Экспресс тест на вирусный перитонит кошек
Обновлено: 26.04.2024
Требования к пробе: - венозная кровь в пробирке с антикоагулянтом ЭДТА - мин. объем - 1 мл. Плазму и эритроциты не разделять! - асцитная жидкость в стерильном контейнере без антикоагулянта- мин.объем - 0,5 мл - асцитная жидкость в стерильной пробирке с антикоагулянтом ЭДТА - мин.объем - 1 мл Будьте внимательны: - кровь с гепарином не подходит для исследований методом ПЦР! - кровь в пробирке для биохимии ( с активатором свертывани и/или гелем) не подходит для данного исследования Хранение и доставка: Материал для анализов доставляется в лабораторию в день взятия или на следующий день, сохраняя их при +2-+8⁰С. Допускается хранение образца асцитной жидкости в течение 14 дней при температуре не выше -16⁰С.
Диагностическая информация
FIP – это нозоологическое название болезни, вызываемой вирусом FCoV тип 1 и его мутация тип 2 , оба могут вызывать FIP Инфицируются в основном котята в возрасте не моложе 5-6 нед, хотя есть случаи заражения и в 2 недели Вирус выделяется с первой недели заражения и в течение последующих 20 дней (до формирования иммунитета). Антитела предотвращают повторное заражение в течение 2-3 мес, после этого кошка снова может заразиться, вот почему для предотвращения циркуляции вируса внутри питомников важно разделять серопозитивных и серонегативных кошек (см. исследование "Титр АТ к FIP) Интерпретация результатов: 1. Только выявление коронавирусов в асцитной жидкости у кошки с характерными клиническими симптомами подтверждает диагноз "FIP" 2. Выявление коронавирусов в крови само по себе (в отдельности) не подтверждает диагноз "FIP" 3. Выделение вируса с калом происходит непостоянно, поэтому для подтверждения статуса "вирусоноситель" необходимо получить 5 ежемесячных положительных результатов. По этой же причине, чтобы быть уверенным, что кошка свободна от коронавируса необходимо получить 5 последовательных отрицательных результатов кала (см. исследование "Коронавирусный гастроэнтерит") Дополнительные лабораторные исследования для подтверждения диагноза FIP включают в себя: - определение по сыворотке крови и/или асцитной жидкости индекса альбумин/глобулин - морфологическое исследование выпотной жидкости - определение в крови титра антител к коронавирусной инфекции - электрофорез белков сыворотки крови ВАЖНО! 1. Чтобы избежать ложноположительных результатов необходимо выдержать 2-3 недели после лечения перед сдачей анализа. 2. Положительный результат при отсутствии клинической картины заболевания может означать бактерио-/вирусоносительство.
.jpg)
Клиническая картина инфекционного перитонита кошек вариабельна и отражает вариабельность распределения васкулитных и пиогранулематозных поражений. Классифицирование инфекционного перитонита на выпотную и невыпотную формы (влажную и сухую) имеет некоторую ценность в различении клинических проявлений и помогает в постановке диагноза, но имеется много промежуточных вариантов между этими двумя формами. В случаях с преимущественно невыпотными проявлениями, поиск возможной аккумуляции субклинических, маленьких количеств жидкости может быть полезен для того, чтобы получить образцы для диагностического тестирования.
Лихорадка, рефракторная к антибиотикам, летаргия, анорексия и потеря веса являются частыми неспецифическими симптомами, но иногда пациенты остаются активными и сохраняют кондицию тела. Асцит является наиболее часто бросающимся в глаза клиническим проявлением выпотной формы (Holzworth,1963,Wolfe&Griesemer1966). Выпот в грудную и перикардиальную полости может встречаться одновременно или изолированно от выпота в брюшную полость. В случаях, когда наличие выпота ограничено грудной полостью, кошки обычно демонстрируют диспноэ. Серозиты могут вовлекать влагалищную оболочку семенников, приводя к увеличению мошонки.
Диагноз
Прижизненная диагностика инфекционного перитонита остается сложной задачей. Иногда окончательный диагноз может быть невозможен, например вследствие инвазивности биопсии органов у больной кошки.Трудности при постановке окончательного диагноза на инфекционный перитонит кошек возникают вследствие отсутствия неинвазивных подтверждающих тестов у кошек с отсутствием выпота.Выпоты нужно искать в первую очередь, поскольку получение их относительно неинвазивно. У кошек без выпотов должны быть оценены различные данные - анамнез, клинические симптомы, лабораторные изменения, титр антител (Rohreretal,1993), и они должны использоваться для принятия решения о дальнейших диагностических процедурах.
Частой лабораторной находкой является увеличение общей концентрации белка в сыворотке крови, вызванное повышением фракции глобулина, главным образом гамма-глобулинов (Paltrinieri et al,2001;2002). Гиперглобулинемия была найдена у примерно 50% кошек с выпотом и 70% кошек без выпота (Sparkes et al,1994). После экспериментального инфицирования вначале наблюдается увеличение α2- глобулинов, в то время как гамма- глобулины и титры антител увеличиваются незадолго до появления клинических симптомов Pedersen 1995;Gunn-Moore et al,1998). Общие концентрации белка в сыворотке крови могут достигать высоких концентраций ,120 г/л, и даже выше.
Отношение альбумина к глобулину имеет значительно более высокую диагностическую ценность, чем только общее содержание протеина или только концентрация гамма-глобулина, поскольку снижение сывороточного альбумина может также встречаться как результат сниженного синтеза (Shelly et al,1988;Rohrer et al,1993;Hartmann et al,2003). Низкие уровни альбумина обычно ассоциируются с потерей протеина, вызванной например гломерулопатией, вторичной к отложению иммунных комплексов, или экстравазацией богатой протеинами жидкости при васкулитах (Hartmann et al, 2003). Оптимум порогового значения (максимальная эффективность) -0,8 был определен для отношения альбумина к глобулину (Hartmann et al,2003;EBM класс I).
Электрофорез белков сыворотки крови может показывать гипергаммаглобулинемию –как поликлональную, так и моноклональную, также как и увеличение белков острой фазы. Другие лабораторные параметры (печеночные ферменты, билирубин, мочевина, креатинин) могут быть вариабельно увеличены, в зависимости от степени и локализации повреждения органов, но обычно не имеют пользы для постановки диагноза. Гипербилирубинемия и желтушность часто наблюдаются как отражение некроза печени (Hartmannetal,2003). Иногда, билирубин увеличивается без доказательства наличия гемолиза, заболевания печени или холестаза, это необычно и в других случаях только наблюдается у септичных животных. Метаболизм билирубина и его экскреция в билиарную систему нарушается вследствие высоких уровней TNF-α (тканевого фактора некроза), который ингибирует трансмембранный транспорт.
Таким образом, высокий билирубин в отсутствие гемолиза и подьема активности печеночных ферментов должен увеличивать подозрение на инфекционный перитонит кошек. Диагностическая ценность параметров белков острой фазы становится наглядной при измерении α1-кислого гликопротеина (AGP), который повышается у животных с инфекционным перитонитом кошек (Duthieetal,1997;Paltrinieri,2008).Высокие уровни AGP в сыворотке крови (>3 мг/мл) могут поддерживать диагноз инфекционный перитонит кошек (Paltrinieri et al,2007a), но уровни его также могут повышаться при других воспалительных состояниях. Кроме того, AGP может быть высоким у асимптоматичных кошек, инфицированных FCoV, особенно в домашних условиях, где инфекция эндемична (Paltrinieri et a 2007a).
Тест Ривальта является простым, недорогим методом, который не требует специального лабораторного оборудования и может быть выполнен на практике. Он был введен в практику итальянским исследователем Ривальта в 1900 г для дифференциации между транссудатами и экссудатами в гуманитарной медицине. Он также используется у кошек для дифференциации между выпотами вследствие инфекционного перитонита кошек и выпотами, вызванными другими заболеваниями (Hartmann et al,2003; EBM класс I). К положительной реакции ведут не только высокое содержание протеина, но и высокие концентрации фибриногена и воспалительных медиаторов.
Прозрачная пробирка ( обьемом 10 мл) наполняется примерно 7-8 мл дистиллированной воды, в которую добавляется 1 капля уксусной кислоты (98%) и тщательно смешивается. На поверхность этого раствора осторожно наслаивается 1 капля выпотной жидкости. Если капля растворяется и исчезает и раствор остается прозрачным, тест Ривальта считается отрицательным. Если капля сохраняет свою форму, остается прикрепленной к поверхности или медленно опускается вниз (похоже на медузу), тест Ривальта считается положительным.
В исследованиии кошек с выпотами (частота встречаемости инфекционного перитонита кошек 51%) тест Ривальта имел положительную прогностическую ценность 86% и негативную прогностическую ценность 96% для инфекционного перитонита кошек. Положительные результаты теста Ривальта могут быть также получены у кошек с бактериальными перитонитами или лимфомой, но эти выпоты обычно легко дифференцировать при помощи макроскопического исследования, цитологии и/или бактериальной культуры.
Анализ спинномозговой жидкости от кошек с неврологическими симптомами в вследствие инфекционного перитонита кошек может обнаруживать увеличенное количество белка (50-350 мг/дл); нормальный уровень
Титры антител, измеренные в сыворотке крови, способствуют постановке диагноза на инфекционный перитонит кошек, если интерпретируются с осторожностью. Вследствие повсеместности FCoV, высокий процент здоровых кошек имеют положительные титры антител и у большинства из них никогда не разовьется инфекционный перитонит. Таким образом, титры должны быть интепретированы с максимальной осторожностью и высокие титры антител здоровых кошек не имеют ни диагностической, ни прогностической ценности; утверждается ,что больше кошек умерло вследствие ложной интерпретации результатов тестов на антитела к FCoV , чем от инфекционного перитонита кошек (Pedersen,1995a).
Измерение антител в жидкостях, иных чем кровь, исследовалось (Boettcher et al,2007;Foley et al,1998), но не рекомендовано.
FCoVRT-PCR крови иногда используется как диагностический метод, но он не может различить между мутациями, вызвавшими FIP и обычной, не мутировавшей популяции FCoV(Fehr et al,1996).Положительный FCoVRT-PCR получали не только у кошек с FIP, но и у здоровых переносчиков, у которых не развивался инфекционный перитонит кошек в течение периода до 70 месяцев (Gunn-Mooreetal,1998b;Meli etal,2004; Gamble et al,1997; Herrewegh et al,1997; EBM класс I). Негативный FCoVRT-PCR также часто обнаруживается у кошек с FIP(Hartmann et al,2003). Более достоверным подходом является измерение измерение информационных РНК методом RT-PCR в крови с обоснованием, что их уровни коррелируют с уровнем репликации FcoV и, тем самым, с вероятностью мутации. Однако, справедливость этого предположения недоказана, поскольку от 5 до 50% здоровых кошек были PCR- позитивны (Simons et al,2005; Can-Sahnak et al,2007); тест недоступен в Европе.
Методы выявления FCoV включают поиск антигена в макрофагах при использовании иммунофлуоресценции (в макрофагах выпота) или иммуногистохимии ( в тканевых макрофагах образцов биопсии). В то время как FCoV может присутствовать системно у здоровых кошек, только в случае инфекционного перитонита кошек будет иметься достаточное количество антигена в макрофагах ,чтобы получить положительный сигнал. Действительно, иммунофлуоресценция внутриклеточного FcoV антигена в макрофагах выпотной жидкости показала 100% прогностическую ценность для FIP; низкая негативная прогностическая ценность (57%) установленная в контролируемом исследовании, могла наблюдаться вследствие низкого количества макрофагов в образцах выпота — даже если кошки имели подтвержденный FIP(Hartmann etal,2003).
Иммуногистохимия для выявления FcoV антигена в тканях также дает 100% прогностическую ценность в случае положительного результата (Tammer et l,1995;Kipar et al 1998b).Однако, для получения образцов ткани обычно необходимы инвазивные методы, такие как лапаротомия или лапароскопия. Когда сравнивались истинная биопсия и тонкоигольная аспирация ткани печени и почек при некропсии,их диагностическая чувствительность была схожей, но наблюдалась более высокая чувствительность ткани печени, в сравнению с тканью почек (Giordano et al,2005). Значение тонкоигольной аспирации под контролем УЗИ для диагностики инфекционного перитонита кошек in vivo исследуется.
В целом, имеется 2 диагностические стратегии для получения окончательного диагноза на инфекционный перитонит кошек: если имеется выпот, иммунофлуоресцентное окрашивание FCoV антигена в макрофагах доказывает наличие FIP. Если выпот отсутствует, должны быть получены образцы тканей из пораженных органов.
FCoV — распространенный и легко передающийся вирус. Процесс заражения происходит через контакт с фекалиями инфицированной кошки. Чаще заболевание FCoV встречается в домах с большим количеством кошек. Для человека и других животных он не опасен.
Как происходит заражение?
FCoV-вирус проникает в организм здорового животного через слизистые оболочки: при прямом контакте с инфицированными кошками, через предметы (особенно лоток для туалета) или при посещении мест, где испражнялись больные кошки. Возможно повторное самоинфицирование при вылизывании. Вплоть до 40% кошек в тот или иной период жизни оказываются инфицированы FCoV, хотя большинство владельцев этого так и не замечают.
Какие проблемы может вызвать FCoV?
У большинства кошек, инфицированных FCoV, не проявляется никаких симптомов, хотя у некоторых может начаться диарея, которая будет продрлжаться несколько дней. Через несколько месяцев организм полностью избавиться от вируса, а кошка останется здоровой.
Однако в очень редких случаях вирус мутирует и вызывает смертельную болезнь — инфекционный перитонит (FIP). Инфекционный перитонит развивается спустя несколько недель иили месяцев после заражения FCoV.
Если кошка избавилась от FCoV и не заболела FIP, означает ли это, что у нее появился иммунитет?
К сожалению, нет. Кошка может заразиться FCoV повторно, и тогда вновь возникнет опасность, что вирус мутирует в FIР.
Почему у некоторых кошек FCoV мутирует в FIP?
Точные причины, по которым FCoV иногда мутирует и вызывает FIP, не установлены, но известны некоторые факторы, под влиянием которых риск мутации повышается:
— стресс (например, переезд в новый дом, появление в доме новых животных, слишком большая скученность животных на ограниченной территории, помещение кошки в гостиницу для животных);
— возраст (мутация чаще происходит у молодых и пожилых кошек, чем в среднем возрасте);
— ослабленная иммунная система или другие заболевания, сопутствующие инфицированию FCoV;
— возможно — генетические факторы. В настоящее время не существует никаких тестов, позволяющих предсказать, разовьется ли FIP у кошки, заразившейся FCoV.
Каковы симптомы FIP?
Симптомы FIP проявляются в различных случаях поразному, и отличить их от внешних признаков некоторых других заболеваний нелегко. Выделяется два типа этого заболевания, хотя возможен и третий смешанный тип:
— влажный FIP: скопление жидкости в брюшной полосги (вызывающее вздутие живота) и/или в грудной клетке (затрудняющее дыхание);
— сухой FIP: жидкость в полостях тела почти не скапливается, но кошка становится вялой и теряет аппетит. Также возможны повышенная температура тела, потеря в весе, проблемы со зрением, нарушения поведения, нервные расстройства.
Как проводится диагностика FIP?
Алгоритмы постановки диагноза, рекомендуемые рядом европейских авторов, представляют собой сложные многоступенчатые комплексы исследований, включающие определение концентрации глобулинов в сыворотке крови и соотношения альбумина к глобулину, выявление титра антител в крови (ИФА, ИХА), выявление антигена (вируса) в крови и в фекалиях (ПЦР, ИХА) и т.д.
Современнее лабораторные тесты на FIP пока не дают 100 % достоверного результата. Поэтому заболевание удается диагностировать, основываясь на симптоматике, результатах врачебного осмотра, анализа крови, рентгеновского исследования и анализа образцов жидкости из грудной клетки или брюшной полости, по совокупности данных истории болезни.
При анализе крови могут выявиться антитела, вырабатывающиеся в организме зараженной кошки в ответ на FCoV, однако это не даетгарантии точного диагноза, так как повышенный уровень антител может свидетельствовать лишь о том, что в какой-то момент кошка контактировала с вирусом. Это не значит, что у у кошки непременно FIP. С другой стороны, у некоторых кошек, пораженных FIP, антитела не вырабатываются вообще.
Существует ли лекарство от FIP?
Лекарства от FIP не существует. Врач может назначить лечение, направленное на облегчение симптомов, но, к сожалению, большинство кошек, заболевших инфекционным перитонитом, погибают.
Можно ли предотвратить FIP?
К сожалению, вакцин против FCoV и FIP в России не существует. FIP развивается лишь у одной из десяти кошек, инфицированных FCoV. Но если вы подозреваете, что ваша кошка контактировала с FCoV, постарайтесь свести к минимуму стрессовые факторы в ее окружении: благодаря этому риск мутации вируса может снизиться. С этой целью желательно избегать скученности животных в тесном помещении. Кроме того, следует избегать сочетания событий, связанных со стрессом: например, не проводить одновременно антипаразитарную обработку, вакцинацию и стерилизацию. Желательно также как можно быстрее убирать фекалии, держать миски для корма и воды подальше от лотка и дезинфицировать лоток по меньшей мере два раза в неделю.
Скоро ли погибает вирус вне организма?
Вне организма вирус обычно живет недолго — от нескольких часов до нескольких дней. Но в закрытом помещении, в неочищенном лотке, он выживает до семи недель. Однако большинство дезинфицирующих средств с легкостью его уничтожают.
У одной из моих кошек обнаружили FIR. Следуетли мне изолировать ее от других кошек?
Нет. Весьма вероятно, что остальные кошки уже заразились FCoV, но риск развития FIP у них не выше, чем у любой другой кошки, инфицированной FCoV. Следуйте приведенным выше советам, как снизить риск возникновения FIР.
Моя кошка умерла от FIP. Когда мне можно будет завести другую кошку?
Если друг их кошек в доме нет, то уже через две недели после смерти кошки от FIP можно будет без опасений взять новое животное. Обязательно продезинфицируйте раствором гипохлорита натрия лоток, миски для корма и воды и места, где они стояли, а затем тщательно ополосните их водой. Если у вас в доме есть другие кошки, то, скорее всего, они уже заражены FCoV, a значит, могут заразить и новоприбывшую кошку. Посоветуйтесь со своим ветеринарным врачом о том, сколько времени лучше выждать. Некоторые врачи рекомендуют дождаться того момента, когда уровень антител крови ваших кошек снизится до нормы. Помните также, что новоприбывшая кошка тоже может быть инфицирована FCoV, так что ветеринарный врач может предложить взять у нее анализ крови для проверки уровня антител. К сожалению, практичных и эффективных общепринятых методов профилактики FIP в помещениях, где одновременно проживает множество кошек, пока не существует.
И нфекционный перитонит кошек (ИПК/ FIP) особо опасное вирусное заболевание, характеризующееся образованием выпота, гранулём в органах, плеврита. ИПК, наряду с панлейкопенией, вирусной лейкемией и иммунодефицитом кошек является одной из ведущих инфекционных причин смерти у кошек. В последние годы были достигнуты успехи в лабораторной диагностике FIP, но несмотря на значительный прогресс, многие аспекты патогенеза ИПК всё еще остаются загадкой.
Содержание статьи:
Пути заражения и распространение
Клинические признаки вирусного перитонита кошек
Лечение вирусного перитонита у кошек
ПАТОГЕНЕЗ
Появление FIP связано с мутацией кошачьего коронавируса (FCoV). При заражении коронавирусом репликация вируса происходит в эпителиальных клетках дыхательного тракта и кишечнике. Начальная стадия коронавируса кошек обычно бессимптомна, но в редких случаях проявляется энтеритом лёгкой и средней степени. Мутация коронавируса в вирусный перитонит чаще происходит после стрессовой ситуации в жизни кошки, сопровождающиеся снижением иммунного статуса организма.
ПУТИ ЗАРАЖЕНИЯ И РАСПРОСТРАНЕНИЕ
алиментарный (через зараженные фекалии)
вертикальный (от инфицированной кошки-котятам)
половой (при вязках с вирусоносителем)
Коронавирус (FCoV) кошек чаще распространен в питомниках, где животные содержатся группами. Около 60% породистых кошек серопозитивны по ИФА тест-системам и являются вирусоносителями.
7% домашних кошек с коронавирусом заболевают инфекционным перитонитом (FIP). У кошек, живущих группами вирусный перитонит (FIP) проявляется чаще.
КЛИНИЧЕСКИЕ ПРИЗНАКИ
наличие асцитной и/или выпотной жидкости
при выпоте в плевральную полость – нарушение дыхания
кошка вялая, потеря аппетита приводит к анорексии
патологический процесс ИПК приводит к дисфункции других органов брюшной полости, чаще почечной недостаточности, изменениям в работе печени, поджелудочной железы.
увеличиваются мезентериальные лимфатические узлы и печень, при пальпации прощупываются
отсутствие аппетита, анорексия
чаще отмечается поражение центральной нервной системы: вестибулярные расстройства, судороги, недержание мочи, изменения в поведении
нистагм глаз в связи с развитием гидроцефалии
увеличиваются мезентериальные лимфатические узлы и печень, при пальпации прощупываются
образование пиогранулем в почках
изменение размера стенки толстой кишки
ДИАГНОСТИКА ВИРУСНОГО ПЕРИТОНИТА
Диагностика коронавирусной инфекции достаточно проста, но поставить диагноз вирусный перитонит кошек (FIP) очень сложно. Существующие тест-системы направлены на определение коронавируса кошек (FCoV).
Ниже представлен алгоритм диагностики вирусного перитонита кошек.
Изменения в биохимическом анализе крови при инфекционном перитоните кошек (FIP):
Читайте также: