Лаборатория молекулярной диагностики туберкулеза сеченова

Обновлено: 01.05.2024

Для данного исследования лаборатория принимает следующий биоматериал:

Возможны ограничения в приеме биоматериала. Уточняйте информацию в расписании нужного Вам офиса.

Подготовка к исследованию

Специальной подготовки не требуется.

Квантифероновый тест – современный лабораторный тест для выявления скрытой и активной туберкулезной инфекции. В настоящий момент в различных странах разработано и выпущено большое число национальных рекомендаций по применению данного теста.

Туберкулёз — широко распространённое во всем мире инфекционное заболевание, вызываемое различными видами микобактерий (Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium bovis, Mycobacterium africanum и др.). При туберкулезе чаще поражаются органы дыхания, но могут быть вовлечены в процесс и другие органы и системы организма - суставы, кости, мочеполовая система, кожа и т.д.

Микобактерии туберкулёза (МБТ) распространяются преимущественно воздушно-капельным путем (при кашле, чихании, отхаркивании). Источник инфекции – человек с легочной формой туберкулеза. Возможно несколько вариантов исхода проникновения возбудителя в организм:

полная элиминация МБТ;
развитие заболевания;
латентная туберкулезная инфекция (ЛТИ);
реактивация туберкулеза.

Примерно 1/3 часть населения мира инфицирована МБТ, и только у 5-10% инфицированных лиц развивается заболевание. Состояние, когда МБТ присутствуют в организме человека, но при этом отсутствуют клинические и рентгенологические признаки туберкулеза, носит название ЛАТЕНТНАЯ туберкулезная инфекция. При наличии неблагоприятных факторов ЛТИ может перейти в активную форму туберкулеза. К группе высокого риска инфицирования МБТ относятся лица, имевшие контакт с больным ТБ, или имеющие высокую вероятность контакта (работники противотуберкулезных диспансеров, приютов, исправительных учреждений и др.), маленькие дети, лица с сопутствующими заболеваниями, приводящими к снижению иммунитета (ВИЧ, сахарный диабет и др.) или находящиеся на иммуносупрессивной терапии.

Симптомы активной формы туберкулеза (кашель, лихорадка, ночной пот, потеря веса и др.) могут быть умеренными в течение многих месяцев. Это может приводить к запоздалому обращению за медицинской помощью и распространению инфекции. За год человек, больной туберкулезом, может инфицировать до 10–15 других людей, с которыми он имеет тесные контакты. Поэтому выявление лиц с ЛТИ и активной формой туберкулёза и их своевременное лечение имеют большое значение в борьбе с этим заболеванием.

До недавнего времени единственными доступными тестами выявления латентной туберкулезной инфекции были кожные туберкулиновые тесты - проба Манту и Диаскинтест®. Однако оба теста, учитывая специфику постановки реакции – внутрикожно - имеют ряд противопоказаний и ограничений к проведению.

Противопоказания к проведению туберкулинового кожного теста (проба Манту и Диаскинтест®):

Индивидуальная непереносимость туберкулина;
Острые и хронические (в период обострения) инфекционные заболевания, за исключением случаев, подозрительных на туберкулез;
Соматические заболевания в период обострения;
Заболевания кожи;
Аллергические состояния (период обострения);
Эпилепсия;
Период карантина в детских коллективах.

В настоящее время помимо туберкулиновых кожных тестов существует другой подход для диагностики всех видов туберкулеза: гамма-интерфероновые тесты IGRA (КВАНТИФЕРОНОВЫЙ ТЕСТ и T-SPOT.TB), которые имеют ряд преимуществ перед кожными тестами.

КВАНТИФЕРОНОВЫЙ ТЕСТ на туберкулёз – это тест, позволяющий определить уровень специфического гамма-интерферона в крови пациента с целью подтверждения или опровержения наличия туберкулезной инфекции.

Преимущества квантиферонового теста перед кожными тестами:

Не имеет противопоказаний и ограничений по времени проведения;
Не дает ложноположительных результатов в случае вакцинации БЦЖ;
Безопасность процедуры и отсутствие побочных реакций;
Интерпретация результатов этого теста менее субъективна, чем интерпретация результатов кожной туберкулиновой пробы;
Высокая специфичность и высокая чувствительность.

Показания к исследованию:

Дети, привитые БЦЖ, у которых выявлена ложноположительная реакция Манту;
при противопоказаниях проведения кожных проб (эпилепсия, вакцинация, острый инфекционный процесс или обострение хронического, карантин и т.д.);
при подозрении на внелегочные формы туберкулеза

проведение скрининга среди пациентов, относящихся к группам риска по развитию ТБ:

медицинские работники;
люди, которые много путешествуют;
военные;
беременные;
иммигранты;
заключенные или прибывшие из мест заключения;
больные наркоманиями;
лица, контактирующие с туберкулезными больными.

Пример результата исследования и интерпретация:

Параметр	Результат	Критерии оценки результатов	Ед. изм.
Квантифероновый тест (диагностика туберкулеза)	Отрицательный	Отрицательный
Содержание гамма-интерферона в контрольной пробе (Nil),	0,05	< 8,00	МЕ/мл
Содержание гамма-интерферона в пробе с ТВ-антигеном (ТВ Ag),	0,09	< 0,35 (или ≥0,35, но < 25% контрольного значения Nil)	МЕ/мл
Содержание гамма-интерферона в пробе с митогеном (Mitogen), МЕ/мл	9,56	≥0,50	МЕ/мл

Примечание к Квантифероному тесту: данный тест не дифференцирует латентный и активный туберкулез. В случае положительного результата необходима консультация врача-фтизиатра для определения дальнейшей тактики. Величина уровня гамма-интерферона не коррелирует со стадией и степенью инфицирования, уровнем иммунной реактивности или вероятностью перехода латентного туберкулеза в активный.

Интерпретация результата исследования

Инфицирование МБТ;
Инфицирование нетуберкулезными микобактериями (M. kansasii, M. szulgai, M. marinum).

Индивидуальные особенности иммунитета;
Нарушение преаналитических требований.

В этом случае врач принимает решение либо в пользу забора нового образца крови, либо в пользу проведения других медицинских обследований.

Вероятность инфекции М.tuberculosis complex отсутствует

В ранние сроки инфицирования;
При иммунодефицитных состояниях;
У детей < 5 лет;
При несоблюдении преаналитических требований.

При единовременном заказе нескольких услуг, услуга по сбору биоматериала оплачивается только один раз.

Клиническая лабораторная диагностика в ГБОУ ВПО Первого МГМУ им. И.М.Сеченова Минздравсоцразвития России представлена совокупностью клинико-диагностических лабораторий - подразделений Клинического центра, обеспечивающих оказание высококвалифицированной специализированной диагностической медицинской помощи амбулаторным и стационарным пациентам Клинического центра.

Координирует и контролирует деятельность лабораторно-диагностических подразделений Клинического центра ГБОУ ВПО Первого МГМУ им. И.М.Сеченова Минздравсоцразвития России заместитель директора по лабораторным технологиям к.м.н. Евгений Павлович Гитель.

В структуру клинико-диагностических лабораторий ГБОУ ВПО Первого МГМУ им. И.М.Сеченова Минздравсоцразвития России входит:
12 специализированных клинико-диагностических лабораторий
6 клинико-диагностических лабораторий общего типа
Деление клинико-диагностического комплекса ГБОУ ВПО Первого МГМУ им. И.М.Сеченова Минздравсоцразвития России по специализированным лабораториям обусловлено особенностями биологического материала, методами исследований, используемым оборудованием, профессиональной специализацией врачей клинической лабораторной диагностики.

Так же в составе клинико-диагностических лабораторий общего типа функционируют 3 лаборатории экспресс-диагностики, работающих в круглосуточном режиме. Одной из главных задач лабораторий экспресс-диагностики является выполнение экстренных лабораторных исследований для оказания реанимационной помощи больным и диагностики неотложных состояний.

Все клинико-диагностические лаборатории ГБОУ ВПО Первого МГМУ им. И.М.Сеченова Минздравсоцразвития России оснащены современным оборудованием ведущих мировых производителей, на которых выполняется более 650 различных видов исследований.

Для удобства амбулаторных пациентов в ГБОУ ВПО Первого МГМУ им. И.М.Сеченова Минздравсоцразвития России функционируют 9 централизованных пунктов приема анализов, где можно оформить все необходимые документы (бланк-направление, договор на оказание платных медицинских услуг), произвести оплату и осуществить забор биологического материала в одном месте.

Каждый сотрудник клинико-диагностического комплекса ГБОУ ВПО Первого МГМУ им. И.М.Сеченова Минздравсоцразвития России имеет свидетельство о повышении квалификации, а также сертификат специалиста который подтверждается каждые 5 лет.

Клинико-диагностические лаборатории ГБОУ ВПО Первого МГМУ им. И.М.Сеченова Минздравсоцразвития России повышают качество лабораторных исследований путем систематического внутрилабораторного контроля качества лабораторных исследований, а также принимаю участие в нескольких системах внешней оценки качества:
Федеральной системы внешней оценки качества (Россия),
Международной программе внешней оценки качества RIQAS - Randox (Великобритания),
Международной программе внешней оценки качества EQAS - BIO-Rad (США).

Ниже представлен список специалистов, которые работают в ФГБУ Национальный исследовательский медицинский центр фтизиопульмонологии и инфекционных заболеваний Минздрава РФ:

ФГБУ Национальный исследовательский медицинский центр фтизиопульмонологии и инфекционных заболеваний Минздрава РФ

Рабочее время в которое можно записаться на прием к врачу Пн-Пт с 09:00 до 18:00

ФГБУ Национальный исследовательский медицинский центр фтизиопульмонологии и инфекционных заболеваний Минздрава РФ находится по адресу:
ул. Достоевского, 4, корп. 2, Москва

О компании

Специализированная больница ФГБУ Национальный исследовательский медицинский центр фтизиопульмонологии и инфекционных заболеваний Минздрава РФ располагает современнейшей техникой. Высокое качество обслуживания пациентов и доступная цена услуг делает НИИ фтизиопульмонологии одним из самых популярных центров здоровья. На веб.сайте центра вам предоставляется информация о ценах на лечение и возможность записаться на прием онлайн или по номеру телефона. Запись в Специализированную больницу производится круглосуточно. Консультирование наших больных согласно итогам нынешней диагностики исполняется на высшем уровне. НИИ фтизиопульмонологии гарантирует особый подход к каждому обратившемуся к нам, и дает гарантию комфортных условий. Находится мед центр адресу: ул. Достоевского, 4, корп. 2, Москва. Приходите к нам, мы позаботимся о вашем здоровье.

Фото объекта

Построить маршрут по карте до объекта медцентр, клиника, медицинская лаборатория, нии, специализированная больница, либо до ближайших объектов:

В 2004 году по инициативе д.м.н., профессора Михаила Александровича Владимирского, заведующего сектором молекулярной диагностики туберкулёза НИИ Фтизиопульмонологии Первого МГМУ им. И.М.Сеченова, мы начали разработки в области ПЦР-диагностики туберкулёза.

Выделение ДНК: использование оригинальных реагентов и магнитных частиц обеспечивает получение максимального количества чистой ДНК и позволяет автоматизировать процесс выделения ДНК.

ПЦР в реальном времени: одновременная детекция нескольких различных участков генома комплекса микобактерий туберкулёза (МБТ) увеличивает информативность и достоверность анализа.

I этап – Пробоподготовка, инактивация

II этап – Выделение ДНК

Набор реагентов для выделения ДНК (на магнитных частицах)

Набор реагентов для выделения ДНК микобактерий из клинических образцов и культур клеток на автоматизированных станциях TECAN

Снижение риска контаминации во время выделения ДНК практически до нуля.
Значительное уменьшение трудоёмкости процесса выделения ДНК.
Стандартизированное выделение ДНК из клинических образцов.
Экономическая выгода: низкий расход пластика и реактивов.

Набор реагентов для ускоренной пробоподготовки и выделения ДНК микобактерий из образцов мокроты

III этап – ПЦР в реальном времени

Обнаружение и количественное определение комплекса МБТ

высокая достоверность анализа благодаря одновременному обнаружению двух специфичных генов M.tuberculosis complex: IS6110 и regX3;
оценка пригодности образца ДНК для определения антибиотикоустойчивости;
высокая чувствительность (не более 100 КОЕ/мл мокроты или 1–10 копий фрагментов ДНК в реакции) и 100%‑ая специфичность, подтверждённые на панели QCMD (Quality Control for Molecular Diagnostics) Mtb EQA (UK).

Определение антибиотикоустойчивости МБТ к препаратам I и II ряда

Наборы реагентов АМПЛИТУБ-МЛУ-РВ, АМПЛИТУБ-FQ-РВ — это:

диагностика форм туберкулеза с лекарственной устойчивостью, в том числе множественной лекарственной устойчивостью (МЛУ) и широкой лекарственной устойчивостью (ШЛУ);
быстрая детекция мутаций M.tuberculosis, ассоциирующихся с устойчивостью к антибиотикам первого и второго ряда (рифампицину, изониазиду, этамбутолу, фторхинолонам);
достоверность результатов, ежегодно подтверждаемая при проведении Федеральной службой внешней оценки качества (ФСВОК) Росздравнадзора испытаний шифрованных тест-культур и образцов.

Наборы АМПЛИТУБ-МЛУ-РВ и АМПЛИТУБ-FQ-РВ основаны на использовании оригинальной мультиконкурентной аллель-специфичной методики ПЦР в реальном времени, позволяющей выявлять мутации в генах микобактерий туберкулеза, ответственных за устойчивость к конкретным антибиотикам.

Принцип мультиконкурентной аллель-специфичной методики ПЦР в реальном времени

В формате одной пробирки используются 5’-флуоресцентно-меченые аллель-специфичные праймеры с общим комплементарным им 3’-меченым олигонуклеотидом-гасителем и контрольный флуоресцентный зонд, комплементарный участку ДНК без мутаций.
При отсутствии мутаций в ДНК нарастание флуоресценции в ходе ПЦР-РВ наблюдается только по флуорофору зонда.
При наличии мутаций в ДНК нарастание флуоресценции в ходе ПЦР-РВ наблюдается как по флуорофору зонда, так и по флуорофору 5’-флуоресцентно-меченого аллель-специфичного праймера. Данный метод позволяет определить не только точку мутации, но и процент устойчивого мутантного штамма МБТ на фоне дикого.

Гены, кодоны, замены, используемые в наборах реагентов
АМПЛИТУБ-МЛУ-РВ при определении антибиотикоустойчивости

Использование автоматизированных станций Freedom EVO (TECAN, Швейцария) для молекулярно-генетической диагностики туберкулёза

Трудозатраты — 1 час
Продолжительность выделения ДНК — не более 2 часов
Подготовка к амплификации и ПЦР-РВ — 1,5 часа

ИТОГО: результаты анализа будут готовы через 3,5 часа
Оператор затратит 1 час своего рабочего времени.

Квантфивероновй тест (QuantiFERON®-ТВ Gold) – современный лабораторный тест для выявления туберкулезной инфекции, альтернатива классическому кожному тесту с туберкулином. В настоящий момент в различных странах разработано и выпущено большое число национальных рекомендаций по применению данного теста.

Квантифероновый тест основан на определении INF-γ (гамма-интерферона), высвобождаемого сенсибилизированными Т-клетками, стимулированными in vitro специфическими протеинами (ESAT-6, CFP-10, TB7.7 (p4)) микобактерий туберкулеза, входящих в комплекс Mycobacterium tuberculosis complex (M. tuberculosis, M. bovis, M. canettii, M. caprae, M. pinnipedii, M. mungi, M. microti, M. africanum и др.). Эти протеины отсутствуют в вакцинных штаммах M. bovis BCG и в большинстве нетуберкулезных микобактерий, за исключением M. kansasii, M. szulagai, M. marinum.

В исследуемой крови пациента (из пробирки с ТВ-антигеном) определяется содержание INFγ, результат анализируется в совокупности с данными, полученными из 2-х других пробирок (выполняющих роль контрольных).

Примерно 1/3 часть населения мира инфицирована МБТ, и только у 5-10% инфицированных лиц развивается заболевание. При наличии неблагоприятных факторов латентная туберкулезаня инфекция (ЛТИ – состояние, когда микобактерии туберкулеза (МБТ) присутствуют в организме человека, но при этом отсутствуют клинические и рентгенологические признаки туберкулеза) может перейти в активную форму с развитием внелегочного туберкулеза (например, туберкулез почек).

К группе высокого риска инфицирования МБТ относятся лица, имевшие контакт с больным туберкулезом, или имеющие высокую вероятность контакта (работники противотуберкулезных диспансеров, приютов, исправительных учреждений и др.), а также лица с сопутствующими заболеваниями (ВИЧ-инфекцией, сахарным диабетом и др.).

Используемые для диагностики ЛТИ кожные тесты – проба Манту и Диаскинтест®, имеют ряд противопоказаний и ограничений к применению.

Противопоказания к проведению пробы Манту и Диаскинтеста:

Индивидуальная непереносимость туберкулина;
Острые и хронические инфекционные заболевания и соматические заболевания в период обострения;
Кожные заболевания и аллергические состояния в период обострения;
Период карантина в детских коллективах.

У пациентов с индивидуальной гиперчувствительностью к туберкулину может наблюдаться ложноположительная реакция.

Сравнение тестов для диагностики туберкулезной инфекции

Параметр	Проба Манту	Диаскинтест®	Квантифероновый тест
Метод исследования	Кожный тест	Кожный тест	Исследование крови
Побочные реакции	Возможны	Возможны	Нет
Противопоказания	Есть	Есть	Нет
Специфичность	Низкая	Высокая	Высокая
Ложноположительные результаты после вакцинации БЦЖ	Да	Нет	Нет
Зависимость от сроков проведения профилактических прививок	Да (не ранее чем через месяц)	Да (не ранее чем через месяц)	Нет
Интерпретация результатов	Субъективна	Субъективна	Объективна

Преимущества квантиферонового теста:

отсутствие противопоказаний и ограничений по времени проведения;
отсутствие ложноположительных результатов в случае вакцинации БЦЖ;
безопасность процедуры и отсутствие побочных реакций;
интерпретация результатов этого теста менее субъективна, чем интерпретация результатов кожных туберкулиновых тестов;
высокая специфичность (99,1%) и высокая чувствительность (89,0%).

Показания к назначению квантиферонового теста:

Выявление ЛТИ в группах высокого риска: работники специализированных противотуберкулезных и других учреждений, где есть высокий риск контакта с возбудителем или больным туберкулезом, пациенты с сопутствующими заболеваниями и др.;
Наличие известных контактов с больным туберкулезом (бактериовыделителем);
Наличие положительной реакции пробы Манту для исключения поствакцинальной реакции;
Наличие противопоказаний к проведению кожных туберкулиновых проб (пробы Манту и Диаскинтеста®);
Дифференциальная диагностика инфекций, вызванных МБТ;
Обследование иммигрантов.

Пример результата исследования и интерпретация:

Примечание: Данный тест не дифференцирует латентный и активный туберкулез. В случае положительного результата необходима консультация врача-фтизиатра для определения дальнейшей тактики. Величина уровня гамма-интерферона не коррелирует со стадией и степенью инфицирования, уровнем иммунной реактивности или вероятностью перехода латентного туберкулеза в активный.

Параметр	Результат	Критерии оценки результатов
Содержание гамма-интерферона в контрольной пробирке (NIL)	0,05	До 8,00
Содержание гамма-интерферона в пробирке с ТВ-антигеном (ТВ Ag)	0,09	Менее 0,35 (или свыше 0,35, но до 25% контрольного значения NIL)
Содержание гамма-интерферона в пробирке с митогеном (Mitogen)	9,56	От 0,50
Квантифероновый тест (диагностика туберкулеза)	Отрицательный	Отрицательный

Интерпретация результата исследования

Инфицирование МБТ;
Инфицирование нетуберкулезными микобактериями (M. kansasii, M. szulgai, M. marinum).

Индивидуальные особенности иммунитета;
Нарушение преаналитических требований.

Не исключает инфицирования МБТ или туберкулеза.

В ранние сроки инфицирования;
При иммунодефицитных состояниях;
У детей < 5 лет;
При несоблюдении преаналитических требований.

Внимание! Интерпретация результатов должна проводиться с учетом клинико-эпидемиологического анамнеза и результатов других диагностических исследований.

Метод исследования: твердофазный иммуноферментный анализ.

Срок выполнения исследования: 3-10 рабочих дней.

Подготовка к проведению исследования: забор крови производят утром строго натощак (или не ранее, чем через 8 часов после последнего приема пищи).

Читайте также: