Может ли быть при ифа рмп на сифилис

Обновлено: 26.04.2024

Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова

Современные лабораторные методы и алгоритмы диагностики сифилиса

Журнал: Клиническая дерматология и венерология. 2015;14(6): 56‑61

Дано описание современных подходов к лабораторной диагностике сифилиса. Описаны прямые тесты (темнопольная микроскопия, прямая иммунофлюоресценция Treponema pallidum, полимеразная цепная реакция), позволяющие выявить самого возбудителя или его генетический материал. Приведены наиболее часто применяемые нетрепонемные и трепонемные тесты, используемые в серологической диагностике сифилиса; показания и ограничения к их применению. Дано описание двух современных алгоритмов, применяемых при серологическом обследовании больного с подозрением на сифилис: традиционного и реверсионного, описаны их достоинства и недостатки. Статья представляет интерес для практических врачей — дерматовенерологов, урологов, акушеров-гинекологов, врачей клинической лабораторной диагностики, в поле зрения которых могут оказаться больные манифестными и скрытыми формами сифилиса.

Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова

Сифилис — системное инфекционное заболевание, вызываемое бледной трепонемой (Treponema pallidum, subspecies pallidum), остается общемировой проблемой здравоохранения.

В Москве в последние годы отмечена стойкая тенденция к снижению заболеваемости сифилисом. В 2013 г. уровень заболеваемости сифилисом составил 20,4 на 100 000 населения. Однако эпидемиологическая ситуация продолжает оставаться напряженной: в структуре сифилиса преобладают скрытые формы, растет число поздних форм инфекции, что диктует необходимость усиления эпидемиологического контроля над распространением заболевания и широкого применения врачами-дерматовенерологами современных высокочувствительных и специфичных методов лабораторной диагностики сифилиса [1].

Все лабораторные методы диагностики сифилиса подразделяются на прямые, позволяющие выявлять возбудителя или его генетический материал непосредственно в очагах поражения, и непрямые — для выявления антител к возбудителю сифилиса в сыворотке крови (серологическая диагностика).

При назначении пациенту лабораторного обследования по поводу сифилиса не следует забывать о том, что абсолютным критерием постановки диагноза является непосредственное выявление возбудителя заболевания — бледной трепонемы (T. pallidum) или его генетического материала [2].

T. pallidum в образцах, полученных из райц-серума сифилидов или инфицированных лимфоузлов при раннем сифилисе, можно обнаружить с помощью следующих прямых методов исследования:

• микроскопия в темном поле микроскопа, или темнопольная микроскопия (ТПМ);

• прямая иммунофлюоресценция (ПИФ) (для образцов из поражений в полости рта или из других очагов, где возможна контаминация трепонемами-комменсалами);

• полимеразная цепная реакция (ПЦР).

Наиболее убедительным доказательством инфицирования сифилисом является прямая визуализация T. pallidum в темном поле зрения [3].

Материалом для темнопольной микроскопии является серозное отделяемое с поверхности эрозии, язвы, мацерированной или экскориированной, эрозированной папулы или бляшки, иногда — содержимое пунктата лимфоузла. При исследовании в темном поле бледная спирохета выглядит в виде нежной подвижной спирали, слабо светящейся серебристым блеском. Исследование в темном поле микроскопа позволяет изучать T. pallidum в живом виде, а также дифференцировать ее от других трепонем как по морфологическим признакам, так и по характерным особенностям движения, что позволяет поставить диагноз даже без учета данных серологических тестов.

Вторым методом выявления возбудителя сифилиса в очагах поражения является метод ПИФ. В результате взаимодействия моноклональных антител анти-T. pallidum, меченных ФИТЦ, и бледной трепонемы, полученной из очагов поражения и помещенной на предметное стекло, при люминесцентной микроскопии наблюдается специфическое ярко-зеленое свечение. Метод удобен при исследовании материала, полученного со слизистой оболочки полости рта и прямой кишки, при биопсии или аутопсии. За счет использования видоспецифических моноклональных антител метод позволяет дифференцировать патогенную T. pallidum от трепонем-комменсалов [4]. В России данный метод не применяют ввиду отсутствия промышленного производства и сертификации соответствующих ингредиентов, в частности, моноклональных антител к патогенной бледной трепонеме, меченных ФИТЦ.

ПЦР позволяет обнаружить единственную молекулу ДНК возбудителя среди миллионов других молекул. Метод основан на принципе естественной репликации ДНК и заключается в размножении (амплификации) в пробирке определенных участков ДНК возбудителя в процессе повторяющихся температурных циклов. На каждом этапе вновь синтезированные молекулы копируются ферментом ДНК-полимеразой, благодаря чему происходит многократное удвоение специфических фрагментов ДНК [5].

Источниками обнаружения генетического материала возбудителя при постановке ПЦР у больных сифилисом могут являться: райц-серум (тканевая жидкость) генитальных язв, биопсийный материал кожных сифилидов, спинномозговая жидкость, амниотическая жидкость, плацента, периферическая кровь и семенная жидкость. Наиболее адекватным для исследования является райц-серум генитальных язв.

Чувствительность и специфичность метода ПЦР при исследовании райц-серума сифилидов при первичном сифилисе достигает 94,7—98,6%, при вторичном 80—98,6% и более выражена по сравнению с темнопольной микроскопией [6].

Широкое применение при обследовании на сифилис получили непрямые, серологические методы исследования, принцип которых заключается в выявлении в сыворотке или плазме крови или спинномозговой жидкости пациентов антител, ассоциированных с сифилитической инфекцией.

Первой серологической реакцией для диагностики сифилиса была реакция связывания комплемента, предложенная в 1906 г. Вассерманом, Нейсcером и Бруком [7]. Однако в настоящее время этот метод, ставший в свое время революционным и положивший начало серологической диагностике сифилиса, считается морально устаревшим: он длительно выполняется, субъективно интерпретируется, часто дает ложноотрицательные и ложноположительные результаты и не подлежит стандартизации.

Современные серологические тесты, применяемые для диагностики сифилиса, подразделяются на две большие группы: нетрепонемные (НТТ) и трепонемные (ТТ).

В НТТ на сифилис используется антиген нетрепонемного происхождения — кардиолипин-холестерол-лецитиновый комплекс [8, 9].

Основными видами НТТ, рекомендуемыми к применению на территории России, в настоящее время являются:

— РМП — реакция микропреципитации с плазмой и инактивированной сывороткой;

— RPR — тест быстрых плазменных реагинов (Rapid Plasma Reagins), или быстрый, или ускоренный плазмареагиновый тест;

— VDRL (Venereal Disease Research Laboratory) — тест исследовательской лаборатории венерических заболеваний.

Могут быть также использованы следующие их аналоги при условии, если тест-система имеет разрешение к медицинскому применению на территории Российской Федерации:

TRUST — тест с толуидиновым красным и непрогретой сывороткой (Toluidin Red Unheated Serum Test);

RST — тест на скрининг реагинов (Reagin Screen Test);

USR — тест на реагины с непрогретой сывороткой (Unheated Serum Reagins) [10, 11].

Показаниями к применению НТТ на сифилис являются:

• проведение скрининга населения на сифилис;

• контроль эффективности терапии (по титру антител в парных сыворотках, полученных до и после лечения);

• определение активности инфекции (по высоте титра антител).

НТТ просты в исполнении, недороги, не требуют специального оборудования и длительного времени; при этом реакции являются высоко чувствительными и специфичными.

Чувствительность РМП варьирует в зависимости от стадии заболевания: от 81% при первичном сифилисе до 94—99% при вторичном и скрытых формах сифилиса. Чувствительность зарубежных тестов варьирует от 59 до 100%, специфичность — от 93 до 99%.

После адекватного специфического лечения сифилиса содержание антител к возбудителю сифилиса, выявляемых в НТТ, постепенно снижается, тесты из резко положительных становятся слабоположительными, а затем отрицательными. В связи с этим НТТ используют для оценки эффективности лечения.

Ограничениями применения НТТ являются ранние стадии сифилиса (период инкубации, начало первичного периода), так как данные реакции становятся позитивными лишь спустя 2—3 нед после появления твердого шанкра, и поздние стадии (поздний скрытый и третичный сифилис, сифилис с поражением внутренних органов и нервной системы), так как лабильные преципитины первыми элиминируются из организма при длительном течении сифилитической инфекции. К числу недостатков НТТ следует отнести также субъективный визуальный учет, хотя в настоящее время разработаны системы для видеоцифровой регистрации результатов с их переводом в цифровые данные.

Следует иметь в виду, что антитела, определяемые в НТТ на сифилис, могут выявляться при ряде острых и хронических инфекционных и соматических заболеваний, которые сопровождаются гибелью клеток и разрушением тканей, что может стать причиной ложноположительных результатов НТТ, которые встречаются при скрининге населения на сифилис в 1—3% случаев [12].

В ТТ применяется антиген трепонемного происхождения — патогенная бледная трепонема, рекомбинантные белки, полученные генно-инженерным способом или пептиды, полученные путем искусственного химического синтеза.

Основными ТТ, рекомендуемыми к применению на территории России, в настоящее время являются:

ИФА — иммуноферментный анализ (ELISA — Enzymelynced immunosorbent assay, EIA – Enzyme immunoassay);

РПГА — реакция пассивной гемагглютинации (ТРНА, TPPA — Treponema pallidum hemagglutination assay, Treponema pallidum partiсle agglutination assay);

РИФ — реакция иммунофлюоресценции (FTA Fluorescent treponemal antibody);

ИХЛ — иммунохемилюминесценция (СLIA — Chemiluminescence Immunoassay);

Простые быстрые тесты у постели больного — ПБТ (РОС — point of care tests);

РИБТ (РИТ) — реакция иммобилизации бледных трепонем (TPI — Treponema pallidum immobilization test) [13, 14].

Показаниями к применению ТТ являются:

• подтверждение положительных результатов НТТ;

• дополнительное подтверждение в случае расхождения результатов скринингового ТТ и последующего НТТ;

• скрининг населения на сифилис (ИФА, РПГА, простые быстрые тесты).

К числу несомненных достоинств ТТ относится их высокая чувствительность и особенно специфичность, возможность подтверждения (верификация) результатов НТТ.

Часть ТТ (ИФА, ИХЛ, иммуноблоттинг) может быть автоматизирована и выполняться на анализаторах с получением объективного отчета в электронном виде. Для РПГА имеется возможность видеоцифровой регистрации результатов.

ТТ могут быть использованы для подтверждения клинического диагноза сифилиса на ранних стадиях инфекции, когда НТТ еще отрицательны, но есть клинические, эпидемиологические или анамнестические подозрения на сифилис. Однако чувствительность при первичном сифилисе этих тестов в совокупности недостаточна (76—86%) в основном за счет РИБТ, которая становится позитивной, начиная со второй половины первичного периода сифилиса.

Ранние стадии сифилиса (начало первичного периода сифилиса, период инкубации) могут быть диагностированы при использовании IgM-тестов, которые выявляют ранние трепонемоспецифические IgM, первыми появляющимися в организме больного сифилисом в ответ на внедрение возбудителя (варианты РИФ-абс IgM, ИФА-IgM, ИХЛ-IgM, IgM-иммуноблоттинга) [15—19].

Трепонемные методы хорошо выявляют вторичный и скрытый сифилис (чувствительность составляет 98—100%) [20].

ТТ могут быть использованы для установления ретроспективного диагноза сифилиса, а также для распознавания ложноположительных результатов НТТ.

С использованием ряда ТТ (ИФА, РПГА, ИХЛ, ПБТ) можно проводить скрининг отдельных категорий населения на сифилис (доноры, беременные, больные офтальмологических, психоневрологических, кардиологических стационаров, ВИЧ-инфицированные).

ТТ не могут быть использованы для контроля эффективности лечения, так как длительно остаются положительными после окончания лечения сифилиса (в особенности РИБТ, РПГА). Они сложнее в техническом отношении, чем НТТ, что несколько ограничивает их применение.

В настоящее время существуют два основных подхода к проведению скрининга и обследования больных на сифилис: первый подход характеризуется началом обследования с назначения НТТ, второй — когда обследование начинается с ТТ.

Рис. 1. Традиционный алгоритм серологического скрининга на сифилис (из лекции Фриго Н.В. на цикле усовершенствования врачей, РМАПО, 2012).

Контрольное обследование после лечения проводится с помощью РМП или ее модификации в полуколичественном варианте. По снижению ее титра судят об эффективности терапии

Заключительное обследование проводят не ранее чем через 1 год. Ставится та же специфическая реакция, что и при первичном обследовании. Наличие ее положительных результатов не является препятствием для снятия пациента с учета [13].

Традиционный алгоритм скрининга на сифилис имеет свои преимущества и недостатки. Несомненным преимуществом является то, что он выявляет активную инфекцию. Однако данный алгоритм дает высокий процент ложноположительных результатов, нуждается в подтверждении ТТ и может пропустить ранний первичный сифилис или пролеченную инфекцию.

Рис. 2. Реверсионный алгоритм серологического скрининга на сифилис (из лекции Фриго Н.В. на цикле усовершенствования врачей, РМАПО, 2012).

При положительном результате ТТ следует постановка НТТ с определением титра антител.

Если НТТ дает отрицательный результат, проводится дополнительное тестирование с использованием второго чувствительного и специфичного (подтверждающего) ТТ (например, РПГА).

При отрицательном результате дополнительного подтверждающего теста (РПГА–) делается вывод о том, что человек не болен сифилисом; при этом положительный результат скринингового ТТ (первый) расценивается как ложноположительный.

При положительном результате (РПГА+) делается вывод о том, что у человека имеется сифилис в настоящем или был перенесен в прошлом.

Можно привести ряд аргументов в пользу использования реверсионного алгоритма:

• возможность автоматизации ТТ;

• высокая производительность (до 180 тестов в час);

• отсутствие или сведение до минимума ручных манипуляций (безопасность персонала и высокое качество исследований);

• низкая себестоимость при больших объемах тестирования (поток);

• отсутствие ложнонегативных реакций и феномена прозоны (высокая чувствительность);

• возможность детекции IgM антител — потенциальная возможность диагностики раннего сифилиса.

Главным преимуществом реверсионного алгоритма является то, что он выявляет ранний или пролеченный сифилис, что может быть пропущено при традиционном скрининге. Вместе с тем он также имеет ряд недостатков: реверсионный алгоритм нуждается в постановке НТТ для подтверждения активной инфекции и контроля эффективности терапии, может давать ложноположительные результаты (из-за недостаточно высокой специфичности тестов), не позволяет дифференцировать активную и пролеченную инфекцию (и это его основной недостаток!).

Проблемы возникают чаще всего при наличии положительного результата ТТ и отрицательного результата НТТ. Тактика в этом случае должна быть следующей.

• При несовпадении результатов скринингового ТТ и НТТ (ТТ+, НТТ–) необходима постановка дополнительного подтверждающего ТТ.

• Подтверждающий Т.Т. должен иметь чувствительность не ниже, а специфичность — выше, чем скрининговый ТТ.

• В качестве дополнительного подтверждающего теста в этих случаях может быть рекомендована РПГА (РИФабс не рекомендуется ввиду более низкой аналитической чувствительности в сравнении с другими ТТ) [24].

• Результаты скрининга следует анализировать с учетом клинической картины заболевания и анамнестических данных пациентов (в частности, полноты и качества проведенного специфического лечения по поводу ранее перенесенного сифилиса).

Таким образом, приведенные данные свидетельствуют о том, что в распоряжении дерматовенерологов и врачей других специальностей в настоящее время имеется большой арсенал как прямых, так и непрямых лабораторных методов исследования для диагностики сифилиса. Рациональное использование имеющихся технологий и алгоритмов диагностики позволяет осуществлять эпидемиологический надзор и контроль над распространением сифилиса на территории города Москвы и других субъектов Российской Федерации.

Реакция микропреципитации (РМП) – экспресс-метод диагностики сифилиса. Это исследование позволяет определить в крови пациента наличие или отсутствие возбудителей сифилиса. Сейчас оно проводится вместо реакции Вассермана (RW).

Суть анализа заключается в выявлении антител к кардиолипину — компоненту внутренней мембраны бактерий и митохондрий. Такие антитела формируются на стадии первичного сифилиса, в течение 7–10 дней после образования твердого шанкра. РМП может быть положительным и при других заболеваниях, при которых возможно разрушение тканей. Это связано с присутствием кардиолипина в качестве фосфолипида в различных клеточных мембранах.

Особенности анализа

Сифилис у человека вызывает бледная трепонема. Это одноклеточная бактерия, относящаяся к спирохетам. На ранних стадиях развития возбудитель заболевания активно размножается, но, в результате иммунных реакций, а также действия факторов неспецифического иммунитета, часть трепонем погибает.

Гибель клеток бактерии вызывает появление большого количества липоидных молекул из разрушенных клеточных мембран возбудителя сифилиса. Иммунная система формирует по отношению к ним защитные антитела.

Ткани, которые были повреждены действием бледной трепонемы, разрушаются. Клеточные митохондрии, которые при этом повреждаются, высвобождают фосфолипиды, в числе которых – кардиолипин. Последний представляет собой собственный антиген организма липидного происхождения. Он появляется в организме при разрушении клеток. Антиген схож с липидными антигенами бледной трепонемы.

Реакция микропреципитации – микрореакция крови на кардиолипиновый антиген (экстракт бычьей сердечной мышцы), который по своей природе схож с возбудителем сифилиса. Когда в пробу с кровью пациента вводится антиген, проводится проверка на ответную реакцию. Если в организме человека сформировались антитела к вирусу (защитные белки), то они отреагируют на этот реагент.

Качественная оценка реакции определяется по объему выпавшего осадка и величине хлопьев. Образование осадка оценивают в условных единицах, плюсами (+), от одного до четырех.

Результат РМП получают всего через 10-40 минут.

В отличие от RW, анализ РМП более чувствителен. В то же время он уступает первому по специфичности.

Это исследование позволяет не только выявить наличие инфекции в организме, но и проследить динамику течения заболевания.

Реакция микропреципитации – нетрепонемный тест, который позволяет определить заражение сифилисом через 1–2 недели с момента образования первичной сифиломы (твердого шанкра). Сифилома – клиническое проявление защитных процессов, куда входят местные клеточные и гуморальные специфические реакции, направленные на уничтожение бледных трепонем в месте их изначального внедрения в организм.

Показания к проведению

Анализ РМП назначают при обнаружении у пациента симптомов, характерных для сифилиса. Это:

повышение температуры до 37–38,5 градусов, ее сохранение в течение длительного времени;
общая слабость, сопровождающаяся кашлем и насморком;
регулярные суставные и мышечные боли;
локальное облысение;
образование на месте внедрения шанкра – язвы с твердым основанием и плотными краями;
появление багровых пятен на слизистой оболочке горла;
появление многочисленных пустул с белыми кончиками;
появление бледно-розовых пятен на коже, которые не причиняют боль и дискомфорт;
кондиломы багрового или фиолетового цвета.

На поздних стадиях сифилиса на коже образуются инфекционные бугры и гуммы, которые периодически изъязвляются и оставляют рубцы. Это сочетается с поражением головного мозга, сердечно-сосудистой системы, печени, костей, глаз.

РМП обязательно назначают лицам, которые проходят обследование для получения санитарной книжки. Также анализ показан при:

срочной госпитализации;
подготовке пациента к операции;
наличии ВИЧ;
беременности;
проверке состояния здоровья потенциального донора органов.

Также этот тест назначают пациенту, завершившему курс лечения сифилиса, для оценки его эффективности.

Расшифровка анализа

Качественный анализ на реакцию микропреципитации позволяет получить всего 2 результата: положительный и отрицательный.

Результат РМП может быть ложноположительным. Это бывает у пожилых людей, а также при наличии ряда заболеваний. Это:

СПИД;
туберкулез;
красная волчанка;
ревматоидный артрит;
хламидиоз;
сахарный диабет;
подагра;
лептоспироз;
тиреоидит;
мононуклеоз;
вирусный гепатит;
склеродермия.

При инфаркте миокарда анализ на определение антител к бледной трепонеме также может быть ложноположительным.

Для пациентов со всеми перечисленными заболеваниями и отклонениями РМП не может быть использован в качестве единственного метода определения сифилиса. Дополнительно антитела нужно определять методами ИФА (иммуноферментного анализа) или пассивной гемагглютинации.

Подготовка к анализу

Чтобы получить достоверный результат, к сдаче крови нужно подготовиться. Основные рекомендации:

сдавать натощак, после сна;
утром перед сдачей не завтракать, не пить кофе и чай, а также другие напитки (можно пить воду);
не курить перед анализом в течение двух часов;
в течение двух дней перед забором крови соблюдать щадящий режим питания, исключив жареное, жирное, острое, а также отказаться от спиртного;
за день до анализа ограничить повышенные физические и психоэмоциональные нагрузки.

Анализ РМП не сдают после физиотерапевтических процедур и инструментальных исследований (УЗИ, рентгенография и т.д.).

Treponema pallidum или бледная трепонема — микроорганизм, вызывающий сифилис. Это спирохета спиралевидной формы, передающаяся от человека к человеку преимущественно половым путем. Инфекция опасна из-за постепенного поражения многочисленных органов и систем с риском инвалидизации пациента при несвоевременном лечении. Современная медицина может предложить несколько эффективных методов диагностики заболевания. Анализ на антитела к бледной трепонеме — один из них. Специалисты могут выявить инфекционный процесс на любой стадии при правильном комбинировании исследований.

Особенности сифилиса

Это распространенная инфекция, отличающаяся постепенным прогрессированием и продолжительным развитием. Для болезни характерно волнообразное течение.

Сифилис — системная патология, поскольку бледная трепонема распространяется во всем организме. Она поражает нервные ткани, сердце, сосуды, кожу, слизистые оболочки, суставы, кишечник и другие анатомические структуры. При несвоевременном или неправильном лечении заболевание развивается в течение многих лет и в конечном итоге вызывает необратимые изменения, делающие пациента инвалидом.

Во время активной фазы сифилис характеризуется кожными симптомами, поражением слизистых оболочек и внутренних органов. Во время латентной фазы симптомы отсутствуют. Эти периоды периодически сменяют друг друга, из-за чего диагностика инфекции может быть затруднена. По мнению врачей, это одна из самых опасных и распространенных патологий, передающихся половым путем.

Treponema pallidum обычно обитает в лимфоузлах и лимфатических сосудах, где происходит ее активное размножение. В кровотоке большая концентрация патогенов наблюдается при вторичном сифилисе. Микроорганизм способен в течение продолжительного периода времени сохранять жизнеспособность во внешней среде.

Передается обычно половым путем, однако реже возможно инфицирование гематогенным, внутриутробным или контактным способом.

Что это за анализ?

Это исследование дает возможно обнаружить и оценить общее количество иммуноглобулинов (антител) к возбудителю сифилиса. Анализ на антитела к бледной спирохете — достоверный и высокочувствительный метод скрининга, применяемый повсеместно. В сумме иммуноглобулинов учитывают количество специфических молекул IgM и IgG, выделяемых гуморальным иммунитетом с целью нейтрализации патогенного микроорганизма. Первичный механизм иммунного ответа — выделение антител IgM. Они появляются уже через 8–14 суток после заражения. Молекулы IgG выделяются на более поздних стадиях, примерно через месяц после заражения. Могут сохраняться в организме в течение года и дольше.

Наибольший уровень IgG возникает на шестой неделе протекания заболевания, когда антител этого класса становится больше всего. Исследование на иммуноглобулины к Treponema Pallidum показывает наличие сифилиса примерно через три недели после заражения, когда в кровотоке появляется много таких молекул. Из-за этого подобный анализ применяется с целью раннего выявления инфекционного процесса. При использовании эффективных методов лечения концентрация IgG понижается, но иммуноглобулины в целом не пропадают. Они остаются в кровотоке гораздо дольше, благодаря чему врачи могут оценивать эффективность назначенной схемы терапии.

Показания к применению

Сифилис — инфекция с подчас сложной клинической картиной, маскирующей реальную природу патологического процесса. Периоды обострения симптомов сменяются латентными фазами, когда у пациента отсутствуют жалобы. По этой причине важен скрининг, направленный на обнаружение сифилиса на ранних стадиях.

Основные показания:

скрининговое исследование в рамках обследования пациента у венеролога при наличии симптомов или факторов риска;
скрининговое обследование во время вынашивания ребенка;
подготовка к донорству крови или органов;
сдача анализов перед трудоустройством в определенных профессиональных сферах.

Анализ снижает вероятность дальнейшего распространения инфекции. Помогает выявить болезнь на ранних стадиях, когда еще нет серьезных осложнений. Если у пациента выявили сифилис, важно обследовать близко контактировавших с ним людей.

Подготовка и проведение

Специально готовиться к анализу на антитела IgM и IgG к Treponema pallidum не нужно. Желательно проводить забор крови примерно через 4–6 часов с момента приема пищи. Врачи рекомендуют отказаться от курения и употребления алкогольных напитков перед диагностикой. В зависимости от режима работы клиники пациент получает результаты через несколько часов или в течение 1–3 дней.

Факторы, способные снизить точность диагностики сифилиса:

иммунопатологические состояния, вроде системной красной волчанки;
присутствие злокачественных новообразований;
гематологические расстройства;
сахарный диабет;
применение наркотиков в виде инъекций;
преклонный возраст;
частое проведение гемотрансфузии;
присутствие других инфекций.

Выше перечислены случаи, при которых возможен ложный положительный результат на сифилис. Ложный отрицательный результат характерен для людей, страдающих от ослабления иммунной системы. По этой причине важно проводить исследование под контролем врача. Специалист оценит все данные, включая анамнез больного, и при необходимости назначит дополнительные тесты.

Процедура ничем не отличается от обычного забора венозной крови, когда пациент проходит биохимическое или клиническое исследование. Материал направляют в лабораторию, где антитела выявляют с помощью реагентов.

Положительный и отрицательный результат анализа

Нормальный показатель — отрицательный результат, когда иммуноглобулины к бледной трепонеме не обнаружены. Положительный результат указывает на активное (или латентное) протекание инфекции в настоящий момент или перенесенное ранее заболевание. Следует учитывать, что отрицательный результат не всегда говорит о том, что человек здоров. Иммуноглобулины отсутствуют в крови в течение примерно 14 суток с момента заражения. Врач может назначить дополнительные исследования, если у пациента есть характерные симптомы. Проводится повторный анализ на антитела через 2–3 недели.

Это исследование не подходит для оценки результативности лечения сифилиса, поскольку иммуноглобулины остаются в кровотоке в течение нескольких лет даже при успешной терапии. Такие пациенты часто здоровы, однако тесты до сих пор дают положительный результат. Во время обследования необходимо исключить носительство других видов трепонем, аутоиммунные расстройства, лепру, онкологию, гормональные нарушения и иные факторы, влияющие на точность диагностики.

Иммуноферментный анализ (ИФА) — это метод выявления в крови специфических антител, представляющих собой молекулы иммуноглобулинов. Он отличается высокой точностью и чувствительностью, позволяет определить не только качественный, но и количественный состав антигенов и антител в организме. В медицине иммуноферментный анализ применяется для выявления болезней, которые провоцируют микроорганизмы различных классов — от вирусов до паразитов, а также для диагностики аутоиммунных заболеваний.

Особенности анализа ИФА

Иммуноферментный анализ состоит из двух компонентов — иммунной и ферментативной реакции. Иммунная реакция связывает биологические молекулы, элементы клетки или микроорганизма, которые пытаются выявить. Ферментативная реакция позволяет увидеть и измерить результат иммунологической реакции.

ИФА относится к непрямым методам диагностики, так как с ее помощью можно определить наличие антител к патогенному микроорганизму, а не самого возбудителя. Этот анализ рекомендуется выполнять совместно с ПЦР-диагностикой.

Важность иммуноферментного анализа несомненна: его применяют, если требуется определить стадию развития заболевания, провести мониторинг проведенного курса лечения, оценить ответ организма на лечение либо подобрать оптимальную схему терапии.

К преимуществам ИФА относят следующее:

высокая чувствительность (до 90%), позволяющая обнаружить микроорганизмы даже в том случае, если они присутствуют в минимальных концентрациях;
возможность выявить заболевание еще до проявления симптомов;
скорость проведения анализа и получения результатов;
возможность определить примерный срок заражения, а также тип течения инфекции (острая или хроническая);
выявление с высокой степенью достоверности микроорганизмов, которые невозможно определить путем применения других диагностических методов (посева, микроскопии и т.д.).

Показания к проведению иммуноферментного анализа крови

Методика ИФА позволяет выявить в крови любой антиген — не только собственный, но и чужеродный для организма. Ее назначают при подозрении на скрытую инфекцию. Показаниями для проведения этого анализа являются:

выявление различных инфекций (гепатиты, паразитарные инфекции, герпес, хламидии, токсоплазмоз, сальмонеллез, вирус Эпштейн-Барра);
определение содержания гормонов для оценки работы органов эндокринной системы — щитовидной железы, гипофиза, половых желез;
выявление и отслеживание онкомаркеров (ПСА у мужчин, фактор некроза опухоли и т.д.);
диагностика аутоиммунных заболеваний (системный васкулит, ревматоидный артрит, системная красная волчанка, синдром Шегрена).

Также иммуноферментный анализ позволяет определить наличие антител к вирусу у пациента после прививки.

ИФА не оказывает непосредственного воздействия на антиген: этот метод позволяет оценить реакцию организма на присутствие такого антигена.

Чаще всего для проведения иммуноферментного исследования используют сыворотку венозной крови, взятой у пациента натощак. Также для анализа могут использоваться околоплодные воды, спинномозговая жидкость, содержимое стекловидного тела и слизь цервикального канала и уретры.

Подготовка к анализу ИФА

Чтобы снизить риск ошибки при проведении иммуноферментного анализа, пациенту рекомендуют подготовиться к этой процедуре. Речь идет о том, чтобы в течение 7-10 дней до назначенного исследования:

прекратить прием антибиотиков, а также противовирусных и антигистаминных препаратов;
исключить из рациона продукты-аллергены (шоколад, мед, орехи, яйца);
отказаться от жирных, острых, жареных блюд, алкоголя, сладостей;
ограничить физические нагрузки;
избегать сильных эмоциональных потрясений.

За сутки до забора крови нужно прекратить курение.

Интерпретация результатов анализа

При выполнении иммуноферментного анализа выявляют антитела разных типов – иммуноглобулины классов M, A, G (JgM, JgA, JgG). Они появляются в разные промежутки времени.

IgM указывает на то, что инфекция находится на острой стадии развития. Этот иммуноглобулин появляется в крови на 4-5 день после предполагаемого заражения. Если выявляют IgM, то пациент в данный момент является больным.

IgG характеризует хроническую форму инфекционного процесса, а также свидетельствует о наличии стойкого иммунитета к антигену. Выработка этого иммуноглобулина происходит на 20-28 день с момента заражения. IgG может сохраняться в крови долгое время – несколько месяцев и даже лет.

IgA – иммуноглобулины, выявление которых указывает на переход острой формы инфекционного процесса в хроническую. Они вырабатываются на 14-20 день с момента заражения и сохраняются в крови больного около двух месяцев.

Анализ ИФА может демонстрировать разные комбинации этих иммуноглобулинов. В зависимости от сочетания, они указывают на определенный этап в развитии заболевания:

JgM (-), JgG (-), JgA (-). Иммунитет к инфекции отсутствует.
JgM (-), JgG (+), JgA (-). У больного имеется иммунитет, приобретенный после введения вакцины или выполнения прививки.
JgM (+), JgG (-/+), JgA (-/+). У пациента присутствует острая инфекция.
JgM (+), JgG (+), JgA (+). У больного протекает период обострения хронической инфекции.
JgM (-), JgG (+/-), JgA (+/-). У пациента имеется хроническая инфекция.
JgM (-). Пациент был заражен, но сейчас выздоровел.

Если ИФА направлен на исследование гормонов щитовидной железы, то его допустимые границы находятся в таких пределах:

При диагностике аутоиммунных заболеваний у пациента могут выявляться такие антитела:

Антинуклеарные (аутоантитела к антигенам ядра клеток). Они характерны для системных аутоиммунных заболеваний.
Антитела к растворимым нуклеарным антигенам. Такие компоненты проявляются при различных системных аутоиммунных процессах.
Антикардиолипиновые антитела IgG и IgM. Они характерны для антифосфолипидного синдрома.
Антитела к двухспиральной ДНК, которые являются специфичными для системной красной волчанки.
Ревматоидный фактор. Антитела такого типа выявляют при ревматоидном артрите, хотя они не специфичны конкретно для этого заболевания и могут обнаруживаться при других отклонениях, а также у абсолютно здоровых пациентов.

Сейчас ИФА-анализ широко используется для выявления антител к коронавирусной инфекции.

Что это за анализ? Это выявление суммарных антител класса M и G к возбудителю сифилиса, которое может использоваться как эффективный сверхчувствительный скрининговый тест для диагностики раннего инфицирования сифилисом.

Какой биоматериал можно использовать для исследования? Венозную кровь

Treponema pallidum (бледная трепонема) – бактерии, которая вызывает сифилис – хроническое венерическое инфекционное заболевание, которое чаще всего передается половым путем, например при прямом контакте с сифилитической язвой (твердым шанкром), также возможно внутриутробное заражение.

Источником инфекции является больной человек. Сифилис легкоизлечим, но грозит серьезными проблемами со здоровьем при бездействии. Инфицированная мать способна передавать заболевание своему плоду, у которого могут развиться серьёзные и необратимые изменения.

Сифилис относят к классическим заболеваниям, передающимся половым путем (венерическим болезням). Возбудитель – бледная трепонема (Treponema pallidum). Сифилис характеризуется медленным прогрессирующим течением. На поздних стадиях он может приводить к тяжелым поражениям нервной системы и внутренних органов

Симптомы сифилиса

Симптомы сифилиса очень разнообразны. Они меняются в зависимости от стадии заболевания. Выделяют три стадии сифилиса:

Первичный сифилис возникает после окончания инкубационного периода. В месте проникновения возбудителя в организм (половые органы, слизистая рта или прямой кишки) возникает безболезненная язва с плотным основанием (твердый шанкр). Через 1-2 нед после возникновения язвы увеличиваются ближайшие лимфатические узлы (при локализации язвы во рту увеличиваются подчелюстные, при поражении половых органов – паховые). Язва (твердый шанкр) самостоятельно заживает в течение 3-6 нед. после возникновения.

Вторичный сифилис начинается через 4-10 нед после появления язвы (2-4 мес. после заражения). Он характеризуется симметричной бледной сыпью по всему телу, включая ладони и подошвы. Возникновение сыпи нередко сопровождается головной болью, недомоганием, повышением температуры тела (как при гриппе). Увеличиваются лимфатические узлы по всему телу. Вторичный сифилис протекает в виде чередования обострений и ремиссий (бессимптомных периодов). При этом возможно выпадение волос на голове, а также появление разрастаний телесного цвета на половых органах и в области заднего прохода (широкие кондиломы).

Третичный сифилис возникает в отсутствие лечения через много лет после заражения. При этом поражается нервная система (включая головной и спинной мозг), кости и внутренние органы (включая сердце, печень и т. д.).

При заражении во время беременности у ребенка возможен врожденный сифилис.

Осложнения сифилиса

По результатам научных исследований, в отсутствие лечения примерно у трети больных развивается третичный сифилис. Примерно четверть больных из-за него погибает. Врожденный сифилис может приводить к тяжелым поражениям или смерти ребенка.

Лечение сифилиса

Достаточно сложное и требует дальнейшего длительного наблюдения. Стоит отметить, что лечение сифилиса на ранних стадиях не представляет особенной сложности с точки зрения выбора препаратов. Особенность бледной трепонемы заключается в том, что она все еще сохраняет чувствительность к пенициллину, который является препаратом выбора при сифилисе.

В случае аллергии на пенициллин назначают антибиотики из ряда макролидов (эритромицин,кларитромицин) или цефалоспоринов (цефтриаксон и тд). Препараты назначаются внутримышечно или в таблетках. Лечение активных форм заболевания проходит в стационарных условиях, пациенты с латентной формой могут получать амбулаторную терапию. Длительность лечения зависит от стадии заболевания и может занимать от нескольких недель до нескольких лет.

Антитела к возбудителю сифилиса

Когда происходит контакт человека с T. pallidum, его иммунная система реагирует, вырабатывая антитела к бактерии. В крови могут быть обнаружены два вида антител к бледной трепонеме: IgM и IgG. В ответ на инфицирование T. pallidum антитела IgM к T. pallidum вырабатываются организмом в первую очередь. Они выявляются у большинства пациентов в конце второй недели заболевания и присутствуют у них в первичную и вторичную стадию. Иммуноглобулины класса G к T. pallidum в определяемых количествах появляются в крови через 3-4 недели после инфицирования. Концентрация их нарастает и на 6-й неделе начинает преобладать над концентрацией IgM, достигая максимума, а затем сохраняется на определённом уровне в течение длительного времени. Начиная с 4-й недели в крови нарастает количество обоих видов иммуноглобулинов, что ведет к положительному результату теста на суммарные антитела к T. Pallidum. Это позволяет использовать данное исследование для ранней диагностики инфицирования T. pallidum. После эффективного лечения концентрация иммуноглобулинов постепенно снижается, но происходит это медленно, в отдельных случаях антитела могут обнаруживаться спустя год и более. От сифилиса можно избавиться с помощью антибиотиков, причём предпочтительно применять производные пенициллина. На ранней стадии заболевание лечится легче и быстрее. Более длительная терапия может понадобиться для пациентов, инфицированных больше года.

Зачем проводится анализ?

Повышение и понижение показателей

Для диагностики сифилиса. Для обследования всех беременных с профилактической целью (желательно на первом приеме гинеколога, при постановке на учет).

Когда назначается исследование? При симптомах сифилиса, таких как твердый шанкр на половых органах или в горле. Когда пациент лечится от другого ЗППП, например от гонореи. При ведении беременности, потому что сифилис может передаться развивающемуся плоду и даже убить его. Когда необходимо определить точную причину заболевания, если у пациента неспецифические симптомы, которые схожи с сифилисом (нейросифилисом). Если пациент инфицирован, он должен повторить анализ на сифилис через 3, 6, 12 и 24 месяца, чтобы убедиться, что лечение прошло успешно.

Результаты/Норма/Расшифровка анализа

Референсные значения (значения в норме)

Результат: отрицательно. Отношение S/CO (signall/cutoff): 0 — 0,9.

Положительный результат означает, что у пациента недавно приобретённое инфицирование. Вместе с тем отрицательный результат не всегда означает, что у пациента нет сифилиса.

Положительный результат

Отрицательный результат

Отрицательный результат анализа может свидетельствовать об отсутствии инфицирования или слишком раннем его сроке, когда не выработался иммунный ответ. При этом отсутствие антител у младенца, родившегося от инфицированной матери, не исключает врождённого заболевания, поскольку на момент исследования антитела могут ещё не сформироваться.

Подготовка к сдаче анализа

Не курить в течение 30 минут до сдачи крови

Что может повлиять на результат анализа?

Могут отмечаться ложноположительные результаты при таких заболеваниях, как ВИЧ, болезнь Лайма, малярия, системная красная волчанка, некоторые виды пневмоний, а также при наркомании и беременности. И многие другие соматические заболевания.

Важные замечания

Обследование на сифилис обязательно должно быть комплексным и включать в себя учёт анамнеза, клинической картины и подтверждение диагноза лабораторными данными.
Людям, ведущим активную сексуальную жизнь, необходимо консультироваться с врачом насчёт любых подозрительных высыпаний или болей в области половых органов.
Если у пациента выявлено инфицирование, ему необходимо поставить в известность и своего сексуального партнера (партнершу), чтобы он (она) тоже прошел обследование и при необходимости лечение.
При сифилисе риск заражения другими заболеваниями, передающимися половым путем, повышается, в том числе риск заражения ВИЧ, который ведёт к СПИДу.

• Сифилис может также передаваться при переливании крови через загрязненные медицинские инструменты, поэтому перед госпитализацией в стационар очень важно проводить обследование.

Читайте также: