Откуда берут кровь на вич и ифа

Обновлено: 25.04.2024

У каждого есть ВИЧ-статус, только у одних он положительный, а у других — отрицательный. Однако знать его необходимо, особенно в российских реалиях, когда в стране эпидемия, и уже более одного процента населения живет с вирусом.

Для диагностики вируса иммунодефицита человека существует несколько видов тестов, причем их классификация сложна лишь на первый взгляд, на самом деле она весьма логична. Главное — помнить, что, несмотря на высокую точность анализов, ни один тест не найдет вирус сразу после заражения.

Скрининговые (поисковые) тесты

Они помогают заподозрить инфекцию, но их результаты надо подтверждать другими анализами. Для скрининга используют тесты либо на антитела, либо на антигены/антитела.

ИФА (иммуноферментый анализ).

Этот метод служит не для обнаружения самого вируса, а антител, которые наша иммунная система вырабатывает для борьбы с ним.

Существует несколько поколений ИФА:

В первом поколении тестов использовался сам вирус, обработанный ультразвуком, при этом определялись антитела только ВИЧ-1. Анализ обладал невысокой чувствительностью и специфичностью.
ИФА второго поколения научили определять антитела как к ВИЧ-1, так и к ВИЧ-2. Материалом служили синтезированные белки, аналогичные настоящим антигенам вируса. Впрочем, тесты первого и второго поколения давно не используются.
Следом появились тесты третьего поколения, которые позволяют диагностировать длительно текущую (хроническую) ВИЧ-инфекцию с чувствительностью и специфичностью около 100 %. Однако при острой ВИЧ-инфекции (когда антител мало или совсем нет) их точность считается недостаточной.

За счет своей простоты и дешевизны этот метод используется чаще всего, в том числе на его основе работают экспресс-тесты.

Подтверждающие тесты

Как следует из названия, они позволяют наверняка убедиться в наличии или отсутствии вируса иммунодефицита у человека. Их минус в сложности и дороговизне.

Иммуноблоттинг помогает проверить результаты скрининговых анализов и уточнить, каким видом вируса инфицирован человек: ВИЧ-1, ВИЧ-2 или обоими. Этот метод обладает высокой точностью, чувствительностью, но дорог и сложен в исполнении. Он является комбинацией ИФА и электрофореза, что позволяет определить антитела к специфическим антигенам ВИЧ-1 (gp160, gp120, gp41).

ПЦР (полимеразная цепная реакция). Тест способен находить генетический материал ВИЧ (ДНК/РНК), то есть проверяет, есть ли непосредственно вирус в крови. Нуклеиновые кислоты могут обнаруживаться уже на 7-й день после инфицирования (по данным CDC — c 10 по 33 день).

Кроме того, ПЦР бывает качественным и количественным. В последнем случае можно отслеживать вирусную нагрузку (концентрацию вируса в крови и других биологических жидкостях) у людей с ВИЧ, оценивая эффект терапии.

А я могу сдать сразу иммуноблот или ПЦР, чтобы узнать свой ВИЧ-статус?

Иммуноблот используют специальные лаборатории центров по борьбе со СПИДом. Пробы крови направляются туда для перепроверки уже положительных первичных скрининговых анализов. Сразу сдать его не получится, даже в платных клиниках.

ПЦР, наоборот, можно сдать в любой момент, но только обратившись в коммерческую лабораторию. В СПИД-центрах его делают также для перепроверки ранее положительного теста. Да, ПЦР позволяет максимально быстро (в течение 7—10 дней после инфицирования) обнаружить ВИЧ, но и у него есть недостатки:

высокая стоимость;
может обнаружить только ВИЧ-1;
в редких случаях выявление низких уровней РНК ВИЧ (например,

Этот тест имеет смысл делать если:

у человека есть подозрение на острую ВИЧ-инфекцию (высокий риск инфицирования) или в период серологического окна;
донорам крови;
новорожденным от ВИЧ-положительных матерей

Как тогда правильно проверяться на ВИЧ?

Нужно ли повторно тестироваться, если результат анализа отрицательный?

Универсальной рекомендации, увы, нет. Повторные тесты нужны чтобы застраховаться от попадания в период окна, когда в крови еще нет антител и антигенов ВИЧ, а вирус уже проник в организм.

То же самое и с частотой тестирования — она зависит от разных факторов: количества рисков, приема доконтактной (PrEP) и постконтактной (PEP) профилактики, нахождения в группах риска (инъекционные наркопотребители, секс-работники, мужчины, практикующие секс с мужчинами). Однако эксперты рекомендуют проверяться каждые 6—12 месяцев.

Что может влиять на результат теста на ВИЧ?

Анализ на ВИЧ может дать неправильные результаты в следующих случаях:

при наличии системных аутоиммунных заболеваний (коллагенозов, васкулитов) и злокачественных опухолей;
при тестировании в период серологического окна — когда в крови еще не появились антитела к ВИЧ;
из-за ошибки при проведении теста в лаборатории;
после вакцинации от гриппа.

У детей, рожденных от ВИЧ-положительных матерей, до восемнадцатимесячного возраста в крови могут сохраняться материнские антитела, что может приводить к ложноположительным результатам.

Кроме того, прием PrEP и PEP могут влиять на точность анализов, так как антиретровирусные препараты уменьшают количество вируса в крови и антител к нему.

В случае с PEP после окончания курса рекомендуется посоветоваться с врачом и подобрать оптимальные сроки проведения анализов. Первый тест обычно проводят через 4—6 недель после контакта с ВИЧ, затем через 3 месяца, при необходимости — через 6 месяцев.

Считается, что крайне важно сдать анализ на ВИЧ перед началом приема PrEP и затем проверяться каждые 3 месяца, уже находясь на PrEP.

На результаты теста не влияют прием пищи и алкоголя или курение. Специальной подготовки перед сдачей анализов на ВИЧ не требуется.

А что с экспресс-тестами?

Они позволяют провериться на ВИЧ, не посещая лабораторию или поликлинику. По сути, это тесты ИФА третьего поколения, которые определяют антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 в слюне, моче или крови.

На рисунке показано, как быстро в крови появляются сам вирус (его генетический материал РНК) антитела и антигены, а также какие системы тестирования можно применить.

Точность большинства экспресс-тестов при хронической (длительно текущей) ВИЧ-инфекции достаточно высока (> 99 % чувствительности и специфичности), но все равно чуть ниже лабораторных анализов.

Сегодня среди них наиболее популярны тесты слюны (или околодесневой жидкости) и крови. Их можно либо купить самому, либо получить бесплатно в ВИЧ-сервисных организациях.

Важно помнить! Если такой тест оказался положительным, результат необходимо как можно быстрее перепроверить более точным методом.

Где я могу сделать тест на ВИЧ анонимно и бесплатно?

Анализ на ВИЧ бесплатный и анонимный, прикрепление к поликлинике и регистрация не требуются. После сдачи теста выдается идентификационный номер, по которому можно будет узнать результат.

Иммуноферментный анализ (ИФА) — это метод выявления в крови специфических антител, представляющих собой молекулы иммуноглобулинов. Он отличается высокой точностью и чувствительностью, позволяет определить не только качественный, но и количественный состав антигенов и антител в организме. В медицине иммуноферментный анализ применяется для выявления болезней, которые провоцируют микроорганизмы различных классов — от вирусов до паразитов, а также для диагностики аутоиммунных заболеваний.

Особенности анализа ИФА

Иммуноферментный анализ состоит из двух компонентов — иммунной и ферментативной реакции. Иммунная реакция связывает биологические молекулы, элементы клетки или микроорганизма, которые пытаются выявить. Ферментативная реакция позволяет увидеть и измерить результат иммунологической реакции.

ИФА относится к непрямым методам диагностики, так как с ее помощью можно определить наличие антител к патогенному микроорганизму, а не самого возбудителя. Этот анализ рекомендуется выполнять совместно с ПЦР-диагностикой.

Важность иммуноферментного анализа несомненна: его применяют, если требуется определить стадию развития заболевания, провести мониторинг проведенного курса лечения, оценить ответ организма на лечение либо подобрать оптимальную схему терапии.

К преимуществам ИФА относят следующее:

высокая чувствительность (до 90%), позволяющая обнаружить микроорганизмы даже в том случае, если они присутствуют в минимальных концентрациях;
возможность выявить заболевание еще до проявления симптомов;
скорость проведения анализа и получения результатов;
возможность определить примерный срок заражения, а также тип течения инфекции (острая или хроническая);
выявление с высокой степенью достоверности микроорганизмов, которые невозможно определить путем применения других диагностических методов (посева, микроскопии и т.д.).

Показания к проведению иммуноферментного анализа крови

Методика ИФА позволяет выявить в крови любой антиген — не только собственный, но и чужеродный для организма. Ее назначают при подозрении на скрытую инфекцию. Показаниями для проведения этого анализа являются:

выявление различных инфекций (гепатиты, паразитарные инфекции, герпес, хламидии, токсоплазмоз, сальмонеллез, вирус Эпштейн-Барра);
определение содержания гормонов для оценки работы органов эндокринной системы — щитовидной железы, гипофиза, половых желез;
выявление и отслеживание онкомаркеров (ПСА у мужчин, фактор некроза опухоли и т.д.);
диагностика аутоиммунных заболеваний (системный васкулит, ревматоидный артрит, системная красная волчанка, синдром Шегрена).

Также иммуноферментный анализ позволяет определить наличие антител к вирусу у пациента после прививки.

ИФА не оказывает непосредственного воздействия на антиген: этот метод позволяет оценить реакцию организма на присутствие такого антигена.

Чаще всего для проведения иммуноферментного исследования используют сыворотку венозной крови, взятой у пациента натощак. Также для анализа могут использоваться околоплодные воды, спинномозговая жидкость, содержимое стекловидного тела и слизь цервикального канала и уретры.

Подготовка к анализу ИФА

Чтобы снизить риск ошибки при проведении иммуноферментного анализа, пациенту рекомендуют подготовиться к этой процедуре. Речь идет о том, чтобы в течение 7-10 дней до назначенного исследования:

прекратить прием антибиотиков, а также противовирусных и антигистаминных препаратов;
исключить из рациона продукты-аллергены (шоколад, мед, орехи, яйца);
отказаться от жирных, острых, жареных блюд, алкоголя, сладостей;
ограничить физические нагрузки;
избегать сильных эмоциональных потрясений.

За сутки до забора крови нужно прекратить курение.

Интерпретация результатов анализа

При выполнении иммуноферментного анализа выявляют антитела разных типов – иммуноглобулины классов M, A, G (JgM, JgA, JgG). Они появляются в разные промежутки времени.

IgM указывает на то, что инфекция находится на острой стадии развития. Этот иммуноглобулин появляется в крови на 4-5 день после предполагаемого заражения. Если выявляют IgM, то пациент в данный момент является больным.

IgG характеризует хроническую форму инфекционного процесса, а также свидетельствует о наличии стойкого иммунитета к антигену. Выработка этого иммуноглобулина происходит на 20-28 день с момента заражения. IgG может сохраняться в крови долгое время – несколько месяцев и даже лет.

IgA – иммуноглобулины, выявление которых указывает на переход острой формы инфекционного процесса в хроническую. Они вырабатываются на 14-20 день с момента заражения и сохраняются в крови больного около двух месяцев.

Анализ ИФА может демонстрировать разные комбинации этих иммуноглобулинов. В зависимости от сочетания, они указывают на определенный этап в развитии заболевания:

JgM (-), JgG (-), JgA (-). Иммунитет к инфекции отсутствует.
JgM (-), JgG (+), JgA (-). У больного имеется иммунитет, приобретенный после введения вакцины или выполнения прививки.
JgM (+), JgG (-/+), JgA (-/+). У пациента присутствует острая инфекция.
JgM (+), JgG (+), JgA (+). У больного протекает период обострения хронической инфекции.
JgM (-), JgG (+/-), JgA (+/-). У пациента имеется хроническая инфекция.
JgM (-). Пациент был заражен, но сейчас выздоровел.

Если ИФА направлен на исследование гормонов щитовидной железы, то его допустимые границы находятся в таких пределах:

При диагностике аутоиммунных заболеваний у пациента могут выявляться такие антитела:

Антинуклеарные (аутоантитела к антигенам ядра клеток). Они характерны для системных аутоиммунных заболеваний.
Антитела к растворимым нуклеарным антигенам. Такие компоненты проявляются при различных системных аутоиммунных процессах.
Антикардиолипиновые антитела IgG и IgM. Они характерны для антифосфолипидного синдрома.
Антитела к двухспиральной ДНК, которые являются специфичными для системной красной волчанки.
Ревматоидный фактор. Антитела такого типа выявляют при ревматоидном артрите, хотя они не специфичны конкретно для этого заболевания и могут обнаруживаться при других отклонениях, а также у абсолютно здоровых пациентов.

Сейчас ИФА-анализ широко используется для выявления антител к коронавирусной инфекции.

Иммуноферментный анализ (ИФА) — способ обнаружения в крови специфических иммуноглобулинов (антител). Характеризуется достоверностью и чувствительностью. С помощью ИФА врачи одновременно определяют качественное и количественное содержание иммуноглобулинов в кровотоке. В медицинской практике такое исследование назначают для диагностики различных заболеваний, вызываемых бактериальными клетками, вирусами, грибками, простейшими микроорганизмами и паразитами. С помощью ИФА также возможно обнаружение иммунопатологических состояний.

Что такое иммуноферментный анализ (ИФА)?

Иммуноферментный анализ (ИФА) — способ лабораторной диагностики инфекционных и аутоиммунных патологий, предполагающий выявление разнообразных химических соединений (патогенов) с помощью реакции антиген-антитело. При проникновении в организм бактериальных клеток или иных вредных агентов из внешней среды развиваются иммунные процессы, направленные на их связывание и удаление. Выделяются иммуноглобулины, способные соединяться с определенным патогеном. Иммунитет для борьбы с инфекцией использует клеточные и гуморальные механизмы. К гуморальным факторам помимо антител относят разнообразные медиаторы.

ИФА проводится с использованием иммунного и ферментативного компонентов. Изначально иммунитет с помощью иммуноглобулинов связывает чужеродные агенты, представленные отдельными молекулами, клеточными элементами или целым организмом. Иммунный компонент направлен на их обнаружение. Ферментативная реакция дает возможность отобразить и оценить результат действия первого компонента. ИФА — непрямой способ исследования, поскольку результаты выявляют специфические иммуноглобулины к патогену, а не самого возбудителя инфекционного процесса.

Иммуноферментный анализ желательно проводиться вместе с ПЦР-тестом для получения достоверных клинических данных. Значимость ИФА в современной медицинской практике сложно переоценить: его используют для уточнения степени прогрессирования болезни, оценки эффективности лечебных мероприятий и скрининга определенных патологических состояний.

Эффективность и достоверность

Иммуноферментное исследование крови используется повсеместно в разных областях медицины, поскольку процедура отличается следующими преимуществами:

высокий показатель чувствительности, благодаря которому выявить инфекционного агента можно даже тогда, когда его уровень в кровотоке очень низкий;
диагностика патологического состояния до его симптоматических проявлений (эффективный способ скрининга);
с помощью современного оборудования ИФА проводится быстро, и врачи могут назначать лечение сразу после получения результатов;
по результатам можно понять, как давно человек заразился;
ИФА определяет, какой у человека инфекционный процесс: хронический или острый;
эффективная идентификация различных патогенов, которых сложно обнаружить с помощью иных способов диагностики.

По этой причине обследование больных при наличии симптомов инфекции или скрининг в современных реалиях редко обходится без подобной процедуры.

Показания к проведению ИФА

Иммуноферментный анализ дает возможность обнаружить антигены любого типа. Можно выявить собственные антигены организма, к которым иммунная система выделяет антитела для связывания. Наиболее распространенный повод для выполнения ИФА — подозрение на латентное протекание инфекционного процесса.

диагностика разнообразных форм инфекций: вирусного воспаления печеночной ткани, паразитарного заболевания, герпетической инфекции, венерической болезни, сальмонеллеза, вируса Эпштейн-Барра;
оценка уровня гормональных веществ для обследования эндокринной системы;
обнаружение онкологических маркеров и их мониторинг;
выявление иммунопатологических состояний: системной красной волчанки, синдрома Шегрена и других.

Подобный метод лабораторной диагностики дает возможность выявить специфические иммуноглобулины к вирусу после вакцинации. При этом анализ непосредственно не влияет на антигенные структуры. Суть обследования заключается только в оценке реакции иммунитета на наличие такой структуры.

Подготовка к исследованию

Для снижения вероятности получения ложноположительного или ложноотрицательного результата больному следует соблюдать определенные правила. Примерно за десять суток до проведения процедуры нужно следовать следующим врачебным рекомендациям:

отказаться от применения антибактериальных, антигистаминных и противовирусных медикаментов (согласованно с врачом);
воздержаться от употребления продуктов, провоцирующих развитие аллергических реакций: шоколада, орехов, цитрусовых фруктов и других;
не употреблять жирную, острую и жареную пищу;
отказаться от алкогольных напитков и продуктов, содержащих большое количество сахара;
избегать физического и психоэмоционального стресса.

За день до проведения процедуры нужно отказаться от табакокурения.

Как проводится иммуноферментный анализ?

Способ выполнения ИФА определяется по рекомендациям врача, выбравшего этот метод диагностики. В большинстве случаев в качестве материала получают кровь из вены натощак. Это обычная процедура, не отличающаяся от забора крови для проведения ее клинического или биохимического анализа. Медицинский работник использует жгут, протирает место прокола спиртом и вводит иглу в вену для получения 10 миллилитров жидкости. Полученный материал направляют в лабораторию, где используется специальное оборудование с реагентами для определения результатов.

Реже в качестве материала для выполнения исследования используют ликвор, околоплодные воды, слизь из мочеиспускательного канала или иную биологическую жидкость. В этом случае этапы проведения процедуры отличаются.

Расшифровка результатов ИФА

Специалисты обнаруживают разные типа иммуноглобулинов. При остром течении инфекции спустя несколько дней после заражения в крови появляются антитела IgM. Если речь идет о хроническом инфекционном процессе или о наличии стойкого иммунного ответа, когда с момента инфицирования прошло больше 3 недель, врачи обращают внимание на IgG. Переходная стадия выявляется по иммуноглобулинам IgA. В большинстве случаев у пациента выявляют различные сочетания этих антител, указывающие на особенности протекания болезни.

Достоверность анализа

Иммуноферментное исследование — одно из самых точных в лабораторной диагностике. Показатель чувствительности достигает 90%. Процедура направлена на обнаружение даже небольшого количества иммунных комплексов, выделенных в результате присутствия антигенов в органах и тканях. Ложные положительные или отрицательные результаты встречаются редко. ИФА хорошо дополняет другие обследования и заменяет различные тесты, не позволяющие идентифицировать возбудителя инфекции.

После выхода известного фильма Дудя большинство ВИЧ-сервисных НКО захлестнула волна желающих провериться. В том числе и СПИД.ЦЕНТР — поток клиентов увеличился почти втрое, а на тестирование пришли люди, раньше никогда не посещавшие открытого пространства фонда на Artplay.

Ввиду большого интереса публики, в том числе и клиентов, дошедших до нашего лофта на Нижней Сыромятнической, сегодня мы рассказываем, как устроены эти и другие тесты на ВИЧ. Почему на ручке тестера появляются полоски, насколько такое тестирование достоверно и надежно, а главное — какие альтернативы ему существуют.

Все, что вы хотели узнать о технологии тестирования на ВИЧ-инфекцию, — в одном материале.

Все анализы на ВИЧ предназначены для того, чтобы либо разыскать части вируса, либо зафиксировать реакцию организма на его присутствие. Поэтому, чтобы понять, как работают тесты на ВИЧ, нужно примерно представлять, как устроен вирус и как он себя ведет, оказавшись в клетке.

Вирус ВИЧ — член семейства ретровирусов (Retroviridae). Представители этого семейства выглядят как крохотные круглые частицы, у которых есть оболочка, усеянная особыми белками. При помощи этих белков вирус распознает клетку-жертву и прикрепляется к ней.

Вирион ВИЧ. Реконструкция. Красным показаны белки, с помощью которых вирус присоединяется к клетке.

Тестов на ВИЧ очень много, но их можно разделить на несколько больших типов. Те экспресс-тесты, которыми пользуются большинство ВИЧ-сервисных НКО, устроены по принципу иммуноферментного анализа, или ИФА.

Их задача — определить антитела к ВИЧ, которые организм вырабатывает в ответ на проникновение в него вируса.

Как это работает? Когда вирус ВИЧ попадает в организм, иммунная система человека не сидит без дела. Она начинает продуцировать антитела — иммунные белки, которые помогают организму бороться с инфекцией. Эти белки можно обнаружить во многих биологических жидкостях.

Способов обнаружения таких антител существует много. Но наиболее популярным считается именно иммуноферментный анализ (ИФА). За рубежом этот тест называется enzyme-linked immunosorbent assay, сокращенно — ELISA.

Напомним: антитела — это частицы, которые организм вырабатывает в ответ на присутствие в нем вируса. Антигены — частицы самого вируса. В данном случае модифицированные.

В экспресс-тестах, которые используются фондом СПИД.ЦЕНТР и многими другими нашими коллегами для бесплатного и анонимного тестирования, антитела тонкой линией нанесены на специальную поверхность, спрятанную под пластмассовым корпусом тестера.

Сначала клиент промокает десневую жидкость лопаточкой, установленной на конце тестера. А как только жидкость собрана, лаборант опускает лопаточку в реагент, который в течение 15 минут поднимается по тестеру, достигая в итоге полоски с антигенами.

Если антитела в десневой жидкости, смешанной с реагентом, были — полоска краснеет.

Как правило, на ручке тестера имеется и вторая полоса — контрольная, она окрашивается в красный всегда. Так что, как правило, отрицательный результат (вируса в организме нет) маркируется одной полоской на рукоятке тестера, а положительный (вирус в организме есть) — двумя.

Экспресс-тестеры на ВИЧ. Слева положительный (две полоски), справа отрицательный (одна) результат.

Две полоски на тестере — это верный признак того, что человек некоторое время назад получил ВИЧ-инфекцию. А стало быть, клиенту срочно нужно обратиться к врачу за терапией — в областной или городской центр СПИД. Там ему будут назначены подтверждающие анализы и прописана антиретровирусная терапия.

Точно такой же тест (ИФА), только лабораторный, можно сделать и во многих коммерческих клиниках — но за деньги. Технология его в целом выглядит так же, а точность отличается незначительно.

Какие бывают тесты ИФА?

● Лабораторный ИФА-тест — анализ на ВИЧ по форме 50. В нашей стране его применяют в качестве стандартной процедуры лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции. Материал для анализа — кровь из вены, которую нужно сдавать в лаборатории. Результаты приходят через 1—5 дней.

Что важно знать об ИФА-тестах?

Подтверждающие тесты: вестерн-блоттинг (WB)

Цель этого теста — подтвердить результаты первичного анализа.

Строение вируса ВИЧ. Схема.

Чтобы провести анализ, у человека берут кровь и добывают из нее сыворотку. Это все та же кровь, только без эритроцитов, иммунных клеток и всего остального, что может образовывать сгустки крови. Потом эту сыворотку наносят на полоску из нитроцеллюлозы, на которой в строгом порядке размещены различные антигены ВИЧ — белки из оболочки и нуклеокапсида вируса. Если в сыворотке крови уже успели появиться антитела, они свяжутся с антигенами, размещенными на полоске.

Какие бывают тесты этого типа? Разные. Некоторые позволяют подтвердить наличие вируса ВИЧ-1, некоторые — ВИЧ-2, а некоторые — обоих вариантов вируса сразу.

Пример: российская тест-система ИФА-Лайн-Блот-ВИЧ-1,2. Эта тест-система участвует в тендерах — закупках в государственные лаборатории, которые действуют при СПИД-центрах.

Что важно знать о вестерн-блоте?

В России вестерн-блоттинг считается золотым стандартом подтверждения ВИЧ-инфекции. Проблема заключается в следующем.

1. Вестерн-блоттинг все равно иногда дает неопределенный результат. В этой ситуации тест придется пересдать, причем только через три недели.

2. Вестерн-блоттинг дорогой и долгий. Тест требует сложного оборудования, кропотливой работы и квалифицированного персонала. А чтобы разобраться с результатами, нужна помощь эксперта.

В чем проблема с российскими анализами на ВИЧ?

В нашей стране для подтверждения ВИЧ-статуса используют лабораторный ИФА-тест и вестерн-блоттинг — это стандартная процедура. Однако Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) отмечает: в странах, где действует эта схема, на определение ВИЧ-статуса тратится очень много времени и средств. Причем ожидание результата настолько изматывает, что некоторые пациенты даже жалеют о решении узнать свой ВИЧ-статус.

Эксперты ВОЗ советуют отказаться от лабораторных ИФА-тестов и вестерн-блоттинга в пользу комбинированных экспресс-тестов, которые дают быстрый и более надежный результат. И это действительно работает.

Комбинированные тесты

Цель комбинированных тестов, как и вестерн-блоттинга, — определить ВИЧ-статус человека.

● Пример лабораторного комбинированного теста — HIV Ag/Ab Combo, который делают в частных лабораториях за деньги.

Что важно знать об этом тесте? Этот анализ относится к четвертому поколению. На сегодняшний день во всем мире именно он считается оптимальным способом выявления инфекции, потому что недорог и позволяет относительно рано узнать ВИЧ-статус клиента.

Если речь идет об определении ВИЧ-статуса, то в Европе и США чаще всего прибегают именно к комбинированным тестам. Если тест дает положительный результат, нет необходимости проводить подтверждающий анализ, его просто через некоторое время сдают повторно — и это считается достаточно надежным.

Дело в том, что антиген — вирусный белок р24 — появляется в крови уже в первую неделю после заражения, то есть задолго до того, как вырабатываются антитела. Поскольку комбинированный тест определяет антиген, шанс узнать свой статус есть уже через 21—28 дней после предполагаемого инфицирования.

После того как начинают вырабатываться антитела, вирусный белок р24 из крови пропадает. Иногда это происходит уже на вторую неделю, но у 90—95 % инфицированных людей антитела появляются в крови в первые три месяца после заражения.

Предсказать, когда именно появятся антитела, невозможно, ведь организм каждого человека по-своему реагирует на вирус ВИЧ. Но даже если антиген р24 из крови успеет исчезнуть, комбинированный тест найдет если не р24, то как минимум антитела, и все равно даст верный ответ.

ПЦР: самый сложный анализ

Тесты, позволяющие определить непосредственно генетический материал вируса ВИЧ, называются полимеразной цепной реакцией с обратной транскрипцией (ПЦР-ОТ).

Методов полимеразной цепной реакции (ПЦР), при помощи которой можно определять вирус ВИЧ, существует много. Но понять, что именно происходит в пробирке, проще всего на примере ПЦР с обратной транскрипцией (ПЦР-ОТ).

по теме

Общество

Две полоски. Как живут в Москве ЛГБТ-беженцы из Узбекистана

Реакцию ПЦР-ОТ можно провести в режиме реального времени. Это помогает достаточно точно понять, сколько вирусных частиц находится в организме. Обычно для этого в реакционную смесь добавляют кусочек ДНК, помеченный химическим веществом, которое начинает светиться, когда кусок ДНК встраивается в молекулу. Так как этот кусочек ДНК подходит только к одному участку вирусной ДНК, можно подсчитать количество вспышек и понять, сколько же вирусной РНК первоначально было в образце.

Видео: как работает ПЦР-тест

Но тест этот очень дорогой и сложный. Впрочем, это не единственная причина, по которой его не используют для определения ВИЧ-статуса для всех, хотя и это можно сделать в частной лаборатории за деньги. Дело в том, что тест подходит для определения только одного типа вируса — ВИЧ-1. ВИЧ-2 он не находит. Поэтому анализы ПЦР на ВИЧ обычно используют только для контроля лечения человека, который уже знает свой ВИЧ-статус.

Скрининговые (поисковые) тесты

ИФА (иммуноферментый анализ).

Делают его следующим образом: на очищенные части вируса (антигены), зафиксированные в специальной лунке, наносят кровь. Если в ней есть антитела, то образуются иммунные комплексы антиген/антитело, которые вступают в реакцию с красителем, приводя к изменению цвета. Это оценивается качественно (есть/нет реакции) и/или количественно при помощи дополнительной аппаратуры.

Существует несколько поколений ИФА:

В первом поколении тестов использовался сам вирус, обработанный ультразвуком, при этом определялись антитела только ВИЧ-1. Анализ обладал невысокой чувствительностью и специфичностью.
ИФА второго поколения научили определять антитела как к ВИЧ-1, так и к ВИЧ-2. Материалом служили синтезированные белки, аналогичные настоящим антигенам вируса. Впрочем, тесты первого и второго поколения давно не используются.
Следом появились тесты третьего поколения, которые позволяют диагностировать длительно текущую (хроническую) ВИЧ-инфекцию с чувствительностью и специфичностью около 100 %. Однако при острой ВИЧ-инфекции (когда антител мало или совсем нет) их точность считается недостаточной.

Современный ИФА позволяет обнаружить антитела, появляющиеся в крови с 30-го (цифры согласно клиническим рекомендациям Минздрава) дня инфицирования (по данным Центра контроля и профилактики заболеваний в США CDC — c 23 по 90 день).

по теме

Лечение

Как устроены ВИЧ и АРВТ? Объясняем на пальцах

Если такой тест оказался положительным, результат перепроверяется на тест-системе другого производителя, и в случае положительного результата применяется иммуноблот (смотри ниже).

Примечательно, что антиген р24 появляется в крови уже через 15 дней (по данным CDC — с 18 по 45 день) после инфицирования ВИЧ, поэтому такой вид анализа позволяет диагностировать ВИЧ-инфекцию раньше.

Так, эксперты из CDC считают комбинированные тесты наиболее предпочтительными для массового клинического использования. А российский Минздрав рекомендует его применять в качестве скринингового в большинстве лабораторий страны. Однако после получения положительного результата его также нужно перепроверять иммуноблоттингом.

Существуют два вида вируса ВИЧ — 1 и 2. В мире наиболее распространен ВИЧ-1. Разновидности вируса различаются по генетическому материалу, по-разному взаимодействуют с иммунитетом и отвечают на лечение.

Подтверждающие тесты

При положительной реакции антиген/антитело на полосках становится видно потемнение.

При этом методе в пробирке с помощью различных ферментов многократно дублируется участок ДНК или РНК вируса до таких объемов, что его можно увидеть глазом в виде полосок. Кроме того, ПЦР бывает качественным и количественным. В последнем случае можно отслеживать вирусную нагрузку (концентрацию вируса в крови и других биологических жидкостях) у людей с ВИЧ, оценивая эффект терапии.

А я могу сдать сразу иммуноблот или ПЦР, чтобы узнать свой ВИЧ-статус?

высокая стоимость;
может обнаружить только ВИЧ-1;
в редких случаях выявление низких уровней РНК ВИЧ (например,

Этот тест имеет смысл делать если:

у человека есть подозрение на острую ВИЧ-инфекцию (высокий риск инфицирования) или в период серологического окна;
донорам крови;
новорожденным от ВИЧ-положительных матерей

Как тогда правильно проверяться на ВИЧ?

Нужно ли повторно тестироваться, если результат анализа отрицательный?

Что может влиять на результат теста на ВИЧ?

Анализ на ВИЧ может дать неправильные результаты в следующих случаях:

при наличии системных аутоиммунных заболеваний (коллагенозов, васкулитов) и злокачественных опухолей;
при тестировании в период серологического окна — когда в крови еще не появились антитела к ВИЧ;
из-за ошибки при проведении теста в лаборатории;
после вакцинации от гриппа.

по теме

Профилактика

Меньше знаешь — крепче СПИД

А что с экспресс-тестами?

Если вы сделали экспресс-тест и он оказался положительным, необходимо его перепроверить более точным методом.

Где я могу сделать тест на ВИЧ анонимно и бесплатно?

Читайте также: