Дифференциация энтерококков от стрептококков

Обновлено: 11.05.2024

Микробиологическая диагностика стрептококка. Диагностика стрептококковой инфекции. Выявление стрептококка. Выделение стрептококка.

Основу микробиологической диагностики стрептококковой инфекции составляют выделение и идентификация возбудителя. При этом обычно биохимические характеристики изолятов не изучают. Прочие методы диагностики стрептококковой инфекции имеют различные ограничения.

Через 24 ч на КА стрептококки группы А образуют блестящие вязкие колонии (рис. 2, см. цветную вклейку). В жидких средах бактерии дают придонный, иногда поднимающийся вверх рост. Весьма информативные методы раннего выявления стрептококков — определение чувствительности к антимикробным агентам методом дисков.

Наиболее часто их используют для идентификации стрептококков в мазках из зева. Для дифференцировки стрептококков группы А от прочих b-гемолитических стрептококков применяют тест чувствительности к бацитрацину. Более чем в 99% случаев изоляты стрептококков группы А чувствительны к бацитрацину, тогда как представители других серогрупп обычно устойчивы (рис. 12-8). Также можно применить тест чувствительности к триметоприм-сульфаметоксазолу.

Стрептококки групп А и В обычно чувствительны к действию антимикробного агента.

По сравнению с чувствительностью к бацитрацину более специфичен тест гидролиза пиррол идонил-b-нафтиламида (ПИР-тест). S. pyogenes — единственный стрептококк, дающий положительную реакцию. Для этого в пробирки вносят полоски фильтровальной бумаги, пропитанные ПИР. Под действием бактериальных пептидаз ПИР расщепляется до b-нафтиламида, и после внесения 0,01% раствора p-диметиламиноциннамальальдегида полоски окрашиваются в вишнёво-красный цвет.

Стрептококки группы А легко можно выявить в мазках из зева, используя коммерческие наборы; групповой А-Аг экстрагируют химическими реагентами или ферментами и идентифицируют в реакциях латекс-агглютинации, коагглютинации или ИФА. Для экспресс-диагностики ревматического процесса и гломерулонефрита можно определять AT к стрептолизину О или стрептодорназе; серологические исследования также позволяют выявить носителей. Следует помнить, что AT к стрептолизину О не образуются при кожных инфекциях, вызываемых стрептококками группы А.

Лечение стрептококковой инфекции

Основу лечения стрептококковой инфекции составляет адекватная антибактериальная химиотерапия. Лечение ревматизма проводят пенициллинами короткого действия, профилактику — пенициллинами длительного действия (бициллин-5), причём антибиотикопрофилактику предпочтительно проводить круглогодично.

Информация на сайте подлежит консультации лечащим врачом и не заменяет очной консультации с ним.
См. подробнее в пользовательском соглашении.

В таблицах 8, 9, 10 представлены критерии дифференциации основных видов патогенных стрептококков, вьщеляемых от лошадей, крупного рогатого скота, свиней.

Таблица 9 - Дифференциация основных видов стрептококков,

Вид стрептококка	Признаки
Тип гемолиза	CAMP- тecт	Гидролиз	Образование кислоты из	Серологическая группа по Лансфилд
эскулина	гиппурата	сорбита	маннита
S. agalactiae S. dysagalacdae	β α	+ -	- -	+ -	- -	- -	В С
S. pneumoniae S. equi subsp. zooepidemicus	α β	- -	(+) -	- -	- +	- -	- С

Таблица 10 - Дифференциация основных видов стрептококков,

Вид стрептококка	Признаки
Тип гемолиза	Образование кислоты из	Серологическая группа по Лансфилд
иннулина	маннита	сорбита	салицина
S. porcinus	β (+)	-	+	+	+	Е, Р,U, V
S. suis	β (a)	+	-	-	+	D, R, S
S. pneumoniae	α	d	(-)	-	-	Нет
S. equi subsp. zooepidemicus	β	-	-	+	+	С

Вид стрептококка	Признаки
Тип гемолиза	Образование кислоты из	Серологическая группа по Лансфилд
лактозы	сорбита	трегалозы
S. equi subsp. equi	β	-	-	-	С
S. equi subsp equisimillis	β	-	+	С
S. equi subsp. zooepidemicus	β	-	+	-	С

Признак	Е.avium	E.casseliflavus	E. cecorum	E. dispur	E. durans	E. faecalis	E. faecium	E. gallinarum	E. hirae
Рост при 45° С	+	+	+	-	+	+	+	+	+
Рост в присутствии 6,5% NaCl	+	+	-	+	+	+	+	+	+
Тип гемолизина	α	н.д	α	н.д.	α. β	(β)	(α)	α, β	-
Образование H₂S	+	-	н.д	+	-	н.д	н.д	-	н.д
Гидролиз гиппурата	d	-	-	d	d	(+)	+	+	-
Образование кислоты из	Рамнозы	+	(+)	-	н.д	-	d	-	-	-
Сахарозы	+	+	+	+	-	+	d	+	+
Рафинозы	-	+	+	+	-	-	-	+	d
Сорбита	+	-	-	-	-	(+)	-	-	-
Маннита	+	+	-	-	(-)	+	(+)	+	-

При идентификации S. pneumoniae, помимо критериев, изложенных в таблице 8, определяют чувствительность к лизису клеток стрептококка желчью (желчными кислотами) и чувствительность к оптохину.

Для проверки на желчеустойчивость 2-3 мл исследуемой культуры, выращенной на сывороточном бульоне, засевают в 5 мл 10%-ного желчного бульона. Среда становится мутной и ее помещают на час в термостат.

Чувствителыюсть S. pneumoniae к оптохину (этилгидрокупреин НС1) используют для дифферегщиации от других зеленящих стрептококков. Для этого применяют коммерческие бумажные диски с оптохипом. Испытуемую культуру засевают на кровяной агар, помещают на поверхность среды диски с оптохипом и культивируют 24 часа при 37° С. Как положительный результат расценивают задержку роста от 14 мм и более (при диске 6 мм), что характерно для S. pneumoniae. При отсутствии таких дисков может быть использован следующий метод: исследуемую культуру засевают на глюкозо-кровяной агар с оптохином (1:50 000), инкубируют при 37-38° С в течение 20-24 часов. S. pneumoniae на этой среде не растет.

Для видовой дифференциации энтерококков используют тесты, представленные в таблице 12, а также тест-систему ЕН-coccus test.

Известно более 20 серологических групп стрептококков. Серологическая принадлежность патогенных для животных стрептококков представлена в таблице 6. Некоторые виды стрептококков (S. pneumoniae и др.) не содержат С-полисахарид и не могут быть классифицированы по системе Лансфилд. Иммунные серогрупповые стрептококковые сыворотки производит и высылает по заявкам ВГНКИ ветпрепаратов. За рубежом для этих целей имеются коммерческие препараты, позволяющие устанавливать серогруп-повую принадлежность в пределах серогрупп А, В, С, D, F и G в тесте латекс-агглютинации или серогрупп А, В, С, F и G в реакции коагглютинации на стекле, ИФА, а также выявлять антигены непосредственно в материале.

Определение серогрупповой принадлежности испьггуемой культуры стрептококка в реакции преципитации проводят следующим образом. Стрептококки выращивают в бульоне Хоттингера с 1% глюкозы при 37° С в течение 20 часов. В стеклянные центрифужные пробирки переносят
9 мл выращенной культуры, центрифугируют при 4000 об/мин. 25 минут. Над осадочную жидкость удаляют, к осадку добавляют 0,3-0,4 мм 0,2 N НС1, суспендируют и вьщерживают смесь в кипящей водяной бане
10 минут.

Затем пробирки охлаждают водой, добавляют в каждую пробирку каплю 0,04%-ного спиртового раствора фенолфталеина и затем по каплям добавляют 0,2 N раствор NaOH до приобретения раствором бледно-розовой окраски (кислота нейтрализована). Далее смесь вновь центрифугируют (4000 об/мин., 25 минут), над осадочную жидкость используют как растворимый антиген в РП.

Техника постановки реакции преципитации. Берут от пастеровских пипеток капилляры диаметром 0,5-1,0 мм, опускают капилляр концом в флакон с сывороткой и набирают в него сыворотку на длину капилляра 1-1,5 см. Удаляют избыток сыворотки с кончика капилляра, погружают его в пробирку с антигеном и набирают равное количество антигена. Капилляр переворачивают таким образом, чтобы смесь оказалась в середине капилляра, и закрепляют его вертикально в куске пластилина. Через 5 минут учитывают результат. Положительная реакция: образование хлопьев или резкое помутнение в середине столбика.

Биопроба.Используют для определепия патогенных свойств культур стрептококков, а также для их выделения из контаминированного материала.

Энтерококки. Особенности энтерококков. Эпидемиология энтерококков. Клинические проявления поражений энтерококками. Выявление энтерококков. Диагностика энтерококков.

Энтерококки — овальные бактерии размером 0,6-2,0x0,6-2,5 мкм; в мазках из культур, выращенных в жидких средах, они располагаются парами или короткими цепочками. Энтерококки не образуют капсул; некоторые виды ограниченно подвижны (имеют небольшие жгутики). Бактерии расщепляют углеводы с образованием кислоты без газа; каталаза отрицательны, растут при температуре 10-45 С (оптимум 37 °С), обитатели кишечника различных позвоночных. У человека наиболее часто поражения вызывают E.faecalis, E .faecium и Е. durans.

Эпидемиология энтерококков

Энтерококки входят в состав микробных ценозов полости рта, кишечника и мочеполовой системы взрослых. Большинство инфекций носит эндогенный характер и обусловлено инвазией микроорганизмов при избыточной колонизации. Также показана возможность нозокомиальной передачи микроорганизмов; частота подобных инфекций возрастает на фоне широкого применения цефалоспоринов широкого спектра действия.

Клинические проявления поражений энтерококками

Энтерококки часто вызывают поражения мочеполовой системы у пациентов с установленными на длительный срок катетерами; подобные поражения у клинически здоровых лиц наблюдают значительно реже. Также энтерококки вызывают 10-20% всех бактериальных эндокардитов и 5% бактериемии. Эндокардиты чаще регистрируют у лиц преклонного возраста с различной патологией, наркоманов и лиц, нуждающихся в регулярных внутривенных инъекциях. Эндокардиты характеризуются вялым течением с постепенным развитием клапанной недостаточности. Бактериемия может развиваться как следствие поражений мочевой системы или внутрибрю-шинных абсцессов; в 40% случаев источник проникновения бактерий в кровоток остаётся неизвестным. Гемолизирующие энтерококки также способны вызывать пищевые отравления и дисбактериозы кишечника.

Факторы патогенности энтерококков

Микробиологическая диагностика энтерококков. Выявление энтерококков. Диагностика энтерококков

На среде Диф-3, содержащей теллурит калия, энтерококки образуют характерные чёрные колонии, что обусловлено способностью бактерий восстанавливать теллур.

Для дифференцировки стрептококков и энтерококков также используют инертность последних к солям жёлчных кислот. Основные тесты — способность расти в присутствии 6,5% NaCl (стрептококки лабильны) и ПИР-тест, в котором энтерококки дают положительный результат.

Также заслуживает внимания способность энтерококков обесцвечивать молоко с лакмусом или метиленовым синим через 4-6 ч при 37 °С

Инфекции вызванные оральными стрептококками и энтерококками: диагностика, лечение, профилактика

Метастазирующие абсцессы. Представители группы Streptococcus milleri, состоящей из видов S. constellatus, S. intermedius, S. anginosis, обычно колонизирующих слизистую оболочку полости рта и кишечника.

В то же время (попадая в кровоток) могут вызвать генерализованную инфекцию и быть причиной развития абсцессов головного мозга, лёгких или печени. Стрептококки этой группы часто выделяют в составе патогенной флоры при микст-инфекциях.

Инфекционный эндокардит. Возбудитель — а-гемолитический стрептококк. Инфекция может возникать после стоматологических вмешательств. В связи с отсутствием выраженных симптомов заболевания лицам из группы риска (например, пациентам, которым показаны стоматологические процедуры — удаление зубного камня, экстракция зубов и др.) рекомендовано проведение антибиотикопрофилактики.

Оральные стрептококки

Энтерококки — представители нормальной микрофлоры кишечника, вызывающие инфекционный процесс только при попадании в другие органы и ткани организма. Возбудители обладают антигеном группы D (полисахаридный антиген клеточной стенки).

Из более чем двенадцати видов возбудителя патогенными для человека считают Enterococcus faecalis и Е. faecium, вызывающих заболевания мочевыводящих путей, раневые инфекции и эндокардит. Некоторые виды энтерококков (например, Е. faecium) играют важную роль в развитии внутрибольничных инфекций и обладают устойчивостью к ряду антибиотиков.

Возбудитель чувствителен к действию ампициллина или амоксициллина, но в последнее время наблюдают повышение его резистентности к этим препаратам. Значительной проблемой стало появление штаммов, устойчивых к гликопептидам. Для лечения инфекций, вызванных ими, применяют линезолид или пристинамицин.

Редактор: Искандер Милевски. Дата обновления публикации: 18.3.2021

Читайте также: