Микротестсистема для биохимической идентификации коринебактерий дифтерии

Обновлено: 08.05.2024

Антигенная структура дифтерийной палочки

У Corynebacterium diphtheriae выделяют О- и К- антигены ( Аг ). Липидные и полисахаридные термолабильные фракции О-антигена ( Аг ) коринебактерий преимущественно представлены межвидовыми антигенами ( Аг ).

Поверхностные термолабильные К-антигены ( Аг ) (нуклеопротеиды, белки) обеспечивают видовую специфичность и проявляют выраженную иммуногенность. С помощью анти-К-сывороток дифтерийные бактерии разделяют на серологические варианты (около 58). Биовар mitis включает 40 сероваров, gravis — 14, intermedius — 4. В отечественной практике используют диагностические агглютинирующие, неадсорбированные сыворотки; в том числе полигрупповые и к сероварам для РА на стекле и в пробирках.

Патогенез поражений дифтерии

Ферменты дифтерии (гиалуронидаза, нейраминидаза, фибринолизин) обеспечивают проникновение возбудителя в различные ткани, включая кровоток. Однако (в отличие от токсинемии) бактериемия клинически не проявляется.

Дифтерия. Нёбные миндалины, нёбные дужки и нёбный язычок покрыты беловато-грязными пленками.
Отмечается изъязвление тканей. Форсированное оттеснение языка позволяет увидеть надгортанник (пленки на нем отсутствуют).

Клинические проявления дифтерии. Клиника дифтерии. Признаки дифтерии

Продолжительность инкубационного периода дифтерии 2-12 сут. В клинической картине дифтерии выделяют сменяющие друг друга период манифестных проявлений фибринозного процесса и ранних токсических осложнений (первые 5-10 сут), период поздних токсических осложнений (не обязательный, с 10-12 сут до 6 нед), период реконвалесценции (2-3 мес после исчезновения проявлений).

В зависимости от локализации дифтерии выделяют поражения ротоглотки (наиболее часто), дыхательных путей, носа и редкой локализации (глаза, наружные половые органы, кожа, раневые поверхности).

Информация на сайте подлежит консультации лечащим врачом и не заменяет очной консультации с ним.
См. подробнее в пользовательском соглашении.

Внешний вид упаковки и препарата может отличаться от изображённого на фотографии

Филиал АО НПО "Микроген" в г. Нижний Новгород "ИмБио", 603950, г. Нижний Новгород, ул. Грузинская, д. 44

Инструкция по применению

Описание

Определение биохимических свойств коринебактерий дифтерии, выделяемых в ходе бактериологического исследования и идентификация их до биовара.

Форма выпуска

Выпускаются СИБ-полоски в про-бирках, СИБ-диски во флаконах по 50 на 50 анализов соответственно. По согласованию с потребителем к наборам № 1 и № 2 прилагается фосфатно-солевой буферный раствор pH 5,4-5,6.

Состав

Системы индикаторные бумажные (СИБ) для идентификации микроорганизмов представляют собой диски хроматографической бумаги, содержащие определенные количества субстрата в сочетании с соответствующим индикатором, стабилизированные пленкообразующим покрытием - поливиниловым спиртом.
Набор № 5 состоит из 4 тестов, позволяющих определить следующие ферментативные свойства: утилизацию глюкозы, сахарозы, наличие уреазы и амилазы.
СИБ-диски выпускают во флаконах по 50 дисков. Набор комплектуют в картонную пачку по 4 флакона с инструкцией по применению.
Набор № 5 обеспечивает проведение 50 анализов.

Показания для применения

Предназначен для определения биохимических свойств коринебакте¬рий дифтерии, выделяемых в ходе бактериологического исследования, и идентификации их до биовара.
Позволяет определять следующие биохимические свойства: утилизацию глюкозы,сахарозы, крахмала и наличие уреазы. Диск помещают в пробирку с соответствующей тесту средой (0,9% раствор натрия хлорида, фосфатно-солевой буфер), в которую суспензируют полную петлю суточной агаровой культуры микроорганизмов и инкубируют при температуре +37 °C. Учет реакции производится по изменению цвета растворенного субстрата.

Режим дозирования и способ применения

РЕГИСТРАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
Регистрацию результатов анализа проводят визуально.

Меры предосторожности при применении

Выявление дифтерийной палочки. Принципы микробиологической диагностики дифтерии. Диагностика дифтерии. Культивирование дифтерии. Определение токсигенности дифтерийной палочки.

С целью раннего выявления дифтерии и определения носителей дифтерийной палочки необходимы выделение и идентификация возбудителя, а также определение его способности к токсинообразованию. Материалом для исследования служат дифтеритические плёнки, слизь из носоглотки или отделяемое из подозрительных поражений кожных покровов.

Забор материала на дифтерию проводят двумя стерильными тампонами: один используют для посева, с другого делают мазки и окрашивают их по Граму и Найссеру. Взятый материал следует доставлять в лабораторию не позднее чем через 3 ч.

Бактериоскопия дифтерийной палочки

Окраска по Граму не является специфичной, так как дифтерийные палочки сравнительно плохо воспринимают красители, но позволяет косвенно идентифицировать непатогенные коринебактерии, располагающиеся в виде палисада (параллельно) или в виде китайских иероглифов. Окраска по Найссеру позволяет выявить характерные зёрна Бабеша-Эрнста и отличить дифтерийную палочку от ложнодифтерийной палочки С. pseudodiphtheriticum (С. hofmannii), часто обитающей в носоглотке.

Культивирование дифтерийной палочки

Бактерии дифтерии выделяют посевом на элективные среды с теллуритом (например, Клауберга II или Маклёода), ложнодифтерийная палочка (палочка Хофманна) теллур не восстанавливает (см. рис. 8 на вклейке). Для выделения чистой культуры дифтерии часть подозрительной колонии засевают на скошенный агар (или среду Ру), вторую часть — на твёрдую питательную среду для определения токсигенности и (не обжигая петли) проводят определение цистиназной активности (проба Пизу). При положительном результате наблюдают образование коричневого облачка вокруг линии укола. Чистую культуру идентифицируют на средах Хйсса, пользуясь укороченным пёстрым рядом (глюкоза, мальтоза, сахароза, мочевина), что позволяет отличить С. diphtheriae от непатоген пых коринебактерии (рис. 14-3).

Определение токсигенности дифтерийной палочки

Определение токсигенности дифтерийной палочки in vivo. Проводят подкожным или внутрикожным заражением 0,5-1,0 мл бактериальной культуры морских свинок массой 250 г. За 24 ч до заражения одно животное иммунизируют дифтерийным антитоксином. При положительном результате неиммунизированные животные погибают в течение 3-5 сут.

Фаготипирование дифтерийной палочки

Для дифференциальной диагностики возбудителей используют набор из 9 кори нефагов. С его помощью можно типировать большинство токсигенных и нетоксигенных штаммов биовара gravis.

Группа коринебактерий включает представителей родов Corynebacterium представленные неподвижными палочковидными бактериями, способными к ветвлению.

Коринебактерии. Corynebacterium diphtheriae

Род Corynebacterium семейства Corynebacteriaceae отдела Firmicutes образуют неподвижные прямые или слегка изогнутые палочки, окружённые микрокапсулой. Большинство видов коринебактерий — облигатные паразиты слизистых оболочек — патогенные и условно-патогенные для животных и человека виды.

Возбудитель дифтерии. Дифтерийная палочка ( палочка Клебса-Лёффлера ). Дифтерия. Гаротильо

Дифтерия — острое инфекционное заболевание, вызываемое Corynebacterium diphtheriae и её токсином. Дифтерийные палочки вызывают воспаление воздухоносных путей, реже кожных покровов. Токсин палочки Клебса-Лёффлера приводит к дегенерации периферических нервов, сердечной мышцы и других тканей.

Возбудитель дифтерии — Corynebacterium diphtheriae; впервые его выделил Э. Клебс (1883), а чистую культуру возбудителя получил Ф. Лёффлер (1884).

Эпидемиология дифтерии. Распространенность палочки дифтерии

Резервуар дифтерии — человек (больной, реконвалесцент, бактерионоситель); наибольшую эпидемическую опасность представляют больные лица. Реконвалесценты выделяют дифтерийную палочку в течение 15-20 сут. Основной путь передачи дифтерийной палочки — воздушно-капельный; также возможно заражение через предметы, используемые больным, и инфицированные пищевые продукты (обычно молоко).

При комнатной температуре во влажной атмосфере палочка Клебса-Лёффлера сохраняется долго. При 60 °С дифтерийная палочка отмирает в течение 10 мин; в высушенных плёнках выдерживает температуру 98 "С в течение 1 ч, а при комнатной температуре может сохраняться до 7 мес.

На игрушках дифтерийная палочка сохраняется до 2 нед, в пыли — до 5 нед, в воде и молоке — до 6-20 сут, на рассеянном свету остаётся жизнеспособным до 8 ч. Дезинфектанты и антисептики инактивирутют возбудителя дифтерии в течение 5-10 мин.

Пик заболеваемости дифтерией приходится на осенне-зимние месяцы.