишь определённые реакции.

На ранних стадиях бруцеллезного процесса наиболее чувствительна реакция агглютинации (РА). Агглютинины в сыворотке крови больных животных в низких титрах можно выявить уже с 10-15-го дня заболевания. Наиболее высокий титр антител отмечают обычно через 1-3 месяцев от начала заболевания, в дальнейшем он начинает быстро снижаться. У отдельных особей повышенный титр антител может сохраняться до 2 лет.

Реакция связывания комплемента (РСК) и реакция длительного связывания комплемента на холоде (РДСК) – специфичные и высокочувствительные методы диагностики бруцеллёза, дополняющие данные РА. РДСК часто применяют вместо РСК для исследования сывороток крови, обладающих антикомплементарными свойствами. Обе реакции позволяют выявлять комплементсвязывающие антитела к бруцеллам, появляющиеся в крови больного животного позже агглютининов. В связи с этим РСК (РДСК) позволяет выявить большее количество больных животных в стадах с хронической инфекцией бруцеллёза. Максимальные титры комплементсвязывающих антител в РСК (РДСК) регистрируют к 4-му месяцу заболевания, в дальнейшем титр снижается, но в небольшом количестве их обнаруживают в течение нескольких лет.

Роз бенгал проба (РБП) применяется при плановых профилактических исследованиях животных на бруцеллез в качестве экспресс-метода на неиммунизированных противобруцеллезными вакцинами животных. В основе этой реакции лежит непосредственное соединение антигена и антитела. РБП является специфичным и чувствительным методом, благодаря кислой реакции антигена, ингибируется проявления неспецифических антител. На постановку РБП (роз бенгал проба – пластинчатая цветная реакция агглютинации) уходит несколько минут, однако с ее помощью нет гарантированной возможности количественно оценить наличие антител Сыворотки крови животных благополучных хозяйств, реагировавшие положительно на РБП, сразу же исследуют в РА и РСК, РА и РИД, или в РНГА для установления титра агглютининов и наличия комплементсвязывающих антител. Сыворотки, с которыми получена отрицательная РБП, дополнительно в РА и РСК (РДСК) не исследуют.

Реакции иммунодиффузии с 0-полисахаридным антигеном (РИД).

Сущность метода состоит в выявлении бруцеллезных антител, основанном на способности антител и антигена диффундировать в агаровом геле и при взаимодействии образовывать комплекс антиген-антитело, наблюдаемый в виде линии преципитации. Результат исследований становится известен лишь спустя 48 часов. Используется для контроля эпизоотического состояния по бруцеллезу животных не ранее чем через 1,5 месяца после вакцинации и для дифференциации положительных реакций, полученных в РА или (и) РСК (РДСК) по истечении 6 месяцев после введения вакцины;

При получении положительного результата в реакции иммунодиффузии, животное признают больным бруцеллезом.

Кольцевая реакция применяется с целью ориентировочной проверки благополучных по бруцеллезу молочных стад и для проверки молока на рынках. Сущность кольцевой реакции заключается в том, что в молоке бруцеллезных животных при добавлении антигена образуется комплекс антитела с антигеном, который адсорбируется жировыми частицами молока. Жировые частицы вследствие своего малого удельного веса поднимаются наверх, увлекая адсорбированный агглютинат, который в зависимости от цвета антигена образует на поверхности жидкости окрашенное кольцо. Преимущество КР с молоком заключается в простоте постановки и быстроте получения результатов. Всех животных, реагирующих по КР в свободных от бруцеллеза стадах, необходимо перепроверять по РА и РСК (РДСК).

Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА) при бруцеллезе является специфической и высокочувствительной. Для её проведения используют эритроцитарный бруцеллезный полисахаридный диагностикум. Метод основан на выявлении бруцеллезным эритроцитарным антигеном специфических антител в сыворотке крови больных бруцеллезом животных или иммунизированных вакцинами против бруцеллеза животных. По диагностической эффективности значительно превосходит используемые в ветеринарной практике другие методы диагностики бруцеллеза (РА, РСК, РБП и РИД с ОП-С антигеном), вместе взятые, выявляя больных бруцеллезом животных в более ранние сроки после заболевания. При этом является экспресс-методом пригодным для массовой диагностики бруцеллеза животных, результат становится известным в течение 3-4 часов,

Мелкий рогатый скот, иммунизированный против бруцеллеза, в РНГА не исследуют.

Интерпретация результатов серологических исследований на бруцеллёз во многом зависит от достоверных данных о благополучии хозяйства по бруцеллёзу и вакцинации против бруцеллёза.

Важно соблюдать сроки разрешающие проведение серологических исследований после применения вакцины, указанные в инструкции. Так как например аглютиногенные вакцины (из шт. Б. абортус 19, Б. абортус 82 и др.) изготавливают из культур бруцелл, находящихся в S- или в SR (RS)-форме. В организме животных, привитых такими вакцинами, синтезируются специфические антитела, гомологичные S-антигену, выявляемые стандартными бруцеллезными диагностическими препаратами в РА, РСК, РДСК, РБП КР с молоком, РИД с 0-ПС антигеном и др. При нарушении инструкции у таких животных будут выявлены вакцинные специфические антитела.

Также важно строго соблюдать правила отбора и сроки доставки материала для исследования, которые оказывают большое влияние на результаты исследований.

Помимо этого, иногда встречаются индивидуальные неспецифические реакции при исследовании сывороток на бруцеллёз.

При постановки РА и РБП, особенно в весеннее время, при исследовании сыворотки крови отдельных незараженных и не вакцированных против бруцеллеза животных с бруцеллезными антигенами могут быть получены неспецифические результаты реакций. Обычно появление таких реакций обусловлено глубокой беременностью, стрессами, прививками против других болезней или носительством близкородственных в антигенном отношении грамотрицательных микроорганизмов (пастерелл, сальмонелл, кампилобактерий,иерсиний и др.), а также рядом других причин.

Кольцевая реакция с молоком (КР) может давать положительные реакции при исследовании молока коров, больных маститами и другими болезнями, сопровождающимися лихорадкой, а также в первые две недели после отела.

Поэтому при выявлении положительных или сомнительных реакций, рекомендуется проводить повторное исследование материала, взятого от таких животных, и исследовать их спустя 15-30 суток в аналогичных реакциях, а также в других реакциях показывающих нарастание или падение титра антител.

Читайте также: