Эритроцитарный диагностикум сыпного тифа

Обновлено: 01.05.2024

Серологическая диагностика эпидемического сыпного тифа и болезни Брилля в РПГА (реакция пассивной, или непрямой гемагглютинации). Эпидемический сыпной тиф (вшивый тиф) – острая инфекция, вызываемая риккетсиями (Rickettsia prowazekii), передаваемыми вшами. Риккетсии – мелкие грамотрицательные бактерии, внутриклеточные паразиты. Источником инфекции является больной человек, от которого платяные и головные вши передают риккетсии здоровому человеку. Расчёсывание укусов насекомых приводит к втиранию их экскрементов, в которых содержатся риккетсии, в ткань кожи. Распространению способствует теснота, скученность, плохие социальные условия. Эпидемии сыпного тифа ранее часто возникали во время войн, стихийных бедствий. Инкубационный период инфекции 7-14 дней. Характеризуется острым началом – подъём температуры до 39-40°С, сильная головная боль, нарушение сна; через 3-7 суток появляется характерная сыпь, преимущественно, на боковых поверхностях туловища и сгибательных поверхностях конечностей; проявляются симптомы поражения сердечно-сосудистой системы и центральной нервной системы. Больной человек заразен около 20 дней, начиная с последних дней инкубационного периода. Обычно после заболевания возникает стойкий иммунитет. Но возбудитель способен подолгу сохраняться в организме лиц, перенёсших сыпной тиф, иногда спустя многие годы после заболевания у них может возникнуть эндогенный. Повторный сыпной тиф (болезнь Брилля-Цинссера) протекает легче самого сыпного тифа, но с тем же характерным комплексом симптомов. При заболевании сыпным тифом специфические антитела выявляются к концу первой недели в титрах 1:125-1:250. Максимального уровня (1:1000 – 1:64000) титры в РПГА достигают в течение первых двух недель заболевания. В связи с этим рекомендуют проводить исследование в парных сыворотках, полученных на 7 и 12-15 днях заболевания. Эндогенный рецидив сыпного тифа (болезнь Брилля) лабораторно также характеризуется выраженным ростом титров специфических антител.

Специальная подготовка не требуется. Рекомендуется взятие крови не ранее чем через 4 часа после последнего приема пищи.

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Диагностический титр: 1:1000. Рекомендовано проводить исследование в динамике на 7 и 12-15 дни заболевания.

Положительно: текущая или перенесённая в прошлом инфекция. Диагностическим титром является разведение 1:1000 и выше (рекомендовано проводить исследование в парных сыворотках на 7 и 12-15 днях заболевания).

Серологическая диагностика эпидемического сыпного тифа и болезни Брилля в РПГА (реакция пассивной, или непрямой гемагглютинации). Эпидемический сыпной тиф (вшивый тиф) – острая инфекция, вызываемая риккетсиями (Rickettsia prowazekii), передаваемыми вшами. Риккетсии – мелкие грамотрицательные бактерии, внутриклеточные паразиты. Источником инфекции является больной человек, от которого платяные и головные вши передают риккетсии здоровому человеку. Расчёсывание укусов насекомых приводит к втиранию их экскрементов, в которых содержатся риккетсии, в ткань кожи. Распространению способствует теснота, скученность, плохие социальные условия. Эпидемии сыпного тифа ранее часто возникали во время войн, стихийных бедствий. Инкубационный период инфекции 7-14 дней. Характеризуется острым началом – подъём температуры до 39-40°С, сильная головная боль, нарушение сна; через 3-7 суток появляется характерная сыпь, преимущественно, на боковых поверхностях туловища и сгибательных поверхностях конечностей; проявляются симптомы поражения сердечно-сосудистой системы и центральной нервной системы. Больной человек заразен около 20 дней, начиная с последних дней инкубационного периода. Обычно после заболевания возникает стойкий иммунитет. Но возбудитель способен подолгу сохраняться в организме лиц, перенёсших сыпной тиф, иногда спустя многие годы после заболевания у них может возникнуть эндогенный. Повторный сыпной тиф (болезнь Брилля-Цинссера) протекает легче самого сыпного тифа, но с тем же характерным комплексом симптомов. При заболевании сыпным тифом специфические антитела выявляются к концу первой недели в титрах 1:125-1:250. Максимального уровня (1:1000 – 1:64000) титры в РПГА достигают в течение первых двух недель заболевания. В связи с этим рекомендуют проводить исследование в парных сыворотках, полученных на 7 и 12-15 днях заболевания. Эндогенный рецидив сыпного тифа (болезнь Брилля) лабораторно также характеризуется выраженным ростом титров специфических антител.

Специальная подготовка не требуется. Рекомендуется взятие крови не ранее чем через 4 часа после последнего приема пищи.

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Диагностический титр: 1:1000. Рекомендовано проводить исследование в динамике на 7 и 12-15 дни заболевания.

Положительно: текущая или перенесённая в прошлом инфекция. Диагностическим титром является разведение 1:1000 и выше (рекомендовано проводить исследование в парных сыворотках на 7 и 12-15 днях заболевания).


Внешний вид упаковки и препарата может отличаться от изображённого на фотографии

Филиал АО НПО "Микроген" в г. Пермь "Пермское НПО "Биомед"" Россия, 614089, Пермский край, г. Пермь, ул. Братская, д. 177

Инструкция по применению

Описание

Набор реагентов выявляет комплементсвязывающие антитела к риккетсиям группы сыпного тифа.

Состав

В комплект Набора реагентов входят:

  • Диагностикум риккетсиозный Тифи для РСК – 10 ампул;
  • Сыворотка диагностическая к риккетсиям Тифи для РСК – 3 ампулы.

Консервант – фенол в конечной концентрации 0,5 %.

Представляет собой порошок или аморфную массу от желтовато-белого до коричневато-розового цвета.

Стабилизатор – сахароза в конечной концентрации 2 %.

Показания для применения

Предназначен для серологической диагностики эндемического (крысиного) сыпного тифа.

Режим дозирования и способ применения

Перед постановкой реакции определяют рабочее разведение комплемента и рассчитывают его необходимое количество.

За одну единицу комплемента принимают его количество, содержащееся во второй пробирке с полным гемолизом (в данном случае 0,07 мл комплемента в разведении 1:10, что соответствует 0,007 мл неразведённого комплемента).

  • 0,2 мл разведенной исследуемой сыворотки;
  • 0,2 мл диагностикума в рабочем разведении;
  • 0,2 мл комплемента в рабочем разведении;
  • 0,4 мл гемолитической системы.
  1. Содержимое ампулы с диагностикумом растворяют в натрия хлориде растворе 0,9 % в объеме, указанном на этикетке ампулы.
  2. В пробирках готовят последовательные двукратные разведения от 1:10 до 1:1280 исследуемых инактивированных сывороток на натрия хлориде растворе 0,9 % в объеме 0,2 мл.
  3. В каждую пробирку с сывороткой добавляют по 0,2 мл диагностикума в рабочем разведении.
  4. В каждую пробирку добавляют 0,2 мл комплемента в рабочем разведении.
  5. Реакцию сопровождают следующим контролем:
    1. Контроль соответствия заявленного титра диагностической сыворотки, выпускаемой в комплекте с диагностикумом. Содержимое ампулы регидратируют в 1 мл натрия хлорида раство-ра 0,9%, получая разведение сыворотки 1:10. В пробирках готовят последовательные двукратные разведения сыворотки от 1:10 до 1:320 (при титре 1:160) или от 1:10 до 1:640 (при титре 1:320) в объеме 0,2 мл. В каждую пробирку с разведениями диагностической сыворотки добавляют 0,2 мл диагностикума в рабочем разведении и 0,2 мл комплемента в рабочей дозе.
    2. Контроль исследуемых и диагностической сывороток на антикомплементарность: к 0,2 мл минимального разведения (1:10) каждой сыворотки добавляют по 0,2 мл натрия хлорида раствора 0,9 % и по 0,2 мл комплемента в рабочем разведении.
    3. Контроль диагностикума на антикомплементарность: к 0,2 мл диагностикума в рабо-чем разведении добавляют 0,2 мл натрия хлорида раствора 0,9 % и 0,2 мл комплемента в рабочем разведении.
    4. Контроль правильности рабочей дозы комплемента: в три пробирки вносят 0,2 мл, 0,1 мл и 0,05 мл комплемента в рабочем разведении и 0,4 мл, 0,5 мл и 0,55 мл натрия хлорида раствора 0,9 %соответственно.
    5. Контроль гемолитической системы: в пробирку наливают 0,6 мл натрия хлорида раствора 0,9 %.

    Меры предосторожности при применении

    Оборудование обеззараживают двукратным протиранием раствором хлорамина 3% или раствором пероксида водорода 6% с интервалом 15 мин.


    Внешний вид упаковки и препарата может отличаться от изображённого на фотографии

    Филиал АО НПО "Микроген" в г. Пермь "Пермское НПО "Биомед"" Россия, 614089, Пермский край, г. Пермь, ул. Братская, д. 177

    Инструкция по применению

    Описание

    Действующим началом диагностикума является Ви-антиген, фиксированный на поверхности эритроцитов. При взаимодействии с сыворотками, содержащими антитела к Ви-антигену, наблюдается феномен агглютинации эритроцитов.

    Форма выпуска

    Выпускается в наборе 1 флакон с диагностикумом - 3 мл, диагностическая сыворотка сальмонеллезная адсорбированная рецептор Ви Сухая в виде лиофилизата из 0,1 мл 1 флакон; 0,9 % раствор натрия хлорида - 2 флакона по 8 мл; планшет для иммунологических реакций однократного применения - 1 шт.

    Состав

    Диагностикум эритроцитарный сальмонеллезный Ви-антигенный, который представляет собой 0,75 % взвесь формалинизированных и сенсибили-зированных Ви-антигеном эритроцитов человека О (I) группы крови в фос-фатном буферном растворе (рН- 7,2 ± 0,2; концентрация - 0,06 моль/л). Консервант - формалин. Гомогенная суспензия коричневого цвета без хлопьев; при отстаивании обра¬зуется 2 слоя: плотный коричневый осадок эритроцитов и прозрачная желто¬ватая надосадочная жидкость 1 флакон-3 мл.

    Сыворотка диагностическая сальмонеллезная адсорбированная рецептор Ви сухая - гомогенная масса от белого с коричневатым оттенком до бежевого цвета. 1 флакон - из 0,1 мл.

    Поддерживающий раствор - 0,9 % раствор натрия хлорида - прозрачная бесцветная жидкость, рН от 6,5 до 7,5. 2 флакона -по 8 мл.

    Планшет круглодонный для иммунологических реакций однократного применения - состоит из 8 рядов, каждый из которых включает в себя 12 лунок с прозрачным, бесцветным, круглым дном. 1 шт.

    Диагностикум должен агглютинироваться в РПГА сывороткой диагностической сальмонеллезной адсорбированной рецептор Ви сухой в разведении не ниже 1/2 их титра, но не менее, чем 1/160. Диагностикум не должен агглютинироваться сыворотками диагностичесскими сальмонеллезными адсорбированными сухими для РА: О рецептор 9 - в разведении 1:40 и выше, Н рецептор d - в разведении 1:10 и выше.

    Показания для применения

    Предназначен для выявления в сыворотке крови человека специфических антител к Ви-антигену сальмонелл тифа в реакции пассивной гемагглютинации (РПГА).

    Режим дозирования и способ применения

    В качестве анализируемых образцов используют образцы сыворотки крови человека.
    Анализируемый образец хранят в условиях, предотвращающих бактериальный пророст при температуре от 2 до 8 °С не более 72 часов. Допускается замораживание, замороженные анализируемые образцы перед исследованием разморозить при комнатной температуре.
    Анализ образцов с выраженным гемолизом, бактериальным проростом, а также длительно хранившихся без замораживания или повторно замораживаемых не допускается.

    ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
    Приготовление растворов для РПГА.
    Флаконы с сывороткой диагностической сальмонеллезной адсорбированной рецептор Ви сухой вскрыть и добавить 1 мл прилагаемого 0,9 % раствора натрия хлорида, получив, таким образом, разведение 1:10, являющееся рабочим разведением.
    Вскрытый флакон с сывороткой диагностической сальмонеллезной адсорбированной рецептор Ви сухой при разведении 1:10 в закрытом виде можно хранить при температуре от 2 до 8 °С в течение одного месяца.
    Диагностикум готов к применению. Перед вскрытием флакон с диагностикумом необходимо осторожно встряхнуть до получения гомогенной суспензии. В ходе работы встряхивание рекомендуется повторять.
    Вскрытый флакон с диагностикумом в закрытом виде можно хранить при температуре от 2 до 8 °С в течение одного месяца.
    0,9 % раствор натрия хлорида. Готов к применению.

    Проведение РПГА.
    При контроле любого количества анализируемых сывороток обязательна постановка 1 ряда агглютинации с сывороткой диагностической сальмонеллезной адсорбированной рецептор Ви сухой.
    Для постановки РПГА используют планшет для иммунологических реакций одно-кратного применения. Готовят двукратные серийные разведения анализируемых сывороток в 0,05 мл прилагаемого 0,9 % раствора натрия хлорида начиная с 1:10 до 1:2560 и 1 ряд двукратного серийного разведения сыворотки диагностической сальмонеллезной адсорбирован-ной рецептор Ви сухой, начиная с разведения 1:10, до удвоенного титра, указанного на этикетке флаконов данной сыворотки.
    В каждую из лунок с разведениями сыворотки прибавляют по 0,025 мл диагностикума.

    Обязательными контролями являются:
    1. Контроль сыворотки диагностической сальмонеллезной адсорбированной рецептор
    Ви сухой и анализированной сыворотки, которые в разведении 1:10 в объеме 0,05 мл вносят
    в две контрольные лунки.
    2. Проверка отсутствия спонтанной агглютинации диагностикума, для чего в две лунки, содержащие по 0,05 мл 0,9 % раствора натрия хлорида добавляют по 0,025 мл диагностикума.
    Планшет встряхивают и помещают на 1,5-2,0 ч в термостат при температуре (37+1) °С.

    Меры предосторожности при применении

    Объективные результаты анализа гарантируются при выполнении следующих условий:
    - хранение всех реагентов набора осуществлять при температуре от 2 до 8 °С;
    - не использовать реагенты с истекшим сроком годности;
    - не использовать реагенты набора при отсутствии на их упаковке соответствующей маркировки;
    - для проведения РПГА использовать реагенты, входящие только в данный набор.

    Читайте также: