Цитологическое исследование мокроты больных туберкулезом

Обновлено: 25.04.2024

Показанием к цитологическому исследованию служит необходимость установить (уточнить) природу неопухолевого заболевания или верифицировать процесс при наличии очаговых изменений в легких, выявленных лучевым методом диагностики.

Получение материала

Материалом для цитологического исследования может служить: материал бронхоскопии (пунктат опухоли, отпечаток с биоптата, соскоб щеткой, бронхиолоальвеолярный лаваж (БАЛ), чресбронхиальная пункция (под визуальным контролем или под контролем УЗИ). При подозрении на опухолевый процесс и неудачах морфологического исследования этого материала выполняют трансторакальную пункцию. Кроме того, можно исследовать цитологическим методом материал, полученный при медиастиноскопии, торакоскопии, во время операции. При необходимости установить степень распространения опухолевого процесса исследуют материал из внелегочных очагов (лимфатические узлы, выпотная жидкость). Самым простым методом является цитологическое исследование мокроты. Преимущества этого метода – дешевый, легко повторяемый, недостатки – низкая выявляемость рака, сложности установления гистологической формы опухоли.

Из материала, полученного при бронхоскопии (торакоскопии, пункции) готовят традиционные мазки5 или, если получают жидкость или материал, помещают в контейнеры со стабилизирующим раствором (жидкостная цитология). В лаборатории с помощью цитоцентрифуги готовят тонкослойные препараты.

Мокрота – продукт патологического процесса (заболевания или повреждения) в дыхательной системе, выделяемый при кашлевом толчке. Свежевыделенную мокроту, полученную путем откашливания, собирают в чистую сухую широкогорлую склянку. Для получения полноценного материала должен быть “глубокий” кашель, собирать ее необходимо до еды, после чистки зубов. При подозрении на наличие злокачественной опухоли и отсутствии элементов рака при первом исследовании мокроту следует собирать три дня подряд. Собранную мокроту сразу же необходимо доставить в лабораторию, где ее нужно исследовать немедленно или хранить до исследования в холодильнике. Можно собирать мокроту в склянку с 40–50% спиртовым раствором (50 мл), в течение 3–5 дней, каждый раз после сбора тщательно встряхивая сосуд для того, чтобы мокрота перемешалась со спиртовым раствором.

Приготовление препаратов

Препараты готовят в лаборатории, распределяя отобранные под визуальным контролем комочки или, если мокрота собрана в спиртовый раствор, получают тонкослойные препараты с помощью цитоцентрифуги. В связи с тем, что клетки в мокроте часто подвержены дегенеративным изменениям, интерпретация клеточного состава может быть затруднена, поэтому метод применяют, в основном, как метод скрининга при отсутствии данных о злокачественном поражении, а также при предположительном диагнозе опухоли у тяжелых ослабленных больных.

Окрашивают препараты с помощью метода Романовского в любой модификации или гематоксилин-эозином. При исследовании мокроты один препарат окрашивают по Цилю-Нильсену для выявления кислотоустойчивых микобактерий.

Трактовка цитологического заключения

Согласно рекомендациям Рабочей группы по бронхоальвеолярному лаважу Европейского респираторного общества, нормальным считают следующий состав бронхиальной порции жидкости БАЛ: бронхиальный эпителий – 5–20%, в том числе: цилиндрический – 4–15%, плоский – 1–5% альвеолярные макрофаги – 64–88%, нейтрофилы – 5–11%, лимфоциты – 2–4% , тучные клетки – 0–0,5%, эозинофилы – 0–0,5%. БАЛ является методом выбора для диагностики: опп ортунистических инфекций респираторной системы, протеиноза, гемосидероза легких, гистиоцитоза Х, профессиональной патологии, связанной с ингаляцией аэрозольных частиц.

Лабораторная диагностика туберкулеза. Выявление бактерий туберкулеза.

В распознавании и дифференциальной диагностике туберкулеза, а также в определении эффективности проводимого лечения важную роль играют лабораторные методы исследования. Среди них большое значение имеют прежде всего способы обнаружения микобактерии туберкулеза в различных выделениях, воспалительных экссудатах, жидкостях и тканях организма больного.

При туберкулезе легких микобактерии находят прежде всего в мокроте. Частота, массивность и постоянство бацилловыделения зависят от формы процесса. Оно часто имеет место при инфильтративном и особенно деструктивном туберкулезе легких. Реже или периодически выделяют микобактерии больные очаговыми, диссеминированными и цирротическими формами туберкулеза без явного распада легочной ткани. Существенное значение имеет при этом состояние бронхов. При их специфическом поражении, но сохраненной дренажной функции микобактерии выявляются с мокротой сравнительно чаще и с большим постоянством, чем при нормальном состоянии бронхов или при их стенозе, вызывающем блокаду каверны.

Микобактерии туберкулеза находят в большом количестве в обильно выделяющейся мокроте, а в скудном отделяемом, наоборот, они встречаются реже и в виде единичных экземпляров. У больных, не выделяющих мокроту, лучшие результаты дает применение раздражающих аэрозольных ингаля пий 10—15% раствора поваренной соли в 1% растворе питьевой соды Н. М. Рудой и соавт. (1971) применяют с этой целью смесь, состоящую из 5 мл 10% раствора хлорида натрия, 1 мл химопсина, растворенного в физиологическом растворе, и 20 капель солутана.

Второе место по эффективности выявления бацилловыделения у больных, не выделяющих мокроту, занимает исследование промывных вод трахеи и бронхов, которое предложил Я. С. Зобин (1939). В настоящее время для анестезии гортани у взрослых применяют 0,25% раствор дикаина, разведенный в 10% растворе новокаина. Этот раствор наливают во время фонации на голосовые связки в количестве 0,5—1 мл. У больных с повышенным глоточным рефлексом этим раствором смазывают заднюю стенку глотки. Затем в трахею шприцем с напаянной канюлей вводят 10—20 мл физиологического раствора комнатной температуры.

При этом в результате раздражения слизистой оболочки бронхов возникает кашель, при котором из глубоких дыхательных путей вместе с введенной жидкостью выделяются слизь и мокрота. Это отделяемое исследуют на присутствие микобактерии туберкулеза или другой микробной флоры.

Исследование промывных вод бронхов редко сопровождается серьезными осложнениями. Только при сильном, длительном и приступообразном кашле иногда появляется кровохарканье, может аспирироваться инфекционный материал в здоровые участки легочной ткани, нарастает сердечная недостаточность. Такие явления отмечаются главным образом у больных с сопутствующей бронхиальной астмой, пороком сердца, гипертонией. В подобных случаях, очевидно, не следует прибегать к данному методу исследования. При отсутствии таких противопоказаний, особенно у больных с ограниченными формами процесса, у которых чаще всего и возникает необходимость в исследовании промывных вод бронхов, обычно не наблюдается каких-либо осложнений, и поэтому его можно производить не только в клинических, но и в амбулаторных условиях.

Менее эффективно производимое натощак исследование промывных вод желудка, в которых может содержаться бациллярная мокрота или бронхиальная слизь, чаще заглатываемая детьми, а иногда и взрослыми (Аrmand-Dellille, 1927). Кроме того, микобактерии могут проникать в желудок через его слизистую оболочку при гематогенном распространении инфекции в организме, а также при забрасывании бациоллосодержащей желчи (М. Д. Розанова, 1950). Пользоваться этим методом рекомендуется в тех случаях, когда не удается получить мокроту при раздражающих ингаляциях, при противопоказаниях к применению промывания бронхов или при невозможности их проведения по другим причинам.

Наименее информативно определение бацилловыделения с помощью исследований мазков слизи из гортани, а также промывания только верхних отделов дыхательных путей.

У части больных можно выделить микобактерии из крови. По наблюдениям 49 авторов, обобщенным в 1954 г. Dalencour, бациллемия отмечалась в среднем у 5,3% больных различными формами туберкулеза. П. И. Беневоленский (1945) установил ее у 3,7% больных туберкулезом легких (исключая страдающих гематогенным процессом). Чаще обнаруживают микобактерии в крови при туберкулезе кожи, обширных гематогенных диссеминациях в легких, при менингите. Однако, по сводным данным Kallos (1937). основанным на изучении гемокультур, выделенных от 14 502 больных, туберкулезная бациллемия имела место всего лишь у 1,13% из них.

Частота выявления микобактерии зависит не только от формы заболевания, метода получения материала, но и от способа его исследования (бактериоскопия, посев, заражение животных). Микобактерии туберкулеза обнаруживают при прямой бактериоскопии мазков мокроты, окрашенных по Цилю—Нельсену, при микроскопии с использованием метода обогащения — флотации и люминесцентного способа исследования. Методы обогащения повышают частоту обнаружения микобактерии туберкулеза в мокроте, промывных водах желудка и бронхов, в экссудате, спинномозговой жидкости, в каловых массах на 10—20% по сравнению с результатами прямой бактериоскопии.

Среди бактериоскопических методов выявления бацилловыделения наиболее чувствительным является люминесцентная микроскопия, повышающая возможность обнаружения в мокроте микобактерии на 15—20% по сравнению с обычной бактериоскопией, а при исследовании мазков из флотационных колец — на 8—10%. При этом облегчается изучение некоторых биологических свойств возбудителя — старения культур, аутолиза клеток и др.

Некоторые авторы утверждают, что при флюоресцентной (люминесцентной) микроскопии микобактерии туберкулеза можно выявить даже чаще, чем при посевах мокроты и других материалов на различные питательные среды. Kolbel (1955) обнаружил их при простой бактериоскопии у 39,7% больных, при бактериологическом методе — у 52,1%, а при люминесцентной микроскопии — у 73,6%. На преимущество последнего метода указывают Т. Н. Ященко и И. С. Мечева (1973), Н. С. Страхов и соавт. (1973).

Для суждения об эффективности проводимой антибактериальной терапии придают прогностическое значение уменьшению (или сохранению) в динамике массивности бацилловыделения. Поэтому целесообразно не только констатировать бацилловыделение, но и оценивать его количественный показатель. При этом при бактериоскопии бацилловыделение оценивается как обильное, если находят микобактерии в каждом поле зрения, умеренное — при наличии «единичных микробов в 40—50 полях зрения и скудное — при нахождении их единичных экземпляров в препарате.

Цитологическое исследование материала из легких. Цитология эпителия пищеварительного тракта.

При диагностике заболеваний органов дыхания цитологическому исследованию подвергают спонтанно выделенную или индуцированную ингаляцией трипсина мокроту, материал, полученный соскобом, аспирацией, смывом, пункцией, в том числе лимфатических узлов средостения во время бронхоскопии; трансторакальной плевральной пункцией лимфоузлов и средостения. Трудности, встречающиеся при цитологической диагностике заболеваний .четких, связаны с разнородностью клеточных элементов в исследуемом материале, разнородностью нозологических форм, являющихся поводом для цитологического исследования, часто встречающимися метастазами в легкие злокачественных новообразований других локализаций. При различных острых и хронических заболеваниях легких в цитологическом материале имеется комплекс изменений, включающих гиперплазию, метаплазию и дистрофию различных эпителиальных клеток.

При острых воспалительных заболеваниях в эпителии могут развиваться реактивные изменения, симулирующие новообразование и являющиеся причиной ошибочного диагноза, иногда же. наоборот, воспалительный процесс маскирует опухоль.

Достоверная цитологическая диагностика туберкулеза легких основана на обнаружении в мазках из мокроты или содержимого бронхов двух видов клеток эпителноидных и клеток Пирогова — Лангханса.

При цитологической диагностике опухолей легких процент обнаружения опухолевых клеток зависит от расположения опухоли в верхних или нижних долях, от формы роста. Около половины всех злокачественных опухолей легкого приходится на долю плоскоклеточного неороговевающего и ороговевающего рака. Цитологический материал при раке легкого характеризуется полиморфизмом размеров и формы клеток, которые располагаются среди слизи и бесструктурных масс.

Клетки плоскоклеточного ороговевающего рака лежат разрозненно или скоплениями. Изредка они располагаются в виде луковиц. Ядра опухолевых клеток, чаще всего гилерхромны, с грубым, неравномерно распределенным хроматином с неровными контурами. По форме ядра — неправильно округлые, палочковидные. Цитоплазма клеток плотная, часто с признаками жировой дегенерации. При плоскоклеточном ороговевающем раке нередко отмечают раннее ороговение.

Плоскоклеточный неороговевающий рак характеризуется наличием крупных округлых клеток, расположенных разрозненно или в виде комплексов. Ядра крупные, расположены центрально и занимают большую часть клетки, хроматин нежный, равномерно распределен по ядру. В ядрах нередко встречаются ядрышки, иногда гипертрофированные.

При железистой форме рака обнаруживают атипичные клетки крупных, средних и иногда мелких размеров округлой, овальной, призматической формы. Клетки расположены разрозненно, в виде железистых структур, папиллярных образований. Ядра крупные, округлой или овальной формы, расположены чаще всего эксцентрично. Хроматин нежный, в ядрах часто видно по нескольку гипертрофированных ядрышек. Встречаются дву- и трехъядерные клетки, цитоплазма очень нежная, в одних клетках она узким ободком окружает ядро, в других — занимает больший объем, вакуолизированная.
В зависимости от степени зрелости клеток можно говорить о степени дифференцировки данного варианта опухоли.

При недифференцированном мелкоклеточном раке опухолевые клетки расположены разрозненно, плотными группами, следующими друг за другом по ходу слизи, скоплениями. Клетки мелкие, округлые, напоминают лимфоциты. Ядра их крупные, плотные, гиперхромные, с компактным хроматином занимают почти всю клетку. Цитоплазма узеньким, еле заметным ободком окружает ядро. В комплексах клетки настолько тесно прилежат друг к другу, что в соседних клетках образуются вдавления, в связи с чем они принимают самую разнообразную форму треугольную, палочковидную, полулунную. Ядра принимают форму клетки.

Крупноклеточный недифференцированный рак характеризуется наличием крупных светлых клеток, расположенных разрозненно или в виде комплексов. Ядра повторяют форму клетки. Хроматин нежно-гранулярный или мелкопетлистый, равномерно распределен по ядру. Цитоплазма узеньким ободком окружает ядро, клетки часто выглядят голоядерными.

В пищеводе встречаются доброкачественные опухоли, такие как плоскоклеточная папиллома, а также некоторые неопухолевые заболевания эзофагиты различного происхождения, лейкоплакии. При цитологическом исследовании материала, полученного ил пищевода в этих случаях, в препаратах обнаруживается значительное количество клеток плоского эпителия и лейкоцитов. Нередко встречаются эпителиальные клетки в состоянии дистрофии

Из злокачественных новообразований в пищеводе встречают преимущественно плоскоклеточный рак, реже аденокарциному. Для цитологической картины плоскоклеточного рака характерно наличие детрита, разрушенных клеток-чешуек плоского эпителии, крупных полигональных клеток и клеток округлой формы. Ядра клеток грубые, пикнотизированные с неровными контурами, грубым глыбчатым хроматином. Цитоплазма преимущественно широкая, гомогенная от базофильной до почти бесцветной, местами с розоватым оттенком, мелковакуолизированная.

Информация на сайте подлежит консультации лечащим врачом и не заменяет очной консультации с ним.
См. подробнее в пользовательском соглашении.

Цитологические методы диагностики туберкулеза. Гистологические методы диагностики туберкулеза.

Цитологические и гистологические методы играют важную, а нередко и решающую роль в распознавании заболеваний органов дыхания. Большое значение имеет исследование клеточного состава мокроты. В нативных и специально окрашенных препаратах находят лейкоциты, эритроциты, клетки плоского и цилиндрического эпителия, альвеолярные макрофаги, пылевые, эпителиоидные, гигантские и опухолевые клетки, кристаллы холестерина и Шарко—Лейдена, неизмененные, обызвествленные коралловидные волокна, микобактерии туберкулеза, неспецифическую флору, друзы актиномицетов, аспергиллы, дрожжевые грибы, сферулы кокцидиоидногэ микоза и т. д.

Следует иметь в виду, что обызвествленные очаги в легких определяются иногда при хроническом абсцессе легкого и гистоплазмозе. Клетки метаплазированного эпителия бронхов со значительной атипией, весьма сходные с элементами злокачественного новообразования, встречаются при хронической пневмонии или бронхите.

Эпителиоидные и гигантские клетки Пирогова— Лангханса можно обнаружить не только при туберкулезе, но и при саркоидозе. Вот почему результаты цитологического анализа мокроты приобретают важное диагностическое значение, если они подтверждаются другими методами исследования.

Частота обнаружения тех или иных клеточных элементов в мокроте или в смывах из бронхов зависит от фазы и динамики процесса, локализации патологического образования в легких, например, при центральном или периферическом раке. Результативность цитологического диагноза, указывал в 1961 г. Umiker, обратно пропорциональна расстоянию опухоли от бифуркации трахеи. Этими факторами следует объяснить различную частоту выявления клеток опухоли при раке легких: в 70—87,6% по данным А. Я. Альтгаузена (1962), Н. Н. Шиллер-Волковой и соавт. (1964), в 24,6—38—45% по наблюдениям Р. Д. Блиновой (1972).

Тот же метод исследования оправдывает себя в диагностике периферических лимфаденитов. При туберкулезе характер обнаруживаемых тканевых изменений зависит от фазы процесса (Е. Д. Тимашева, 1953; М. Г. Абрамов, 1974). В I гиперпластической стадии определяется лишь гиперплазия лимфаденоидной ткани, во II стадии (гранулематозной) находят элементы туберкулезного бугорка, в III — массивный казеозный некроз, в IV — гной, в V (фиброзной) — соединительнотканные волокна, мелкие клеточные элементы.

При раке в пунктатах из лимфатических узлов обнаруживают клетки опухоли, при саркоидозе — эпителиоидные и гигантские клетки без признаков творожистого некроза, при лимфогранулематозе — клетки Березовского—Штернберга и большое число эозинофилов, при лимфолейкозе— картину мономорфной гиперплазии лимфоидной ткани и т. д.

Те или иные патологические изменения удается обнаружить при цитологическом исследовании пунктатов печени, селезенки, костного мозга. Пользуясь этим методом, Olderhauser и соавт. выявили туберкулезные бугорки в печени у 25,3 % больных диссеминированным туберкулезом и у 7,3% — при других его формах. Почти в 60% случаев при пункции печени находят гранулемы, характерные для саркоидоза, особенно при I его стадии (Scadding, 1967, и др.). Сочетая этот способ исследования с пери-тонеоскопией, Tachibana и соавт. (1971) выявили такие тканевые изменения в печени у 70%, a Liehr (1971) — у 90% больных саркоидозом.

Известное значение в дифференциальной диагностике приобретает цитологическое изучение материала, полученного при трансторакальной пункции легкого. Этот метод исследования, который впервые использовал Leyden .еще в 1883 г., в последнее время получил более широкое применение. В пунктате, помимо альвеолярного и бронхиального эпителия, можно обнаружить при туберкулезе эпителиоидные и гигантские клетки и элементы творожистого некроза, при саркоидозе — эпителиоидные и гигантские клетки, при раке и других злокачественных новообразованиях — клетки опухоли и т. д.

Sabow и соавт. при изучении пунктатов установили диагноз рака легкого у 117 больных, между тем как при бронхоскопии — у 81, а при цитологическом исследовании мокроты — лишь у 59 из них. По данным Р. Д. Блиновой (1972), диагноз рака удается верифицировать при пункции легкого у 91,9% больных, по наблюдениям И. С. Мечевой (1973), Н. А. Шмелева (1959) и др. — у 57—80%, а по материалам М. Г. Виннера и М. Л. Шулутко (1971) — у 50% больных. Менее результативна диагностическая пункция при аденоме, гамартохондроме и других доброкачественных образованиях легких. Однако Otto и Frick (1971) на обширном материале (1000 диагностических пункций легкого, произведенных на протяжении 1967—1971 гг. у больных со злокачественными и доброкачественными новообразованиями, туберкулезом, микозами, пневмокониозом, хроническим воспалительным процессом и т. д.) удалось подтвердить диагноз в среднем в 3/4 случаев.

Пункцию легкого целесообразно производить при периферической локализации процесса и достаточной величине патологического образования в легком. Не рекомендуется пользоваться этим методом при подозрении на асбсцесс или гангрену, кисту или эхинококкоз ввиду возможности инфицирования плевральной полости, а также при аневризме легочных сосудов. Его нельзя применять у больных с геморрагическим диатезом, при легочно-сердечной недостаточности у пожилых людей.

Лабораторная диагностика легочных и бронхиальных заболеваний основана на исследовании мокроты, бронхиального аспирата, материала щеточной и катетерной биопсии, трансбронхиальной и трансторакальной пункционной аспирационной биопсии, которые составляют обширный раздел практической цитологии [1]. Клиническая цитология - признанный полноценный метод морфологического анализа, основанный на изучении и оценке клеточного материала, полученного различными способами из патологического очага. К преимуществам цитологического исследования мокроты в амбулаторной практике относят ее простоту, быстроту, легкую повторяемость. Последнее позволяет использовать цитологический анализ для изучения динамики морфологических изменений в течение заболевания и в процессе лечения. Кроме того, цитологическое исследование не требует больших материальных затрат, недороги реактивы и оборудование. Все вышеизложенное позволяет широко использовать метод как для морфологической верификации в условиях поликлиники, так и для проведения массовых профилактических осмотров, выбора групп риска с последующим систематическим наблюдением за лицами входящими в группы риска.

Цитологическое исследование мокроты позволяет выявить болезнетворные микроорганизмы (в том числе микобакте- рию туберкулеза), клетки злокачественных опухолей, примеси (кровь, гной и т.п.), характерные для определенных болезней, а также определить чувствительность бактериальной флоры к антибиотикам.

В мазке мокроты могут встречаться волокнистые образования: эластические волокна, фибриновые волокна и спирали Куршмана (при туберкулезе, абсцессе легкого,раке). Эластические волокна имеют вид тонких двухконтурных волоконец одинаковой на всем протяжении толщины, дихотомически ветвящихся. Эластичные волокна исходят из легочной паренхимы. Выявление в мокроте эластичных волокон свидетельствует о разрушении легочной паренхимы (туберкулез, рак, абсцесс). Иногда их присутствие в мокроте используют для подтверждения диагноза абсцедирую- щей пневмонии.

Кристаллические образования также встречаются в мазке мокроты. Это кристаллы Шарко-Лейдена - бесцветные октаэдры различной величины, напоминающие по форме стрелку компаса, состоящие из белка, освобождающегося при распаде эозинофилов(при бронхиальной астме, эмфиземе, глистных инвазиях); кристаллы гематоидина - ромбы, иголки, звезды от желтого до оранжевого цвета (при некрозе ткани, кровоизлияниях при инфаркте легкого кристаллы холестерина (при распаде ткани - туберкулез, абсцесс легкого, рак); друзы актиномицетов [3]. Мокрота в норме не содержит паразитов и яйца гельминтов. Выявление паразитов позволяет установить природу легочной инвазии, а также диагностировать кишечную инвазию и ее стадию [2].

Читайте также: