Как брать кровь у вич инфицированного

Обновлено: 25.04.2024

Метод определения в пробах материалов, подвергающихся исследованию, любых ДНК и РНК, в случае неэффективности других методов.

Суть этого метода звучит в самом названии.

Поначалу исторический экскурс.

Автор разработки Кэри Мюллис, заработал Нобелевскую премию за работу 1983 года.

Первоначально планировалось научное применение метода, но впоследствии он завоевал свое место и в диагностической медицине.

Этим методом можно определять генетический материал всевозможных инфекций.

Гинекологические и урологические труднодиагностируемые инфекции выявляются этим методом.

Очень часто ПЦР используется для диагностики ВИЧ.

Основы метода, на основании которых работает исследование, основаны на уникальности фрагмента ДНК для каждой инфекции.

В случае с ВИЧ это РНК.

И создает большое количество копий этого фрагмента ДНК (или РНК).

Геометрическая прогрессия определяет число копий в течение цикла ПЦР (около 3-х минут).

По прошествии нескольких часов число фрагментов – несколько миллиардов.

Теперь несложно определить и возбудителя инфекции.

Метод силен своей универсальностью.

Для определения фрагментов ДНК (или РНК) возбудителя любой инфекции всегда используется одно и то же стандартное оборудование.

ПЦР на ВИЧ

ПЦР славится и своей специфичностью (практически 100%).

Можно использовать один и тот же исследуемый материал для поиска разных возбудителей заболеваний.

У метода очень высокая чувствительность и оперативность.

Всего в течение дня, можно узнать, есть ли возбудитель в организме и какой.

Инкубационный период не мешает проведению исследования.

Нет еще клиники заболевания и антител в крови, но есть ДНК или РНК конкретного возбудителя в организме подвергающегося исследованию.

К недостаткам метода нужно отнести высокую квалификацию врача, берущего материал для исследования, и лаборанта, проводящего исследование.

Также важна высокая чистота помещения, в котором проводят исследование (практически 100%), чтобы результаты исследований были достоверными.

проведение анализа на ВИЧ методом ПЦР

Для ИППП существуют специальные комплексные исследования, при которых определяют наличие сразу нескольких возбудителей.

А теперь поговорим о перспективах ПЦР для диагностики ВИЧ-инфекции.

Когда делают ПЦР на ВИЧ

От четырех до четырнадцати дней спустя, после инфицирования, можно обнаружить ВИЧ данным методом.

Достоверность результата оценивают, когда минуло четырнадцать дней спустя опасной половой связи.

Наличие отрицательного результата говорит о достоверности проведенного исследования.

Но для того чтобы получить непререкаемый результат исследования проводят еще и ИФА.

ПЦР является высокочувствительным методом, в основе которого лежит амплификация (усиление) небольшого участка провирусной ДНК (или РНК) за счёт праймеров.

Праймеры – это специальные реагенты.

Желательная (не обязательная) процедура взятия венозной крови на исследование на ВИЧ-инфекцию.

Проведение ПЦР для диагностики достаточно дорогостоящий анализ.

Его делают не всегда, а в особых случаях.

донор сдает кровь

И если случилась медицинская авария, в которой есть ВИЧ-инфицированные и возможно заразившиеся.

Спустя четырнадцать дней достоверность на наличие ВИЧ-инфекции порядка 98%.

По истечении пяти дней после предполагаемого заражения - 80%.

Анализ ИФА можно делать только тогда, когда появятся антитела к ВИЧ в крови.

Проходит от одного до трёх месяцев, иногда до года.

Поэтому если есть озабоченность по поводу ВИЧ инфицирования, лучше не тянуть, а сделать этот дорогостоящий, но такой необходимый анализ.

Важно знать диагноз как можно раньше.


ПЦР анализ на ВИЧ
рассказывает подполковник
медицинской службы, врач
Ленкин Сергей Геннадьевич

Содержание данной статьи проверено и подтверждено на соответствие медицинским
стандартам врачем дерматовенерологом, урологом, к.м.н.

Ленкиным Сергеем Геннадьевичем

Наименование Срок Цена
Прием венеролога 900.00 руб.
ДНК ВИЧ (кровь) 5 д. 3450.00 руб.

Как делают

Нахождение ВИЧ в пробах крови методом ПЦР выполняется двумя вариантами:

  • исследуется провирус ВИЧ-инфекции, точнее его ДНК
  • исследуется плазма или сыворотка крови на РНК ВИЧ-инфекции

Периферическая кровь, точнее ее мононуклеарные клетки, исследуются на содержание провируса.

По причине того, что ИФА дает вероятность выше 98% - 99,9%, ПЦР не является 100% подтверждающим анализом на наличие ВИЧ-инфекции.

Большой процент ложноположительных срабатываний зависит и от чистоты лаборатории, где проводят исследования, и от квалификации проводящего исследования.

ПЦР на ВИЧ-инфекцию – единственная диагностика до появления антител к ВИЧ.

То есть до минимум трёх месяцев с начала инфицирования.

Прогресс заболевания ВИЧ-инфекцией характеризуется нарастанием количества вируса в крови.

Проведение ПЦР говорит о стадии заболевания ВИЧ и эффективности антиретровирусной терапии.

Помимо вышеперечисленных условий, есть обязательные исследования крови на ВИЧ-инфекцию для:

  • новорожденных от ВИЧ-инфицированной матери
  • наблюдения за концентрацией ВИЧ-инфекции

Все остальные условия являются необязательными.

Процедура сдачи ПЦР для диагностики наличия ВИЧ-инфекции в организме проста.

Берется венозная кровь и проводится анализ.

забор крови на ПЦР ВИЧ

Нужно воздержаться от употребления любых продуктов около десяти часов.

Не употреблять алкоголь, ограничить физическую активность, исключить эмоциональные нагрузки.

Для этого нужна очень чистая лаборатория.

При получении положительного результата его обязательно перепроверяют.

Для этого используют референц-лабораторию.

Там проводят более точный исследовательский способ диагностики.

К сожалению, универсальность не 100%, и зачастую результат анализа ложноположительный.

Его используют вспомогательным методом для установления наличия или отсутствия ВИЧ-инфекции в организме.

Если проводят скрининг на наличие ВИЧ-инфекции или ставят диагноз ВИЧ инфицирования, то используют метод ПЦР.

Методом проводят и количественную оценку нахождения ВИЧ в организме.

Так определяется степень и тяжесть патологических изменений в организме.

Уровень концентрации ВИЧ-инфекции, в организме диагностируемого определяют методом ПЦР.

концентрация вируса ВИЧ в крови

До лечения исследуется кровь методом ПЦР и после, и можно оценить правильность проводимого курса лечения.

Те ли препараты назначают или нужно другие.

Проводят анализ, и в том случае, если антитела в крови есть, но их наличие не говорит о достоверности наличия ВИЧ-инфекции в организме.

Результаты анализов

Есть много поводов для исследования на наличие ВИЧ-инфекции в организме.

Предстоящая операция, планирование беременности, наличие в анамнезе случайных половых связей и другие похожие причины.

Есть категории работников (например, медицинские работники, учителя и другие) для которых эта процедура необходима, для допуска работы с людьми.

Есть определенная тревожная симптоматика, при которой анализ на ВИЧ-инфекцию проводят:

  • при резкой потере веса
  • при длительной диарее (около 3-х недель)
  • при лихорадке невыясненной этиологии
  • при росте лимфоузлов в разных местах
  • при лимфо- и лейкопении
  • при наличии необъяснимой пневмонии, системном кандидозе, туберкулезе, манифестном токсоплазмозе и других серьезных заболеваниях

Интерпретацией результатов проведенных анализов занимается только лечащий врач.

пациент у инфекциониста

Какой бы ни был результат - это не повод заниматься лечением самостоятельно.

К тому же результат ввиду несовершенства метода может быть как ложноотрицательным, так и ложноположительным.

Иногда схожие результаты анализов у разных людей свидетельствуют о различной клинике.

Чаще делают количественный ПЦР-анализ на ВИЧ-инфекцию.

Этот анализ дает сведения о количестве вируса и отображается единицей копия/мл.

Расшифровка результатов:

  • РНК вируса отсутствует или его очень мало (около 20 копий/мл)
  • мизерное количество РНК (чуть больше 20 копий/мл)
  • 20 – 10 6 копий/мл
  • более чем 10 6 копий/мл

Самый опасный третий и четвертый результат.

Что делать, если результат анализа ПЦР на ВИЧ положительный

Анализы на ВИЧ-инфекцию делают в несколько этапов.

Это занимает период от двух до десяти дней.

Результаты анализов делятся на положительные, отрицательные и сомнительные.

Если результат сомнительный, то немного позже обязательно делают анализ еще раз.

Но даже положительный результат не окончательный.

Пересдача крови на анализ тоже делается.

На достоверность результата влияние оказывает некоторые заболевания и состояния организма.

Проведение анализа может быть конфиденциальным или анонимным.

При конфиденциальном обследовании имя обследуемого человека называется.

При анонимном обследовании анализ делают по идентификационному номеру.

Результат анализа может узнать только подвергшийся обследованию человек.

Даже положительный результат остается тайной.

Это врачебная тайна, и она не может быть нарушена.

врачебная тайна

Но даже подтвержденный положительный результат еще не приговор.

В современных условиях ВИЧ-инфицированные подвергаются пожизненной антиретровирусной терапии, что позволяет сохранить им жизнь.

Наоборот, чем раньше обнаружено наличие ВИЧ-инфекции в организме, тем плодотворнее будет лечение.

Перспективы метода в диагностике ВИЧ-инфекции

ПЦР относится к молекулярно-биологическим методам исследования.

Помимо диагностики ВИЧ-инфекции и ИППП, метод зарекомендовал себя в генетических разработках, в ветеринарной науке, сельском хозяйстве.

Продукты питания исследуют на содержание ГМО с помощью ПЦР.

Также сфера применения метода судебно-медицинская экспертиза.

Но все же нас интересуют, в первую очередь, перспективы ПЦР для постановки диагноза наличия ВИЧ-инфекции.

С помощью ПЦР выявляются даже единицы ВИЧ присутствия в крови.

Анализ характеризуется очень высокой чувствительностью – от одного до ста единиц ВИЧ.

Выраженная уникальность происходит за счет того, что идет поиск специфичной ДНК (или РНК) присущий конкретному возбудителю заболевания.

Реакция протекания операции копирования фрагментов РНК характеризуется высокой специфичностью метода ПЦР.

Поэтому амплификационная тест-система (ПЦР) выигрывает перед другими тест-системами иммунологического характера (например, ИФА).

клинико-диагностическая лаборатория

Еще важна и скорость ПЦР анализа.

Один рабочий день уходит на проведение ПЦР.

Но есть у метода и негативные качества.

Если ВИЧ-инфекция попадет в исследуемую кровь случайно, из воздуха, при ее отсутствии в организме, реакция копирования вируса все равно будет идти.

Поэтому и нужна такая стерильность в лаборатории, в которой проводиться ПЦР.

Благодаря большому непостоянству генетического материала ВИЧ уменьшаются диагностические показатели чувствительности.

Хотя сам метод очень чувствительный.

Чувствительность метода ПЦР характеризуют 98%. У ИФА этот показатель выше – 99%.

А за данными статистики или вовремя не продиагностируемые заболевшие или, наоборот, неправильно продиагностируемые о наличии в организме ВИЧ-инфекции.

Для лабораторий, в которых ПЦР проводиться, разрабатываются специальные системы внутреннего контроля, с целью повышения качества диагностики.

На основе стандартизированных межлабораторных панелей качества минимализируют ошибки тестирования.

Если все сделано правильно, без ошибок, то с помощью ПЦР можно определить только один фрагмент провируса на десять тысяч – сто тысяч лимфоцитов.

Методом определяют и резистентность к препаратам антиретрорвирусной терапии.

Конечно, метод несовершенный, но у него большие перспективы.

Особенно на ранних стадиях инфицирования, когда в крови еще нет антигенов.

Метод хоть и недешевый, но правильно проведенный, с соблюдением всех условий правильной постановки, очень информативный.

Е.Б. Лукоянычева–заведующая иммунологической лабораторией ГУЗ КОКБ.

Правила забора биологического материала для иммунологических исследований: Методические рекомендации / Авт.-составитель О.М.Луппова.- Кемерово: ГУЗ КОКБ ,2008.-25 стр.

Введение 4
Раздел 1. Общие правила забора биологического материала и оформления сопроводительных документов
Раздел 2.Технология забора крови из периферической вены для лабораторного исследования
Раздел 3.Правила взятия венозной крови с помощью закрытой системы (вакуумного шприца-контейнера)
Раздел 4.
Транспортировка образцов крови
Раздел 5.
Требование к маркировке пробирок
Раздел 6
Образец оформления пробирок и заполнения сопроводительных документов
Приложение № 1
Забор крови на иммунограмму
Приложение №2.
Забор крови на циркулирующий иммунный комплекс
Приложение №.3
Забор крови на криоглобулины
Приложение №.4
Забор крови на группу крови и резус принадлежность
Приложение №5.
Забор крови на реакцию Кумбса
Приложение №6
Забор крови на гемоконтактные гепатиты В и С (HBsAg, анти – HCV)
Приложение №7.
Забор крови на развернутый комплекс маркеров гепатитов
Приложение №8.
Забор крови на клещевой энцефалит, боррелиоз
Приложение №9.
Забор крови на антитела к антигенам описторхисов, лямблий, хеликобактеру
Приложение №10.
Забор крови на цитомегаловирус, токсоплазмоз, герпес
Приложение №.11
Забор крови на а/т к тироидной пероксидазе
Приложение №12
Забор крови на ВИЧ 23
Приложение № 4(образец заполнения)
Список литературы

Данное методическое пособие предназначено для медицинских сестер Кемеровской областной клинической больницы.

Методическое пособие поможет правильно произвести забор биологического материала и оформить сопроводительные документы.

Правильно произведенный забор биологического материала и правильно оформленные направления исключат ошибку на преаналитическом этапе исследования.

Формы сопроводительных документов составлены так, чтобы сократить время медицинской сестры, затрачиваемое на оформление направлений.

Необходимо, чтобы образцы крови были правильно взяты и вовремя доставлены в лабораторию. Нарушения, допущенные на преаналитическом этапе, могут повлиять на результат исследования и его дальнейшую интерпретацию.

Раздел 1.
Общие правила забора биологического материала и оформления сопроводительных документов

Перед забором крови пациенту следует сообщить:

1. На какой вид исследования будет проводиться забор крови.

2. Требования необходимые для данного исследования.

Порядок забора венозной крови

1. Исследование проводится утром натощак, последний прием пищи за 12 часов до взятия крови.

2. Исключение приема алкоголя не менее чем за 24 часа до взятия крови.

3. Утренний прием лекарственных препаратов, лечебно-диагностических процедур (массаж, ЭКГ, физиотерапевческое лечение и др.) проводится после взятия крови.

5. Пациент перед процедурой должен находиться в покое, сидеть или лежать не менее 5 минут.

6. Продолжительность пережатия сосудов жгутом должна составлять не более 1 минуты.

7. Нельзя просить работать пациента кулаком и массировать предплечье по ходу вен.

Раздел 2
Технология забора крови из периферической вены для лабораторного исследования

подготовить на манипуляционном столе стандартный набор для забора крови из периферической вены, проверив целостность упаковок и сроки годности:

1. лоток для использованных материалов;

2. пробирки для крови;

3. упаковка с 2-мя стерильными салфетками (5х5см) или 4-5 шариками;

5. кожный спиртовой антисептик во флаконе с дозатором;

сделать необходимые надписи на пробирках;

оформить сопроводительные документы в лабораторию;

обеспечить удобное освещение;

помочь пациенту найти удобное положение;

разъяснить пациенту суть предстоящей процедуры, создавая атмосферу доверия, предоставляя возможность задать вопросы;

обработать руки спиртовым антисептиком;

вскрыть упаковки со стерильными материалами;

руку больного уложить в положении максимального разгибания, для чего под руку следует положить валик, имеющий влагостойкое покрытие.

наложить жгут на 10 - 15 см выше выбранной зоны, не нарушая ток крови;

выбрать вену для венепункции;

обработать место венепункции кожным антисептиком и дать высохнуть самостоятельно;

Не пальпируйте вену повторно!

надеть на стерильный шприц иглу;

снять с иглы защитный колпачок;

пальцами левой руки фиксировать кожу над веной;

ввести под кожу иглу срезом вверх под углом 30-40 0 ;

установить иглу параллельно вене и быстрым движением проколоть ее стенку;

иглу продвинуть немного вверх по длине вены;

набрать необходимое количество крови в шприц

- запрещается забор крови свободным кровотоком из иглы в пробирку, а также присоединение к игле нового шприца;

- для безопасного забора крови предпочтительно использовать вакуумный шприц-контейнер.

иглу извлечь из вены;

прижать место венепункции стерильной салфеткой на 2-3 минуты;

осторожно, предупреждая разбрызгивание крови, вылить содержимое шприца через иглу в одну или несколько пробирок.

Раздел 3
Правила взятия венозной крови с помощью закрытой системы (вакуумного шприца-контейнера)

Закрытые системы взятия венозной крови представляют собой новое поколение вакуумных шприцев - контейнеров с реактивами. Их использование имеет следующие преимущества перед традиционными способами:

полностью исключается контакт медперсонала с кровью на всех этапах взятия крови и ее транспортировки;

особо прочный пластик закрытых систем позволяет осуществить безопасную доставку крови на любые расстояния;

благодаря наличию широкого спектра пробирок с заранее добавленными реагентами для различных видов анализов (ЭДТА для гематологии, цитрат натрия для коагулогии, активатор свертывания для получения сыворотки), значительно облегчается работа медсестер и лаборатории. Международная цветовая маркировка предотвращает их не правильное применение;

уменьшается количество ошибочных анализов, связанных с неправильным взятием проб крови и неверным соотношением реагентов.

закручивающаяся крышка предотвращает "аэрозольный эффект" при открывании;

1. Надеть иглу на контейнер и закрепить легким поворотом по часовой стрелке. Провести пункцию вены.

1. Провести пункцию вены иглой. Благодаря защитной мембране кровь из иглы не вытекает.

2. Медленно оттягивая поршень, наполнить контейнер кровью. После заполнения кровью контейнер вместе с иглой вынуть из вены. Поршень зафиксировать в конечном положении до характерного щелчка. В случае взятия нескольких образцов крови, контейнер отсоединить. Иглу оставить в вене и на нее надеть следующий контейнер.

2. Создать вакуум в контейнере.
Для этого отвести поршень в конечное положение (до характерного щелчка) и отломить его

3. По окончании взятия крови, шток поршня обломить. Вы получаете транспортный контейнер с кровью и антикоагулянтом или готовую пробирку для сепарации сыворотки.

3. Насадить контейнер на иглу. Взятие крови осуществляется под действием вакуума. В этом случае вы также получаете транспортный контейнер с кровью и антикоагулянтом или готовую пробирку для сепарации сыворотки.

Транспортировка образцов крови

При транспортировке образца внутри лечебно-диагностического учреждения, пробирки с кровью должны находиться в контейнере, который в случае повреждения пробирки будет предотвращать разлитие крови.

Порядок доставки крови в лаборатории

  • Штативы с кровью поместить в герметичный контейнер;

наружные части контейнера двукратно с интервалом в 15 минут протереть дезинфицирующим средством (концентрация по режиму для вирусных гепатитов);

доставить контейнер в лабораторию;

вынимать образцы крови из контейнера только в перчатках!

после возвращения из лаборатории контейнер вновь двукратно с интервалом в 15 минут протереть дезинфицирующим средством (концентрация по режиму, предусмотренному для гемоконтактных вирусных гепатитов).

Требование к маркировке пробирок.

Маркировку пробирок и заполнение сопроводительных документов следует проводить аккуратно и четко.

Фамилию, имя, отчество пациента писать четко и разборчиво.

В направлении заполнять все графы.

Не допускается, чтобы этикетка на пробирке была размыта, порвана или плохо приклеена.

Мы проводим исследования крови на:

Преаналитический этап

1

При исследовании на инфекционные маркеры необходимо соблюдать все правила преаналитического этапа, который включает в себя комплекс мероприятий, выполняемых от назначения на инфекционные маркеры до осуществления лабораторных измерений взятого биоматериала.

Преаналитический этап-это условия, в которых находится пациент перед взятием у него биоматериала, его первичной обработки, хранения и доставки в лабораторию. Соблюдение правильного проведения преаналитического этапа важно, так как до 60% погрешностей в КДЛ по России приходится на преаналитический этап.

Преаналитический этап включает:

  • правильное взятие биоматериала
  • хранение
  • транспортировка

При исследовании в цельной крови, сыворотке или плазме образец крови берут чаще всего из локтевой вены. При плановом назначении лабораторного теста кровь для его выполнения следует брать натощак (после примерно 12ч. голодания и воздержания от приема алкоголя и курения), при минимальной физической активности непосредственно перед взятием (в течение 20-30 мин), в положение пациента лежа или сидя.

Взятие венозной крови облегчается применением вакуумных пробирок. Под влиянием вакуума кровь из вены быстро поступает в пробирку, что упрощает процедуру взятия и сокращает время наложения жгута.

В зависимости от назначенного вида исследования образец крови должен собираться при наличии строго определённых добавок. Для получения плазмы кровь собирают с добавлением антикоагулянтов: этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА), цитрата, оксалата, гепарина. Для исследований системы свертывания крови применяется только цитратная плазма. В большинстве гематологических исследований используют венозную кровь с солями этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА, К2 или К3-ЭДТА). Взятие биоматериала для иммуносупрессантов (такролимус и циклоспорин) проводят в пробирке с ЭДТА, К2 до верхней метки, содержимое пробирки незамедлительно, с осторожным переворачиванием 5-10 раз, перемешать.

1

Для предупреждения контаминации (механический перенос инфекционного агента из одного образца в другой) необходимо строго соблюдать правила забора биоматериала и его транспортировки.

Доставка образцов крови происходит с соблюдением всех этапов холодовой цепи. Холодовая цепь – это соблюдение температурного режима от момента взятия биоматериала до лабораторного тестирования.

Пробирки с образцами крови после оседания эритроцитов или оседания сгустка крови (не ранее чем через 30мин. после взятия крови) подвергаются центрифугированию. Кровь для получения сыворотки или плазмы центрифугируют в течение 10-15 мин при 800-1600 х g .

Несоблюдение правил преаналитического этапа приводит к возникновению неспецифических реакций.

Общие правила по подготовке к исследованиям на ВИЧ-инфекцию, вирусный гепатит В (HbSAg), вирусный гепатит С, сифилис.

  1. кровь сдавать утром натощак;
  2. исключить физические нагрузки в течение 24 часов;
  3. накануне избегать пищевых нагрузок;
  4. исключить курение минимум за 2 часа до исследования;
  5. исключить приём алкоголя накануне исследования;
  6. при себе иметь паспорт или заменяющий его документ с фотографией

Вич-инфекция

1

ВИЧ-инфекция - болезнь, вызванная вирусом иммунодефицита человека-антропонозное инфекционное хроническое заболевание, характеризующееся специфическим поражением иммунной системы, приводящим к медленному ее разрушению до формирования синдрома приобретенного иммунодефицита (СПИД).

Возбудитель ВИЧ-инфекции - вирус иммунодефицита человека - относится к семейству ретровирусов. Вирус преимущественно поражает клетки иммунной системы-Т-лимфоциты, называемые СD4 Т-клетками. СD4 Т-клетки - это субпопуляция лимфоцитов, которая выполняет важнейшие функции в регуляции и осуществлении иммунного ответа организма против бактерий, вирусов и других микроорганизмов. В клетке человека вирус образует участок ДНК, встраивает его в геном хозяина. Пораженная вирусом клетка производит материалы для построения вирусных частиц, на ее поверхности появляются антигены вируса. При делении дочерние клетки получают вирусную ДНК.

К антигенам вируса, расположенным на поверхности клеток, вырабатываются антитела, которые используются для диагностики инфекции. В настоящее время известны 2 типа вируса: ВИЧ-1 и ВИЧ-2. Считают, что ВИЧ-2 имеет меньшую способность к распространению и медленнее разрушает иммунную систему.

1

Источником ВИЧ-инфекции является человек. Почти во всех биологических жидкостях инфицированного человеческого организма (кровь, сперма, грудное молоко, влагалищный и цервикальный секрет) в различной концентрации обнаруживаются вирусные частицы.

Основным методом лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции является обнаружение антител к вирусу с помощью иммуноферментного анализа. Антитела к ВИЧ появляются у 90-95% зараженных в течение 3-х месяцев после заражения, у 5-9% - через 6 месяцев от момента заражения и у 0,5-1 %- в более поздние сроки. Наиболее ранний срок обнаружения антител-2 недели от момента заражения.

В терминальной стадии СПИД количество антител может значительно снижаться, вплоть до полного их исчезновения. Серологическая диагностика инфекции ВИЧ на первом этапе строится на выявлении суммарного спектра антител против антигенов ВИЧ с помощью твердофазного анализа. На втором этапе методом иммунного блотинга проводится определение антител к отдельным белкам вируса.

1

Гепатит С

1

Гепатит С - вирусное заболевание , характеризующееся поражением печени и аутоиммунными нарушениями, часто имеющее первично-хроническое и латентное течение. Протекает в желтушной (5%) или безжелтушной (95%) формах. Вирус гепатита С относится к семейству флавивирусов, представляет собой небольшой(40-50нм в диаметре), покрытый оболочкой вирус, достаточно устойчивый во внешней среде. Его геном представлен одноцепочечной РНК, которая кодирует 3 структурных и 5 неструктурных белков вируса. К структурным относятся нуклеокапсидный белок(С-core) и гликопротеины оболочки(Е1-Е2). Неструктурную область представляет комплекс белков с ферментативной активностью(NS1,NS2, NS3, NS4,NS5).

Протекая бессимптомно, долгие годы остающейся нераспознанной, именно ВГС-инфекция является основной причиной формирования всей группы хронических болезней печени - хронического гепатита, цирроза, гепатоцеллюлярной карциномы.

Источниками ВГС являются больные всеми формами острого и хронического гепатита С. Вирус попадает в кровь при любых парентеральных манипуляциях: гемотрансфузии, инъекциях, при посещении стоматолога и гинеколога, оперативных вмешательствах, зондовом обследовании и т.д. К группе риска относятся больные, находящиеся на гемодиализе, страдающие гемофилией и другими заболеваниями крови, получающие плазму, гемоконцентраты, иммуноглобулины. Наркоманы, употребляющие наркотики внутривенно. Медицинские работники, имеющие контакт с кровью. Относительно меньшее значение имеют половой, бытовой и вертикальный пути передачи, что связано с низкой виремией ВГС.

1

Инкубационный период длится в среднем 6-8 недель с возможными колебаниями от 2-4-х недель до 4-6 месяцев больше. В конце инкубационного периода повышаются уровни печеночных трансаминаз (превышают норму в 5-30раз). Сероконверсия наступает через 15-20 недель от момента заражения. На 3-4 недели раньше анти-ВГС-IgG обнаруживается анти-ВГС-IgM. РНК вируса с помощью ПЦР определяется через 1-3 недели после инфицирования.

Лабораторная диагностика гепатита С основана на обнаружении в образцах сывороток крови человека специфических маркеров вируса гепатита С: антител к антигенам ВГС, относящихся к иммуноглобулинам классов G и M, а так же нуклеиновой кислоты возбудителя (РНК ВГС).

1

Гепатит В

1

Гепатит В (ГВ) - является одним из самых распространенных и опасных вирусных инфекционных заболеваний человека, что обусловлено высокой устойчивостью возбудителя во внешней среде и широким спектром клинико-эпидемиологических особенностей.

Вирусный гепатит В- инфекционное заболевание, которое характеризуется тяжелым воспалительным поражением печени. Источниками возбудителя инфекции являются больные острыми и хроническими формами болезни, а также лица с субклиническим течением инфекционного процесса и здоровые носители.

ГВ передается через кровь и контактным, преимущественно половым путем. Большому риску подвергаются медики, имеющие контакты с кровью. Вирус может передаваться от матери к ребенку во время беременности или непосредственно при родах.

Лабораторная диагностика ГВ основана на выявлении специфических для ГВ антигенов и соответствующих антител в крови, а также вирусных нуклеиновых кислот, основными из которых являются:

  • HBsAg
  • анти-НВs
  • анти-НВс класса IgM и IgG
  • HВe-Ag-антиНВе
  • ДНК | ВГВ

В диагностике ГВ наиболее широко используется определение HBsAg. HBsAg – поверхностный антиген вируса гепатита В, основной маркер острого и хронического гепатита В- представляет собой белковую молекулу, ответственную за адсорбцию вируса на поверхности гепатоцитов. После встраивания вируса в геном печеночных клеток они начинают продуцировать вирусную ДНК и белки, и новые молекулы HBsAg поступают в кровь.

1

Данный антиген выявляется как при остром, так и при хроническом заболевании. При остром ГВ поверхностный антиген вируса обнаруживается через 3-5 недель от момента инфицирования, то есть задолго до появления клинических признаков болезни и в этих случаях является единственным серологическим маркером.

Обнаружение поверхностного антигена вируса гепатита В в крови больше 6 месяцев от начала болезни указывает на затяжное или хроническое течение болезни, и позволяет предположить хроническое носительство вируса. Элиминация HBsAg и появление антител к нему является непременным условием выздоровления. Серологическими маркерами репликации ВГВ являются- анти-НВс класса IgM, НвеAg, ДНК и ДНК-полимераза, которые обнаруживаются при остром ГВ с первых дней клинических проявлений или при обострении. HВcAg выявляется в ткани печени и не определяется в сыворотке крови. Опосредованно его присутствие в организме отражают циркулирующие антитела- анти-НВс класса IgM и IgG. В острый период ГВ наличие анти-НВс класса IgM является дополнительным маркером этого заболевания. Наличие в сыворотке крови только анти-НВс класса IgG наблюдается в период между исчезновением HBsAg и образованием анти-HBs. Сочетанное выявление анти-НВс класса IgG в низком титре с анти-НВs указывает на перенесенную ГВ-инфекцию и наличие иммунитета. Тестирование НВеАg проводят в сыворотках крови только с наличием HBsAg и позитивный результат данного маркера свидетельствует об активном процессе - либо подтверждает диагноз острого ГВ, либо свидетельствует об обострении хронического ГВ. Наличие ДНК-ВГВ( наиболее чувствительный маркер продолжающейся репликации ВГВ) в сыворотке крови указывает на высокую инфекционность данного образца и активное размножение вируса в организме. Высокая активность аминотрансфераз сыворотки отражает воспалительное повреждение ткани печени. Сероконверсия HBsAg в анти-HBs происходит у 90-95% больных с острым ГВ в стадии разрешения инфекционного процесса и, является показателем иммунитета к вирусу ГВ, то есть наличие анти-HBs свидетельствует о перенесенной инфекции и наличии иммунитета к этой инфекции. Лица, имеющие эти антитела в защитной концентрации(10МЕ и более), не болеют ГВ и не нуждаются в вакцинации.

Сифилис

1

Сифилис – хроническое инфекционное заболевание, вызываемое Treponemapallidum (бледная трепонема), характеризуется полиорганным поражением и стадийным течением.

Treponemapallidum относится к семейству Spirochaetaceae, роду Treponema. Имеет спиралевидную форму с завитками, грамотрицательный анаэроб. Сифилис , как правило передается половым путем, а важнейшим фактором проникновения бледных трепонем в организм и его инфицирования является нарушение целостности кожных и слизистых покровов и большое количество вирулентных возбудителей. Трансплацентарное заражение или инфицирование новорожденных через родовые пути больных сифилисом матерей, а также при кормлении грудью представляет серьезную опасность и диктует необходимость обследования.

Инкубационный период длится 3-4 недели, первичный серонегативный -1 месяц, затем первичный серопозитивный -1 месяц, затем вторичный период-2-4 года, далее третичный период. В первичном периоде возникает твердый шанкр( безболезненная язва в месте проникновения бледной трепонемы), сопровождающийся регионарным лимфаденитом. В конце первичного периода шанкр самостоятельно заживает, а лимфаденит переходит в полиаденит и сохраняется до пяти месяцев. Началом вторичного периода являются генерализованные высыпания ( пятнистые, папулезные, пустулезные сифилиды). На втором полугодии вторичного сифилиса исчезает полиаденит. Появление третичных сифилидов (бугорков и гумм) знаменует начало третичного периода, который наступает у 40% нелеченных и неполноценно леченных больных. Волны третичного периода разделены более продолжительными периодами латентного течения инфекции. В третичных сифилидах содержится крайне мало трепонем, поэтому они практически не заразны. Передача сифилиса потомству наиболее вероятна в первые три года заболевания. В результате возникают поздние выкидыши (на 12-16 неделе), мертворождение. Ранний и поздний врожденный сифилис. Проявления раннего врожденного сифилиса возникают сразу после рождения и аналогичны проявлениям вторичного сифилиса.

Диагноз сифилиса должен быть подтвержден лабораторными исследованиями, однако, при отрицательном результате скринингового теста обследование пациента с существующим риском недавнего заражения сифилисом следует повторить через 1-2 недели. Образцы, давшие положительный результат в тест-системе для выявления суммарных антител, необходимо проанализировать в системах, выявляющих конкретные классы иммуноглобулинов(JgG и IgM). Положительный результат на JgG и IgM является подтверждением положительного результата, полученного в скрининговом тесте, и свидетельствует о наличии специфических антитрепонемных антител.

Человечество слишком поздно осознало опасность, которую представляет вирус иммунодефицита человека (ВИЧ).

Вызываемое им заболевание – синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД).

Правда, на начало XXI века медики научились эффективно бороться с этой инфекцией.

Никто не станет отрицать, что ведущую роль в этом направлении сыграло совершенствование лабораторных методов выявления инфекции.

А также исследования показателей крови уже зараженных людей.

показатели крови при ВИЧ

Виды анализов

По своим характеристикам, ВИЧ относится к категории гемотрансмиссивных инфекций.

Заражение здорового человека происходит при попадании возбудителя в кровеносное русло.

Там вирус связывается с лимфоцитами и другими мишенями, начинает активную репликацию.

Зараженные клетки не сразу, но истощаются и погибают.

За счет этого и возникает иммунодефицит.

Благодаря компенсаторным способностям человеческого организма, инфекция очень долго (до нескольких лет) протекает бессимптомно.

В этом и заключается главная опасность инфекции.

Единственно, что может оказаться информативным в начальных стадиях болезни, это – анализы крови.

В клинической практике они применяются по разным направлениям:

  • первичная диагностика – это исследования, которые прямо указывают на наличие или отсутствие ВИЧ-инфекции в организме обследуемого человека
  • иммунограмма – направлена на оценку показателей иммунной системы, таких как количество лимфоцитов CD4, которые являются главной мишенью для вирусов
  • вирусная нагрузка – помогает оценить степень активности инфекции и эффективность проводимой антиретровирусной терапии
  • общий анализ крови (ОАК), который проводится инфицированным людям для общей оценки поражения организма вирусом
  • биохимические исследования позволяют оценить функцию основных жизненно важных органов – печени, почек, кроветворной системы и так далее

Сложность в том, что показатели последних двух пунктов меняются в основном на продвинутых стадиях заболевания.

Но если человек вовремя прошел диагностику и узнал о своем статусе, он теперь может держать заболевание под полным контролем.

сдача крови на ВИЧ

Достаточно лишь стать на учет в специализированном центре и вовремя сдавать необходимые анализы.

Типичный алгоритм обследования пациента предлагаем рассмотреть в виде следующей таблицы:

Кровь на ВИЧ

Экспресс-метод и ИФА при ситуации, рискованной по заражению или при характерных симптомах (лихорадка, увеличение лимфоузлов, частые простуды, диарея, похудание и так далее)

Повторный анализ

Положительный ответ первого исследования.

Клинический анализ крови

Установление диагноза ВИЧ-инфекции, в дальнейшем – по показаниям

Биохимический анализ крови

Установление диагноза ВИЧ-инфекции, в дальнейшем – по показаниям

Кровь на CD-4 клетки

Установление диагноза ВИЧ-инфекции, сначала двукратно с периодом в 7 дней, в дальнейшем каждые 6-12 месяцев, при ухудшении здоровья – немедленно

Вирусная нагрузка

Установление диагноза ВИЧ-инфекции, перед началом АРТ и дальше – через 3 месяца до получения негативных результатов, в дальнейшем каждые 6 месяцев

Как и любая патология, ВИЧ-инфекция имеет индивидуальные черты у каждого инфицированного человека.

Поэтому предложенная таблица – лишь ориентир.

Точные сроки и перечень необходимых анализов назначаются врачом, который ведет пациента.

Также меняются сроки проведения мониторинговых обследований после того, как пациент начинает прием препаратов антиретровирусной терапии (АРТ).

Показатели общего анализа крови при ВИЧ

На ранних стадиях инфекции, показатели общего анализа крови меняются мало или вообще остаются в переделах нормы.

общий анализ крови при ВИЧ

Внимательный врач может связать некоторые граничные колебания лейкоцитов (формулы белой крови) с эпизодами повторных рецидивных простуд и респираторных инфекций.

В более продвинутых стадиях заболевания, когда компенсаторные возможности организма слабеют, в ОАК возникают такие изменения:

  • Анемия. Снижение количества эритроцитов ниже возрастной и половой нормы связывают с повреждением ВИЧ клеток костного мозга и общим истощением организма. Степень анемии коррелирует с активностью ВИЧ-инфекции: малокровие нарастает при прогрессировании заболевания и наоборот, отступает на фоне АРТ-терапии.


  • Лейко- и лимфопения являются типичными явлениями для ВИЧ. В общем анализе крови можно обнаружить стойкое снижение количества лейкоцитов (ниже 4*10 в 9 степени) и лимфоцитов (ниже 13%), показатели этих клеток помогают врачам составить предварительный прогноз и разработать меры по защите человека от других инфекций (например – назначить профлечение бисептолом).
  • Тромбоцитопения. Падение уровня тромбоцитов ниже нормы (180*10 в 9 степени) весьма характерно для ВИЧ-инфекции, в течение 10 лет, такое явление возникает у 45% инфицированных людей. Вызывают тромбоцитопению два механизма: аутоиммунное повреждение тромбоцитопению и снижение количества их предшественников (мегакариоцитов).

Для пациента очень важно соблюдать сроки, когда врач рекомендует сдавать ОАК.

Это поможет вовремя заметить опасные осложнения ВИЧ-инфекции и предотвратить их.

Кроме того, нельзя забывать о риске развития побочных реакций в ответ на прем препаратов АРТ-терапии.

Показатель СОЭ

Очень важными данными ОАК, является скорость оседания эритроцитов или, сокращенно – СОЭ.

Норма – 4-10 мм в час.

Когда СОЭ ускоряется, это свидетельствует о нарушении белкового баланса крови.

снижение количества эритроцитов

К сожалению, показатель абсолютно неспецифичен: СОЭ возрастает при любой инфекции, травмах, онкологии.

Для пациентов характерно такое сочетание, когда скорость оседания эритроцитов повышена до 30-40-50 мм в час.

А человек чувствует себя более-менее нормально.

Такая картина связана со снижением количества белых кровяных телец.

В частности, тех лимфоцитов, какие синтезируют белки-иммуноглобулины.

Уменьшение количества этих иммунных белков влечет за собой относительное повышение белков-альбуминов, что и отражается в росте СОЭ.

Показатели биохимии крови

Биохимический анализ крови для пациентов очень важен.

С его помощью можно оценить функцию почек и, что более важно – печени.

ВИЧ очень часто соседствует с вирусными гепатитами.

измерение СОЭ в лаборатории

Поэтому показатели трансаминаз помогают вовремя сориентироваться и дообследовать пациента.

Кроме того, контроль за функцией печени и почек позволяет вовремя заметить негативные реакции организма на АРТ-препараты.

Биохимия – важнейший комплекс анализов.

Однако из-за многогранности показателей интерпретировать их должен только специалист.

В этой статье мы просто не сможем осветить все детали таких исследований у пациентов.

Читайте также: